Mikrobiologinen näytteenotto: Sieni- ja märkänäytteet

Transkriptio

1 Alueellinen vieritutkimuskoulutus 2014 Mikrobiologinen näytteenotto: Sieni- ja märkänäytteet Elina Aho Erikoistuva mikrobiologi Mikrobiologian yksikkö Seinäjoen keskussairaala

2 Infektioepäilyjen vahvistaminen tai poissulku Millainen hoitoennuste? Epidemioiden havaitseminen Miksi mikrobiologisia näytteitä? Tehoaako antibioottihoito? Resistenttien mikrobien löytäminen, esim. ESBL, MRSA

3 Yleisiä mikrobiologian näytteenotto-ohjeita Tarkista näytteenotto-ohjeet ja näyteastiat. Ohjaa potilasta näytteenotossa. Ota näytteet ennen antibioottihoidon aloitusta. Ota näyte oikeasta paikasta oikealla tavalla. Vältä ihon ja limakalvojen normaalimikrobien kontaminaatiota näytettä otettaessa. Ota näytettä riittävä määrä. Muista aseptiikka ja tartuntavaara! Merkitse näyteastiat ja täytä lähete huolellisesti. Toimita näyte nopeasti tutkittavaksi, säilytä ja kuljeta näytteet oikein!

4 Näytteenotto-ohjeet Tarkista näytteenotto-ohjeet ja -välineet mikrobiologisten tutkimusten ohjekirjasta. Internet-sivut/Weblabra Anna potilaalle kirjalliset ohjeet ja ohjaa potilasta tarvittaessa näytteenotosta. Tarkista kotona otettujen näytteiden laatu (mm. oikea säilytys ja sulkeminen, nimitarrat). _palvelut/kliininen_mikrobiologia/ohjekirja

5

6 Weblabra Tarkista näytteenottoohjeet ennen näytteenottoa! Kliinisen mikrobiologian kotisivut /kliininen_mikrobiologia/ohjekirja/tutkimuskohtaiset_ohjeet Mikrobiologian ohjekirja HRtyöpöydälle

7

8 Lähetetiedot tärkeitä tulosten tulkinnassa! Millä anatomisella alueella näytteenottoalue sijaitsee? näytteenottokohta (anatomia) tarkasti esim. nilkka, sääri, korva, polvi, kainalo, nivus sekä oikea, vasen vai molemmat Miten näyte on otettu? näytteenottotapa, esim. punktio, tikkusively, raaputus Mistä näytelaadusta tai näytetyypistä kyse? esim. märkäerite, leikkaushaavaerite, krooninen säärihaavaerite, nieluerite, virtsa, bursaneste, uloste, peräaukon erite Taustatiedot perussairaudet esim. diabetes, antibioottihoidot, yliherkkyys antibiooteille, matkat (missä ja milloin), sairaala-infektio, eläinkontaktit Kliininen kuva oireet ja niiden kesto esim. kuume, punotus, turvotus, kipu.. tautiepäily

9 Mikrobiologisen lähetteen täyttäminen

10 Näytteiden säilytys ja kuljetus Mahdollisimman nopeasti laboratorioon. Säilytyksen aikana mikrobien määräsuhteet muuttuvat, osa mikrobeista voi kuolla. Mikro-organismit herkkiä ympäristön olosuhteille. Lyhytaikainen säilytys jääkaappilämpötilassa (paitsi veriviljely- ja anaerobiviljelypullot huoneenlämmössä). Näytteet pakattava hyvin. Ei saa vuotaa, rikkoutua tai jäätyä. Näyteastioiden korkit kunnolla kiinni ja astiat suojapussiin. Nimitarrat näyteastiaan, ei muovipussiin.

11 Sieninäytteenotto Näyte otetaan ennen sienilääkehoidon aloitusta. Oikea näytteenottotekniikka on diagnostiikan kulmakivi. Näyte tutkitaan laboratoriossa sekä suoraan mikroskopoimalla että viljelemällä. Todetun sienikasvuston merkitys potilaan iho- tai kynsimuutosten aiheuttajana on joka näytteen kohdalla erikseen arvioitava. Silsasieni- eli dermatofyyttilöydös kliinisesti merkitsevä, kun taas hiiva- ja homesienet useimmiten harmittomia saprofyytteja.

