NEUTROFIILISTEN GRANULOSYYTTIEN KÄYTTÖ TERVEYSHAITAN ARVIOINNISSA. Janne Atosuo FT Biokemian laitos Immunokemia Kliininen tutkimusyksikkö TROSSI 2018

Samankaltaiset tiedostot
SISÄILMATUTKIMUS Katsaus tämänhetkiseen tilanteeseen. Dosentti Esa-Matti Lilius Biokemian laitos Turun yliopisto

TESTAUSSELOSTE. E. coli-lux kokonaistoksisuusmittaus huonepölystä TURUN YLIOPISTO BIOKEMIAN LAITOS IMMUNOKEMIAN LABORATORIO

TESTAUSSELOSTE. E. coli-lux kokonaistoksisuusmittaus huonepölystä TURUN YLIOPISTO BIOKEMIAN LAITOS IMMUNOKEMIAN LABORATORIO

Sisäilmaongelmaisen rakennuksen diagnosointi. FM Eetu Suominen Turun yliopisto, Biokemian laitos Labquality Days 2017

IMMUUNIPUUTOKSET. Olli Vainio Turun yliopisto

BAT-tutkimus Terveyshaitat kosteusvaurioituneilla paloasemilla

Miten rokottaminen suojaa yksilöä ja rokotuskattavuus väestöä Merit Melin Rokotusohjelmayksikkö

Lasten immuunipuutokset. Merja Helminen Lasten infektiolääkäri TaYS lastenklinikka 2004

Pienryhmä 3 immuunipuolustus, ratkaisut

KandiakatemiA Kandiklinikka

IMMUNOLOGIAN PERUSTEET Haartman-instituutti

11. Elimistö puolustautuu

BI4 IHMISEN BIOLOGIA

Työryhmä: Tuula Putus, Jussi Kantele, Esa-Matti Lilius, Janne Atosuo, Eetu Suominen, Liisa Vilén, Katariina Husman

Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia

Elimistö puolustautuu

Elimistö puolustautuu

Nivelreuman serologiset testit: mitä ne kertovat? LT, apulaisylilääkäri Anna-Maija Haapala TAYS Laboratoriokeskus

Immuunipuutokset. Olli Vainio OY Diagnostiikan laitos OYS Kliinisen mikrobiologian laboratorio

Immuunijärjestelmän eri komponentit voidaan jakaa luonnolliseen ja adaptiiviseen immuniteettiin:

Pienryhmä 3 immuunipuolustus

vauriotyypit Figure 5-17.mhc.restriktio 9/24/14 Autoimmuniteetti Kudosvaurion mekanismit Petteri Arstila Haartman-instituutti Patogeeniset mekanismit

Hankittu ja luontainen immuunijärjestelmä

UUDET TEKNIIKAT SISÄYMPÄRISTÖN MIKROBIEN TOTEAMISESSA

Tunnin sisältö. Immuunijärjestelmä Luonnollinen immuniteetti Hankittu immuniteetti Rokotukset Allergiat HIV / AIDS

Immuunijärjestelmän toimintamekanismit

SUOMALAINEN PAKURIN (INONOTUS OBLIQUUS) TULEHDUKSEN HILLITSIJÄNÄ

Työryhmä: Tuula Putus, Jari Nuutila, Mika Kantele, Janne Atosuo, Eetu Suominen, Liisa Vilén, Marja Päivinen, Katariina Husman

Labqualitypäivät Riitta Karttunen. HUSLAB, kl. Mikrobiologia Virologian ja immunologian osasto

Narkolepsian immunologiaa ja Pandemrixiin liittyvät tutkimkset

Myönnetyt Fellowship-apurahat Ensimmäinen vuosi:

Materiaalinäytteiden qpcr-tulosten tulkinnasta

BIOSIDISET BOORI- JA PHMG/B YHDISTEET EDISTÄVÄT TOKSISTEN SISÄTILAHOMEIDEN LEVIÄMISTÄ RAKENNUKSISSA

Original Elche antimicrobi TM desinfiointiaineen testaus Legionella lajeille

Vasta-aineiden merkitys elinsiirroissa

Komplementtitutkimukset

Myönnetyt Fellowship- apurahat Toinen vuosi: Myönnetyt Fellowship- apurahat Toinen vuosi: Myönnetyt Fellowship- apurahat 27.6.

