CHEM-A1310 Biotieteen perusteet 2018
|
|
- Tauno Nurminen
- 5 vuotta sitten
- Katselukertoja:
Transkriptio
1 CHEM-A1310 Biotieteen perusteet 2018 Laboratoriodemojen teoriaosuus Huomaa: Jokaisesta suorittamatta jääneestä demokerrasta vähennetään 0.75 pistettä tentin kokonaispisteistä. Rästikertojen jälkeen suoritukset eivät ole enää mahdollisia. Laboratoriodemoihin mukaan oma laboratoriotakki, suojalasit (tarvittaessa saa lainattuakin) ja kirjoitusvälineet harjoitustyön aikana tulet vastaamaan kirjallisiin kysymyksiin, jotka palautetaan opettajalle harjoituskerran lopussa; harjoituskerta arvostellaan käytännön työn lisäksi näiden vastausten perusteella (hyväksytty/hylätty) Laboratoriodemoissa mukana myös englanninkielisiä opettajia Mikroluokkademoihin EI laboratoriovarusteissa!
2 Kromatografia Kromatografiaa voi käyttää proteiiniseosten puhdistukseen esim. koon ja/tai nettovarausten perusteella 2
3 Kromatografiat proteiinien puhdistuksessa Ekskluusiokromatografia (size-exclusion chromatography) Nimiä: molekyyliseulakromatografia, geelikromatografia Ioninvaihtokromatografia Kiinteä faasi on joko positiivisesti tai negatiivisesti varautunut ja vastakkaisesti varautunut proteiini tarttuu siihen Hydrofobinen interaktio -kromatografia (HIC) Kolonnin kiinteässä faasissa hydrofobisia ligandeja, joihin proteiini tarttuu kiinni reversiibelisti Affiniteettikromatografia Proteiinilla spesifinen sitoutuminen kiinteän faaasin ligandiin Ekskluusiokromatografian periaate Pienikokoiset molekyylit kulkevat kolonnin partikkelien pienten huokosten kautta ja siksi liikkuvat kolonnissa hitaasti. Suuret proteiinit ja muut molekyylit kulkevat partikkelien ulkopuolelta ja siksi liikkuvat kolonnissa nopeasti. 3
4 Ekskluusiokromatografiassa proteiinien ja muiden molekyylien erotus perustuu niiden erilaiseen etenemisnopeuteen kiinteällä materiaalilla täytetyssä kolonnissa. Erottuminen koon mukaan. Vertaa esim. DNA-elektroforeesi! Pienet vs. isot DNA-palat, kummat kulkevat nopeammin? Näyte ajetaan sisään kolonniin ja sen jälkeen kolonniin ajetaan puskuria, jossa proteiinit liikkuvat kolonnin sisällä. t06/sim0.htm 4
5 Esimerkki HPLC-laitteistosta Tutkimustilanteessa kolonnista ulos tulevan proteiinin määrä mitataan esim. UV-detektorilla, jolloin nähdään missä fraktioissa erottuvat proteiinit ovat. Figure 2: HPLC chromatographic protein analysis of the fractions collected by the preparative size-exclusion chromatography (Sephadex G-100 column) of the clarified medium of the submerse culture. 5
6 Demotyön kuvaus Puhdistuskolonnin läpi ajetaan väriliuos, jossa erikokoiset (iso ja pieni) värimolekyylit kulkevat eri nopeuksilla kolonnin sisältämän geelin läpi ja siten erottuvat toisistaan. Värimolekyylit poistuvat kolonnista eri aikoina. Tässä työssä käytämme värimolekyylejä lähtömateriaalina, jotta voitte seurata erottumistapahtumaa. Econo-Pac 10DG Puskuri: 50 mm Tris-HCl, ph 7.5 Blue dextran Fluorescein DNA:n geelielektroforeesi Proteiinien geelielektroforeesi 6
7 DNA eliöissä DNA-sekvenssi ja geenit muodostavat eliöiden genotyypin ja määräävät täten myös fenotyypin eli ilmiasun, jonka me voimme havaita. DNA on luonnon keskeinen rakennusosanen ja se toimii myös pohjana biotekniikan ja synteettisen biologian sovelluksissa. DNA sisältää solun geneettisen informaation (käydään läpi prof. Linderin luennolla) 7
8 Geelielektroforeesi DNA-tutkimuksen perustyökaluna Kun DNA on eristetty esim. eläinsolusta tai bakteerista, sitä voidaan esim. Kopioida PCR:n (polymerase chain reaktion, polymeraasiketjureaktio) avulla Pilkkoa paloihin entsyymien avulla DNA:ta voidaan pilkkoa restriktio- eli katkaisuentsyymeillä, jotka tunnistavat esim. kuuden tai kahdeksan nukleotidin jakson sekvenssistä Perustyökalu esim. rekombinantti-dna-tekniikassa DNA-palojen pituus voidaan määrittää geelielektroforeesilla Restriktioentsyymi katkaisee DNA:n nology.htm 8
9 Restriktioentsyymejä on erilaisia Esimerkki DNA-digestion sovelluskohteesta: Geenin kloonaus plasmidiin, jonka avulla haluttua proteiinia voidaan tuottaa esim. E. coli soluissa -haluttu proteiini voi olla esim. lääkeaine tai vaikkapa entsyymi, jota bakteeri ei luonnostaan tuota 9
10 Harjoitustyö: DNA-geelielektroforeesi ja analyysi Plasmidissa olevan geeni-insertin olemassaolo voidaan tarkistaa restriktioentsyymi-digestion ja DNA-geelielektroforeesin avulla. Elektroforeesin tuloksena voidaan määrittää DNA-palojen määrä ja koko bp 6200 bp 10
11 Mikä on DNA:n varaus: negatiivinen, neutraali vai positiivinen? Mihin suuntaan DNA-palat liikkuvat sähkövirrassa?
12 SybrSafe: SYBR Safe is a safer alternative to the known mutagen ethidium bromide. - A cyanine dye used as a nucleic acid stain in molecular biology - Binds to DNA - The resulting DNA-dyecomplex absorbs blue light (λ max = 509 nm) and emits green light (λ max = 524 nm) Värjätty DNA näkyy UV-valossa - Suojamaskia ja suojakäsineitä käytettävä! 12
13 Videot 1) Video agaroosigeelin valmistuksesta (BioRad) 2) Video DNA-agaroosigeeliajosta (BioRad) Proteiinien elektroforeesi 13
14 Miten erottaa erilaiset proteiinit toisistaan? Exam%201%20Review/Ch03%20Cell%20Organelles%20&%20Cytoskeleton.htm Miten voidaan havaita onko haluamaamme proteiinia syntynyt esim. mikrobeissa tuotettaessa?
