Virus EBOLA Dos. Maija Lappalainen HUSLAB, Virologian ja immunologian osasto Laboratoriolääketiedepäivät 9.-10.10.2014 ss(-) RNA virus Lahko: Mononegavirales Heimo: Filoviridae Suku: Ebolavirus, Marburgvirus Ebolavirus: 5 lajia Zaire ebolavirus Sudan ebolavirus Reston ebolavirus Taï Forest ebolavirus Bundibugyo virus Vaaraluokan 4 agenssi > viruksen rikastaminen vaatii BSL4 tason laboratorion (ei Suomessa) Tartuntatavat Suora kontakti infektoituneeseen ihmiseen/eläimeen (elävä tai kuollut) -veri -kehon eritteet -elimet Limakalvokontakti Ihorikot Ei näyttöä tartunnasta ilmateitse Länsi-Afrikan Ebola-epidemia Baize S, Pannetier D, OesterreichL, ym. NEJM April 15, 2014 Ensimmäiset ebola-epidemiat kuvattu jo 1970-luvulla, puskaepidemiat Länsi-Afrikka: ensimmäiset ilmoitukset WHO:lle 3/2014 taudista Guineassa Kuume, ripuli, oksentelu, korkea kuolleisuus Aiheuttaja tunnistettiin: Zaire ebolavirus (EBOV) Epidemiologisin tutkimuksin tapaukset yhdistettiin fataaliin tapaukseen 12/2013 Inkubaatioaika 2-21 vrk (yl. 4-10 vrk) Oireeton henkilö ei ole tartuttava 1
Ebola outbreak, updated October 3, 2014, CDC Country Total Cases Total Deaths Laboratory Confirmed Cases Guinea 1199 739 977 Liberia 3834 2069 931 Sierra Leone 2437 623 2179 Countries with localized transmission (CDC, 3.10.2014) Country Total cases Total Deaths Laboratoryconfirmed cases Nigeria 20 8 19 Total 20 8 19 Total 7470 3431 (45,9%) 4087 ProMed, WHO 24.8.2014: >225 terveydenhuollon työntekijää sairastunut, liki 130 kuollut Countries with travel-associated cases (CDC, 3.10.2014) CDC, 3.10.2014 Country Total cases Total Deaths Laboratoryconfirmed cases Senegal 1 0 1 USA 1 0 1 Total 2 0 2 Ensimmäinen tapaus Pohjoismaissa (6.10.2014) Ensimmäinen Euroopassa saatu Ebola-tartunta (6.10.2014) 2
Varautumisohjeita laaditaan shp:ssa Laboratorion varautuminen Erittäin epätodennäköinen Suomessa Varautuminen ja valmistautuminen tarpeen Ajantasaiset ohjeistukset ja koestetut käytännöt Työturvallisuus! Infektiolääkäri päättää ebola-epäilystä ja eristämisestä, laboratorio toimii sen mukaisesti Laboratorioon otetaan puhelimitse yhteyttä jo ennen näytteenottoa Oikeat näytteet, oikeat putket, oikeat pyynnöt, asianmukaiset pakkaus- ja kuljetuskäytännöt Näytteet tutkitaan CDC:n ohjeistuksen mukaisesti: Recommendations for laboratory testing by staff: Any person testing specimens from a patient with a suspected case of Ebola virus disease should wear gloves, water-resistant gowns, full face shield or goggles, and masks to cover all of nose and mouth, and as an added precaution use a certified class II Biosafety cabinet or Plexiglass splash guard with PPE to protect skin and mucous membranes. All manufacturer-installed safety features for laboratory instruments should be used. Laboratorion varautuminen Normaalimenettelyt laboratorioissa eivät ole välttämättä turvallisia! Miksi varotoimet ovat tarpeen? Hyväkuntoisella, oireilevalla potilaalla on mahdollisesti korkea viremia Infektiivinen annos on matala Ei hoitoa, ei rokotetta, korkea kuolleisuus HUSLAB: Samanlainen menettely, olipa kyseessä pieni tai suuri riski Laboratoriotutkimukset joko ns. bedside tai BSL-3 laboratoriossa Kokeneet toimijat (näytteenotto ja analytiikka) Ebola-infektion poissulkuun pyritään mahdollisimman pikaisesti. Spesifinen dg HUSLABin BSL-3:ssa (ma-su). Alustava vastaus n. 1 vrk:n kuluessa. HUSLABinmenettelylinjaukset jaettu 5.9.2014 Tarvittavat laboratoriotutkimukset Tavanomaiset laboratoriotutkimukset: Verikaasut (bedside) Verenkuva Elektrolyytit Maksan- ja munuaisten toimintakokeet Verensiirtotutkimukset Spesifinen filovirusdiagnostiikka Alustava vastaus n. 1 vrk:n kuluessa Malariadiagnostiikka Veriviljely Muu verenvuotokuumevirusdiagnostiikka 3
