Allergeenien testaus. Erihyvä Erityisruokavaliot, tarpeita ja mahdollisuuksia Tutkimus, tuotekehitys ja analytiikka

Transkriptio

1 Allergeenien testaus Erihyvä Erityisruokavaliot, tarpeita ja mahdollisuuksia Tutkimus, tuotekehitys ja analytiikka , Turku Timo Tumelius, FM Tieteellinen yhteyspäällikkö, Labema Oy

2 Ruoan allergeenit Luontaisesti esiityviä proteiineja ruoka-aineissa Ruoka-allergialle ei tunneta lääkitystä Ainoa onnistunut menetelmä hallita ruoka-allergeeneja on tarkkailla ruuan sisältämiä proteiineja seuraavien systemaattisten toimintatapojen kautta: GMP Good Manufacturing Practice HACCP Hazard Analysis and Critical Control Points SSOP Sanitation Standard Operating Procedures

3 Directiivi 2000/13/EC päivitettynä Directiivillä 2007/68/EC listaa 14 allergiaa aiheuttavaa ainesosaa, jotka täytyy ilmoittaa pakkausmerkinnöissä Cereals vilja Crustacean äyriäiset Fish kala Egg kananmuna Peanut maapähkinä Soybean soija Milk maito Nuts pähkinät Celery selleri Mustard sinappi Sesame seesaminsiemen seeds Sulphur rikkidioxidi dioxide Lupine lupiini Molluscs nilviäiset

4 Ruoka-allergeenien kontrollointisuunnitelma Mitkä seikat täytyy ottaa huomioon: näytteenottosuunnitelma, näytteidenoton taajuus, näytteenottotyyppi, menetelmän tarkoitukseen sopivuus, menetelmän hyväksynnät ja validointi, herkkyys, spesifisyys, tarkkuus, näytematriisin vaikutus, koulutus, tulosten tallentaminen, laboratoriopalvelut ja akkreditointi, kustannukset ja aika Reveal 3-D & Reveal Veratox

5 Allergeenitestejä Labemalta ja Neogenilta Maito Maapähkinä Kananmuna Soija Gliadiini/Gluteeni Sinappi Manteli Hasselpähkinä Saksanpähkinä Seesami Äyriäiset Lupiini

6 Testien formaatit: Kittivaihtoehdot, vasta-ainepohjaisia 1. Kvantitatiivinen kuoppalevytesti (Microwell): Veratox ja Alert 2. Seulontatesti, paikanpäällä tapahtuva (on-site lateral flow) testi: Reveal 3-D

7 Reveal 3-D -Testi Testin formaatti Tunnistusraja Soveltuvuus Lateral Flow ja 3D-tekniikka (vasta-aine), ei lisävälineitä Matala 5-10 ppm taso ruoka-aineille, riippuu testistä Pintanäytteet, CIP viimeiset huuhteluvedet Pakkauksen testimäärä Testausaika 10 testiä <10 min / näyte

8 Reveal 3-D -Testit Almond Casein Egg Gluten Hazelnut Peanut Shellfish Soya Manteli Gliadiini Muna Gluteeni Hasselpähkinä Maapähkinä Äyriäiset Soija 0 sts 00 sts G M Q P E L S K UUTUUDET Maito Sinappi Puupähkinät Z D M D R H P H

9 Reveal 3-D -Testipakkaus Puskurijauhepussi (10) Näyteputki ja korkki (10) Reveal 3-D testi-väline (10) Näytteenottotikku (10)

10 Reveal 3D Testin työnkulku huuhtelunäytteet Avaa puskuripussi ja kaada sisältö näyteputkeen. Lisää 0,25 ml näytettä putkeen, tai puoli korkkia. / tai 1ml Sulje valkoinen korkki ja ravista minuutin ajan. (Lisää putkeen toisen puskuripussin sisältö, ja ravista jälleen minuutin ajan )

11 Reveal 3D Testin työnkulku pintanäytteet Avaa puskuripussi ja kaada sisältö näyteputkeen. Kuivat pinnat: Kostuta näytteenottotikku liuoksessa. Ota näyte 10*10 cm 2 alueelta Katkaise tikun pää putkeen. Sulje valkoinen korkki ja ravista minuutin ajan. Lisää putkeen toisen puskuripussin sisältö, ja ravista jälleen minuutin ajan

12 Reveal 3D Testin työnkulku näytteen testaus Täytä korkki näyteputken nesteellä. Vaahdon tulisi pysyä näyteputkessa. Kasta Reveal 3-D laitteen pää korkin sisältämään nesteeseen. Varmista, että aukko on täynnä nestettä. Jätä aukko nesteeseen kunnes näet nesteen liikkuvan testi-ikkunassa. Aseta laite tasaiselle pinnalle ja anna testin kehittyä 5 minuuttia. Huomio: On tärkeää asettaa laite tasaiselle pinnalle heti kun neste on saavuttanut testi-ikkunan, jotta neste virtaa tasaisesti koko testerin läpi

13 Reveal 3-D -Testin tulokset Ei O-viivaa, T-viiva heikko tai sitä ei ole ollenkaan (Overload ) VARMA POSITIIVINEN POSITIIVINEN T-viiva näkyvissä (Above detection limit) Vasemmalta oikealle: Negatiivinen; Positiivinen; Vahva Positiivinen Ei T-viivaa (Undetectable) NEGATIIVINEN

14 Reveal 3-D -validaatio * Limit of Detection Reveal 3-D 1ppm 5ppm 10ppm 20ppm >50ppm Gluteeni Keksit Vauvanruoka Tumma suklaa Kaseiini Suklaakakku Margariini Punaviini Hasselpähkinä Maitosuklaa Aamiaismurot Tumma suklaa Maapähkinä Suklaalla kuorrutettu rulla Rapeat patukat Kana Nugget Manteli Tumma suklaa Jogurtti Tomaattikastike Äyriäinen Kasvisöljy Majoneesi Kananmuna Margariini Tumma suklaa Kalakakku Jäätelö Jauhettu valkoinen kala Soija Sianlihamakkara Margariini Jäätelö

15 Veratox Allergeeni Kitti (S-ELISAs) Kit Kvantitatiiviset tulokset ruokaainenäytteistä Tarvitsee sekoittavan vesihauteen, kuoppalevylukijan ja monikanavapipetin Kolme 10 minuutin inkubaatiota Testi 38 näytteelle (+kontrollit) Ei tarvita monimutkaisia kemiallisia testejä eikä liuottimia

16 Veratox-Testin kulku Pipetoi 150 ul uutettua näytettä ja standardeja kuoppalevyn (siirto)kaivoihin Pipetoi 100 ul kuoppalevyn vasta-ainekaivoihin Pese 5X Pipetoi 100 ul Conjugate liuosta Pese 5X 10 min 10 min Pipetoi 100 ul Substraatti-liuosta 10 min Pipetoi 100 ul Red Stop-liuosta Lue 650 nm 20 minuutin sisällä

17 Veratox Testin työnkulku

18

19

20 Alert Allergeeni Kitti (S-ELISA) Kit Tarkoitettu skriinaukseen 1 standari, johon tulosta verrataan Tarvitsee sekoittavan vesihauteen, ja pipetin Kolme 10 minuutin inkubaatiota Testi 24 näytteelle Ei tarvita monimutkaisia kemiallisia testejä eikä liuottimia Visuaalisesti tai lukulaitteella luettava testi

21 Alert-Testin työnkulku

22

23

24 Kiitos mielenkiinnosta - Tervetuloa keskustelemaan näyttelyständillemme!