ITÄ-SUOMEN LABORATORIOKESKUKSEN ISLAB Laboratoriotiedote 17/2008 LIIKELAITOSKUNTAYHTYMÄ. Kliininen mikrobiologia (5)

TOKSISUUSTESTI SISÄILMALLE?

KEMIALLISET ANALYYSIT TURUN YLIOPISTOSSA

VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI. MUTAFLOR oraalisuspensio 10 8 CFU/ml 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT

BAT-tutkimus paloasemilla sekä SPAL ry:n henkilöstökysely

Pro Clean ja Ultrasnap pikatestien hyödynnettävyys ja luotettavuus rakenneavauksissa

HLA alueen geenit ja niiden funktiot. Maisa Lokki, dosentti Transplantaatiolaboratorio Haartman Instituutti

Tutkijat askelta lähempänä MS-taudin aiheuttajaa

TaLO-tapaukset Virusoppi. Vastuuhenkilöt: Tapaus 1: Matti Varis Tapaus 2: Veijo Hukkanen Tapaus 3: Sisko Tauriainen Tapaus 4: Ilkka Julkunen

Kirkkokadun koulu Nurmes Sisäilmaongelmat & mikrobit Minna Laurinen, Rakennusterveysasiantuntija Marika Raatikainen, Sisäilma-asiantuntija

NEUTROFIILISTEN GRANULOSYYTTIEN E. COLI K12 -KANNAN FAGOSYTOOSI

Genetiikan perusteiden toisen jakson kaavailua

Työperäinen tuberkuloosi epidemia. V-J Anttila dos, osastonylilääkäri HYKS/Infektioepidemiologinen yksikkö/sairaalahygieniayksikkö

HUSLAB Immunologian osasto Labquality-päivät Vasta-aineet

Tulehduksen laboratoriodiagnostiikka

Opiskelijoiden kokemuksia moniammatillisesta terveysalan simulaatio-opetuksesta Kuopiossa

TAPAUS-VERROKKITUTKIMUS

Emmi Saha LASTEN IMMUNITEETIN TOIPUMINEN AKUUTIN LYMFOBLASTILEUKEMIAN HOIDON JÄLKEEN

IHMISEN SYNNYNNÄISEN IMMUNITEETIN TUTKIMINEN MITTAAMALLA E.COLI- BAKTEERIN EMITTOIMAA BIOLUMINESENSSIA

TARTUNTATAUDIT Ellen, Olli, Maria & Elina

C.Difficilen säilyminen potilaassa ja leviäminen. ympäristöön

Uuden vieritestin käyttöönotto avoterveydenhuollossa

Tiina Tuomela LKT, lastentautien erikoislääkäri

Mycobacterium tuberculosis

Uusi sisäilman laadun tutkimusmenetelmä

tulehduksellisten suolistosairauksien yhteydessä

ITÄ-SUOMEN LABORATORIOKESKUKSEN ISLAB Laboratoriotiedote 16/2008 LIIKELAITOSKUNTAYHTYMÄ Hallintokeskus Kuopion aluelaboratorio 9.10.

- TYÖTÄ JA YHTEISTYÖTÄ

Asiakastiedote 15/2015

Sisäilmaongelmien terveyshaittojen arviointi pölynäytteiden perusteella

Muovimatot VOC:t, mikrobit ja toksisuus. Loppuseminaari Ulla Lignell RTA 3

Tuberkuloosin immunodiagnostiset testit. Dosentti Tamara Tuuminen, kliinisen mikrobiologian erl HY, HUSLAB Labquality

BAT-tutkimus Terveyshaitat kosteusvaurioituneilla paloasemilla

SISÄILMAAN LIITETTY OIREILU JA LÄÄKÄRISSÄKÄYNNIT SUOMESSA

Koulurakennusten sisäilmaongelmat rehtoreiden arvioimina ja niiden yhteys opettajien äänihäiriöihin

Virtsan kemiallisen seulonnan kliininen käyttö. Dosentti Martti L.T. Lalla Osastonylilääkäri HUSLAB Kirurginen sairaala

Myönnetyt Fellowship apurahat

LYMFOSYTOOSIT SANOIN JA KUVIN. Pentti Mäntymaa TAYS, Laboratoriokeskus

Immuunijärjestelmän toimintamekanismit

Plasmasolukasvaimet (hematologin näkökulmasta) Eeva-Riitta Savolainen LKT, dos Os.ylilääkäri

