Oraalimikrobiologian laboratoriodiagnostiikkaa Heini Torkko 4.5.2012 (Päivi Tissari,, Pentti Kuusela)
Laboratorio? mikä? missä? www.espooncine.fi onko nimettyä yhteyshenkilöä öä? näytteenotto-ohjeet? ohjeet? tutkimuksen kulun ja vastaamisen aikataulu? oman toimintaympärist ristön n mahdolliset ohjeet yhteydenotto tarvittaessa!!!
Esimerkiksi HUSLABin Kliinisen mikrobiologian ohjeet internetissä HUS > HUSLAB > Tutkimusohjekirja, asiantuntijaluettelo ja näytteenoton käsikirja > Bakteriologia - näytteenotto-ohjeetohjeet Virologia - näytteenotto-ohjeetohjeet myös s vapaa tekstihaku
Bakteriologian osasto Tehtyjä tutkimuksia noin 494 000 (2011) Tutkimusnimikkeitä noin 100
Bakteriologian tutkimusmää ääriä 2011 U-BaktJVi 108 000 -MRSAVi 59 000 B-BaktViBaktVi 47 000 Pu-BaktVi BaktVi 56 000 Ps-StrVi+JVi 37 500 -GcVi 9 700 Li-BaktVi 2 400 -SienVi 18 200 -TbVrVi 15 500 F-Para-O 13 300 F- HepyAg 12 100 Ts-HepyVi 1 200 F-BaktVi1 15 700 F-SalmVi 10 400 F-CldiVTx 12 500 F-CldiTy 1 900 -ParodVi 1800
Joulu Marras Loka Syys 300 250 200 150 100 50 0 ParodVi Kesä Heinä Elo Kuukausi 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 Touko Huhti Maalis Helmi Tammi Lkm
Oraalimikrobiologiset näytteetn *parodontologiset näytteet *endodontiset näytteet *suun hiivasieninäytteet *märkänäytteet hammasper.. infektioista -sairaalaperäiset iset (Töö öölö, Kirurg.. sairaala) -avohoitoperäisetiset (HL:n vastaanotolta)
Näytteenotto / parodontologia anaerobiampulli VMGA-pullo - säilyttää anaerobioosin hyvin - bakteerien alkuperäiset määm ääräsuhteet säilyvät t melko hyvin supragingivaaliplakin poisto syvimmmät ja tulehtuneimmat taskut näyte kyretillä tai paperinastalla
Näytteenotto / endodontia anaerobiampulli VMGA-pullo kanavan puhdistus, tyhjänä useita vrk HUOM! Steriilin alueen näyten kruunun eristys kofferdam hampaan ja kanavan desinfektio paperinastalla juurikanavasta /aspiroimalla absessista
Näytteenoton merkitys Suuri! huono näyte n huono viljelytulos tehostaa parodontiitin varhaista toteamista vaikuttaa hoitopää äätöksiin helpottaa hoitotavan valintaa auttaa työnjaon suunnittelussa (HL/EHH/EHL) motivoi potilasta kertoo onko juurikanavassa infektio
Oraalinäytteiden viljely parodontologiset näytteet: näytepullon lämmittl mmittäminen minen (->5( min, 35C) näytteen homogenisointi (vortex( ->1 min) kvantitatiivinen laimennossarja näytteen pipetointi maljan keskelle näytteen levitys kulmasauvalla anaerobien sulkeminen anaerobiastiaan aerobimaljat hiilidioksidikaappiin
Parodontopatogeenien taksonomiaa Haemophilus->Actinobacillus >Actinobacillus-> Aggregatibacter Bacteroides->Porphyromonas Bacteroides->Tannerella Bacteroides->Prevotella Peptostreptococcus->Micromonas >Micromonas-> Parvimonas Wolinella->Campylobacter
Aggregatibacter actinomycetemcomitans mikroaerofiilinen (kapnofiilinen) kasvatusaika 3 vrk, 5% CO 2, 35-37 37 o C TBV (tryptic( soy+bacitracin+vancomycin) semiselektiivinen kasvualusta: gram-pos ei kasva; suolistosauvat, akinetobakteerit, pseudomonaksen kaltaiset, apatogeeniset neisseriat,, hiiva kasvavat pesäke tähtimt htimäinen inen / kukkamainen katalaasi+ (NO 3 +)
