Norovirusten esiintyminen ja leviäminen elintarvikeprosesseissa ja ravintoloissa Virukset elintarvikehygieenisenä haasteena -seminaari
Norovirus Kalikiviruksiin kuuluva RNA virus Kuusi genoryhmää, GI, GII ja GIV ihmisillä GII ryhmän virukset muuntautumiskykyisiä -> ajoittain maailmanlaajuisia pandemioita Yleisin elintarvikevälitteisten epidemioiden aiheuttaja Suomessa (n. 10-20/v, Evira) Myös yksi yleisimmistä THL:n raportoiduista vatsataudin aiheuttajista (n. 2 000 tapausta/v) Ripuli, oksentelu, joskus yleisoireet kuten kuume Yleensä paranee itsestään, joskus vakavat oireet
Norovirus on tehokas leviämään Voi tarttua sekä aikuisiin että lapsiin Matala infektiivinen annos Korkea pitoisuus virusta oireilevien ulosteessa ja oksennuksessa Pitkä viruksen eritysaika, jopa 8 vk perusterveillä Tartunnan saaneet voivat olla oireettomia Kestävä ympäristössä Leviää useita reittejä pitkin (feko-oraalisesti) Kuva: Anssi Mörttinen
Noroviruksen leviämisreitit Mathijs ym. 2012
Esityksen aiheita Pintanäytteenottomenetelmä noroviruksille Noroviruksen siirtymiskokeet Sellaisenaan syötävien elintarvikkeiden riski saastua noroviruksilla Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä
Pintanäytteenottomenetelmä norovirukselle 1. Pintanäytteenottomenetelmän kehittäminen norovirukselle 2. Noroviruksen säilyvyyden tutkiminen
Pintanäytteenottomenetelmä norovirukselle Pintanäytteenottomenetelmän kehittäminen Norovirus lisättiin pisaroina tutkittavalle pinnalle ja pisaroiden annettiin kuivua Näyte otettiin hankaamalla pintaa kostutetulla näytteenottovälineellä (näytteenottotikku tai liina) D MK P
Pintanäytteenottomenetelmä norovirukselle Virus irrotettiin näytteenottovälineestä puskuriliuokseen Puskuriliuoksesta eristettiin viruksen perimä Viruksen läsnäolo osoitettiin reaaliaikaisella käänteiskopiointi-pcr:llä
Pintanäytteenottomenetelmä norovirukselle Tulokset Saanto: pinnan pyyhkimisen jälkeen näytteenottovälineestä osoitettu virusmäärä suhteessa pinnalle alun perin lisättyyn virusmäärään 4.12.2015
Pintanäytteenottomenetelmä norovirukselle Kuinka pitkään pintanäytettä voi säilyttää? Miten hyvin virukset selviävät pintanäytteessä Viileässä? Huoneenlämmössä?
Noroviruksen siirtymiskokeet Vastasivat kysymyksiin: 1. Siirtyykö norovirus käsistä suojakäsineisiin käsineiden pukemisen aikana? 2. Siirtyykö norovirus käsin koottavaan voileipään 1. Työntekijän käsistä? 2. Voileivän raaka-aineesta (kurkku)? 3. Kuinka paljon käsissä pitää olla noroviruksia, jotta yksikin virus siirtyy voileipään? 4. Kuinka moneen voileipään noroviruksia siirtyy 1. Työntekijän käsistä? 2. Voileivän raaka-aineesta?