Infektioista keskosilla. Dos. Outi Tammela TAYS

Suoliston immuunijärjestelmä ja ruoka-allergia

Viljelijäväestön altistuminen, oireet ja hengitystiesairaudet

KORJAUSTEN ONNISTUMISEN ARVIOINTI JA SEURANTA LYHYT OPPIMÄÄRÄ

SELKÄYDINNESTEEN PERUSTUTKIMUKSET

Borrelia burgdorferi, vasta-aineet seerumista

M I K P I N T A S I V E L Y N Ä Y T T E E T. Jokivarren koulu Sorvatie 16 Vantaa Hanke 5271

LICENCE TO KILL - elävää ekotoksikologiaa

Proteesikomplikaatoiden SPECT- ja PET/CT. Jukka Kemppainen

HERKKIEN TROPONIINIMÄÄRITYSTEN HÄIRIÖTEKIJÄT. Tanja Savukoski Biokemian laitos / Biotekniikka

Sairaaloiden hoitohenkilökunnan allergiasairauksien yleisyys ja liittyminen sisäilma-altisteisiin

Sisäilmaongelma tulehdusta elimistössä vai tulehtunut työilmapiiri. LT Riitta-Liisa Patovirta Keuhkosairauksien ja allergologian erikoislääkäri KYS

Hevosten rokottaminen. Eläinlääkäri Martti Nevalainen Intervet Oy, osa Schering-Plough konsernia

KEESHONDIEN MONIMUOTOISUUSKARTOITUS

Elodean käyttö maanparannusaineena ja kasvitautitorjunnassa

Bakteerialtistuminen maatiloilla ja ei-maatiloilla asuvilla lapsilla - yhteys atopiaan ja astmaan

Sisäympäristön laadun arviointi energiaparannuskohteissa

KOSTEUSVAURIOKOHTEIDEN YLEISIMMÄT MIKROBIT JA NIIDEN TERVEYSVAIKUTUKSET

IMPEDANSSITOMOGRAFIA AIVOVERENVUODON DIAGNOSOINNISSA - TARVE UUDELLE TEKNOLOGIALLE

Sisäilmaongelmien selvittäminen mikrobiston ja uusien mittausten rooli

MITÄ VIRHEITÄ TEHDÄÄN VIERIANALYTIIKASSA

22. Ihmiselimistön ulkoiset uhat

BIOPÖLYSPESIFISTEN IGM-VASTA-AINEIDEN VIITEARVOJEN MÄÄRITTÄMINEN OSANA IH-HOUSE ELISA-MENETELMÄN VALIDOINTIA

Transkriptio:

NEUTROFIILISTEN GRANULOSYYTTIEN KÄYTTÖ TERVEYSHAITAN ARVIOINNISSA FT Biokemian laitos Immunokemia Kliininen tutkimusyksikkö TROSSI 218

NEUTROFIILIT Granylosyyttiset neutrofiilit ovat yleisin valkosolutyyppi Käytännössä ne tuhoavat ja poistavat fagosytoimalla kaikki järjestelmää ja kudosta uhkaavat tunkeutujat, siis mikrobit tai vieraspartikkelit Klebanoff et al. 213 Hurst 212 Thrasher, Segal 211 Roos, Winterbourn 22

NEUTROFIILIT Neutrofiilit toimivat immuunijärjestelmän ensimmäisenä solupuolustuslinjana ja ovat merkittävä osa synnynnäisen immuniteetin toimintaa. Neutrofiilit osallistuvat olennaisina tekijöinä myös adaptiivisen immuunivasteen indusoitumiseen ja koko systeemin homeostaasin ylläpitoon ja säätelyyn. Klebanoff et al. 213 Hurst 212 Thrasher, Segal 211 Roos, Winterbourn 22

O 2 Glukoosi MPO 3. Hengitysryöpsähdys NADPH- Oksidaasi O 2 - MPO MPO 2. Tunnistus, Adheesio, Ingestio Vasta-aineet IgG, (IgA, IgM) Fc reseptorit Komplementin komponentit Komplementtireseptorit H 2 O 2. O 2 OH - Elektronien viritystila Patogeeni 1. Opsonisaatio HOCl 4. Tappo, Hajoitus Kemiluminesenssi Klebanoff et al. 213 Hurst 212 Atosuo et al. 211 Thrasher, Segal 211 Segal 25 Reeves et al. 22 Roos, Winterbourn 22