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
P.gingivalis, T.forsythia, P.intermedia -ryhmä, P.micra, C.rectus obligaatti anaerobi kasvatusaika ->7vrk, AnO 2, 35-37 37 o C Brucella hevosen veri + K-vit + hemiini non-selektiivinen kasvualusta: keitetty hevosen veri lisää haettujen parodontopatogeenien pigmentaatiota; NF:n prevotellat, fusobabteerit, veillonellat,, anaerobiset +kokit ( peptostreptokokit( peptostreptokokit ) ym,, sekä fakultatiiviset viridansit,, laktobasillit, aktinomykeetit, kapnosytofagat kasvavat
Porphyromonas gingivalis -obligaatti anaerobi -pigmentoiva:: lähes l väritön->->lähes musta -CAAM:+ mittaa trypsiinin kaltaista entsyymiaktiviteettia katsotaan UV-valossa valossa->sinertävä fluoresenssi -ei autofluoresenssia -ind:+, MUG:- (B-galaktosidaasi) -gram.neg kokkobasilli -pahan hajuisia aineenvaihduntatuotteita
Parodontopatogeenien viitearvot Aggregat. actinomycetemcomitans 0.01% Porphyromonas gingivalis 0.1% Tannerella forsythia 5% Prevotella intermedia 5% Parvimonas micra 3% Campylobacter rectus 2% Slots & v. Winkelhoff 1993
Herkkyysmää ääritys ei tehdä parodontopatogeeneille rutiinisti herkkyyden oletusarvo tiedossa: yleisesti perusterveiden kannat herkkiä ß-laktamaasituottajat penr (Prevotella intermedia ryhmä) toistuvat löydl ydökset, huono vaste hoidolle ->herkkyysmääritys perusteltu
Herkkyysmää ääritys 2 endodontisten näytteiden löydl ydöksille sekä muille suun alueen näytteiden n löydl ydöksille tehdää ään n herkkyysmää ääritys rutiinisti -yleensä enintää ään n viidelle runsaimmin kasvavalle tai merkityksellisimmiksi katsotuille löydl ydöksille -syljen normaalifloora ->ei herkkyyttä -selvä kontaminaatio ->ei herkkyyttä
Herkkyysmää ääritys 3 Aggregatibacter actinomycetemcomitans ampisilliini amoksisilliini+klavulaanihappo atsitromysiini doksisykliini
Herkkyysmää ääritys 4 Anaerobit / avohoidon näytteetn ytteet metronidatsoli penisilliini amoksisilliini+klavulanihappo atsitromysiini klindamysiini doksisylkliini
Herkkyysmää ääritys 5 Anaerobit / sairaalapotilaiden näytteetn ytteet penisilliini metronidatsoli klindamysiini doksisykliini imipeneemi piperasilliini+tatsobaktaami amoksisilliini+klavulaanihappo
Vastaustapa Paron näyte: -parodontopatogeenit prosenttiosuuksineen -bakteerien kokonaismää äärä -ei yleensä herkkyysmää äärityksiä Endon näyte / muu suun märkm rkänäyte: -kaikki (merkittävät) t) löydl ydökset -semikvantitatiivinen +/++/+++ -herkkyysmääritykset
Bakteriologinen vastaus
Bakteriologinen vastaus
10VV05063 Potilas, Pekka 56V XXXXXX-YYYY HASSIPÄ:09-3105018 MH 05.11.2010 14:00 veri (AER/MH) #M1333055//# 07.11.2010 1. löydös 483 STREP.MUTANS T-107963 1 74 Kasvaa molemmissa pulloissa. kiekko MIC kiekko Ampisill S Vankomys S Erytromy S Genta-hi S Imipenem S Kefaloti S Keftriax 0.064=S Kefuroks 0.047=S Klindamy S Penisill S 0.047=S MIC
KIITOS!