Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely 1 3/2010

Transkriptio

1 Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely 1 3/2010 Kuvat ja teksti: Markku Koskela Mikrobiologian ylilääkäri OYS, Oulu Huom! Käyttäkää yläpalkin suurennusmahdollisuutta % pesäkekasvun yms. yksityiskohtia tarkastellessanne!!!!

2 Näyte 9/2010 Märkänäyte iholta. Vastasyntyneen pemfigus. Löydös: Staphylococcus aureus, patogeeni Tehtävät: Bakteerin eristäminen, tunnistaminen ja mikrobilääkeherkkyysmääritys

3 Näyte 9/2010. Staphylococcus aureus Viljely lampaanveri- ja suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk. Keskikokoisia, matalia, kiiltäviä, kellertäviä, verimaljalla hemolysoivia S.aureus-pesäkkeitä

4 Näyte 9/2010. S.aureus Gram+ ryhmäkokki Stafylokokkien Latex-koagulaasitesti + Negat. kontrolli

5 Näyte 10/2010 Eritettä 3-vuotiaan afrikkalaissyntyisen maahanmuuttajalapsen vuotavasta välikorvasta Oletettu löydös: Haemophilus influenzae, patogeeni Moraxella catarrhalis, patogeeni ja Staphylococcus aureus, patogeeni Tehtävät: Bakteerien eristäminen ja tunnistaminen. Tulosten tulkinta

6 Näyte 10/2010 Välikorvaerite Viljely lampaanverimaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 -> 2 vrk. 1. Keskisuuri, matala, keltainen, hemolysoiva pesäke: S.aureus? 2. Sen satelliittina hemolyysialueella kasvaa Haemophilus sp. 3. Korkea, kupera, agarilla liikuteltava pesäke -> oksidaasi + ->Moraxella catarrhalis?

7 Näyte 10/2010 Välikorvaerite Viljely suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1 -> 2 vrk. 2. Korkeita, kuperia, vaaleita M.catarrhalispesäkkeitä 3. Isoja,matalia, keltaisia S.aureus-pesäkkeitä 1. Matalia, harmaita hemofiiluspesäkkeitä

8 Näyte 10/2010 Haemophilus influenzae S aureus Satelliitti+ Kasvu suklaamaljalla, 5% CO 2,, +35 C, 1 vrk Pieni monimuotoinen gram-sauva Kasvufaktorit: X ja V +

9 Näyte 10/2010 Moraxella catarrhalis Gram- diplokokki Oksidaasi+ Tributyreeni+

10 Näyte 10/2010. Staphylococcus aureus Koagulaasitesti kts. näyte 9/2010

11 Näyte 10/2010 Eritettä 3-vuotiaan afrikkalaissyntyisen maahanmuuttajalapsen vuotavasta välikorvasta Potilaan ulkomaalaistaustan vaikutus tutkimuksen suunnitteluun ja toteutukseen: Yleiset välikorvatulehduksen aiheuttajat (pneumokokki, H.influenzae, M.catarrhalis, S.pyogenes), samoin S.aureus ovat samoja eri puolilla maailmaa, mutta niiden mikrobilääkeherkkyys voi vaihdella.

12 Näyte 11/2010 Märkää munasarja-absessista. Alavatsan infektio 43-vuotiaalla naisella. Löydökset: Klebsiella pneumoniae, patogeeni ja Actinomyces israelii, patogeeni Tehtävät: Bakteerien eristäminen ja tunnistaminen. Tuloksen tulkinta. Tekninen haaste: Hitaasti kasvavan anaerobin bakteerin eristäminen nopea- ja runsaskasvuisen aerobin bakteerin seasta!

13 Näyte 11/2010 Märkää munasarja-absessista (Simuloidun) natiivin märkänäytteen gramvärjäys: 1) Gam-sauva ja 2) ohut, haarautuva gram+/-sauva

14 Näyte 11/2010 Märkää munasarja-absessista Viljely lampaanverimaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1-2 vrk. Aerobi, korkea, limainen sauvabakteerikasvu. Muuta??

15 Näyte 10/2010 Märkää munasarja-absessista Viljely suklaamaljalle, 5% CO 2, +35 C, 1-2 vrk. 1-2 vrk Aerobi, korkea, limainen sauvabakteerikasvu. Muuta??

16 Näyte 11/2010 Märkää munasarja-absessista Viljely anaerobille lampaanverimaljalle (FAA), anaerobinen inkubaatio, +35 C, 2 ja 7 vrk. 2 vrk 7 vrk Klebsiella-kasvua. Anaerobeja ei näy Valkoisia, kuivia, syömähampaan näköisiä pesäkkeitä on kasvanut Klebsiellapesäkkeiden joukkoon!

17 Näyte 11/2010 Märkää munasarja-absessista Viljely anaerobille lampaanverimaljalle (FAA), anaerobinen inkubaatio, +35 C, 7 vrk. (Toinen FAA-maljahajoitusviljelmä). Valkoisia, kuivia, syömähampaan näköisiä pesäkkeitä Klebsiella-pesäkkeiden seassa! Kts. Tarkemmin % suurennoksella!