15 Proteiinien elektroforeesin periaate Proteiinit liikkuvat sähkökentässä Hyödynnetään proteiinien erottamiseksi toisistaan tunnistamista varten Proteiinit liikkuvat kokonsa perusteella eri nopeuksilla ja siten erottuvat toisistaan SDS-PAGE SDS = sodium dodecyl sulphate (negatiivisesti varautunut detergentti) PAGE = polyakryyliamidi-geelielektroforeesi SDS-PAGE = natriumdodekyylisulfaattipolyakryyliamidigeelielektroforeesi SDS denaturoi ja linearisoi proteiinit niiden primaarirakenteiksi eli aminohapposekvenssimuotoon sekä päällystää linearisoidut proteiinit -> kompleksilla negatiivinen varaus 15
16 SDS-PAGE Miksi juuri polyakryyliamidi? Kemiallisesti inertti Sähköisesti neutraali Hydrofiilinen Läpinäkyvä koostumus hyvä havainnointitarkoituksiin Proteiinien erottuminen 16
17 Proteiinin koon määritys FDH: 10-formyltetrahydrofolate dehydrogenase 2,3-BDH: 2,3-butanediol dehydrogenase GDH: glutamate dehydrogenase Proteiini-elektroforeesin työjärjestys Ajopuskurien valmistus Geelin valmistus Näytteiden valmistelu ajoa varten Näytteiden ja standardien lataus ja ajo Geelin värjäys ja/tai immunoblottaus Kuvantaminen ja tulosten analysointi Esimerkki näyte-cocktailista: Tris-HCl-puskuri SDS glyseroli bromophenol blue DTT (dithiothreitol, rikkisillat poikki) näy eiden denaturoin kuumentamalla Geelin värjäys - Esim. Coomassie blue -värillä Huom! Muista työturvallisuus ja suojavarusteet, esim. akryyliamidi on neurotoksiini 17
18 Laitteisto 200 V Tärkeää, että johdot kytketään oikein päin! Ajolaitteen kansi päälle/pois vasta, kun virtalähde on sammutettu ja johdot on irrotettu virtalähteestä! 18
19 19
20 Proteiinien identifiointi geeliajon jälkeen Yhtenä vaihtoehtona proteiinien immunoblottaus eli Western blot Geeliajossa koon mukaan erotellut proteiinit siirretään sähkövirran avulla membraanille, josta haluttu proteiini voidaan tunnistaa sille spesifisen vasta-aineen avulla western-blot-protein-immunoblot.html#.vqqjewo6h8e Western blot -menetelmän tuloksena vain tutkittava proteiini havaitaan membraanilla, jos alkuperäinen näyte sisältää ko. proteiinia Kemiluminesenssiin tai kolorimetriseen reaktioon perustuva detektio 20
21 Video Video vertikaalisesta SDS-PAGE-ajosta: Huom! Käy tämä teoriaosuus läpi vielä juuri ennen omaa harjoituskertaasi (osa harjoituskerroista vasta maaliskuussa), jotta osaat toimia oikein demossa ja pystyt vastaamaan analyysiosuuden kysymyksiin 21
22 Töiden suoritus Pienryhmissä B-siiven oppilaslaboratorioissa Kromatografia-ajo tai pipetointiharjoitukset geeleihin Erillinen analyysiosio, tehtävien läpikäynti pienryhmissä -> opettajat tarkastavat tehtävät ja keräävät vastauspaperit ennen kuin lähdette Tule ajoissa paikalle, työ alkaa heti ilmoitettuna ajankohtana Mukaan laboratoriotakki ja suojalasit sekä kirjoitusvälineet REPPUJA ja TAKKEJA ym. EI LABORATORIOTILOIHIN! B-siiven aulassa lokerot päiväsäilytystä varten 22
Plasmidi-DNA:n eristys bakteerisoluista DNA:n geelielektroforeesi (Proteiinien geelielektroforeesi)
Plasmidi-DNA:n eristys bakteerisoluista DNA:n geelielektroforeesi (Proteiinien geelielektroforeesi) CHEM-A1310 Biotieteen perusteet Heli Viskari 2017 DNA-harjoitustöiden aikataulu, valitse yksi näistä
LisätiedotCHEM-A1310 Biotieteen perusteet 2019
CHEM-A1310 Biotieteen perusteet 2019 Laboratoriodemojen teoriaosuus Huomaa: Jokaisesta suorittamatta jääneestä demokerrasta vähennetään 0.75 pistettä tentin kokonaispisteistä. Rästikertojen jälkeen suoritukset
LisätiedotBioteknologian perustyökaluja
Bioteknologian perustyökaluja DNAn ja RNAn eristäminen helppoa. Puhdistaminen työlästä (DNA pestään lukuisilla liuottimilla). Myös lähetti-rnat voidaan eristää ja muuntaa virusten käänteiskopioijaentsyymin
LisätiedotBiokemian menetelmät I kurssi, työselostukset, kevät 2016.
Biokemian menetelmät I kurssi, työselostukset, kevät 2016. DEADLINET: työselostus tulostettuna paperille Työ 3: To 24.3.2016 klo 15:00 KE1132:n palautuspiste tai BMTK:n Työ 2: Pe 1.4.2016 klo 16:00 KE1132:n
LisätiedotGeenitekniikan perusmenetelmät
Loppukurssikoe To klo 14-16 2 osiota: monivalintatehtäväosio ja kirjallinen osio, jossa vastataan kahteen kysymykseen viidestä. Koe on auki klo 14.05-16. Voit tehdä sen oppitunnilla, jolloin saat tarvittaessa
LisätiedotLABORATORIOTYÖ: AGAROOSIGEELIELEKTROFOREESI
LABORATORIOTYÖ: AGAROOSIGEELIELEKTROFOREESI Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) on yksinkertainen ja tehokas menetelmä erikokoisten DNAjaksojen erottamiseen, tunnistamiseen ja puhdistamiseen. Eri valmistajien
LisätiedotGEENITEKNIIKAN PERUSASIOITA
GEENITEKNIIKAN PERUSASIOITA GEENITEKNIIKKKA ON BIOTEKNIIKAN OSA-ALUE! Biotekniikka tutkii ja kehittää elävien solujen, solun osien, biokemiallisten menetelmien sekä molekyylibiologian uusimpien menetelmien
LisätiedotNimi sosiaaliturvatunnus. Vastaa lyhyesti, selkeällä käsialalla. Vain vastausruudun sisällä olevat tekstit, kuvat jne huomioidaan
1. a) Mitä tarkoitetaan biopolymeerilla? Mihin kolmeen ryhmään biopolymeerit voidaan jakaa? (1,5 p) Biopolymeerit ovat luonnossa esiintyviä / elävien solujen muodostamia polymeerejä / makromolekyylejä.
