Ajankohtaisia asioita veriryhmätutkimuksista Inna Sareneva FM Laboratorioasiantuntija 13.5.2013 1 1 1 1 1
Veripalvelu lyhyesti 18 toimipaikkaa ja lukuisia verenluovutustilaisuuksia ei tavoittele voittoa 540 päätoimista työntekijää vuosibudjetti 70 milj. euroa 143 000 250 000 50 000 verenluovuttajaa > verenluovutusta > potilasta Luomme mahdollisuuksia elämän pelastamiseen verivalmisteet potilastutkimukset raskaudenaikaiset veriryhmätutkimukset kudossopeutuvuustutkimukset kantasolusiirteet kudospalvelut solutuotantokeskus lääketukkukauppa tutkimus ja tuotekehitys 2 2 2 2 2
500000 Valmisteet ja luovutukset 1984-2012 450000 400000 350000 300000 250000 200000 150000 100000 50000 0 19841985198619871988198919901991199219931994199519961997199819992000200120022003200420052006200720082009201020112012 Kokoveret Punasolut Trombosyytit (yks) Jääplasma KV Luovutukset 3 3 3 3 3
Verivalmisteet, laskeva suunta kaikissa valmisteryhmissä 300 000 250 000 200 000 150 000 100 000 50 000 0 Punasolumyynti (kpl) 2006-2012 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 45 000 40 000 35 000 30 000 25 000 20 000 15 000 10 000 5 000 0 ' 2006 Trombosyyttimyynti (kpl) 2006-2012 ' 2007 ' 2008 ' 2009 ' 2010 ' 2011 ' 2012 4 * koosteveri 4 4
ENNEN VERENSIIRTOA TEHTÄVÄT VERENSIIRTOSEROLOGISET TUTKIMUKSET 1. ABORhD-määritys kahdesta riippumattomasta näytteestä luonnolliset ABO isoagglutiniinit RhD immunisaation ehkäisy 2. veriryhmävasta-aineiden seulonta ja tarvittaessa tunnistus (suora antiglobuliinikoe) 3. sopivuuskoe ABO sopivuuden varmistus varmistetaan serologisesti jokaisen punasoluyksikön sopivuus potilaalle 5 5 5 5 5
Veriryhmä? Mikä on ongelma? ABO? Rh? Heikot reaktiot Ylimääräiset reaktiot Kaksoispopulaatio Ristiriita aikaisempien tulosten kanssa Edelliset verensiirrot? Diagnoosi? Verentarve? kiireellisyys Hyvät esitiedot nopeuttavat tutkimuksia ja säästävät turhilta soitoilta 6 6 6
Kiiretilanteissa Usein päivystysaikana epäselvät veriryhmät vastataan alustavana, esim:? RhD pos, jolloin verensiirtoihin suositellaan toistaiseksi O punasoluja ja AB-plasmaa A RhD?, jolloin verensiirtoihin suositellaan toistaiseksi RhD neg verta ja tarvittaessa RhD-suojausta Jos jatkotutkimuksiin tarvitaan lisänäytettä, se on otettava ennen verensiirtoja ABO- ja Rh- jatkotutkimuksia tehdään Veripalvelussa vain arkipäivisin Absorptio-eluaatiotutkimus tehdään yleensä seuraavana arkipäivänä RhD-genotyypitys voi kestää useamman päivän 7 7 7
RhD-jatkotutkimus kun serologinen D-tyypitys heikko tai epäselvä voi muodostua anti-d puuttuvia antigeenin rakenteita kohtaan D-variantti D-antigeenin määrä alentunut tai rakenteessa muutoksia yleisyys n. 0,3 1,7 % verensiirroissa: heikko D tyyppi 1, 2 ja 3 pidetään verensaajana RhD positiivisena kaikki muut D-variantit verensaajina RhD negatiivisina verenluovuttajina kaikki variantit RhD positiivisia jos RhD epäselvä, siirretään toistaiseksi RhD neg punasoluja ja suojataan Tutkittavan D-antigeeni on heikko ja osoitettavissa vain osalla reagensseja. Jatkotutkimuksissa todettiin D kategoria VI -variantti Verensiirtoihin suositellaan RhD neg punasoluvalmisteita. Anti-D suojausta suositellaan tarvittaessa immunisaatioriskin pienentämiseksi. 8 8 8 8 8
Geno- versus fenotyypitys reagenssit serologiseen tyypittämiseen saattavat olla: vaikeasti saatavia (esim. harvinaisille antigeeneille) ei kaupallisia huonosti standardoituja kalliita heikosti reagoivia ei automaateille soveltuvia joskus serologia hankalasti tulkittavissa esim. D-variantit, suora coombs positiiviset äskettäiset verensiirrot ABO:n osalta serologinen tyypitys täysin ylivertainen nopea, halpa, yksinkertainen genotyypitys tuskin lähiaikoina tulee korvaamaan rutiinissa serologista tyypitystä, mutta yleistyy koko ajan feno- ja genotyypitys tukevat toisiaan mainiosti 9 9 9
