Ajankohtaista laboratorionäytteistä

Transkriptio

1 Ajankohtaista laboratorionäytteistä Kaisu Rantakokko-Jalava Oyl, Tyks Kliininen mikrobiologia Sairaalahygieniayksikön alueellinen koulutus

2 Ajankohtaista laboratorionäytteistä Etusivu uusiks: VRE JA VRE-NÄYTTEIDEN OTTAMINEN

3 Enterokokit Suoliston normaalimikrobistoa E. faecalis, E. faecium Taudinaiheuttamiskyky varsin vähäinen, ns. opportunistisia patogeeneja Virtsatieinfektiot, immuunipuutteisten sepsikset Mukana haavoissa ja märkäpesäkkeissä, merkitys kyseenalainen Luonnostaan resistenttejä useimmille antibiooteille. Herkimpiin tehoavat ampisilliini, imipeneemi, (fluorokinolonit), vankomysiini, linetsolidi, daptomysiini, nitrofurantoiini

4 VRE Enterokokki (lähes aina E. faecium), jonka soluseinän rakennusprosessi on muuttunut niin, että vankomysiini on menettänyt tehonsa vana tai vanb geeni liikkuva geenielementti (transposoni) Voi olla vaikea todeta kiekkotestillä non-vre VRE

5 VRE-rikastusviljely Sairaalasiirto ulkomailta tai hoidossa ulkomailla edeltävän 5 v aikana tai altistusmerkintä [VRE ] Rektum- tai ulostetikku (x2) Maldi-TOF herkkyydet Vanko-E vana/vanb

6

7 Vaihtoehtoiset näytteenottotavat Geelikuljetusputken sijasta voidaan käyttää pinkkikorkkista eswabputkea Näyte säilyy 2-3 vrk Ulostenäyte voidaan ottaa myös kuivaan ulostepurkkiin Näyte säilyy +4 C yön yli

8 Ajankohtaista laboratorionäytteistä 2 MRSA-NÄYTEPUTKET JA NÄYTTEEN- OTTOPAIKAT MUUTTUVAT

9 Mikä on MRSA? Metisilliinille, käytännössä kaikille beetalaktaamiantibiooteille (penisilliinit, kefalosporiinit, karbapeneemit) resistentti S. aureus Vanhoilla sairaalakannoilla resistenssiä myös muiden ryhmien antibiooteille, ns. avohoidon kannoilla ei Aiheuttaa samoja infektioita kuin herkkä S. aureus (ihoja haavainfektiot, syvät märkäpesäkkeet, sepsis) mutta hyviä hoitovaihtoehtoja paljon vähemmän Kantajuus altistaa infektioille

10 MRSA:uusi näyteputki, uudet ohjeet Uusi näytteenotto- ja rikastusputki TSB Salt 2.5% NaCl estää useimpien bakteerien mutta suosii S. aureuksen kasvua (myös MSSA) Näytteenottopakkauksessa lisäksi kaksi näytteenottotikkua: pinkkivartinen ja valkovartinen.

11 MRSA-tutkimukset alkaen MRSASEVI (paketti) Tutkimusnimike MRSASeVi poistuu, uudet MRSAneni nenä ja nielu MRSAperin perineum MRSAVi (4358) Kaikki muut näytteenottopaikat Voi käyttää myös neni- ja perin näytteille (ellei järjestelmässä erillisiä nimikkeitä) kainalo-nivusnäyte jää pois MRSANhO () Pika -MRSA (PCR) Voidaan tehdä samasta putkesta kuin viljely

12 MRSASeVi-näytteiden ottaminen Jos samaan putkeen otetaan näytteitä kahdella eri tikulla, ensimmäinen otetaan pinkki- ja toinen valkovartisella tikulla. MRSAneni: Sieraimet pinkkivartisella tikulla Nielu valkovartisella tikulla 1) Sieraimet (pinkkivartisella näytetikulla) 2) Nielu (valkovartisella näytetikulla) huom. pyynnössä lukee nenä

13 1. Ota nenänäyte pinkkivartisella tikulla. Avaa sinikorkkinen putki, pane pinkkivartinen tikku putkeen niin että kärki koskettaa pohjaan ja huljuta tikkua näyteputkessa n. 5 sek ajan. Nosta tikkua niin että näytteenottotikun kärki tulee putkessa olevan nestepinnan yläpuolelle ja paina kärkeä putken seinämää vasten 5 kertaa, jotta näyte siirtyy kärjestä putkeen. Sulje korkki kevyesti ja hävitä pinkkivartinen tikku jätteisiin (pinkkivartisessa ei ole katkaisukohtaa). Pinkkivartinen tikku huljutetaan näyteputkessa ja kärkeä painellaan putken reunoihin poistettaessa, jotta näyte saadaan tikusta putkeen. 2. Ota toinen näyte (nielu) valkovartisella tikulla. Katkaise valkovartinen tikku näytteen oton jälkeen samaan sinikorkkiseen putkeen sieraimista otetun näytteen kanssa ja sulje korkki huolellisesti. Valkovartinen tikku katkaistaan putkeen. Tikku aktivoi elatusaineen.

