Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely 1 4/2009

Transkriptio

1 Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely 1 4/2009 Kuvat ja teksti: Markku Koskela Mikrobiologian ylilääkäri OYS, Oulu Huom! Käyttäkää yläpalkin suurennusmahdollisuutta % pesäkekasvun yms. yksityiskohtia tarkastellessanne!!!!

2 Näyte 13/2009 Kystistä fibroosia sairastavan potilaan yskösnäyte Löydös: Pseudomonas aeruginosa Tehtävät: Bakteerin eristäminen, tunnistaminen ja mikrobilääkeherkkyysmääritys

3 Näyte 13/2009. P.aeruginosa Viljely lampaanveri- ja suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1-2 vrk. ->tämä kanta tuotti limaisia, punertavaa pigmentiä muodostavia, oksidaasipositiivisia sauvapesäkkeitä.

4 Näyte 13/2009. P.aeruginosa + - -, + - -, + - +, - - +, + - +, + + +, API20NE Pseudomonas aeruginosa (99,5%). Oxid Nitraatti on pelkistynyt nitraatiksi ja edelleen kaasuiksi, jolloin kaivo jää värittömäksi sinkkilisäyksenkin jälkeen. P. aeruginosa ei fermentoi glukoosia (nonfermentatiivinen) mutta käyttää sitä hapen läsnäollessa oksidatiivisesti.

5 Näyte 14/2009 Sivelynäyte keski-ikäisen opettajattaren vähäeritteisestä silmän sidekalvotulehduksesta Oletettu löydös: Silmän sidekalvon normaalia flooraa. Näyte sisälsi alfa-hemol.streptokokkia (S.viridans), koagulaasinegatiivista stafylokokkia (S.epidermidis) ja akinetobakteeria (Acinetobacter spp). Tehtävät: Bakteerien eristäminen ja tunnistaminen. Tulosten tulkinta

6 Näyte 14/2009 Silmän sidekalvoeritteen viljely Viljely lampaanveri- ja suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1-2 vrk. -> Aerobista sauvakasvua, seassa pieniä harmaita pesäkkeitä. Optokiinikiekosta verimaljalla ei ole apua.

7 Näyte 14/2009 Silmän sidekalvoeritteen viljely Näytteessä olleiden bakteerien puhdasviljelmät ja tunnistuskokeita: 1. koagulaasinegatiivinen stafylokokki, 2.S.viridans (optokiinikoe negat) ja 3. akinetobakteeri.

8 Näyte 14/2009 Akinetobakteeri Akinetobakteerin sokerisarja: 1) Glukoosi / kaasu: +/ (glukoosista muodostuu happoa hapekkaassa pintaosassa = muuttuu keltaiseksi, mutta ei hapettomassa kaasunkeräysputkessa = jää vihreäksi; kaasua ei muodostu) 2) Indoli - (väritön) 3) liikkumaton eli akineettinen, josta tämän bakteerin sukunimi (pistoviljelykohta vain samea) 4) sitraatti + (sininen) 5) urea - (keltainen) 6) TSI: ei sokerien fermentaatiota eli nonfermentatiivinen = putki punainen eikä kaasua. H 2 S-reaktio on negat.

9 Näyte 14/2009 Akinetobakteeri - - -, - - -, - - +, - - -, - - -, + + +, API20NE: Acinetobacter baumannii (99,8%) Akinetobakteeri ei pelkistä nitraattia, joten NO 3 -kaivo jää reagenssien lisäyksen jälkeen värittömäksi. Negatiivinen tulos saadaan varmistettua lisäämällä kaivoon sinkkiä, joka pelkistää kaivossa olevan nitraatin nitriitiksi, josta punainen väri. Glukoosikaivojen tulkinnan hankaluus: A. baumannii ei fermentoi glukoosia (nonfermentatiivinen) ts. öljyn alla neste pitäisi olla vihreää. Se käyttää glukoosia hapen läsnä ollessa oksidatiivisesti ts. ilman öljyä tulisi olla selvä samentuma (mutta näkyy heikosti)

10 Näyte 14/2009 Akinetobakteeri 1 vrk viljelmä: Gram-negat kokkisauva, jopa diplokokkimaisia muotoja (josta vanha nimi Mima ts. muistuttaa erehdyttävästi mm. gonokokkia) 3 vrk viljelmä: Värjäytyvyys heikompaa, pitkiä sauvamuotoja joukossa.

