Bordetella pertussis Laboratorion näkökulma Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia
SIDONNAISUUDET Asiantuntija Labquality Ammatinharjoittaja Mehiläinen Apurahoja: Suomen akatemia TYKS EVO Suomen kulttuurirahasto Turun yliopistosäätiö
KIRJALLISUUS He et al. High heterogeneity in methods used for the laboratory confirmation of pertussis diagnosis among European countries, 2010: integration of epidemiological and laboratory surveillance must include standardisation of methodologies and quality assurance. Euro Surveill 2012 Guiso et al. What to do and what not to do in serological diagnosis of pertussis: recommendations from EU reference laboratories. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2011
BORDETELLA PERTUSSIS INFEKTION LABORATORIODIAGNOSTIIKKA Bakteerin osoitukseen perustuvat menetelmät (viljely ja PCR) käyttökelpoisia kolmen ensimmäisen viikon aikana Pienillä lapsilla ad 2 v B. pertussis -spesifisten vasta-aineiden määritys yli 3 vko kestäneessä infektiossa
LÖYDÖKSIÄ/NÄYTTEITÄ UTULAB 2011 JA 2012 Viljely 11/149 7,4% PCR 73/560 13% Serologia 369/6060 6% Positiivisista 18% viljelyllä ja PCRllä
TILANNE EUROOPASSA Kysely 27 maan referenssilaboratoriolle 2010 Käytössä olevat metodit: Viljely 17 PCR 18 Serologia 20 Viidessä maassa 1 menetelmä, yhdeksässä kaksi ja kymmenessä 3 menetelmää He Euro Surveill 2012
TILANNE EUROOPASSA Serologia PT antigeenina 13 maassa Kokosoluantigeeni, PRN, FHA antigeenina 4 maassa WHO standardi (IU/ml) käytössä 6 maassa He Euro Surveill 2012
TILANNE EUROOPASSA He Euro Surveill 2012
ONGELMIA JOHTUEN ERI KÄYTÄNNÖISTÄ Tapausmääritelmä eri Epidemiologinen tilanne ei ole vertailtavissa Antigeenivaranttien seuranta ei onnistu ilman viljelyä Eri rokotuskäytäntöjen tehon arviointi vaikeaa
ONGELMIA SEROLOGIAN KANNALTA Rokotus sekoittava tekijä Immuniteetin kesto/laatu, rokotus v. infektio Onko infektio erotettavissa rokotusvasteesta? B. pertussis v. B. parapertussis B. pertussis antigeenievoluutio
ANTIGEENEJÄ/VIRULENSSITEKIJÄT PT on Bordetella pertussis spesifinen Crowcroft, Lancet 2006
ANTI-PT-IGG ROKOTUKSEN JÄLKEEN Puoliintumisaika 508 vrk Dalby J Med Microbiol 2010
ANTI-PT-IGG INFEKTION JÄLKEEN Puoliintumisaika 221 vrk Dalby J Med Microbiol 2010
Turku study, ap-tehosteen jälkeen 11-13 v, Boostrix He, unpublished
SEROLOGIA SUOMESSA HUSLAB: EIA Serion (IgA), EIA In house (IgG ja IgM) YML: EIA Anilabsystems TY, Lääket mikrobiologia ja immunologia: EIA In house, kokobakteeriantigeeni
SUOSITUS pertussisserologiaa tulee tehdä vain silloin, kun potilaan oireet sopivat pertussisinfektioon (mm. pitkittynyt yskä yli 2-3 viikkoa) ELISA on ainoa suositeltava menetelmä immunoblotit eivät ole suositeltavia, koska tulos ei ole kvantitatiivinen mikroagglutinaatio on epäherkkä eikä sitä suositella komplementinfiksaatio ja immunofluorensenssi ovat epäherkkiä ja -spesifisiä Guiso Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2011
SUOSITUS puhdistettu pertussistoksiini (PT) on ainoa suositeltava antigeeni ainoastaan PT on spesifinen B. pertussikselle filamentous hemagglutiniini (FHA), pertaktiini (PRN), fimbria (FIM) ja adenylaattisyklaasi -antigeenit ovat epäspesifisiä kokobakteeriantigeenin/sonikaattien käyttöä ei suositella IgG-anti-PT on käyttökelpoinen vain vanhemmilla lapsilla ja aikuisilla tutkitaan vain IgG-luokan PT-vasta-aineet IgA-luokan vasta-aineet tarvittaessa, jos IgG-tulos on rajaarvo Guiso Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2011
SUOSITUS referenssiseerumina tulee käyttää WHO:n referenssejä 06/140 ja 06/142 tulos tulee ilmoittaa IU/ml yksikköinä seeruminäytteet tulee säilyttää 20 C lämpötilassa pariseeruminäytteet tulee testata rinnakkain samassa sarjassa Guiso Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2011
SUOSITUS tuloksen tulkinta: tulkintarajat tulee asettaa maa/laboratoriokohtaisesti eri maissa on käytetty cut off pitoisuuksia 40-125 IU/ml yksittäisen näytteen optimaalisin cut off lienee tasolla 60-75 IU/ml. pariseerumissa (2-4 vko) 100 % nousu tai 50 % lasku on merkki infektiosta IgG-anti-PT-määritys ei ole käyttökelpoinen vuoden ajan asellulaarisesta pertussisrokotuksesta Guiso Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2011
KESKUSTELUA tulisiko Suomessa siirtyä käyttämään IgGanti-PT-määritystä?
Kiitos