LisätiedotPCR - tekniikka elintarvikeanalytiikassa
PCR - tekniikka elintarvikeanalytiikassa Listerian, Salmonellan ja kampylobakteerien tunnistus elintarvikkeista ja rehuista 29.11.2012 Eva Fredriksson-Lidsle Listeria monocytogenes Salmonella (spp) Campylobacter
Lisätiedot9/30/2013. GMO analytiikka. Termistöä. Markkinoilla olevien GM kasvien ominaisuuksia
GMO analytiikka Kemian ja toksikologian tutkimusyksikkö Evira Termistöä geenimuuntelu muuntogeeninen siirtogeeninen GM GMO (geneettisesti muunnettu organismi) GM tapahtuma (event): käytetään silloin kun
LisätiedotTEE-SE-ITSE-ELEKTROFOREESI
TEE-SE-ITSE-ELEKTROFOREESI Justus Mutanen (Opinkirjon työn pohjalta) BioPop-resurssikeskus, Helsingin yliopiston LUMA-keskus Työn tavoite Työn tavoitteena on tutustua elektroforeesin periaatteeseen ja
LisätiedotBiokemian labrameiningit I harjoitustyöosuus. Arne Raasakka, 20.10.2007 Työ suoritettu: 12. 13.10.2007 arne.raasakka@oulu.fi
Työ 1. Rekömbinanttipröteiinin puhdistaminen Ni-NTA affiniteettikrömatögrafialla seka pröteiinin mölekyylipainön ma a ritys elektröföreesilla ja geelisuödatuskrömatögrafialla Biokemian labrameiningit I
LisätiedotENTSYYMIKATA- LYYSIN PERUSTEET (dos. Tuomas Haltia)
ENTSYYMIKATA- LYYSIN PERUSTEET (dos. Tuomas Haltia) Elämän edellytykset: Solun täytyy pystyä (a) replikoitumaan (B) katalysoimaan tarvitsemiaan reaktioita tehokkaasti ja selektiivisesti eli sillä on oltava
Lisätiedot2.1 Solun rakenne - Lisämateriaalit
2.1 Solun rakenne - Lisämateriaalit Tiivistelmä Esitumaisiset eli alkeistumalliset solut ovat pieniä (n.1-10µm), niissä on vähän soluelimiä, eikä tumaa (esim. arkeonit, bakteerit) Tumalliset eli aitotumalliset
LisätiedotGenetiikan perusteiden harjoitustyöt
Genetiikan perusteiden harjoitustyöt Molekyylien kloonaus ja siihen liittyvät taidot ja temput, osa 1 Restriktioentsyymit, elektroforeesi Moniste sivulta 24-: Geenien kloonaus CELL 491- Isolating, cloning,
Lisätiedot- Extra: PCR-alukkeiden suunnittelutehtävä haluttaessa
Kertaus CHEM-C2300 0 Tällä luennolla: - Oletteko lukeneet artikkelia, käydäänkö läpi? - Ehdotuksia tenttikysymyksiin? - Käydään läpi kurssin keskeiset asiakokonaisuudet otsikkotasolla - Extra: PCR-alukkeiden
LisätiedotGMO analytiikka Annikki Welling Kemian tutkimusyksikkö Evira
GMO analytiikka Annikki Welling Kemian tutkimusyksikkö Evira Millaisia GM kasvit ovat ja kuinka tätä käytetään hyväksi analytiikassa Aromaattisten aminohappojen biosynteesireitti kasvissa Kasvi tarvitsee
LisätiedotKvantitatiivisen PCR:n käyttö mikrobivaurion toteamisessa
Kvantitatiivisen PCR:n käyttö mikrobivaurion toteamisessa Maria Valkonen, Kaisa Jalkanen, Martin Täubel, Anne Hyvärinen 31.3.2014 Sisäilmastoseminaari 2014 1 Tausta Asumisterveysoppaan mukaiset sisäympäristön
LisätiedotELEC-C2210 Molekyyli- ja solubiologia
ELEC-C2210 Molekyyli- ja solubiologia Entsyymikatalyysi Vuento & Heino ss. 66-75 ECB: Luku 3, s. 90-93 & luku 4, s. 144- Dos. Tuomas Haltia, Biotieteiden laitos, biokemia ja biotekniikka Miten entsyymit
LisätiedotDNA:n informaation kulku, koostumus
DNA:n informaation kulku, koostumus KOOSTUMUS Elävien bio-organismien koostumus. Vety, hiili, happi ja typpi muodostavat yli 99% orgaanisten molekyylien rakenneosista. Biomolekyylit voidaan pääosin jakaa
LisätiedotGenomin ilmentyminen Liisa Kauppi, Genomibiologian tutkimusohjelma
Genomin ilmentyminen 17.1.2013 Liisa Kauppi, Genomibiologian tutkimusohjelma liisa.kauppi@helsinki.fi Genomin ilmentyminen transkription aloitus RNA:n synteesi ja muokkaus DNA:n ja RNA:n välisiä eroja
LisätiedotKromatografian perusteet
Kromatografian perusteet 740151P Biokemian menetelmät I 2.10. ja 9.10. Juha Kerätär / BMTK Päivän aiheet Mitä on kromatografia? Taso- ja pylväskromatografian yleiset sovellukset biokemiassa. Opiskelija
LisätiedotKROMATOGRAFIAN PERUSTEET
KROMATOGRAFIAN PERUSTEET Outi Itkonen Sairaalakemisti, dos. HUSLAB 5.2.2015 O. Itkonen 1 KROMATOGRAFIA χρῶμα chroma väri" γράφειν graphein kirjoittaa alan uranuurtajat Archer John Porter Martin ja Richard
LisätiedotKromatografian perusteet
12.10. Kromatografian perusteet 740151P Biokemian menetelmät I 2.10. ja 9.10. Juha Kerätär / BMTK Päivän aiheet Mitä on kromatografia? Taso- ja pylväskromatografian yleiset sovellukset biokemiassa. Opiskelija
LisätiedotMetsäpatologian laboratorio tuhotutkimuksen apuna. Metsätaimitarhapäivät 23. 24.1.2014 Anne Uimari
Metsäpatologian laboratorio tuhotutkimuksen apuna Metsätaimitarhapäivät 23. 24.1.2014 Anne Uimari Metsäpuiden vaivat Metsäpuiden eloa ja terveyttä uhkaavat monet taudinaiheuttajat: Bioottiset taudinaiheuttajat
LisätiedotKOE 6 Biotekniikka. 1. Geenien kloonaus plasmidien avulla.
