HERKKIEN TROPONIINIMÄÄRITYSTEN HÄIRIÖTEKIJÄT. Tanja Savukoski Biokemian laitos / Biotekniikka

Koko: px

Aloita esitys sivulta:

Download "HERKKIEN TROPONIINIMÄÄRITYSTEN HÄIRIÖTEKIJÄT. Tanja Savukoski Biokemian laitos / Biotekniikka"

Jalmari Tuomas Hukkanen
7 vuotta sitten
Katselukertoja:

1 HERKKIEN TROPONIINIMÄÄRITYSTEN HÄIRIÖTEKIJÄT Tanja Savukoski Biokemian laitos / Biotekniikka tanja.savukoski@utu.fi

2 SISÄLTÖ Sydäninfarktin kriteerit Troponiinimääritykset Sydäninfarktispesifisyyden lasku ü Muut sydänlihasvauriot ü Endogeeniset häiriötekijät Heterofiilistyyppiset vasta-aineet Troponiiniautovasta-aineet de Lemos 2013, JAMA

sydänlihasvauriot ü Endogeeniset häiriötekijät

3 SYDÄNINFARKTIN KRITEERIT ESC/ACC/AHA/WHF-työryhmä MERKKIAINEPITOISUUDEN DYNAAMINEN MUUTOS Sydänperäinen troponiini (ctn) T tai I + ISKEMIAOIREET EKG-MUUTOKSET KUVANTAMISELLA TODETTU VAURIO 99. persentiili

4 TROPONIINIMÄÄRITYKSET Ensimmäiset ctn-määritykset 80-luvun lopussa ja 90-luvun alussa kertaa parempi analyyttinen herkkyys, jopa ng/l Useita kaupallisia ctni-määrityksiä, ctnt-määrityksiä vain kahdelta valmistajalta (tiukat patentit) ü ü Yhtenäistäminen ja standardointi puuttuvat!

1 1 ng/l Useita kaupallisia ctni-määrityksiä, ctnt-määrityksiä vain kahdelta valmistajalta (tiukat

5 TROPONIINIMÄÄRITYKSET Useampi vasta-aineen sitoutumiskohta eli epitooppi Voidaan mitata kaksipuoleisilla immunometrisillä määrityksillä Mab: ctni A C B Fab Fc

6 TROPONIINIMÄÄRITYKSET Useampi vasta-aineen sitoutumiskohta eli epitooppi Leimavasta-aine Voidaan mitata kaksipuoleisilla immunometrisillä määrityksillä ctni A Y Sitojavasta-aine C B

7 TROPONIINIMÄÄRITYKSET Useampi vasta-aineen sitoutumiskohta eli epitooppi Voidaan mitata kaksipuoleisilla immunometrisillä määrityksillä

8 HERKÄT TROPONIINIMÄÄRITYKSET Epäherkät (conventional, low-sensitivity) vs. herkät (sensitivecontemporary, medium-sensitivity) ja erittäin herkät (highsensitivity, hs) hs-määrityksen kriteerit: 1) 99. persentiilin CV 10% 2) ctn-pitoisuudet mitattavissa (>LoD) vähintään 50% terveistä Entistä pienempien sydänlihasvaurioiden luotettava havainnointi, mikä nopeuttaa sydäninfarktin toteamista ja poissulkemista ü Erityisesti hyötyä potilaan hakeutuessa hoitoon pian oireiden alkamisesta sekä haasteellisissa potilasryhmissä

persentiilin CV 10% 2) ctn-pitoisuudet mitattavissa (>LoD) vähintään 50% terveistä Entistä pienempien sydänlihasvaurioiden

9 HERKÄT TROPONIINIMÄÄRITYKSET Ka. CV 10 %! 50 % LoD Jarolim 2014, Clin Chem Lab Med

10 HERKÄT TROPONIINIMÄÄRITYKSET Epäherkät (conventional, low-sensitivity) vs. herkät (sensitivecontemporary, medium-sensitivity) ja erittäin herkät (highsensitivity, hs) hs-määrityksen kriteerit: 1) 99. persentiilin CV 10% 2) ctn-pitoisuudet mitattavissa (>LoD) vähintään 50% terveistä Entistä pienempien sydänlihasvaurioiden luotettava havainnointi, mikä nopeuttaa sydäninfarktin toteamista ja poissulkemista ü Erityisesti hyötyä potilaan hakeutuessa hoitoon pian oireiden alkamisesta sekä haasteellisissa potilasryhmissä

11 SYDÄNINFARKTISPESIFISYYDEN LASKU Sydänspesifisyys sydäninfarktispesifisyys Koholla olevia (>99. persentiili) pitoisuuksia usein muissakin akuuteissa ja kroonisissa sairauksissa sekä jopa terveissä henkilöissä esim. liikuntasuorituksen jälkeen Matalat pitoisuudet herkempiä myös erilaisille endogeenisille häiriötekijöille Thygesen et al. 2012, Nat Rev Cardiol

