Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely 1 1/2010

Transkriptio

1 Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely 1 1/2010 Kuvat ja teksti: Markku Koskela Mikrobiologian ylilääkäri OYS, Oulu Huom! Käyttäkää yläpalkin suurennusmahdollisuutta % pesäkekasvun yms. yksityiskohtia tarkastellessanne!!!!

2 Näyte 1/ vuotiaan miehen tulehtunut säärimurtuma Löydös: Klebsiella pneumoniae, patogeeni Tehtävät: Bakteerin eristäminen, tunnistaminen ja mikrobilääkeherkkyysmääritys

3 Näyte 1/2010. Klebsiella pneumoniae Viljely lampaanveri- ja suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk. ->Isoja ja limaisia sauvapesäkkeitä

4 Näyte 1/2010 K.pneumoniae Klebsiella pneumoniaen sokerisarja: 1) Glukoosi / kaasu: +/ 2) Indoli - (väritön) 3) liikkumaton (pistoviljelykohta vain samea) 4) sitraatti + (sininen) 5) urea + (punainen) 6) TSI: pinta keltainen (+) / pohja keltainen (+)/ pohjassa ei kaasua (-). Lisäksi H 2 S- reaktio negatiivinen eli putkessa ei näy mustaa aluetta keskellä.

5 Näyte 1/2010. K.pneumoniae + - +, - + -, + - -, + - +, + + +, + + +, Oxid API20E Klebsiella pneumoniae (97,6%).

6 Näyte 1/2010. Klebsiella pneumoniae Viljely Cled-maljalle aerobisesti, +35 C, 1 vrk. ->Isoja ja limaisia laktoosipositiivisia pesäkkeitä

7 Näyte 2/2010 Märkäistä eritettä tulehtuneelta kainalon ihottuma-alueelta Oletettu löydös: A-ryhmän beta-hemolyyttinen streptokokki (Streptococcus pyogenes), patogeeni ja Candida albicans, patogeeni Lisäksi ihon normaalia flooraa edustanut difteroidi (Corynebacterium amycolatum) Tehtävät: Bakteerien ja hiivan eristäminen ja tunnistaminen. Tulosten tulkinta

8 Näyte 2/2010 Märkivä kainalon ihottuma-alue Viljely lampaanverimaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 ja 2 vrk. 1 vrk 2 vrk 1.Beta-hem.streptokokki+++ 2.Jotakin muuta? 1. Beta-hem.streptokokki 2 Valkoinen hiiva 3. Muuta???

9 Näyte 2/2010 Märkivä kainalon ihottuma-alue Viljely lampaanverimaljalle, 5% CO 2, +35 C, 2 vrk. 2 vrk Kasvuston gram-värjäys: Hiivasoluja ja hiivan valerihmaa, gram+ketjukokkia (heikosti värjäytynyt) ja muutama difteroidiksi sopiva gram+sauva.

10 Näyte 2/2010 Märkivä kainalon ihottuma-alue Viljely suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 ja 2 vrk. 1 vrk 2 vrk 1. Pieniä harmaita streptokokkipesäkkeitä 2. Valkoisen harmaita hiivapesäkkeitä 1.Harmaita ja vihreitä (!) streptokokkipesäkkeitä 2. Valkoisen harmaita hiivapesäkk. 3. Kuivia difteroidipesäkkeitä (??)

11 Näyte 2/2010 A-ryhmän beta-hem streptokokki (Streptococcus pyogenes) Streptokokkilatex-agglutinaatio A + G - Tyypillinen beta-hemolyytt. streptokokki verimaljalla. Tämä kanta beta-hemolysoi hyvin jo 1 vrk:ssa. Gram+ketjukokki

12 Näyte 2/2010 A-ryhmän beta-hem streptokokki (Streptococcus pyogenes) Rapid ID32Strep Streptococcus pyogenes (99,9 %)

13 Näyte 2/2010. Candida albicans Ituputkitesti (seerumitesti), 2 t, +30 C -> natiivimikroskopointi: C.albicans posit. vrt. Candida glabrata negat. Pesäkkeen Gram-värjäys: hiivasoluja

14 Näyte 2/2010 Candida albicans Hiivan tunnistaminen kromogeenimaljalla: Chromagar Candida (biomerieux, Ranska), aerobisesti +35 C, 2 vrk. Aluksi vihertäviä ( 1vrk) -> Vihreitä (2 vrk) C.albicans pesäkkeitä

15 Näyte 3/2010 Endokardiittipotilaan sydämen tahdistimen johto Löydökset: Staphylococcus lugdunensis, patogeeni Tehtävät: Bakteerin eristäminen ja tunnistaminen. Tuloksen tulkinta.

