Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely1 1/2011. Kuvat ja teksti: Markku Koskela, ylilääkäri OYS, mikrobiologian laboratorio Oulu

Transkriptio

1 Labquality Ulkoinen laadunarviointikierros Bakteeriviljely1 1/2011 Kuvat ja teksti: Markku Koskela, ylilääkäri OYS, mikrobiologian laboratorio Oulu

2 Näyte 1 / 2011 Haavaerite. Leikkaushaavainfektio Löydös: Staphylococcus aureus Tehtävät: Bakteerin eristäminen, tunnistaminen ja mikrobilääkeherkkyysmääritys

3 Näyte 1/2011. Staphylococcus aureus Viljely lampaanverimaljalle ja suklaamaljalle. Aerobi inkubaatio, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk.

4 Näyte 1/2011. Staphylococcus aureus S.aureus Koag neg stafylokokki + - Stafylokokkien latexagglutinaatiotesti Matalia, kiiltäviä, kellertäviä ja betahemolysoivia S aureus-pesäkkeitä verimaljalla, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk.

5 Näyte 2 / 2011 Poskionteloerite. Opiskelijan sinuiitti. Löydökset: Arcanobacterium haemolyticum, patogeeni. Haemophilus parainfluenzae, lisäpatogeeni (?), Neisseria mucosa, normaalia flooraa Tehtävät: Mikrobien eristäminen ja tunnistaminen.

6 Näyte 2/2011. Poskionteloerite Kolme erilaista pesäkettä. Selvimmin suklaamaljalla. Kts. 300x suurennoksella! 3 2. Oksidaasi + Viljely lampaanverimaljalle ja suklaamaljalle. Aerobi inkubaatio, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk.

7 Näyte 2/2011. Poskionteloerite Pesäkkeet: 2 1. Matala, vaalean harmaa, vain suklaamaljalla ->Hemofiilus? Vaalea, korkea, oksidaasi Pieni, heikosti hemolysoiva. Viljely lampaanverimaljalle ja suklaamaljalle. Aerobi inkubaatio, 5% CO 2, +35 C, 2 vrk.

8 Näyte 2/2011. Poskionteloerite Viljely streptokokkiverimaljalle. Aerobi inkubaatio, 5% CO 2, +35 C, 2 vrk. ->beta-hemolysoiva, kupera pesäke ->Beta-hemol. streptokokki?

9 Näyte 2/2011. Arcanobacterium haemolyticum A haemolyt S aureus 1 Katalaasi - Katalaasi + Kasvu streptokokkiverimaljalla 5% CO 2, +35 C, 3 vrk. Beta-hemol. streptokokin näköisiä pesäkkeitä, jotka eivät agglutinoidu streptokokkien ryhmämäärityslatex-reagensseilla!! Gram+sauva

10 Näyte 2/2011. Arcanobacterium haemolyticum S aureusviivaviljely B-strept viivaviljely A haemol. viivaviljely 1 B-ryhmän beta-hemolyyttinen streptokokki saa aikaan rusettikuvion muodostumisen (CAMP +) Arcanobacterium haemolyticum saa aikaan käänteisen CAMPreaktion eli S aureuksen hemolyysivyöhyke kapenee. (Käänteinenn CAMP +) CAMP-koe verimaljalla, 5% CO 2, 1 vrk, +35 C.

11 Näyte 2/2011. Arcanobacterium haemolyticum , + + -, + + +, - + +,+ - +, Lisätestit: katalaasi -, pesäkkeen väri - eli 0 RapID CB Plus Arcanobacterium haemolyticum 99%

12 Näyte 2/2011. Haemophilus parainfluenzae S aureus 1 Kasvu suklaamaljalla, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk. H parainfluenzae Satelliittikoe+

13 Näyte 2/2011. Haemophilus parainfluenzae 1 Hemofiilusten kasvufaktorit (X ja V): H parainfluenzae vaatii kasvaakseen maljalla vain V-faktorin. (Huom! H influenzae vaatii sekä X- että V-faktorin kasvakseen maljalla!!) Pieni, heikosti värjääntyvä ja monimuotoinen gram-sauva

14 Näyte 2/2011. Neisseria mucosa 1 Oksidaasi+ Kasvu verimaljalla, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk. Kupera, limainen, kellertävä pesäke Gram - diplokokki

15 Näyte 2/2011. Neisseria mucosa + - -, + + -, - - -, RapID NH 1302 Neisseria mucosa 99,99%

16 Näyte 3 / 2011 Askitesnäyte. Liikenneonnettomuuspotilaan peritoniitti Löydökset: E coli, Cronobacter sakazakii (Enterobacter sakazakii) ja Salmonella sp. Tehtävät: Bakteerien eristäminen ja tunnistaminen.