Noroviruksen siirtymiskokeet Hiiren norovirus: Ihmisen norovirus:
Noroviruksen siirtymiskokeet Käsineiden pukeminen:
Noroviruksen siirtymiskokeet Näytteenotto käsineiden pinnalta
Noroviruksen siirtymiskokeet Viruksen perimän puhdistaminen -> perimän osoitus
Noroviruksen siirtymiskokeet Noroviruksen ja hiiren noroviruksen lisääminen pinnoille:
Noroviruksen siirtymiskokeet 1. Kurkusta otettiin kiinni vasemmalla kädellä, veitsestä oikealla
Noroviruksen siirtymiskokeet 2. Kurkusta leikattiin kuusi viipaletta
Noroviruksen siirtymiskokeet 3. Viipaleet aseteltiin leivän päälle oikealla kädellä
Noroviruksen siirtymiskokeet 4. Avustaja otti pintanäytteet puskuriliuokseen kastetulla polyesteritikulla -> perimän osoitus
Noroviruksen siirtymiskokeet Virus Käsi Kuivaus min Tutkittu käsi Viruksen siirtyminen Siirtynyt määrä %, KA Hiiren norovirus 60 Vasen 3/3 1.5 60 Oikea 3/3 2.6 60 Vasen 1/3 0.0 60 Oikea 3/3 0.1 Ihmisen norovirus 0 Vasen 3/3 11.4 0 Oikea 2/3 2.1 60 Vasen 3/3 0.1 60 Oikea 2/3 0.1 0 Vasen 3/3 32.4 0 Oikea 3/3 8.7 60 Vasen 3/3 3.6 22.1.2015 60 Oikea 2/3 0.2
Noroviruksen siirtymiskokeet 2,4 %, 1,2 %, 1,1 % (3/3) ~10 6 hiiren noroviruspartikkelia 0,06 % (1/3) 0,2 %, 0,3 % (2/3)
Noroviruksen siirtymiskokeet ~10 6 hiiren noroviruspartikkelia 11,7 %, 5,2 %, 2,2 % (3/3)
Noroviruksen siirtymiskokeet ~10 6 hiiren noroviruspartikkelia 0,1 %, 0,3 %, 0,8 % (3/3) 0,1 %, 0,1 % (2/3)
Noroviruksen siirtymiskokeet MuNoV: 1.2% ± 0.6% (3/3) HuNoV GII: 1.5% ± 1.9% (3/3) MuNoV: 0.7% ± 0.5% (3/3) HuNoV GII: 0.5% ± 0.4% (3/3)
Sellaisenaan syötävien elintarvikkeiden riski saastua noroviruksilla Norovirus levisi herkästi työntekijän käsineiden välityksellä Virus levisi kontaminoituneesta raakaaineesta vain pistemäisesti Noin 1000 virusta käsissä voisi riittää monen voileipäannoksen kontaminoitumiseen Antti Mikkelä, Evira
Noroviruksen esiintymisen selvittäminen A. Tiloissa, joissa epäily noroviruksen aiheuttamasta epidemiasta B. Tiloissa, joissa ei ollut (tiedossa) käynnissä olevaa norovirusepidemiaa I. Ravintolat II. Elintarviketeollisuuden tilat
Tilat, joissa epäily noroviruksen aiheuttamasta epidemiasta Yhteistyö Helsingin yliopisto (Eltdk): Elintarvike- ja ympäristövirologian tutkimusryhmä Ympäristöterveydenhuollon valvonnan tutkimusryhmä Helsingin ympäristökeskus 16 ravintolaa ja suurkeittiötä Yht. 158 pintanäytettä Näytteenottokohteina mm. keittiössä käytetyt veitset, taukotilan mikroaaltouuni, henkilökunnan ja asiakkaiden WC tilat
Tilat, joissa ei epäilyä noroviruksen aiheuttamasta epidemiasta I. Ravintolat Tutkimus osa pro gradu työtä (ohjaajana Leena Maunula, elintarvike- ja ympäristövirologian tutkimusryhmä) Näytteenotto kolmesta ravintolasta ja niiden läheisyydessä olevista yleisö-wc tiloista Yhteensä 256 näytettä neljällä näytteenottokerralla Aho ym. 2013
Tilat joissa ei epäilyä Paljon positiivisia sittenkin epidemia käynnissä? Aho ym. 2013