Kemiluminesenssi (CPS) 3 25 Ingestio Herkkä kemikaaleille 2 15 1 5 Adheesio 5 1 15 2 25 3 35 4 45 5 55 6 min Vilén et al. 217 Atosuo 215 Ciz et al 212 Pedata et al. 212 Jantan et al. 211 Lilius, Nuutila 26 Marnila et al 1995 Lilius et al. 1987

Kemiluminesenssi (CPS) 3 Ingestio 25 2 15 Adheesio 1 5 5 1 15 2 25 3 35 4 45 5 55 6 min

Kemiluminesenssi (CPS) 3 Adheesio 25 2 15 Ingestio 1 5 5 1 15 2 25 3 35 4 45 5 55 6 min

Kemiluminesenssi (CPS) 3 Adheesio 25 2 15 1 5 Ingestio 5 1 15 2 25 3 35 4 45 5 55 6 min

Kemiluminesenssi (KL) IN VITRO TOKSISUUSMITTAUS Neutrofiilejä voidaan käyttää toksisuuskoettimin joko eristettynä tai kokoverilaimennoksena esim. sormenpääverinäytteestä Toksisuus havaitaan kemiluminesenssin laskuna! A 4 35 3 25 µg/ml,1 µg/ml,1µg/ml 1 µg/ml 1 µg/ml Atosuo. 215 ja 217 Vilén. et al. 217 Ciz et al 212 Lilius, Nuutila. 26 Marnila. et al 1995 Lilius et al. 1987 2 15 1 5 2 4 6 8 1 12 14 min Mitokondriomyrkky antimysiini A:n vaikutus ihmisen sormenpääveren neutrofiilien fagosytoosiaktiivisuuteen. Kuvassa vaikutus KL kinetiikkaan. Arvot kolmen mittauskaivon keskiarvo ja STDV. Kuvassa B Antimysiini A:n annosvasteet. Annosvaste µg/ml, eli pelkkien neutrofiilien vaste, määriteltiin 1 %:ksi.

Piikkiarvon lasku (%) 1 IN VITRO TOKSISUUSMITTAUS PÖLYNÄYTTEET Standardi (EI-TOKSINEN) Standardi (TOKSINEN) Vilén Et al. 217 Cecinato et al. 217 La Guardia et al. 217 Atosuo 215 9 8 7 6 5 4 3 2 1 1 1 1 1 1 Standardi ( g/ml)

IN VIVO TOKSISUUSMITTAUS Kirjolohi: Paperiteollisuuden valkaisuun käyttämät kloridipitoiset valkaisuaineet laskivat merkittävästi kirjolohien neutrofiiliaktiivisuutta huuhdevesialtaissa Lilius et. al. 1992 Rotta: 28 päivän altistus (ravinnossa) moniliformiinille laski merkittävästi rottien neutrofiiliaktiivisuutta Jonsson et. al. 214

(%) IN VIVO TOKSISUUSMITTAUS Ihminen: Vauriorakennuksista mahdollisesti altistuneiden neutrofiilivasteita mitataan. Oireettomia ja oireellisia verrataan. Vilén. et al. 217 Atosuo. 215, 217 Ciz et al 212 Lilius et al. 1987, 1992, 28 Marnila. et al 1995 16 15 14 13 12 11 1 9 8 7 6 5 4 3 V3 C1 Oire (n=17) matala aktiivisuus B Terve (n=18) Testattujen henkilöiden neutrofiilien soluspesifiset fagosytoosiaktiivisuudet. Kontrolliryhmän (n=18), eli terveiden henkilöiden keskiarvo määritettiin 1 %:ksi. Vaurioryhmän (n=17) kohdalla erottui alhaisen aktiivisuuden omaava ryhmä, joka on kuvassa ympyröity.

ALTISTUKSEN MITTAUS SEERUMINÄYTTEISTÄ IgG on seerumin pääopsoniini ja itiöspesifiset fagosytoosiaktiivisuudet korreloivat itiöspesifisten ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay) - tulosten kanssa. Mitä suurempi määrä vasta-ainetta sitä tehokkaampi fagosytoosiaktiivisuus. Voidaan käyttää sormenpääverinäytettä, joka mahdollistaa pikatestien suunnittelun Vilén et al. 217 Atosuo. 215 ja 217 Ciz. et al. 212 Lilius. et. al. 1987 ja 1992