Esseekysymyksistä 1-2 voi saada enintään 9 pistettä/kysymys. Vastauksia pisteytettäessä huomioidaan asiatiedot, joista voi saada enintään 7 pistettä. Lisäksi vastaaja saa enintään kaksi pistettä, mikäli
LisätiedotALKOHOLIT SEKAISIN KOHDERYHMÄ:
ALKOHOLIT SEKAISIN KOHDERYHMÄ: Työ soveltuu lukion kursseille KE1, KE2 ja KE4. KESTO: Työ kestää n.1h MOTIVAATIO: Työ on havainnollinen ja herättää pohtimaan kaasujen kemiaa. TAVOITE: Työssä opiskelija
LisätiedotGenomi-ilmentyminen Genom expression (uttryckning) Nina Peitsaro, yliopistonlehtori, Medicum, Biokemia ja Kehitysbiologia
Genomi-ilmentyminen Genom expression (uttryckning) DNA RNA 7.12.2017 Nina Peitsaro, yliopistonlehtori, Medicum, Biokemia ja Kehitysbiologia Osaamistavoitteet Lärandemål Luennon jälkeen ymmärrät pääperiaatteet
LisätiedotEPH-RESEPTORIN KLOONAUS, TUOTTO JA PUHDISTUS HYÖNTEISSOLUSTA
Eph- reseptorin kloonaus, tuotto ja puhdistus hyönteissoluista Bio- ja Elintarviketekniikka Biotekniikka 2012 Shevin Mamandi EPH-RESEPTORIN KLOONAUS, TUOTTO JA PUHDISTUS HYÖNTEISSOLUSTA OPINNÄYTETYÖ (AMK)
LisätiedotTenttipäivät. Tentti TI :30-17:30 1. uusinta MA :30-17:30 2. uusinta MA :30-17:30
Tenttipäivät Tentti TI 14.11. 14:30-17:30 1. uusinta MA 11.12. 14:30-17:30 2. uusinta MA 30.1.2018 14:30-17:30 Jos on joku iso päällekkäisyys (= tutkinnon pakollisen kurssin pakollinen läsnäolo, esimerkiksi
LisätiedotOrgaanisten epäpuhtauksien määrittäminen jauhemaisista näytteistä. FT Satu Ikonen, Teknologiakeskus KETEK Oy Analytiikkapäivät 2012, Kokkola
Orgaanisten epäpuhtauksien määrittäminen jauhemaisista näytteistä FT, Teknologiakeskus KETEK Oy Analytiikkapäivät 2012, Kokkola TEKNOLOGIAKESKUS KETEK OY Kokkolassa sijaitseva yritysten osaamisen kehittämiseen
Lisätiedot6 GEENIT OHJAAVAT SOLUN TOIMINTAA nukleiinihapot DNA ja RNA Geenin rakenne Geneettinen informaatio Proteiinisynteesi
6 GEENIT OHJAAVAT SOLUN TOIMINTAA nukleiinihapot DNA ja RNA Geenin rakenne Geneettinen informaatio Proteiinisynteesi GENEETTINEN INFORMAATIO Geeneihin pakattu informaatio ohjaa solun toimintaa ja siirtyy
LisätiedotPerinnöllisyystieteen perusteita III Perinnöllisyystieteen perusteita
Perinnöllisyystieteen perusteita III Perinnöllisyystieteen perusteita 10. Valkuaisaineiden valmistaminen solussa 1. Avainsanat 2. Perinnöllinen tieto on dna:n emäsjärjestyksessä 3. Proteiinit koostuvat
LisätiedotCHEM-C2300 Solu- ja molekyylibiologia Luento
CHEM-C2300 Solu- ja molekyylibiologia Luento1 31.10.2017 Heli Viskari Tervetuloa kurssille! 1 Kurssin sisältö (Oodista) Mikrobi-, kasvi- ja eläinsolujen solutason rakenteiden ja toiminnan vuorovaikutus
LisätiedotPCR:n laadunvarmistus. Saija Hallanvuo Elintarvike- ja rehumikrobiologian tutkimusyksikkö/ Elintarvikemikrobiologiajaosto
PCR:n laadunvarmistus Saija Hallanvuo Elintarvike- ja rehumikrobiologian tutkimusyksikkö/ Elintarvikemikrobiologiajaosto Ajankohtaista laboratoriorintamalla 11.10.2012 1 Laadunvarmistus Validointi Henkilökunnan
LisätiedotAgaroosigeelielektroforeesi (AGE)
Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) Johdanto Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) on yksinkertainen ja tehokas menetelmä erikokoisten DNA/RNA -jaksojen erottamiseen, tunnistamiseen ja puhdistamiseen. Agaroosigeelielektroforeesin
LisätiedotTransgeenisten kasvien geneettinen ja fenotyyppinen
Jenna Roivas Transgeenisten kasvien geneettinen ja fenotyyppinen analysointi Opinnäytetyö raportti Metropolia Ammattikorkeakoulu Bioanalyytikko AMK Bioanalytiikan koulutusohjelma Opinnäytetyö 13.5.2014
LisätiedotProteiinipuhdistus. Johdanto. www.edu.fi/biogeeni
