Gliadiinipeptidivasta-aineet. aineet. Dos. Markku Viander Turun yliopisto Lääketieteellinen mikrobiologia ja immunologia

Transkriptio

1 Gliadiinipeptidivasta-aineet aineet Dos. Markku Viander Turun yliopisto Lääketieteellinen mikrobiologia ja immunologia

2 Keliakia Geneettinen alttius -> tauti missä iässä tahansa gluten on Oireeton keliakia (silent) biopsiassa keliakiaan sopivat muutokset Gastrointestinaliset oireet lievät ripuli imeytymishäiriö (malabsorptio) Extraintestinaaliset manifestaatiot dermatitis herpetiformis, osteopenia ja osteoporoosi, hammaskiillevauriot, neuropatia, ataksia, epilepsia, maksan tulehdukset, infertiliteetti, suoliston lymfomat Tautiassosiaatiot diabetes tyyppi 1, Sjögrenin syndroma, autoimmuuni thyroidiitti, nivelreuma, IgA-puutos off

3 Keliakiaa ei tunnisteta, diagnoosi viivästyy Pohjois- ja Etelä-Amerikka Eurooppa, Arabivaltiot Intia... (ei: Japani, musta Afrikka) Suomi 1:75 UK 1:100 Eurooppa, USA 1:100 1:200 Hoito: elinikäinen dieetti (GFD) Genetic susceptibility The Coeliac Disease Iceberg DR3-DQ2, DR4-DQ8 Clinical coeliac disease Silent coeliac disease Coeliac disease latency Healthy individuals Manifest mucosal lesion Normal mucosal morphology Jejunal morphology Mäki M. & Collin P. Lancet 1997;349:

4

5 NKT killing of enterocytes TG2 -> DGP DGP Sollid-Jabri, 2005 The inducible gene MHC class I chain-related molecules (MICs)

6 Marsh M: Coeliac disease, 1992

7 H-E stained small bowel mucosa.. A: normal, Marsh score 0; B: increased IELs, score 1; C: flat mucosa typical of celiac disease (Hoffenberg et al. J Pediatr 2000;137: ) 60)

8 Keliakian diagnoosi (ESPGHAN kriteerit 1990) 1. Anamneesi ja oireet 2. Serologiset seulontatestit 3. Biopsia sopii keliakiaan 4. Dieetti: kliininen ja serologinen vaste 5. Potilas > 2 v 6. Muut suolivaurion syyt poissuljettava -> > Keliakian diagnoosi on varmistettu

9 The Normal Duodenum The duodenal bulb seen after just passing the instrument tip through the pylorus. Copyright E Jaramillo

10 Coeliac Disease Slightly nodular mucosa of the duodenum that after indigo carmine spray and close observation does not reveal villi. Instead a mosaic-like pattern becomes evident. Copyright E Jaramillo

11 Keliakia diff. dg Crohnin tauti Akuutti enteriitti (virus, giardia) Maitoallergia Eosinofiilinen gastroenteriitti Immuunipuutokset tai X-radX Tulehduskipulää ääkkeet (NSAID)

12 Keliakia riskiryhmät 1. asteen sukulaiset (10-15%) 15%) Muita autoimmuunitauteja sairastavilla 5-10%:lla keliakia Tyyppi 1 diabetes Sjögrenin syndroma Autoimmuuni thyroidiitti IgA-puutospotilaat (10x)

13 Keliakian autovasta- aineet

14 Serum IgA-class reticulin antibody test in coeliac disease Sensitivity 97% (28/29) Specificity 98% (241/245) Mäki et al. J Pediatr 1984;105:901-5

15 TISSUE AUTOANTIBODIES (IgA) in coeliac disease Comparison between rat tissues (ARA) and human umbilical cord (EmA( EmA) ) from 6112 routine sera sent to Coeliac Disease Service Laboratory,, Tampere ARA neg. pos. EmA neg. pos. Number of samples neg. pos. pos. neg. 32 n = Coeliac Coeliac Disease Disease Study Study Group Group Percentage of total samples Iga- HUC-ab(serum titre) Iga-ARA(serum titre) Mäki et al., eds. Coeliac disease, 1997