18 Näyte 11/2010 Märkää munasarja-absessista Viljely anaerobille PEA-maljalle (joka sisältää K-vitamiinia), anaerobinen inkubaatio, +35 C, 7 vrk. Vain gram-posit bakteerit kasvavat PEA:lla!! Kuvassa aktinomykes kasvaa puhtaana ja runsaana kasvustona!

19 Näyte 11/2010 K.pneumoniae Klebsiella pneumoniaen sokerisarja: 1) Glukoosi / kaasu: +/+ 2) Indoli - (väritön) 3) liikkumaton (pistoviljelykohta vain samea) 4) sitraatti + (sininen) 5) urea + (punainen) 6) TSI: pinta keltainen (+) / pohja keltainen (+)/ pohjassa kaasua (+). Lisäksi H 2 S- reaktio negatiivinen eli putkessa ei näy mustaa aluetta keskellä.

20 Näyte 1/2010. K.pneumoniae - - +, - + -,+ - -, + - +, + + +, + + +, Oxid API20E Klebsiella pneumoniae (98%).

21 Näyte 4/2010. Actinomyces israelii Aerotoleranssitesti: 1. verimalja/aerobi: ei kasvua 2. suklaamalja / 5% CO 2 : ei kasvua 3. FAA-malja/anaerobi: kasvu+++

22 Näyte 4/2010. Actinomyces israelii Anaerobien identifikaatiotesti (A I): Kanamysiini S, Vankomysiini S, Kolistiini R sopien grampositiiviseksi anaerobiksi Metronidatsoli R Tyypillistä aktinomykeksen kaltaiselle gram-posit. anaerobille

23 Näyte 4/2010. Actinomyces israelii Anaerobinen kasvu anaerobiverimaljalla 7 vrk:ssa, +35 C:ssa: Valkoisia syömähampaita Gram+haarautuva sauva Katalaasi neg

24 Näyte 11/2010. Actinomyces israelii - + +, + + +, + - -, - + +, + + +, RapID ANA II Actinomyces israelii (99,7 %)

25 Näyte 11/2010. Actinomyces israelii - + +, + - +, + + -, - + +, , - + -, + + -, + + -, Rapid ID32 A Actinomyces israelii (84 %)

26 Näyte 11/2010. Actinomyces israelii A.israelii on anaerobinen gram-positiivinen sauvabakteeri, jota on suun ja genitaalien normaalissa floorassa. Se aiheuttaa suussa hammasperäisiä infektioita, genitaaliinfektioita ja se voi löytyä myös mm maksa-absessista. Koska se on hidaskasvuinen ( vrk) ja koska samassa näytteessä on usein muitakin bakteereita, sen löytäminen vaatii hyvät hajotusviljelyt, pidennetyn inkubaatioajan (7-10 vrk) ja tarkkanäköisen viljelmien tulkitsijan. Gram-positiivisten bakteerien kasvua suosiva anaerobimalja (anaerobi PEA-malja) on hyödyllinen lisäapu! Sen lajitunnistus voi olla vaikeaa. Usein tavallisilla kaupallisilla testeillä päästään luotettavasti vain Actinomyces-sukutasolle.

27 Näyte 12/2010 Hodgkinin tautia sairastavan siipikarjankasvattajan yskösnäytte Löydökset: Ylähengitysteiden normaalia flooraa, jossa Rhodococcus equi, patogeeni Tehtävät: Bakteerien eristäminen ja tunnistaminen. Tuloksen tulkinta.

28 Näyte 12/2010: Yskösnäyte Viljely lampaanveri- ja suklaamaljoille, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk. -> 1) kiiltäviä, limaisia epäsäännöllisiä,pesäkkeitä 2) alfa-hemolyyttisiä streptokokkeja

29 Näyte 12/2010: Yskösnäyte Viljely lampaanveri- ja suklaamaljoille, 5% CO 2, +35 C, 2 vrk. -> 1) kiiltäviä, limaisia, vaaleita pesäkkeitä, joiden alle jää 2) alfa-hemolyyttisiä pesäkkeitä

30 Näyte 12/2010. Rhodococcus equi Gram+kokkisauva Katalaasi+ Tyypillinen lohenpunainen pigmentti vasta 5-7 vrk kuluttua verimaljalla

31 Näyte 12/2010. Rhodococcus equi - - -, - + +, - - -, + + +, + - +, RapID CB Plus: Rhodococcus equi ( 99,9 %)

32 Näyte 12/2010. Rhodococcus equi R.equi on maaperäbakteeri, joka nimensä ( equi ) mukaisesti voi aiheuttaa mm. hevosille hengitystieinfektioita. Se voi tarttua immuunipuutteiseen ihmiseen hengitysteitse mm. eläinten lantaa sisältävän pölyn välityksellä ja aiheuttaa keuhkokuumeen. Sen lajitunnistus tapahtuu kliinisen mikrobiologian laboratoriossa korynebakteerien lajitunnistukseen käytettävien testien avulla.

33 Näyte 12/2010. Alfa-hemolyyttinen streptokokki Optokiinille resistentti alfa-hemolyyttinen streptokokki ts. se ei ole pneumokokki. Hengitysteiden normaalia flooraa

34 Syystervehdys poronjäkäläkankaalta, jossa

35 myös herkkutatit kasvavat