12 HÄIRIÖTEKIJÖIDEN VAIKUTUSMEKANISMIT Y Leimavasta-aine ctni A C B Y Y Sitojavasta-aine Väärä positiivinen Y Väärä negatiivinen

13 HÄIRIÖTEKIJÖIDEN VAIKUTUSMEKANISMIT Leimavasta-aine ctni A C B Y Sitojavasta-aine Väärä positiivinen Y Väärä negatiivinen

14 HETEROFIILISTYYPPISET VASTA-AINEET Sitoutuvat määrityksissä käytettyihin analyyttisiin vasta-aineisiin Noin %:lla 1) Heterofiiliset vasta-aineet ü Matala-affiniteettisia, multispesifisiä 2) Anti-eläin vasta-aineet (human anti-animal antibodies, HAA) ü Korkea-affiniteettisia, spesifisiä ( tunnettu altistuminen) ü Esim. anti-hiiri vasta-aineet (human anti-mouse antibodies, HAMA) 3) Reumatekijät (reumatic factors, RF) ü Autovasta-aineita, IgG- tai IgA-spesifisiä

anti-animal antibodies, HAA) ü Korkea-affiniteettisia, spesifisiä ( tunnettu altistuminen) ü Esim.

15 HETEROFIILISTYYPPISET VASTA-AINEET Heterogeenisiä; luokka, spesifisyys, affiniteetti ja pitoisuus Fc! Väärä positiivinen tai väärä negatiivinen

16 MITEN NÄITÄ VOIDAAN VÄHENTÄÄ Blokkausvasta-aineet määrityspuskurissa ü ü Tarjoavat vaihtoehtoisia/kilpailevia sitoutumiskohtia heterofiilistyyppisille vastaaineille Esim. naudan gammaglobuliinit, hiiren vasta-aineet (natiivi tai denaturoitu), kaupalliset reagenssit Kimeeriset vasta-aineet Carter. 2001, Nat Rev Cancer (c)

17 MITEN NÄITÄ VOIDAAN VÄHENTÄÄ Vasta-ainefragmentit ü Entsymaattiset ü Rekombinanttiset

18 MITEN NÄITÄ VOIDAAN VÄHENTÄÄ Abbottin Architect hs-ctni ja Rochen hs-ctnt Abbott Roche Sitojavasta-aine Mab Fab Leimavasta-aine cmab cfab

19 MITEN NÄITÄ VOIDAAN VÄHENTÄÄ Mab + 1) Mab 2) Fab2 3) Fab 4) cfab & Mab Samat standardit & analyyttiset herkkyydet

20 TROPONIINIAUTOVASTA-AINEET Sitoutuvat ctn:i:hin tai ctnt:hen Noin 5 20 %:lla Heterogeenisiä; luokka, spesifisyys, affiniteetti ja pitoisuus 30 IFCC:n suositus 110 ctn 30 ng/ml Autovasta-aine+ n=10 5 ng/ml Odotettu nousu 35-5 = 30 ng/ml Recovery 100%

affiniteetti ja pitoisuus 30 IFCC:n suositus 110 ctn 30 ng/ml

21 TROPONIINIAUTOVASTA-AINEET Väärä negatiivinen Väärä positiivinen Autovasta-aine+ n=16

22 MITEN NÄITÄ VOIDAAN VÄHENTÄÄ Radiometerin AQT90 FLEX ctni (2+1) ja Turun yliopiston tutkimuskäyttöön tarkoitettu ctni (3+1) 30 Keskiosa IFCC:n suositus 110 N C ctnaab

23 MITEN NÄITÄ VOIDAAN VÄHENTÄÄ Autovasta-aine Autovasta-aine+ n(lr)=49, autovasta-aine+ n(mr)=17, autovasta-aine+ n(nr)=66

24 MÄÄRITYSVASTA-AINEET

25 YHTEENVETO Perinteisten blokkausvasta-aineiden lisäksi, heterofiilistyyppisten vasta-aineiden aiheuttamia häiriöitä voidaan vähentää kimeerisillä vasta-aineilla ja/tai vasta-ainefragmenteilla Humanisoidut vasta-aineet Troponiiniautovasta-aineiden aiheuttamia häiriöitä voidaan vähentää uudentyyppisillä määritysvasta-ainevalinnoilla Häiriötekijän ominaisuudet ja pitoisuus, ctn:n pitoisuus & määritys Vaikutus ctn-tulokseen Häiriöiden minimoiminen etukäteen!

26 KIRJALLISUUTTA &

27 KIITOS! Tanja Savukoski Biokemian laitos / Biotekniikka tanja.savukoski@utu.fi

Samankaltaiset tiedostot

AUTOVASTA-AINEET NIVELREUMASSA. Marja-Kaisa Koivula Sairaalakemisti, FT, dosentti

AUTOVASTA-AINEET NIVELREUMASSA Marja-Kaisa Koivula Sairaalakemisti, FT, dosentti Esityksen sisältö Johdanto Mitä uudelta niveltulehduspotilaalta tutkitaan? Käypähoito-suositus ja ACR/EULAR:n kriteerit