2. Tunnistus, Adheesio, Ingestio Spesifiset vasta-aineet (IgG) MPO O 2 Glukoosi MPO 3. Hengitysryöpsähdys NADPH- Oksidaasi O 2 - MPO H 2 O 2. O 2 OH - Elektronien viritystila 1. Opsonisaatio HOCl 4. Tappo, Hajoitus Kemiluminesenssi Vilén L. et al. 217 Atosuo J. 215 ja 217 Lilius EM. et. al. 1987 ja 1992

2,5 5 7,5 1 12,5 15 17,5 2 22,5 25 27,5 3 32,5 35 37,5 4 42,5 45 47,5 5 52,5 55 57,5 6 2,5 5 7,5 1 12,5 15 17,5 2 22,5 25 27,5 3 32,5 35 37,5 4 42,5 45 47,5 5 52,5 55 57,5 6 ALTISTUKSEN MITTAUS Seerumi josta mitattu korkea Itiöspesifinen (Streptomyces albus) IgG Seerumi josta mitattu matala Itiöspesifinen (Streptomyces albus) IgG 45 Seerumissa inkuboitu itiö aiheuttaa korkean fagosytoosi vasteen 45 4 4 35 35 3 3 25 2 15 Tehokas opsonisaatio 25 2 15 Seerumissa inkuboitu itiö aiheuttaa matalamman fagosytoosi vasteen 1 1 5 5 Hekompi opsonisaatio

1 2 3 4 5 6 Referenssi 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 11 12 13 14 15 16 17 18 19 2 21 22 23 24 25 26 27 28 29 3 31 32 33 34 35 36 37 38 39 4 41 42 43 44 45 Itiöspesifinen ELISA Itiöspesifinen fagosytoosi

LEUKOSYYTTIEN PINTARESEPTOREIDEN FENOTYYPITYS Leukosyyttien pintareseptorien fenotyypitys perustuu valkosolujen pintareseptoreiden analyysiin virtaussytometrillä. Leukosyyttipopulaatiosta mitataan tiettyjen pitareseptoreiden expressioita (mm. CD35, CD46, CD55, CD59, CD28, CD64, CD11b ja MHC I). Analyysi tapahtuu statistisesti, erilaisten reseptorien ja reseptoriryhmien ilmenemisen suhteista Bakteeri- ja virusinfektioissa leukosyyteillä on oma toisistaan ja terveistä yksilöistä eroava pintareseptorifenotyyppinsä ja ne pystytään nopeasti tällä menetelmällä differentioimaan. Menetelmällä on testattu suuri määrä infektiopotilaita (n >12) ja sillä pystytään hyvin korkeaan spesifisyyteen ja sensitiivisyyteen bakteeri/virusdifferentiaalidiagnostiikassa. Menetelmä on käytössä Turun yliopistollisen keskussairaalassa. Nuutila et al. 28, 29, 21, 211, 212, 213, 216 Lilius et. al. 212

LEUKOSYYTTIEN PINTARESEPTOREIDEN FENOTYYPITYS Kosteusmikrobialtistuksen aiheuttamat muutokset muodostavat oletettavasti oman fenotyyppinsä, joka eroaa vastaavista bakteeri- ja virusinfektioista sekä terveistä kontrolleista. Vilén et al. 217 Nuutila et al. 28, 29, 21, 211, 212, 213 ja 216 Lilius et. al. 212

Hyvä patofysiologisen tilan mittari! Herkkä toksiineille! Koetinsolu toksisuusmittuksiin! IN VITRO-testaus IN VIVO-testaus Toksiinille altistunut systeemi Altistuksen mittaus Seerumin antigeenispesifinen IgG Leukosyyttien fenotyypitys virtaussytometyrillä Soluja tarvitaan vähän ja testi voidaan tehdä esim. sormenpääverestä! Mahdollistaa pikatestien kehittämisen

Kliininen tutkimusyksikkö TROSSI Prof MD Tuula Putus (LKT) Dos MD Jussi Kantele (LKT) FT (Biokemia) Tohtorikoulutettava TtM Liisa Vilen (LKT) Tohtorikoulutettava FM Eetu Suominen (LKT, Biokemia) Maisteriopiskelija LuK Juho Myllymäki (Biokemia) LuK Eemil Aalto-Setälä (Biokemia) Bachelor student Veronika Skockova (Masaryk University, Czech Republic) (Biokemia) Biokemian laitos Dos Jari Nuutila Dos Esa-Matti Lilius University of Turku Työsuojelurahasto