12 Sienilääkkeet ja -näytteenotto Näytteet otettava ennen lääkitystä, koska sienilääkkeiden vaikutus on pitkäkestoinen. Lääkityksen jälkeen pidettävä riittävän pitkä tauko ennen näytteen ottamista: Paikallista sienilääkettä EI: - iholle 2 viikkoon - kynsiin 6 viikkoon / amorolfiinilakkaa ei 3 kuukauteen Systeemistä sienilääkettä EI: - ihoinfektioissa 2 kuukauteen - kynsi-infektioissa 6 kuukauteen!!

13 Savipuoli Kynsisilsa Hiussilsa Nivussilsa Homeen vaurioittama kynsi Hiivainfektio

14 Pintasieniviljely (Sk-SienVi) Ihon, hiusten ja kynsien sieniinfektiot Tarkista sienilääkitys. Puhdista näytteenottokohta (80 % alkoholi) ja anna kuivua. Ota mahd. hienojakoista näytettä runsaasti. Laita näytteet kuivaan astiaan esim. kapsapurkki. Säilytä näyte kuivana huoneenlämmössä, kuljetus laboratorioon 3 vrk:n kuluessa. Tutkimuspyyntö: 3509 Sk-SienVi Kapsapurkki

15 Sieniviljely iholta (vartalo, raajat, kasvot) Hilsettä raaputetaan runsaasti terveen ja sairaan ihon rajalta, joka on yleensä koholla, hilseilevä ja punoittava. Jos rakkuloita, niiden katto näytemateriaaliksi esim. atuloilla ja saksilla. Näytteeseen voidaan ottaa materiaalia myös infektioalueella olevista pustuloista. Jalkapohjan ja kämmenen infektioissa materiaalia kerätään koko oirealueelta. Ihon hiivainfektiota epäiltäessä näyte oirealueen reunamien ulkopuolisista satelliiteista.

16 Hiusten ja hiuspohjan sieniviljely Katkenneiden hiusten tynkiä nypitään näytteeseen juurineen atuloilla runsaasti, lisäksi raaputetaan runsaasti hilsettä mukaan. Jos katkenneita hiuksia ei ole -> tutkittavien hiusten latvaosat leikataan pois, näytteeksi nypitään noin 1 2 cm pitkiä tyviosia juurineen sekä raaputetaan hilsettä. Voimakasoireisessa kerion-tyyppisessä hiuspohjan infektiossa -> hiusnäytteiden lisäksi märkäeritettä kuivalla vanutikulla geelikuljetusputkeen.

17 Sieninäytteenotto kynnestä Näyte otetaan terveen ja sairaan alueen rajalta sienen etenemisvyöhykkeestä kynsilevyn alapinnasta. Näytteeksi vuollaan veitsellä tai kyretillä vaurioitunutta kynttä. Kynnen kuollut kärki tai kynnen alla oleva irtonainen massa ei kelpaa näytteeksi! Näytteenottokohdasta poistetaan kynnen kärkiosa ja terveet pintakerrokset kynsipihdeillä ja vuolemalla ohuita lastuja veitsellä, kunnes päästään kynnen vaurioituneeseen kerrokseen. 17

18

19 Pintasieniviljelyn (Sk-SienVi) laboratoriovastaus Natiivitutkimuksen vastaus annetaan heti sen valmistuttua. Jos näytteestä kasvaa yksiselitteistä sieni-infektioiden aiheuttajaa eli dermatofyyttiä, siitä annetaan heti alustava vastaus. Lopullinen vastaus annetaan heti lajinimen varmistuttua (yleensä kahden viikon kuluessa). Laboratoriovastauksessa voidaan kommentoida natiivija viljelylöydöksen vastaavuutta, löydöksen todennäköistä merkitystä taudinaiheuttajana ja tarkistusnäytteiden tarpeellisuutta. Negatiivinen viljelytulos annetaan 6 viikon kuluttua.