16

17 Endomysial and tissue transglutaminase staining patterns in human umbilical cord CD IgA Mab ttg CD IgA + Mab ttg SMA + Mab ttg Sulkanen et al. Gastroenterology 1998;115:

18 Monkey oesophagus Fibroblast Human jejunum CD IgA Mab ttg CD IgA +Mab ttg Korponay-Szabo et al. 2000;JPGN 31:520-27

19 Investigation of the endomysial binding on mouse oesophagus Wildtype TG2 knockout TG2 knockout + human rec TG2 TG CDIgA binding TG CDIgA binding TG CDIgA binding Korponay-Szabo et al. 2002

20 Correlation between serum IgA class tissue transglutaminase and endomysial autoantibodies - Patients with untreated CD IgA-tTG-ab(AU) 1<5 1:5 1:50 1:100 1:200 1:500 1:1000 1:2000 1:4000 1:8000 IgA-EmA(serum titer) -Control patients with normal jejunal mucosa - Represents the 194 disease controls with negative results in both tests Sulkanen et al. Gastroenterology 1998;115:

21 Serum IgA-class tissue transglutaminase antibody titers determined by ELISA IgA-tTG-ab(AU) I II III IV V I. Newly diagnosed untreated CD II. CD patients on GFD III. CD patiens during gluten- challenge IV. CD patients after gluten withdrawal V. Disease controls with normal small bowel mucosa Sulkanen et al. Gastroenterology 1998;115:

22 Frequency of different antibodies in CD (n=136) and control patients (n=154) Children with untreated CD Control children IgAtTG-ab 95% IgA- EMA 93% IgA- ARA 92% IgA- AGA 85% IgG- AGA 69% All 6% 0.5% 4% 18% 27% Clinically suspected for coeliac disease 0 0.5% 0.5% 19% 29% Crohn s disease 0 0 6% 38% 31% Ulcerative colitis % 0 13% Insulin-dependent diabetes mellitus 0 0 2% 1% 14% Coeliac Coeliac Disease Disease Study Study Group Group Sulkanen et al. Gastroenterology 1998;115:

23 Case finding by screening Tenfold increase in incidence Prevalence 1:370 Collin et al. Scand J Gastroenterol 1997;32:

24 Causes leading to the diagnosis (Collin et al. 1997) N N % Symptom-detected CD Apparent symptoms Steatorrhoea Malabsorption Minor symptoms Loose stools Abdominal discomfort Screen-detected CD First degree relatives 200 Sjögren s syndrome 70 Other connective tissue diseases NA IDDM 250 Neurologic symptoms NA Infertility 200 Other associated diseases NA By chance alone (routine biopsy on endoscopy) Cutaneous symptoms (DH) 97 24

25 Gliadiinipeptidivasta-aineet aineet

26 NKT killing of enterocytes TG2 -> DGP DGP Sollid-Jabri, 2005 The inducible gene MHC class I chain-related molecules (MICs)

27 The intestinal T cell response to alpha-gliadin in adult celiac disease is focused on a single deamidated glutamine targeted by tissue transglutaminase. Binding to DQ2 Alfa-9(57-68)E65 Arenz-Hansen et al. J Exp Med Feb 21;191(4):

28 Binding to DQ2: Q at positions 65 and 72 Alfa-2(62-75)E65

29 TG2:n deamidoimat gliadiinipeptidit sitoutuvat DQ2/T-solureseptoriin ja ovat vasta-aineita aineita sitovia epitooppeja Gamma-gliadiini ( ), 153), QQLPQPE QPQQSFPE QERPF, positioissa 140, 148 ja 150 glutamiini on deamidoitu glutamiinihapoksi sitoutuu DQ2:een ja stimuloi CD-potilaan T-soluja T (Molberg( ym. Nat Med 1998) Aleanzi,, ym. (2001 ) käytti k QPE QPQQSFPE QE RPF peptidiä AGA-testiss testissä ja osoitti, että deamidointi lisäsi si IgA- ja IgG-positiivisten keliakiapotilaiden osuutta, mutta ei vaikuttanut positiivisten kontrollihenkilöiden iden osuuteen.