14 MRSAperin ja MRSAVi Jos samaan putkeen otetaan näyte vain yhdestä kohdasta, käytetään pelkästään valkovartista tikkua. MRSASEVI-paketin perineum-näyte (=MRSAperin) MRSAVi-näytteet: haavat, ihorikot jne. Putken viimeinen näyte otetaan siis aina valkovartisella tikulla, joka katkaistaan putkeen.

15 MRSAVi-näytteet Putkessa oleva elatusaine aktivoituu valkoisen tikun vaikutuksesta Tarvittaessa putkea voidaan inkuboida yön yli lämpökaapissa jo ennen kuin se lähetetään tutkittavaksi (rasti tarran kohtaan Inkuboitu, jos on ollut >12h lämpökaapissa) Tällöin näyte voidaan mikrobiologian laboratoriossa viljellä suoraan maljalle ja vastaus saadaan nopeammin

16 Sisältävät kefoksitiiniantibioottia, minkä takia sille herkät bakteerit (esim. herkkä S. aureus) ei kasva maljalla MRSA kasvaa värillisinä pesäkkeinä Ennen lopullista vastaamista Bakteerilaji sekä Resistenssi ja sen aiheuttava geeni varmistetaan MRSA-maljat

17 Kuva MRSA-näytteestä ennen ja jälkeen rikastuksen Viljelty 10 µl maljalle ennen rikastusta Viljelty 10 µl maljalle yön yli rikastuksen jälkeen

18 MRSA-näytteet Uusi näytteenottoputki mahdollistaa viljelyn automaatilla Siirtyvät asteittain alkaen Geelikuljetusputkiin otetut näytteet hyväksytään tammikuun 2019 loppuun TSBSalt-putkien Abakus-tilausnumero on (Mekalasin tuotenumero 32022)

19 Uutta mikrobiologialla BAKTEERIVILJELYAUTOMAATTI

20 Inkubaattorit (2*ilma, 1 *CO2) BD Kiestra WCA digit. lukuasemaa Puoliautomaattinen viljely Maljavarasto (9 erilaista) Maljojen leimaus Nestemäisten näytteiden automaattinen viljely

21

22 VIRTSAVILJELY AUTOMAATILLA

23 Virtsanäytteet automaatilla Syyskuun alusta kaikille putkessa tuleville virtsoille viljely automaatilla ja suoraan virtsasta tehtävät herkkyysmääritykset E. colin alustavat herkkyydet voidaan lukea ja vastata varsinaisena, jos herkkyysmaljalla todetaan yhtenäinen kasvu. Mikäli korkeintaan 2 antibioottia on R JA amoksisilliiniklavulaanihappo ja kefuroksiimi ovat S, suoraan virtsasta tehdyt herkkyydet jäävät voimaan. Muussa tapauksessa tehdään standardiherkkyydet pesäkkeestä (laajempi paneeli ja ESBL-varmistus, mikäli viitteitä ESBL:stä). Muillekin enterobakteereille suorat herkkyydet on mahdollista lukea, mutta toistaiseksi niille tehdään aina myös pesäkeherkkyydet (kunnes riittävä n täynnä)

24 E. colin suorat herkkyydet E. coli ESBL kannan suora herkkyysmalja ja kaksi kuva-asetusta estorenkaiden mittaamiseen. Kasvun tulee olla yhtenäistä jotta herkkyydet saa mitata. Huomaa klavulaanihapon aiheuttama muutos kefuroksiimi- ja amc-kiekkojen välissä.

25 Nielut Nielun StrVi-näytteet siirretty automaatille lokakuun alusta. Haasteet riittävän hyvin hajottava viljelykuvio, kun bakteerimäärä näytteessä vaihtelee paljon ja beetahemolyyttiset pesäkkeet pitäisi saada esiin Kuvausasetukset joissa beetahemolyysi mahdollisimman hyvin esiin

26 Kiitos