Näytteenotto ja vieritutkimukset Kokeneet toimijat Rauhalliset työskentelytavat Suojavarustuksen riisuminen riskialtis vaihe Näytteenotto parityöskentelynä Analytiikka vierilaitteilla, erilaisia testikasetteja Testivalikoimaa on työstetty yhdessä infektiolääkärien kanssa Muut kuin vieritutkimukset BSL3-laboratoriossa Ebola-epäilypotilaan mikrobiologiset tutkimukset Spesifi pyyntö ebolaviruksen osoittamiseen: 21359 B FiloNhO, 2x 7ml EDTA-verta sekä 3x 7ml verta ilman antikoagulanttia (HUSLAB huolehtii yhteistyössä THL:n kanssa näytteen toimittamisesta Ruotsiin varmistustutkimukseen) Erotusdiagnostinen pyyntö malarian osoittamiseen: 21358 B PlasNhO, 7ml EDTA-verta Mahdollinen bakteeridiagnostiikka: 1153 B BaktVi, 2+2 BactALERT-pulloa (inkuboidaan BSL3:ssa) Lisätiedustelut (HUSLAB, Virologian yksikkö): Virka-aikaan: 040 838 4004 Maija Lappalainen 050 427 0476 Hannimari Kallio-Kokko Päivystysaikaan: 040 837 4010 / 040 837 4011 virologian etupäivystäjä (arkisin klo 16-07 ja viikonloppuisin) Kategoria A näytteet. Tartuntavaaralliset aineet, jotka kuljetetaan sellaisessa muodossa, että ne voivat altistumisen tapahduttua aiheuttaa muuten terveisiin ihmisiin tai eläimiin sairauden, jonka seurauksena on pysyvä vamma, hengenvaara tai kuolema. Kategoria A mukainen näytteenkuljetusastia Näytteet on pakattava IATA:n ( International Air Transport Association) Infectious Substance Category A-vaatimusten mukaisesti. Pahvipakkauksessa on oltava UN 2814 merkintä (Tartuntavaarallinen aine, ihmisiin vaikuttava). https://www.iata.org/whatwedo/cargo/dgr/documents/dgr52_ InfectiousSubstances(DGR362).pdf 4
Yhteydenotto puhelimitse HUSLABin viruslaboratorioon jo ennen näytteenottoa! Kategoria A-näytteet (esim. ebola-epäily) Verinäyteputken pakkaaminen ja lähettäminen HUSLAB:n ohje, 16.9.2014 THL Kategoria A-näytteen pakkaamiseen ja lähettämiseen tarvittavat välineet. Verinäyteputket esipaketoidaan yksittäisinä, 1L kuljetuspurkkiin mahtuu 3 esipaketoitua näytettä ja 1.8L purkkiin 6 esipaketoitua näytettä. 1.a 1.b 2.a 2.b 1.c 1.d 1.a-d. Potilastiedoilla varustettu verinäyteputki pyyhitään EtOH:lla ja kiedotaan tiiviisti imeytysaineeseen esim. selluloosavanuun. 2.c 2.d 2.a-d. Imeytysaineeseen kiedottu verinäyteputki laitetaan esim. 50ml:n greiner-putkeen, joka puolestaan kiedotaan imeytysaineeseen, jonka päälle laitetaan potilastarra. Nämä pakataan salpapussiin, joka pintapyyhitään EtOH:lla. 5
3.a 3.b 4.a 4.b 3.c 3.a-d. Siirrytään puhtaampaan tilaan. Kuljetukseen käytetään Kategoria A-näytteille tarkoitettua pakkausta. Esipakatut näyteputket kiedotaan sulloaineeseen esim. kuplamuoviin ja pakataan tiiviisti kuljetuspurkkiin. 3.d 4.c 4.d 4.a-d. Näytepurkin kannen alle laitetaan vielä imeytysainetta ja purkin kansi suljetaan huolellisesti. Saatekirje sisältötietoineen (tutkimuslähete) laitetaan pahviseen kuljetus-pakettiin muovipurkin ulkopuolelle. Hyvin merkitty pahvipakkaus suljetaan vielä teipillä. Kategoria A-näytepakkauksen merkitseminen (Ebola-epäily) Pahvipakkauksessa on oltava UN 2814 merkintä (Tartuntavaarallinen aine, ihmisiin vaikuttava). Lisäksi pahvipakkaukseen on merkittävä selkeästi: Lähettäjän tiedot: organisaatio osasto/yksikkö vastuuhenkilö ja puh.nro osoite Luovutettavan aineen kuvaus: Filovirus-epäilynäyte Vastaanottajan tiedot (etukäteisyhteydenotto välttämätön): HUSLAB, Virologian yksikkö yhteyshenkilö, jonka kanssa asiasta sovittu ennakkoon ja puh.nro os. Haartmaninkatu 3, 00290 Helsinki Tietoa kategoria A-näytteille sopivista kuljetuspakkauksista 1L purkkiin mahtuu 3 yksittäin pakattua veriputkea tai veriviljelypulloa 1.8L purkkiin mahtuu 6 yksittäin pakattua veriputkea tai veriviljelypulloa Pakkauksia / kuljettajia, esim.: 1. CORT37BIOT1.8ST BIOTAINER tarvikkeineen 1.8L (LK6.2). [VWR International] 2. Kategoria A kuljetusastiat. [Dangerous Goods Management Finland Oy (DGM Finland) Sinikellontie 4 01300 Vantaa, Finland tai www.dgm.fi.] 3. World Courier:lta voi tilata kuljetuksen Kategoria A pakkauksineen (PATHOPAK; eri kokoja). Kylmäkuljetus (+4 C). 4. TNT Special Service kuljettaa Kategoria A näytteitä. Kylmäkuljetus (+4 C). 6
Toiminta BSL3 -laboratoriossa Infektiohälytysryhmä Kokeneita BSL3 osaajia Parityöskentely, tarvittaessa jopa 3-4 lab.hoitajaa Takapäivystäjä (lääkäri) ulkopuolella päivystysaikana 7