Vasta-aineiden seulonta Positiivisen seulonta tuloksen takana voi olla: punasoluallovasta-aine potilaan autovasta-aine tai panagglutiniini valkosoluvasta-aine muu tekninen tai näytteeseen liittyvä ongelma Yhteensä 33 veriryhmäjärjestelmää, jotka sisältävät yli 300 veriryhmäantigeenia kaikkia näitä antigeeneja vastaan voi muodostua veriryhmävastaaineita, jotka pitää mahdollisesti huomioida verensiirroissa 10 10 10 10
Vasta-aineiden tunnistus Tunnistus pyyntöjen taustalla: positiivinen vasta-aineiden seulontatulos positiivinen sopivuuskoetulos aiemmin todetut tai epäillyt punasoluvasta-aineet epäselvä veriryhmä verensiirtoreaktio 11 11 11 11
Haasteita ja ratkaisuja 1) Useita yleisiä vasta-aineita riittävä määrä reagenssisoluja antigeenityypitys allovasta-aineiden poissulkemiseen feno/genotyypitetyt valmisteet kaikista luovuttajista C,c,E,e, K suppea plus: Jka, Jkb, Fya, Fyb,M, S, s Luminex: RH, KELL, KIDD, Duffy, MNS, Diego, DO, CO, Cartwright suomalaiset /muut harvinaisuudet: LW, Ula, LE, LU, Lsa, Ana, WESa, P1 huom. fenotyyppi etikettiin vasta kolmannen luovutuksen jälkeen Useita yleisiä vasta-aineita esim. anti-c veristä sopii 20% anti-fya veristä sopii 28% anti-jka -veristä sopii 25% anti-c + -Fya veristä sopii 5,4% anti-c + -Fya + -Jka veristä sopii 1,4% 12 12 12 12
Vuosivertailu: uudet vasta-ainelöydökset potilas, neuvola- ja luovuttajanäytteistä 600 500 400 300 200 100 0 Anti-E Anti-D Anti-C Anti-c Anti-K Anti-M Anti-Cw Anti-Fya Anti-Jka Anti-LWb Anti-e Anti-Cx 2009 2010 2011 2012 13 13 13 13
Haasteita ja ratkaisuja 2) Vasta-aine kohdistuu harvinaista antigeenia kohtaan esim. anti-lsa, -WESa, -Wra, -Ana vasta sopivuuskokeessa esille, tärkeä saada sopimaton jaoke tutkittavaksi asiakkaalle saatetaan joutua lähettämään vain kertaalleen fenotyypitetty yksikkö 14 14 14 14
Haasteita ja ratkaisuja 3) Autovasta-aineet, panagglutiniinit ilman spesifiteettiä tai autoanti-e, -C, -D verensiirtosuositus riippuen potilaan fenotyypistä ja tilanteesta auto/alloabsorptio, feno/genotyypinmukaiset valmisteet, putkitekniikat, sopivuuskokeet autokontrollia vasten 15 15 15 15
Autovasta-aineet eli panagglutiniinit panagglutiniineja esiintyy usein runsaasti verensiirtoja saaneilla potilailla tiettyihin kl. tiloihin liittyen, esim. AIHA nämä autovasta-aineet haittaavat tutkimuksia sekä hidastavat sopivien verien löytymistä reagoivat voimakkaasti kaikkien testi- sekä ristattavien punasolujen kanssa näiden verensiirron kannalta vaarattomien autovasta-aineiden alle voi jäädä kl. merkityksellisiä allovasta-aineita, jotka tulee huomioida punasoluja valittaessa 16 16 16 16
Panagglutiniini panagglutiniini häiritsee tutkimuksia lähetetiedot erittäin tärkeät sopivuuskokeet putkitekniikalla autokontrollia vastaan erityisen huolellinen biologinen esikoe jokaisen yksikön siirron alkuun 17 17 17 17
Autovasta-aineet eli panagglutiniinit Vaihtoehtoiset jatkotutkimukset putkitekniikka autoabsorptio laaja antigeenityypitys (SPRV 5910) RH- ja KELJKFY-genotyypitys (SPRV 5295 ja 5242) 18 18 18 18
Laboratoriovastaus Genotyypitys on tehty. Elektiivisissä verensiirroissa sopivuuskokeisiin suositellaan toistaiseksi ryhmänmukaisia punasoluja, jotka ovat K neg_ (potilaan fenotyypin mukaisia) Kiireellisessä verensiirroissa sopivuuskokeisiin suositellaan ryhmänmukaisia punasoluja. / jotka ovat K neg_ (mahdollisten todettujen vasta-aineiden mukaisia) 19 19 19 19
Haasteita ja ratkaisuja 4) Vasta-aine kohdistuu yleistä antigeenia kohtaan esim. anti-jk3, -LWa, -Vel, -P SCARF solut muiden allovasta-aineiden poissulkemiseen pakastetut punasolut, luovuttajien kutsuminen 20 20 20