Proteiinipuhdistus Johdanto Proteiinien jälkikäsittely on monimuotoinen, usein myös vaikeahko ja kalliskin laji. Haastetta hommassa riittääkin jos esimerkiksi E.Colin tuottamista tuhansista proteiineista
LisätiedotGeenisakset (CRISPR)- Geeniterapian vallankumousko? BMOL Juha Partanen
Geenisakset (CRISPR)- Geeniterapian vallankumousko? BMOL 19.11.2016 Juha Partanen Geenisakset 2 2 N A T U R E V O L 5 2 2 4 J U N E 2 0 1 5 Sisältö Geenimuokkaus: historiallinen perspektiivi Geenisakset
LisätiedotBiotieteiden perusteet farmasiassa, syksy 2017
Biotieteiden perusteet farmasiassa, syksy 2017 Maarit Kortesoja Farmaseuttisten biotieteiden osasto 23.8.2017 1 Opintojakson tavoitteet Opintojakson suoritettuaan opiskelija Osaa kuvata entsyymien rakenteen
LisätiedotEkologiset ympäristöongelmat. 10. Geeniteknologia. BI5 II Geeniteknologia 4. Geenitekniikan perusmenetelmiä
Ekologiset ympäristöongelmat 10. Geeniteknologia Dna:n ja rna:n käsittely Eristäminen Puhdistaminen Lähetti-rna:t voidaan muuntaa niiden emäsjärjestystä vastaavaksi ns. komplementaariseksi dna:ksi (c-dna)
LisätiedotALKOHOLIPITOISUUDEN MÄÄRITYS OLUESTA KAASUKROMATOGRAFIL- LA
(1) ALKOHOLIPITOISUUDEN MÄÄRITYS OLUESTA KAASUKROMATOGRAFIL- LA 1. Standardiliuosten teko etanolista Arvioi, mikä on näytteen alkoholipitoisuus Valitse sen mukaan 3-4 standardiliuosta, jotka ovat näytteen
LisätiedotLABORATORIOTYÖ: RESTRIKTIOENTSYYMIDIGESTIO
LABORATORIOTYÖ: RESTRIKTIOENTSYYMIDIGESTIO Restriktioentsyymidigestio on yksi yhdistelmä-dna-tekniikan perusmenetelmistä, jossa katkaistaan kaksinauhainen DNA tietystä kohdasta erilaisten restriktioentsyymien
LisätiedotEPHA3-RESEPTORIPROTEII I LIGA DIA SITOVA OSA TUOTTO ERI ISÄ TÄORGA ISMEISSA SEKÄ PUHDISTUS JA KARAKTERISOI TI
Opinnäytetyö EPHA3-RESEPTORIPROTEII I LIGA DIA SITOVA OSA TUOTTO ERI ISÄ TÄORGA ISMEISSA SEKÄ PUHDISTUS JA KARAKTERISOI TI Eerika Päivänsäde Bio- ja Elintarviketekniikka 2009 TURUN AMMATTIKORKEAKOULU TIIVISTELMÄ
LisätiedotMYKOPLASMA- WORKSHOP!
Science whereyou are Tarjoukset voimassa 31.12.2014 asti kampanjakoodilla FIN311214FIN. Kampanjahinnat ilman arvonlisäveroa. TULOSSA... MYKOPLASMA- WORKSHOP! BioNordika Finland Oy Kutomotie 18, 00380 Helsinki
LisätiedotBiologia. Pakolliset kurssit. 1. Eliömaailma (BI1)
Biologia Pakolliset kurssit 1. Eliömaailma (BI1) tuntee elämän tunnusmerkit ja perusedellytykset sekä tietää, miten elämän ilmiöitä tutkitaan ymmärtää, mitä luonnon monimuotoisuus biosysteemien eri tasoilla
LisätiedotProteiinikoon määritys (SDS-page)
Proteiinikoon määritys (SDS-page) Johdanto SDS-pagen (sodium dodecyl sulfate) avulla määritetään proteiinien kokoja ja menetelmällä voidaan myös selvittää proteiininäytteen puhtautta. peitegeeli Menetelmässä
LisätiedotALKOHOLIT SEKAISIN TAUSTAA
ALKOHOLIT SEKAISIN TAUSTAA Kaasukromatografia on menetelmä, jolla voidaan tutkia haihtuvia, orgaanisia yhdisteitä. Näyte syötetään tavallisesti ruiskulla injektoriin, jossa se höyrystyy ja sekoittuu inerttiin
LisätiedotDEE-11110: SÄHKÖTEKNIIKAN PERUSTEET
DEE-11110: SÄHKÖTEKNIIKAN PERUSTEET Kurssin esittely Sähkömagneettiset ilmiöt varaus sähkökenttä magneettikenttä sähkömagneettinen induktio virta potentiaali ja jännite sähkömagneettinen energia teho Määritellään
LisätiedotCHEM-C2300 Solu- ja molekyylibiologia Luento
CHEM-C2300 Solu- ja molekyylibiologia Luento1 0 Heli Viskari Tervetuloa kurssille! 1 Kurssin sisältö (Oodista) Mikrobi-, kasvi- ja eläinsolujen solutason rakenteiden ja toiminnan vuorovaikutus Luokittelun
LisätiedotTarkastele kuvaa, muistele matematiikan oppejasi, täytä tekstin aukot ja vastaa kysymyksiin.