30 Deamidoitut gliadiinipeptidit diagnostiikassa Schwertz,, ym. (2004 ) osoittivat, etä gamma-gliadiinin gliadiinin peptidit PLQPE QPFP ja PE QLPQFEE antoivat parhaat tulokset keliakian diagnostiikassa Ankelo,, ym. (2007) käyttivk yttivät deamidoitua gamma-gliadiinin gliadiinin peptidiä,, H2N-LPFP LPFPE QPE QPFPQPE QPQ(biotin)K-CONH2 (aa ), ja osoittivat että testi oli herkempi ja spesifisempi kuin tavanomaiset AGA-testit

31 Ankelo M, ym. Clin Exp Immunol 2007; 150: GlpepAbA:n spesifisyys ja herkkyys olivat 90% / 92% ja GlpepAbG:n 98% / 75%. AGA ELISA testin spesifisyys ja herkkyys olivat IgA:lle 72% / 87% ja IgG:lle 64% / 78%. TTGAbA-ELISA:n spesifisyys ja herkkyys olivat 90% / 90% samoista potilaista.

32 DGP-testit on evaluoitu useissa kansainvälisiss lisissä tutkimuksissa (1) (1) DGP-ELISAt ovat herkempiä ja spesifisempiä kuin AGA-testit testit,, myös s lapsilla (2) DGP-ELISA on yhtä herkkä (tai herkempi) ja yhtä spesifinen kuin ttg-elisa tai EMA (3) DGP-ELISA on yhtä hyvä indikaattori keliakian dieettihoidon seurannassa kuin ttg-elisa tai EMA.

33 DGP-testit on evaluoitu useissa kansainvälisiss lisissä tutkimuksissa (2) Kun käytetk ytetään n sekä IgA- ja IgG-luokan DGP- ELISAa,, testi löytl ytää myös s keliakiapotilaat, joilla on IgA-puutos DGP-ELISA on herkempi löytl ytämään n potilaat, joilla on latentti keliakia. Kaukinen ym. (2007 ) osoittivat, että DGP-testi oli positiivinen 6/9 potilaalla joilla oli hoidolle resistentti, refraktaari keliakia, kun vain 2/9 näistn istä oli EMA-positiivisia ja 0/9 TGA-positiivisia Lisäksi Kaukisen tutkimuksessa DGP-testi osoittautui herkemmäksi ksi kuin TGA tai EMA iäkki kkäillä henkilöill illä,, joilla gliadiinivasta-aineet aineet ovat usein olleet positiiviset, mutta TGA tai EMA negatiiviset.

34 Keliakian serologinen seulonta: suositus Kansainväliset tutkimukset suosittelevat DGP-vasta vasta-aineidenaineiden (IgA ja IgG) ) käyttk yttöä ensisijaisena testinä keliakian seulontaan ja dieettihoidon seurantaan yhdessä IgA-luokan kudostransglutaminaasi vasta-aineiden aineiden kanssa.

35 Keliakian seuranta Gluteeniton dieetti (kaura sallittu) Serologinen seuranta (6 kk, 12 kk, kk) DGP (deamidoitu( gliadiinipeptidi) IgA / IgG vasta-aineet aineet tai anti-ttg ttg vasta-aineet aineet tai anti-endomysium vasta-aineet aineet -> > Suolen limakalvon paraneminen varmistetaan biopsialla ( kk)

36