16 Näyte 3/2010: Primaariviljely (Staphylococcus lugdunensis) Viljely lampaanverimaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 ja 2 vrk. ->Aluksi (1 vrk) kellertäviä -> (2 vrk) vaaleankeltaisia ja hemolysoivia stafylokokkipesäkkeitä, jotka erehdyttävästi muistuttavat S.aureus-pesäkkeitä

17 Näyte 3/2010: Primaariviljely (Staphylococcus lugdunensis) Viljely suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 ja 2 vrk. ->Aluksi (1 vrk) kellertäviä -> (2 vrk) vaaleankeltaisia stafylokokkipesäkkeitä, jotka erehdyttävästi muistuttavat S.aureus-pesäkkeitä.

18 Näyte 3/2010. Staphylococcus lugdunensis S.lugdunensis agglutinoituu stafylokokkilatex-testeillä kuten S.aureus, Staphaurex Remel Europe Ltd, UK Mutta S.lugdunensis ei koaguloi kanin plasmaa eli se on koagulaasinegatiivinen stafylokokki. Pasteurex TM Staph Plus, Bio-Rad, Ranska Kanin plasman koagulaasi: S lugdun negat S aureus posit

19 Näyte 3/2010. Staphylococcus lugdunensis S aureus S lugdunensis Kasvu S aureuksen identifikaatiomaljalla (SAID, biomerieux, Ranska) 1 vrk:ssa, +35 C:ssa.: S aureus vihreä ja S lugdunensis valkoisen harmaa

20 Näyte 3/2010. Staphylococcus lugdunensis - + +, + + -, + - -, - + -, + - -, + - +, API20Staph: Staphylococcus lugdunensis ( 97 %)

21 Näyte 4/2010 Ultraääniohjattu näyte immuunipuutteisen potilaan maksa-absessista Löydökset: Clostridium innocuum, patogeeni Tehtävät: Bakteerin eristäminen ja tunnistaminen. Tuloksen tulkinta.

22 Näyte 4/2010. Primaariviljelyt (Clostridium innocuum) Aerotoleranssitesti: 1.verimalja/aerobi: ei kasvua 2. suklaamalja / 5% CO 2 : ei kasvua 3.FAA-malja/anaerobi: kasvu+++ ja iso esto metronidatsolikiekon ympärillä

23 Näyte 4/2010. Clostridium innocuum FAA-maljakasvu anaerobiviljelyssä (2 vrk, +35 C): Keskisuuria, tarkkarajaisia, hiukan koholla olevia (navallisia), harmaita pesäkkeitä. Haju mieto.

24 Näyte 4/2010. Clostridium innocuum Pikatestit: Katalaasi: negat Pikaindoli: negat Gram-positiivinen itiöllinen sauva. Värjäytyvyys vaihteleva! Terminaalisia itiöitä näkyy vain muutamissa basilleissa.

25 Näyte 4/2010. Clostridium innocuum Anaerobien identifikaatiotesti (A I): Kanamysiini R, vankomysiini S, kolistiini R sopien gram-positiiviseksi anaerobiksi Huom! Vain kohtalaisen herkkä vankomysiinille vrt. pieni vankomysiinin estorengas! (Kanta kasvoi KVLB-maljalla!)

26 Näyte 4/2010. Clostridium innocuum EYA-maljakasvu anaerobisesti +35 C, 2 vrk: Lesitinaasireaktio: negat ja lipaasireaktio: negat

27 Näyte 4/2010. Clostridium innocuum - - -, - - +, - - -, - - -, - + +,+ - - RapID ANA II Clostridium innocuum (99,4 %)

28 Jääkukkia auringossa Pohjanlahden kantohangilla

29 Silmäniloa!