20 Muut sieninäytteet Kosteat näytteet ja näytteet hiivainfektioita epäiltäessä mm. suu, nielu tai ihon hautuneet alueet, limakalvonäytteet, korva, silmä (-SienVi 2631): Tikulla näytteenottokuljetusputkeen. Säilytys jääkaappilämpötilassa. Näytteestä ei tehdä värjäystä muutoin kuin erikseen pyydettäessä ja jos näyte toimitetaan muussa kuin tikussa. Syvät sieniviljelynäytteet esim. aspiraatit, kudospalat ym. (Pu-SienVi 3508): Tiiviskorkkiseen putkeen. Säilytys jääkaappilämpötilassa. Tutkimus sisältää sienivärjäyksen, mikäli näytettä on riittävästi. Sieniviljely verestä: 3-5 näytettä eri päivinä aerobiin veriviljelypulloon A (B-BaktVi), lisätietoihin: Sieniviljely.

21 Märkänäytteenotto Syvä- ja pintamärkänäytteet Haavanäytteet

22 Syvämärkänäyte (Pu-BaktVi1) Tarkoitettu tilanteisiin, joissa infektion aiheuttajana voi olla sekä aerobinen että anaerobinen bakteeri. Absessimärkäeritteet Punktionäytteet (steriileiltä alueilta) Kyrettinäytteet kroonisista haavoista Kierukat Kudospalat Välikorvatulehduseritteet Poskiontelonäytteet Syvämärkänäytteet otetaan pääsääntöisesti punktoimalla. Näytteenotossa on tärkeää noudattaa hyvää aseptiikkaa.

23 Syvämärkänäyte (Pu-BaktVi1) Kuva, Krooninen alaraajahaava, Käypä hoito -suositus 2007 Jos selvä märkäpesäke tai syvä haava -> ota näyte punktiolla. Ime haavan puhdistuksen jälkeen näytettä ruiskuun ja poista ilma ruiskusta. Puhdista anaerobipullon korkki ja ruiskuta näyte hapettomasti anaerobikuljetusampulliin geelin päälle. Säilytä valolta suojattuna huoneenlämmössä ennen lähetystä. Tutkimuspyyntö: 3491 Pu-BaktVi1 (aerobi- ja anaerobiviljely)

24 Kyrettinäyte eswab -putkessa (490CE.A) Tarkista eswab-putken käyttökelpoisuus ja viimeinen käyttöpäivämäärä. Avaa eswab-putken pakkaus ja korkki. Siirrä näyte kyretin renkaasta eswab-pakkauksessa olevaa tikkua käyttäen. Laita tikku eswab-putkeen ja katkaise tikku punaisella merkitystä katkaisukohdasta putken reunaa vasten ja sulje putki tiiviisti korkilla, jolloin näytteenottotikku asettuu korkin reikään. Pyydä tutkimus atk:lle syvämärkänäytteenä (3491 Pu-BaktVi1) ja täytä lähete huolella: näytteenottokohta (= anatominen sijainti) näytteen laatu (esim. kudos) näytteenottotapa (kyretillä) taustatiedot (mm. perussairaudet, antibioottihoito, oireet) Liimaa potilastarra putkeen. Toimita putki mikrobiologian laboratorioon 1 vrk:n sisällä.

25 Kroonisen haavan bakteerinäytteet Haavasta otetaan bakteeriviljelynäyte vain, jos epäillään kliinistä haavainfektiota tai halutaan seurata resistenttien kantojen kuten MRSA:n esiintymistä haavassa. Näyte ennen antimikrobilääkehoidon aloitusta. Näyte mekaanisesti puhdistetun haavan pohjalta syvämärkänäytteenä. MRSA- ja muut resistenttien kantojen seurantanäytteet aina puhdistamattomasta haavasta (hoitogeelit ja -voiteet poistetaan). Keskivaikea tai vaikea jalkainfektio: myös veriviljely

26 Bakteeriviljelynäytteenottotavat kroonisesta haavasta 1. Kyretillä (rengasveitsellä) 2. Punktoimalla ruiskulla ja neulalla syvämärkänäyte (3491 Pu-BaktVi1) Syvämärkänäyte vertailututkimusten mukaan paras tutkimusmenetelmä, kun halutaan löytää syvällä haavassa kasvavat bakteerit ja todellinen infektion aiheuttaja. 3. Näytteenottotikulla -> pintamärkä (3492 Pu-BaktVi2) Vertailututkimuksissa pintamärkänäyte oli heikoin tutkimusmenetelmä. Mikäli yleisoireita, otetaan myös veriviljely (1153 B- BaktVi).