Anti-Jk3 suora coombs ja autokontrollit negatiiviset fenotyyppi Jka-Jkb- verentarpeen kiireellisyyden selvittely luovuttajien kutsuminen tai punasolujen sulattaminen 21 21 21 21
Laboratoriovastaus 22 22 22 22
Punasolujen pakastus ja sulatus harvinaista fenotyyppiä olevia punasoluja varten kokoveri luovutetaan ja punasoluvalmiste valmistetaan tavanomaisesti punasolut jäädytetään viimeistään 6 vrk luovutuksesta jäädytyksessä käytetään 40 % glyserolia säilytysaika pakastettuna on tällä hetkellä 10 vuotta, mutta todennäköisesti huomattavasti pidempään sulatuksessa glyseroli pestään huolellisesti pois käyttöaika sulatuksesta on 6 vrk tänä aikana voidaan käyttää ja siirtää normaalien siirtokäytäntöjen mukaisesti ei suositella vauva- ja lapsipotilaille Laite glyserolin lisäämiseen ja sen poistamiseen 23 23 23 23
Veriryhmä- ja seulontakäytäntö Type (veriryhmämääritys) and Screen (seulonta) verensiirtoja ilman serologisia opivuuskokeita verensiirron turvallisuus taataan laajalla vasta-aineiden seulonnalla, 3 tai useampi seulontasolu elektronisella sopivuuskokeella tietojärjestelmän avulla potilaalta tutkitaan veriryhmä kahdesta eri näytteestä vasta-aineiden seulonta tehdään veritilaus mutta ei verivarausta mahdollistaa oman sairaalan verivaraston puitteissa toimittaa suurenkin määrän punasoluja esim. suuren vuodon yhteydessä nopeasti käytäntö sopii n. 90% potilaista 24 24 24
Huomioitavaa ei sovi potilaille, joilla on aiempia todettuja tai epäiltyjä vasta-aineita historiassa verensiirtoreaktioita maksansiirtopotilaille taustalla allogeeninen kantasolujensiirto huomioitavaa sopivuustutkimusten automaatio kansallinen lisäseulontasolu automaattinen tiedonsiirtojärjestelmä erilaisten toteuttamistapojen kustannusvaikutukset uusien toimintatapojen koulutus henkilökunnalle verivaraston hallinta 25 25 25 25 25
Veriryhmä- ja seulontakäytäntö Käytössä laajasti mm. Ruotsi, Norja, Tanska, Alankomaat, Australia pisimmillään jo yli 20 vuotta turvallinen menettelytapa Suomessa Fimlabin ja TYKSlabin alueilla siirtymävaihe meneillään, monet sairaalat suunnitteluvaiheessa Suomessa tällä hetkellä noin 20 % punasolusiirroista veriryhmäja seulontakäytännön piirissä ISLAB ottaa käyttöön kokoa alueellaan, kun kaikki sen aluelaboratoriot ovat ottaneet käyttöön uuden verikeskusjärjestelmän 26 26 26 26
Rutiininomainen raskaudenaikainen anti-d-suojaus RAADP synnytyksen jälkeisestä ja riskiperusteisesta suojauksesta huolimatta 0,5-2,5% RhD-negatiivisita äideistä immunisoituu suomalaisilla RhD neg äideillä anti-d 1,8% raskauden aikainen oireeton fetomaternaalivuoto, valtaosassa jo 1.raskauden aikana synnytykset, missä vuoto määrä suurempi, kuin mitä anti-d-annos pystyy neutraloimaan raskaudenaikainen rutiininomainen anti-d-suojaus RAADP 100µg H 28 ja 34 tai 200-300µg H 28-30 Kanada 1976 Iso-Britannia, USA 1995- Tanska 2010, Ruotsi 2011, Norja 2012, Suomi 2013 Suomessa suositukseksi 2013 aikana suojaus näkyy vasta-aineseulonnassa ad. 6kk 27 27 27
Vaikutus verikeskusten toimintaan RhD-negatiivisten verentarve synnytyksessä 1. hätäverensiirrot -> O RhD neg K neg 2. kiireelliset verensiirrot a. jos seulonta positiivinen -> ryhmänmukaisia D neg C neg E neg K neg ristikokeen mukaan, tunnistus jälkikäteen -> pikatunnistus esim. DiaScreen Prophylax (6 solua), Alba RhD Negative Antibody Screening Panel (3 solua) -> Type&Screen: ei b. seulonta negatiivinen -> kuten ennenkin -> Type&Screen: kyllä 3. ei-kiireelliset siirrot -> normaalin käytännön mukaan 28 28 28
Uusi verivalmisteiden käytön opas http:///www/verivalmisteet -> Terveydenhuollon ammattilaiset -> Verivalmisteet -> Verivalmisteiden käytön opas Kiitos! 29 29 29