1. Pääryhmien ominaispiirteitä Tarkastele kuvaa, muistele matematiikan oppejasi, täytä tekstin aukot ja vastaa kysymyksiin. Merkitse aukkoihin mittakaavan tuttujen yksiköiden lyhenteet yksiköitä ovat metri,
LisätiedotVASTAUS 1: Yhdistä oikein
KPL3 VASTAUS 1: Yhdistä oikein a) haploidi - V) ihmisen sukusolu b) diploidi - IV) ihmisen somaattinen solu c) polyploidi - VI) 5n d) iturata - III) sukusolujen muodostama solulinja sukupolvesta toiseen
LisätiedotNimi sosiaaliturvatunnus. Vastaa lyhyesti, selkeällä käsialalla. Vain vastausruudun sisällä olevat tekstit, kuvat jne huomioidaan
1. a) Seoksen komponentit voidaan erotella toisistaan kromatografisilla menetelmillä. Mihin kromatografiset menetelmät perustuvat? (2p) Menetelmät perustuvat seoksen osasten erilaiseen sitoutumiseen paikallaan
LisätiedotHEIKOT VUOROVAIKUTUKSET MOLEKYYLIEN VÄLISET SIDOKSET
HEIKOT VUOROVAIKUTUKSET MOLEKYYLIEN VÄLISET SIDOKSET Tunnin sisältö 2. Heikot vuorovaikutukset Millaisia erilaisia? Missä esiintyvät? Biologinen/lääketieteellinen merkitys Heikot sidokset Dipoli-dipolisidos
LisätiedotVirukset Materiaalitieteiden Rakennusaineina Suomalainen Tiedeakatemia
Virukset Materiaalitieteiden Rakennusaineina Suomalainen Tiedeakatemia Mauri Kostiainen Molekyylimateriaalit-ryhmä Teknillisen fysiikan osasto Aalto-yliopisto Virukset materiaaleina Virus on isäntäsolussa
LisätiedotCHEM-A1200 Kemiallinen rakenne ja sitoutuminen, syksy 2016
CHEM-A1200 Kemiallinen rakenne ja sitoutuminen, syksy 2016 Kontaktiopetus 70 h Luennot 44 h Laboratoriotyöt 24 h + 2 h = 26 h Oma työ 65 h Laskutuvat ja kotitehtävät 24 h Laboratoriotöiden loppuraportti
LisätiedotGeeli-elektroforeesi. Lähde: http://www.thehomescientist.com/biology/lab-3-7a.pdf
Geeli-elektroforeesi Lähde: http://www.thehomescientist.com/biology/lab-3-7a.pdf Toimivaan laitteeseen tarvitset: Ajoastian Kelkan, johon geeli valetaan Kamman, jolla geeliin tehdään kaivot näytteitä varten
LisätiedotElämän synty. Matti Leisola
Elämän synty Matti Leisola Selitettävää Universumin rakenne Biologinen elämä Maailmallemme on olemassa kaksi erilaista selitysmallia Kaikki on syntynyt sattumanvaraisten fysikaalisten ja kemiallisten tapahtumien
LisätiedotMitä elämä on? Astrobiologian luento 15.9.2015 Kirsi
Mitä elämä on? Astrobiologian luento 15.9.2015 Kirsi Määritelmän etsimistä Lukemisto: Origins of Life and Evolution of the Biosphere, 2010, issue 2., selaile kokonaan Perintteisesti: vaikeasti määriteltävä
LisätiedotPlasmid construction PCR reactions were carried out with Pfu or Pfu turbo polymerases (Stratagene) unless otherwise stated.
Expanding the Genetic Code of Yeast for Incorporation of Diverse Unnatural Amino Acids via a Pyrrolysyl-tRNA Synthetase/tRNA Pair Susan M. Hancock 1, Rajendra Uprety 2, Alexander Deiters 2 & Jason W. Chin
LisätiedotEeva Seppänen ENDOTELIINI-1-FUUSIOPROTEIININ KLOONAAMINEN JA TUOTTAMINEN
Eeva Seppänen ENDOTELIINI-1-FUUSIOPROTEIININ KLOONAAMINEN JA TUOTTAMINEN ENDOTELIINI-1-FUUSIOPROTEIININ KLOONAAMINEN JA TUOTTAMINEN Eeva Seppänen Opinnäytetyö Syksy 2010 Laboratorioalan koulutusohjelma
LisätiedotSolun tutkiminen. - Geenitekniikka
Solun tutkiminen - Geenitekniikka Tunnin sisältö 1. Bioteknologian peruskäsitteitä 2. Hieman mikroskoopeista 3. DNA:n eristäminen, puhdistaminen ja pilkkominen 4. Geenikirjasto 5. PCR 6. Elektroforeesi
LisätiedotUUDET TEKNIIKAT SISÄYMPÄRISTÖN MIKROBIEN TOTEAMISESSA
UUDET TEKNIIKAT SISÄYMPÄRISTÖN MIKROBIEN TOTEAMISESSA LIITU-päivä 4.5.2006 FT Helena Rintala Kansanterveyslaitos, Ympäristöterveyden osasto Mihin sisäympäristön mikrobien mittauksia tarvitaan? Rakennusten
LisätiedotBiologian tehtävien vastaukset ja selitykset
Biologian tehtävien vastaukset ja selitykset Ilmainen lääkiksen harjoituspääsykoe, kevät 2017 Tehtävä 2. (20 p) A. 1. EPÄTOSI. Ks. s. 4. Menetelmää käytetään geenitekniikassa geenien muokkaamisessa. 2.
LisätiedotSolun perusrakenne I Solun perusrakenne. BI2 I Solun perusrakenne 4. Entsyymit ovat solun kemiallisia robotteja
Solun perusrakenne I Solun perusrakenne 4. Entsyymit ovat solun kemiallisia robotteja 1. Avainsanat 2. Solut tuottavat entsyymejä katalyyteiksi 3. Entsyymien rakenne ja toiminta 4. Entsyymit vaativat toimiakseen
LisätiedotPäijät-Hämeen LUMA-keskuksen verkostoviesti. Maaliskuu 2018
Päijät-Hämeen LUMA-keskuksen verkostoviesti Maaliskuu 2018 LUMA TIEDEKERHO Suosittu, alakouluikäisille suunnattu LUMA Tiedekerho kokoontuu vielä kahtena tiistaina klo 17 18 Tiedeluokka SOLUssa Niemen kampuksella.