27 1. Bakteeriviljelynäyte kyretillä Muista aseptiikka ja käsihygienia. Puhdista haava ensin esim. suihkuttamalla vesijohtovedellä. Poista mahdollinen kate ja kuollut kudos mekaanisesti. Huuhtele haava steriilillä keitto-suolalla ja kuivaa steriilillä sideharsotaitoksella. Avaa kyrettipakkaus ja kaavi kudosnäyte kyretillä haavan pohjalta (syvämärkänäyte).

28 2. Bakteeriviljelynäyte kyretillä (jatkuu) Suositeltavin tapa: Näyte eswab-putkeen siten, että kudosnäyte siirretään kyretistä pakkauksessa olevalla nukkatikulla eswabputken nesteeseen ja tikku katkaistaan putkeen. -> Näyte säilyy yön yli jääkaappilämpötilassa ennen lähetystä lab. tai Kyretti takaisin muovisuojukseen, potilaan tarra kyrettiin. Kyretti suojuksineen esim. minigrip-pussiin ja sulje pussi huolellisesti. -> Alle 2 h:ssa lab. tai Kyretti steriiliin, säilöntäaineettomaan putkeen, johon voi lisätä pari tippaa keittosuolaa. -> Alle 2 h:ssa lab.

29 Pintamärkänäyte (Pu-BaktVi2) Suppea, pinnallisille ihomärkänäytteille tarkoitettu tutkimus, joka sisältää vain aerobiviljelyn. Pintahaavanäytteet Silmäeritteet Akuutin korvatulehduksen näytteet Korvakäytävän eritteet Näytteenotto: pinnallista tulehduseritettä dacron- tai vastaavalla tikulla bakteerien näytteenotto- ja kuljetusputkeen.

30 Bakteerien näytteenotto- ja kuljetustikku on vaihtunut M40 Transystem-putkeksi, mutta muutkin bakteerien kuljetustikut käyvät aerobisiin bakteeriviljely- sekä MRSAnäytteiden ottoon

31 Bakteeriviljelynäyte pintahaavasta (Pu-BaktVi2) Märkä sekä mahdollinen nekroottinen kudos poistetaan ja haava-alue puhdistetaan huolellisesti keittosuolaliuoksella. -> Ihon normaalimikrobiston bakt. poisto. Ota näyte kuljetusputkeen kuuluvalla pumpulitikulla haavan pohjasta. (Vältä koskettamista haavan reunoihin!) Säilytä näyte jääkaapissa ja lähetä huoneenlämpöisenä. Tutkitaan aerobit bakteerit: Bakteeriviljely, aerobi (3492 Pu-BaktVi2) = infektion aiheuttava bakteeri º = ihon normaaliflooraan kuuluva bakteeri

32 Bakteeriviljelyvastaus Valmiina noin 2 4 vrk:n kuluttua näytteenotosta. Bakteerin/bakteerien nimet herkkyyksineen ja kommentteineen (todennäköiset patogeenit!). Tarkista antibioottihoidon osuvuus bakteerin viljelyvastauksen perusteella. Yleensä ihon normaalimikrobistoon kuuluvia bakteereita: mm. koagulaasinegat. stafylokokit, difteroidit, viridansryhmän streptokokit, peptostreptokokit ja propionibakteerit. Jos bakteeriviljelyssä kasvaa MRSA tai muu resistentti kanta, konsultoi alueen sairaalahygieniayksikköä.

33 Bakteeriviljelylöydöstä tulkittaessa Mistä näyte on otettu? Miten näytteenotto ja näytteen kuljetus onnistuivat? Mikä on löydettyjen bakteerien taudinaiheuttamiskyky (virulenssi)? Ovatko haavan paranemisedellytykset heikentyneet (huono verenkierto, haavassa nekroottista kudosta, luuta tai vierasesine)? Mikä on infektion vaikeusaste? Onko viljelynäyte otettu infektion pahenemis- vai paranemisvaiheessa? Onko mikrobilääkehoito ollut käytössä näytteenoton aikaan tai sitä ennen?

34 Antibiootin nimi? Näytteenottokohta?

35 Näytteen laatu?

36 Kiitos!