17 Näyte 3 / 2011 Askitesnäyte. Liikenneonnettomuuspotilaan peritoniitti (Oletus: Näyte anaerobiampullissa) Primaarinäytteen gram-värjäys: Gram-sauvoja

18 Näyte 3/2011. Askitesnäyte 3 erilaista sauvapesäkettä! Kasvu lampaanverimaljalla, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk

19 Näyte 3/2011. Askitesnäyte 3 erilaista sauvapesäkettä! Kasvu suklaamaljalla, 5% CO 2, +35 C, 1 vrk.

20 Näyte 3/2011. Askitesnäyte Pesäkkeet: 1. Laktoosi + sauvapesäke 2. Iso,limainen, laktoosi + sauvapesäke 3. Laktoosi - sauvapesäke Kasvu Cled-maljalla aerobisti, +35 C, 1 vrk

21 Näyte 3/2011. Askitesnäyte Ylikasvu veri-, suklaa- ja Cled-maljoilla 2 vrk:ssa

22 Näyte 3/2011. Askitesnäyte Anaerobiverimaljalla anaerobisti 2 vrk:ssa ei selvää anaerobikasvua

23 Näyte 3/2011. Askitesnäyte Sabouraud-maljalla aerobisti 2 vrk:ssa ei sienikasvua

24 Näyte 3/2011. Askitesnäyte Puhdasviljelmät Cled-maljalla aerobisti 1 vrk

25 Näyte 3/ E.coli E colin sokerisarja: 1) Glukoosi +/+(keltainen ja kaasua) 2) Indoli+ (eli punainen) 3) liikkuva (putki kokonaan samea) 4) sitraatti - (vihreä) 5) urea - (keltainen) 6) TSI: pinta keltainen, pohja keltainen ja kaasua, putkessa ei ole mustaa (H 2 S -).

26 Näyte 3/ E.coli Oksidaasi neg + - +, - - -, - - +, - - +, + - +, + + +, API20E E coli 99,9%

27 Näyte 3/ Cronobacter sakazakii Cronobacter (Enterobacter) sakazakiin sokerisarja: 1) Glukoosi +/+ (keltainen ja kaasua) 2) Indoli (eli väritön) 3) liikkuva (putki kokonaan samea) 4) sitraatti + (sininen) 5) urea - (keltainen) 6) TSI: pinta keltainen, pohja keltainen ja pohjalla paljon kaasua. Putkessa ei ole mustaa eli H 2 S -.

28 Näyte 3/ Cronobacter sakazakii Oksidaasi neg + + -, + + -, - - -, + - +, + - -, + + +, API20E Enterobacter sakazakii 51% (koska INO negat) (API20E Enterobacter sakazakii 98,4%)

29 Näyte 3/ Salmonella sp Salmonella-lajin sokerisarja: 1) Glukoosi +/+ (keltainen ja kaasua) 2) Indoli (eli väritön) 3) liikkuva (putki kokonaan samea) 4) sitraatti + (sininen) 5) urea - (keltainen) 6) TSI: pinta punainen, pohja keltainen ja kaasua ja putki keskeltä musta (H 2 S +).

30 Näyte 3/ Salmonella sp. Oksi- daasi neg - + +, + + +, - - -, + - +, + - +, + - -, API20E Salmonella sp 77,8% (koska MEL negat) (API20E Salmonella sp 89,4%)

31 Näyte 3/2011. Askitesnäyte 1. E coli 2. C sakazakii 3. Salmonella sp Gram - sauvoja

32 Cronobacter sakazakii (Iversen et al., Int J Syst Evol Microbiol 58: ,2008) Cronobacter on vuonna 2007 ehdotettu uusi Enterobacteriacae-heimon suku, joka koostuu entisestä Enterobacter sakazakii-bakteerista ja sen lähibiotyypeistä Cronobacter-sukuun kuuluu: C sakazakii, C malonaticus, C turicensis, C muytjensii ja C dublinensis. Cronobacter-nimi on kreikan mytologiasta: Kronos söi vastasyntyneet lapsensa; C sakazakii on aiheuttanut vastasyntyneille infektioita. Riichi Sakazaki on japanilainen mikrobiologi.

33 Näyte 4 / 2011 Kudosnäyte nilkasta. Pikkulapsella selluliitti lemmikkikoiran pureman jälkeen. Löydös: Pasteurella multocida Tehtävät: Bakteerin eristäminen ja tunnistaminen.

34 Näyte 4 / Kudosnäyte. Koiranpurema. Oksidaasi+ Viljely lampaanverimaljalle 5% CO 2, +35 C, 1 vrk -> Harmaita, kuperia sauvapesäkkeitä, jotka oksidaasi +

35 Näyte 4 / Kudosnäyte. Koiranpurema. Lyhyt gram-sauva Viljely suklaamaljalle 5% CO 2, +35 C, 1 vrk -> Harmaita, kuperia sauvapesäkkeitä.

36 Näyte 4 / Pasteurella multocida - - -, + + +, + + +, RapID NH 0776 Pasteurella multocida 99,9 %

37 Hyviä hiihto- ja luistelukelejä luonnon hangilla ja jäillä!