Lisätiedot5.7 Biologia Perusopetus Opetuksen tavoitteet Valinnaiset kurssit 1. Elämä ja evoluutio (bi1) 2. Ekosysteemit ja ympäristönsuojelu (bi2)
5.7 Biologia Biologia tutkii elämää ja sen edellytyksiä. Opetus syventää aikuisopiskelijan luonnontuntemusta ja auttaa ymmärtämään luonnon perusilmiöitä. Biologian opiskelu kehittää opiskelijan luonnontieteellistä
LisätiedotCHEM-C2300 Solu- ja molekyylibiologia Syksy 2015
CHEM-C2300 Solu- ja molekyylibiologia Syksy 2015 Luennot Maanantai 10.15 12.00 KE 2 Keskiviikko 13.15 15.00 KE 2 Demot (pakollinen läsnäolo) Perjantai 8.30 10.00, KE1, 25.9. ja 2.10. Osaamistavoitteet
LisätiedotEtunimi: Henkilötunnus:
Kokonaispisteet: Lue oheinen artikkeli ja vastaa kysymyksiin 1-25. Huomaa, että artikkelista ei löydy suoraan vastausta kaikkiin kysymyksiin, vaan sinun tulee myös tuntea ja selittää tarkemmin artikkelissa
LisätiedotElintarvikepetokset Annikki Welling Kemian ja toksikologian tutkimusyksikkö Evira
Elintarvikepetokset Annikki Welling Kemian ja toksikologian tutkimusyksikkö Evira Elintarvikepetokset EU:ssa ei ole yleisesti hyväksyttyä elintarvikepetosten määritelmää. Yleinen ohjeistus löytyy elintarvikelainsäädäntöä
LisätiedotALKOHOLIEN TUNNISTUS KAASUKROMATOGRAFIAN AVULLA
ALKOHOLIEN TUNNISTUS KAASUKROMATOGRAFIAN AVULLA Kohderyhmä: Työ on suunniteltu lukiolaisille sekä ammattikoululaisille ja sopii hyvin erotus- ja tunnistusmenetelmien opetuksen yhteyteen. Työn teoriassa
LisätiedotSATE1120 Staattinen kenttäteoria kevät / 5 Laskuharjoitus 2 / Coulombin laki ja sähkökentänvoimakkuus
AT taattinen kenttäteoria kevät 6 / 5 Laskuharjoitus / Coulombin laki ja sähkökentänvoimakkuus Tehtävä Kaksi pistevarausta ja sijaitsevat x-tason pisteissä r x e x e ja r x e x e. Mikä ehto varauksien
Lisätiedot"Geenin toiminnan säätely" Moniste sivu 13
"Geenin toiminnan säätely" Moniste sivu 13 Monisteen alussa on erittäin tärkeitä ohjeita turvallisuudesta Lukekaa sivu 5 huolellisesti ja usein Vaarat vaanivat: Palavia nesteitä ja liekkejä on joskus/usein
LisätiedotPeptidi ---- F ----- K ----- V ----- R ----- H ----- A ---- A. Siirtäjä-RNA:n (trna:n) (3 ) AAG UUC CAC GCA GUG CGU (5 ) antikodonit
Helsingin yliopisto/tampereen yliopisto Henkilötunnus - Biokemian/bioteknologian valintakoe Sukunimi 24.5.2006 Etunimet Tehtävä 3 Pisteet / 20 Osa 1: Haluat selvittää -- F -- K -- V -- R -- H -- A peptidiä
LisätiedotVastaa lyhyesti selkeällä käsialalla. Vain vastausruudun sisällä olevat tekstit, kuvat jne huomioidaan
1 1) Tunnista molekyylit (1 piste) ja täytä seuraava taulukko (2 pistettä) a) b) c) d) a) Syklinen AMP (camp) (0.25) b) Beta-karoteeni (0.25 p) c) Sakkaroosi (0.25 p) d) -D-Glukopyranoosi (0.25 p) 2 Taulukko.
LisätiedotDNA RNA proteiinit transkriptio prosessointi translaatio regulaatio
CELL 411-- replikaatio repair mitoosi meioosi fertilisaatio rekombinaatio repair mendelistinen genetiikka DNA-huusholli Geenien toiminta molekyyligenetiikka DNA RNA proteiinit transkriptio prosessointi
LisätiedotIntegrointialgoritmit molekyylidynamiikassa
Integrointialgoritmit molekyylidynamiikassa Markus Ovaska 28.11.2008 Esitelmän kulku MD-simulaatiot yleisesti Integrointialgoritmit: mitä integroidaan ja miten? Esimerkkejä eri algoritmeista Hyvän algoritmin
Lisätiedot(Jatkotutkinto-opiskelija, Helsingin yliopisto: eläinlääketieteen tohtorin tutkinto 2.6.2007 )
CURRICULUM VITAE Opetustehtävät Tuija Kantala, yliopisto-opettaja (sijainen), jatkotutkinto-opiskelija KOULUTUS Eläinlääketieteen lisensiaatti, Helsingin yliopisto, 2006 (Jatkotutkinto-opiskelija, Helsingin
LisätiedotNimi sosiaaliturvatunnus. Vastaa lyhyesti, selkeällä käsialalla. Vain vastausruudun sisällä olevat tekstit, kuvat jne huomioidaan
1. Valitse listasta kunkin yhdisteen yleiskielessä käytettävä ei-systemaattinen nimi. (pisteet yht. 5p) a) C-vitamiini b) glukoosi c) etikkahappo d) salisyylihappo e) beta-karoteeni a. b. c. d. e. ksylitoli
Lisätiedotα-amylaasi α-amylaasin eristäminen syljestä ja spesifisen aktiivisuuden määritys. Johdanto Tärkkelys Oligosakkaridit Maltoosi + glukoosi
n eristäminen syljestä ja spesifisen aktiivisuuden määritys. Johdanto Työssä eristetään ja puhdistetaan merkittävä ja laajalti käytetty teollisuusentsyymi syljestä. pilkkoo tärkkelystä ensin oligosakkarideiksi
LisätiedotElektroniikka. Tampereen musiikkiakatemia Elektroniikka Klas Granqvist
Elektroniikka Tampereen musiikkiakatemia Elektroniikka Klas Granqvist Kurssin sisältö Sähköopin perusteet Elektroniikan perusteet Sähköturvallisuus ja lainsäädäntö Elektroniikka musiikkiteknologiassa Suoritustapa
LisätiedotItuepidemia ja VTEC -tutkimukset elintarvikkeista. Saija Hallanvuo Mikrobiologian tutkimusyksikkö
Ituepidemia ja VTEC -tutkimukset elintarvikkeista Saija Hallanvuo Mikrobiologian tutkimusyksikkö Ajankohtaista laboratoriorintamalla / 12.10.2011 EHEC-ITUEPIDEMIAN VAIHEITA: Vahva signaali epidemiasta