11 Näyte 15/2009 Virtsarakkokarsinoomapotilaan rakkokanyylin (cystofix) juuresta otettu eritenäyte Löydökset: Propionibacter acnes Tehtävät: Bakteerin eristäminen ja tunnistaminen. Tuloksen tulkinta.

12 Näyte 15/2009. Primaariviljelyt Kasvua vain anaerobiviljelyssä (2 vrk, +35 C). Kuvassa FAA-maljalla kuivahkoja, kuperia, ruskeankellertäviä pesäkkeitä, jotka resistenttejä metronidatsolille! ja herkkiä aminoglykosidille (tässä amikasiinikiekko)! Sopii propionibakteerin ja aktinomykesten tyyppiseksi anaerobiksi.

13 Näyte 15/2009. Propionibacter acnes Aerotoleranssitesti: 1.verimalja/aerobi: ei kasvua 2.suklaamalja/5% CO 2 :ei kasvua 3.FAA-malja/anaerobi: kasvu+++ Anaerobien identifikaatiotesti (A I): Kanamysiini S, vankomysiini S, kolistiini R

14 Näyte 15/2009. Propionibacter acnes FAA Katalaasi + Gram + haarova sauva

15 Näyte 15/2009. Propionibacter acnes - - -, + + -, - - +, + + +, + + +, RapID ANA II: P.acnes (99,9 %) Tämä kanta oli indolinegatiivinen.

16 Näyte 16/2009 Neutropeenisen tehohoitopotilaan BAL-näyte. Sen värjäyksessä ei näkynyt leukosyyttejä, mutta näkyi runsaasti bakteereita. Löydökset: Hengitysteiden normaalia flooraa, jossa Staphylococcus aureus (patogeeni) Enterobacter cloacae (lisäpatogeeni / kolonisoija) Hiiva, ei Candida albicans (C.glabrata) (kolonisoija / lisäpatogeeni?) Tehtävät: Bakteerien ja hiivan eristäminen ja tunnistaminen. Tulosten tulkinta.

17 Näyte 16/2009: Primaariviljelyt Viljely lampaanveri- ja suklaamaljalle, 5% CO2, +35 C, 1 vrk. ->Voimakkaasti hemolysoivia, matalia, kiiltäviä ja kellertäviä S.aureus-pesäkkeitä ja isompia aerobisia sauvapesäkkeitä. Muuta?

18 Näyte 16/2009: Primaariviljelyt 1 2 Viljely selektiiviselle hiivamaljalle aerobisesti. -> 1. Runsas hiivakasvu Sabouraud-maljalla (+30 C,2 vrk). -> 2. Punaruskea hiivakasvu kromogeenisella Candida-maljalla (+35 C, 2 vrk ): Hiiva, ei Candida albicans.

19 Näyte 16/2009. Staphylococcus aureus Tämän tyypillisen S. aureuksen näköisenä kasvavan kannan osoittaminen koagulaasipositiiviseksi vaati lisätestin: vain kanin plasman koagulaasitesti oli selvästi positiivinen. S aureuksista 98% agglutinoituu latex testeillä. Tämä kanta oli poikkeus!! Vrt. Seuraava sivu

20 Näyte 16/2009. Staphylococcus aureus S. aureus 16/2009 S. aureus ATCC25923 Staphaurex* Remel Europe Ltd, UK - + Pasturex TM Staph Plus, Bio-Rad, France - Testit + Negat - kontr -

21 Näyte 16/2009. Staphylococcus aureus - + +, + + +, - + -, - + +, - - -, + - -, API20Staph: Staphylococcus aureus ( 90 %)

22 Näyte 16/2009. Enterobacter cloacae Enterobacter cloacaen sokerisarja: 1) Glukoosi / kaasu: +/+ (keltainen / pikkuputkessa on kaasua 2) Indoli - (väritön) 3) liikkuva (koko putki on samea) 4) sitraatti + (sininen) 5) urea + (punainen) 6) TSI: pinta punainen, pohja keltainen, runsaasti kaasua = fermentatiivinen. H 2 S-reaktio on negat ts. ei mustaa vyöhykettä putkessa.

23 Näyte 16/2009. Enterobacter cloacae + + -, - + -, - - -, + - +, + - +, + + +, API20E: Enterobacter cloacae ( 92 %) Ohut gram - sauva

24 Näyte 16/2009. Candida glabrata Ituputkitesti (seerumitesti): C.glabrata neg, C.albicans pos. C.glabrata: pieni hiivasolu

25 Näyte 16/2009. Candida glabrata + + Api32 Candida (ID 32 C): Candida glabrata (99%)

26 Talven taikaa