Tilat joissa ei epäilyä II. Elintarviketeollisuuden tilat Näytteitä otettiin sellaisenaan syötäviä elintarvikkeita valmistavien yritysten linjastoista ja taukotiloista Yksittäiset näytteenottokerrat Tutkimuksen aikana kerättiin pieni erä elintarvike- ja vesinäytteitä, joista myös tutkittiin noroviruksen esiintyminen Vuoden seurantatutkimus Vuoden seurantatutkimuksen aikana yritysten työntekijät täyttivät myös puolen vuoden välein kyselylomakkeen, jossa kysyttiin työntekijöiden vatsatautisairastumisista
Tilat joissa ei epäilyä Näytteen ottokerta Kevät 2010 Vuoden seuranta 2011 Kevät 2012 Linja Taukotila Työntekijöiden WC 3/30 (GII) 2/30 (GII) 0/30 0/36 4/132 (GII) 2/tammi 1/touko 1/marras Raaka -aine Vesi - 0/16 1*/5 0/30 2/30 (GII) 4/30 (GII) 0/5 0/6 Valmis elintarvike * Positiivista tulosta ei saatu toistettua
Vatsataudin oireita Keväällä 38,9 %:lla Syksyllä 20,3 %:lla Noin 50 % vastaajista myönsi työskennelleensä päivinä, jolloin heillä oli ollut vatsataudin oireita Eläinlääke-tieteellinen 34 tiedekunta / Maria 8.2.2016 Rönnqvist/ Tekes kokous
Lopuksi Noroviruksen genomia esiintyi niin ravintolatiloissa, joissa epäilty norovirusepidemia kuin tiloissa, joissa ei tiedossa olevaa epidemiaa Epidemiaepäilyissä positiiviset näytteet usein vahvempia kuin muissa Norovirusta esiintyy sellaisilla pinnoilla, joita kosketaan paljon käsin Työntekijöiden (ja asiakkaiden!) käsihygienia erittäin tärkeää Siivoustoimet tulisi kohdistaa myös näihin pintoihin, lattioiden ja pöytäpintojen siivous ei riitä
Kiitokset Helsingin yliopisto Leena Maunula Elina Aho Kirsi Söderberg Carl-Henrik von Bonsdorff Mari Nevas Tekes hanke, Virushallinta EVIRA: Pirkko Tuominen, Jukka Ranta, Antti Mikkelä VTT: Marjaana Rättö, Satu Salo, Hanna Miettinen, IrinaTsitko TEKES Helsingin ympäristökeskus Yhteistyöyritykset Rahoittajat
Norovirusepidemioita maailmalta Kouluepidemia Tieto epidemiasta, kun lähes 30 koulun oppilasta sairastui yllättäen vatsatautioirein Aluksi epäiltiin koulun omaa ruokalaa -> haastattelun tuloksena epäily kohdistui naapuritontin kebab ravintolaan Norovirus GII.P21osoitettiin kolmelta sairastuneelta ja kolmelta ravintolatyöntekijältä Pizzauunin kahvasta ja tiskauspisteestä otetut pintanäytteet noroviruspositiivisia (Lin et al. 2015)
Norovirusepidemioita maailmalta Tapaus kesäleiri Epidemia alkoi yhdessä neljästä leiristä Leireissä yhteensä yli 1000 osallistujaa Leirissä A sairastui 30 %, muissa alle 10 % Yli 100 sairastunutta, myös henkilökuntaa Siivoaminen pahensi tilannetta: Ennen siivoamista norovirus osoitettiin pintanäytteistä 40 leiriläisten huoneessa, siivouksen jälkeen positiivisia huoneita oli 72 (Fankem et al. 2014)
Norovirusepidemioita maailmalta Tapaus Boeing 777-200 Sai alkunsa, kun matkustaja oksensi tuolinsa eteen lentokoneen matolle 27/77 lentohenkilökunnasta sairastui 6 päivän aikana Eri reitit, eri vuorot mutta sama kone Sairastuneilla ei suoraa kontaktia toisiinsa Norovirus osoitettiin kahdelta sairastuneelta (Thornley et al. 2011)
Norovirusepidemioita maailmalta Tapaus musiikkitalo Konserttia kuulemassa ollut henkilö sairastui ja oksensi WC tilojen lisäksi mm. aulan kokolattiamatolle ja roskikseen 163 koululaista (57,7%) sai tartunnan seuraavana päivänä käytyään koulun lounaskonsertissa Myös 37 aikuista sairastui, 6 heistä viisi päivää ensimmäisen tapauksen jälkeen (Evans et al. 2002)