LisätiedotTRPA1-PROTEIININ TUOTTO JA KARAKTERISOINTI WESTERN BLOT -MENETELMÄLLÄ
TRPA1-PROTEIININ TUOTTO JA KARAKTERISOINTI WESTERN BLOT -MENETELMÄLLÄ Meiju Kukkonen Kehittämistehtävä Kesäkuu 2010 Solu- ja molekyylibiologian erikoistumisopinnot Tampereen ammattikorkeakoulu TIIVISTELMÄ
LisätiedotMAIDON PROTEIININ MÄÄRÄN SELVITTÄMINEN (OSA 1)
MAIDON PROTEIININ MÄÄRÄN SELVITTÄMINEN (OSA 1) Johdanto Maito on tärkeä eläinproteiinin lähde monille ihmisille. Maidon laatu ja sen sisältämät proteiinit riippuvat useista tekijöistä ja esimerkiksi meijereiden
LisätiedotDesialotransferriinimääritys kapillaarielektroforeesilla
Desialotransferriinimääritys kapillaarielektroforeesilla Labqualityn Laaduntarkkailupäivät 12.2.2004 Annukka Mäki VITA Laboratorio CDT = Carbohydrate Deficient Transferrin alkoholin suurkulutuksen merkkiaine
LisätiedotZF-automaattivaihteiston 8HP öljynvaihtosarja
Palohaavojen vaara jouduttaessa kosketuksiin kuuman öljyn kanssa. Lievät tai keskivakavat vammat mahdollisia. Käytä suojalaseja. Käytä suojakäsineitä. Käytä suojavaatetusta. Omaisuusvahingot mahdollisia
LisätiedotEpigeneettinen säätely ja genomin leimautuminen. Tiina Immonen Medicum, Biokemia ja kehitysbiologia
Epigeneettinen säätely ja genomin leimautuminen Tiina Immonen Medicum, Biokemia ja kehitysbiologia 12.12.2017 Epigenetic inheritance: A heritable alteration in a cell s or organism s phenotype that does
LisätiedotTÄSSÄ ON ESIMERKKEJÄ SÄHKÖ- JA MAGNETISMIOPIN KEVÄÄN 2017 MATERIAALISTA
TÄSSÄ ON ESMERKKEJÄ SÄHKÖ- JA MAGNETSMOPN KEVÄÄN 2017 MATERAALSTA a) Määritetään magneettikentän voimakkuus ja suunta q P = +e = 1,6022 10 19 C, v P = (1500 m s ) i, F P = (2,25 10 16 N)j q E = e = 1,6022
LisätiedotSeosten erotusmenetelmiä
Seosten erotusmenetelmiä KEMIAA KAIKKIALLA, KE1 Kemiassa on usein tarve erottaa niin puhtaita aineita kuin myös seoksia toisistaan. Seoksesta erotetaan sen komponentteja (eli seoksen muodostavia aineita)
LisätiedotTorque teno viruksen proteiinien tuotto ja puhdistus
Torque teno viruksen proteiinien tuotto ja puhdistus Bioanalytiikan koulutusohjelma, bioanalyytikko Opinnäytetyö 16.4.2007 Eija Lönn HELSINGIN AMMATTIKORKEAKOULU STADIA Sosiaali- ja terveysala Koulutusohjelma
LisätiedotVIIKKI BIOCENTER University of Helsinki
VIIKKI BIOCENTER University of Helsinki Biologian DNA koodi ja sen selvittäminen Petri Auvinen DNA Sequencing and Genomics Laboratory Institute of Biotechnology Kuinka solut kehittyivät? Kolmenlaisia soluja
LisätiedotHuumetestauksen tekniikkaa
Huumetestauksen tekniikkaa SKKY ry:n ja Sairaalakemistit ry:n syyskoulutuspäivät 1.11.2013, Helsinki FT Antti Leinonen Huume-, lääkeaine- ja dopinganalytiikan yksikkö Yhtyneet Medix Laboratoriot Oy Huumetestien
LisätiedotNäytteiden inaktivointi tutkimusanalyyseihin
Näytteiden inaktivointi tutkimusanalyyseihin Pamela Österlund 16.4.2015 Pamela Österlund 1 16.4.2015 Pamela Österlund 2 Mikrobien Inaktivaatiomenetelmiä Kemialliset yhdisteet Klooriyhdisteet Alkoholit
LisätiedotUutta pikadiagnostiikkaan
Uutta pikadiagnostiikkaan Joanna Peltola Sairaalamikrobiologi NordLab Rovaniemi Käsitteitä Perinteiset mikrobiologiset menetelmät Viljely Biokemiallinen tunnistus Kiekkoherkkyysmääritys Pikatestit Immunografiset
LisätiedotMateriaalinäytteiden qpcr-tulosten tulkinnasta
Materiaalinäytteiden qpcr-tulosten tulkinnasta Helena Rintala ja Teija Meklin Sisäilmastoseminaari 13.3.2014 Taustaa qpcr (kvantitatiivinen PCR) on nopea menetelmä mikrobien toteamiseen Käytetty paljon
Lisätiedotmåndag 10 februari 14 Jaana Ohtonen Kielikoulu/Språkskolan Haparanda
GENETIIKKA: KROMOSOMI DNA & GEENI Yksilön ominaisuudet 2 Yksilön ominaisuudet Perintötekijät 2 Yksilön ominaisuudet Perintötekijät Ympäristötekijät 2 Perittyjä ominaisuuksia 3 Leukakuoppa Perittyjä ominaisuuksia
Lisätiedot10.9.2015 Pipetointi, sentrifugointi ja spektrofotometria
BIOKEMIAN MENETELMÄT I, SYKSY 2015 VASTAUKSET LUENTOMATERIAALIN TEHTÄVIIN: 10.9.2015 Pipetointi, sentrifugointi ja spektrofotometria Pesukoneen g-voimat: RCF (x g) = 1,119 10-5 (rpm)2 r = roottorin säde
LisätiedotMETABOLISTEN SAIRAUKSIEN ANALYTIIKAN JÄRJESTÄMINEN NORDLAB OULUSSA. Marja-Kaisa Koivula Sairaalakemisti, FT, dosentti
METABOLISTEN SAIRAUKSIEN ANALYTIIKAN JÄRJESTÄMINEN NORDLAB OULUSSA Marja-Kaisa Koivula Sairaalakemisti, FT, dosentti Esityksen sisältö Johdanto Kromatografiset menetelmät Entsymaattinen määritysmenetelmä
LisätiedotTutkimuksellisia töitä biologian opetukseen
Tutkimuksellisia töitä biologian opetukseen Justus / Biotieteiden opetuksen keskus BioPop 13.6.2017 1 Päivän ohjelma 16:00 16:25 Mitä tutkimuksellisuus on? 16:25 16:35 Johdatus päivän tutkimustyöhön 16:35
LisätiedotBiologia ylioppilaskoe
Biologia ylioppilaskoe 12 tehtävää, joista kahdeksaan (8) vastataan Tehtävät vaikeutuvat loppua kohden, jokeritehtävät merkitty +:lla Molempiin jokereihin saa vastata ja ne lasketaan mukaan kahdeksaan
Lisätiedot