SILMÄN ALUEEN MIKROBIOLOGISET NÄYTTEET

Transkriptio

1 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- / 8 SILMÄN ALUEEN MIKROBIOLOGISET NÄYTTEET Näyte Bakteeri- ja sieninäyte* Sidekalvoerite, kyyneltiehyt-erite, enukleoidun silmän erite Kuntaliiton nro ja tutkimuspyyntö 49 Pu-BaktVi (508 Pu-SienVi) Tutkimus Bakteeriviljely,pintanäyte Sieniviljely Näyteastia Geelikuljetusputki, (suklaa- ja sabouraudmaljat) Sarveiskalvonäyte, etukammioneste ja lasiainen 49 Pu-BaktVi 508 Pu-SienVi Bakteeriviljely, syvänäyte Sieniviljely Suklaa-ja sabour.-maljat, mikrotioputki**, objektilasi ja kuljetuskotelo Hoitopiilolasi, piilolinssi, piilolinssin säilytysliuos; syvät vierasesineet 49 Pu-BaktVi 508 Pu-SienVi Bakteeriviljely, syvänäyte Sieniviljely. Kudosnäytteelle lisätään muutama tippa steriiliä keittosuolaa. Märkä- ja kudosnäytteet silmän ympäristön absessista ja haavasta 49 Pu-BaktVi 508 Pu-SienVi Bakteeriviljely, syvänäyte Sieniviljely Geelikuljetusputki, anaerobiampulli tai steriili putki (kiinteä kudos) Klamydia- ja gc-näyte Side-/sarveiskalvonäyte Mykobakteerinäyte Mikä tahansa silmästä tai sen ympäristöstä otettu näyte 94 -ChtrAg 78 -CtGcNhO 506 -GcVi 8 -TbVr 8 -TbVi TbNhO Chlamydia trachom antig Chlamydia trachomatis ja gonokokki, nukleiinihapot Gonokokkiviljely Mykobakteerivärjäys Mykobakteeriviljely M.tubercul. nukl happo Rengaslasi Vanutikku ja steriili putki Geelikuljetusputki Virusnäyte Side-/sarveiskalvo-näyte 64 -HSVAg 975 -VirVi Herpes simplex-virus ag Virusviljely Rengaslasi Virusviljelynäyteputki Sarveiskalvonäyte, etukammioneste, lasiainen 975 -VirVi 860 -HSVNhO -VZVNho 75 -CMVNh Virusviljely Herpes simplex-, Varicella-Zoster- ja sytomegaloviruksen nukleiinihapon osoitukset Virusviljelynäyteputki Parasiittinäyte Sarveiskalvonäyte, piilolasi, lasiainen 808 -AcantVi 70 -ToxoNhO Acanthamoeba, viljely Toksoplasma gondiin nukleiinihapon osoitus Acanthamoeba-näyteputki *Samasta näytteestä voidaan tehdä sekä bakteeri- että sienitutkimukset OML:ssa. **OYS:n sisäiseen käyttöön tarkoitettu silmän bakteeri- ja sieniviljelynäytteen kuljetus- ja rikastusviljelyputki, jossa vähäinenkin bakteeri- ja sienimäärä voi lisääntyä tunnistettavaksi.

2 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- / 8 Välineet (kts kuvaliite: Mikrobiologian näytteenottovälineet) Näytteenottokohdan puhdistukseen tarvittavat välineet Steriilit näytteen ottamiseen tarvittavat välineet (vanutikut, rikkaneula, kyretit, leikkausveitset, ym.) Steriili vanutikku ja geelikuljetusputki (sivelynäyte bakteeri- ja sienitutkimuksiin) Elatusainemaljat (suklaamalja, sabouraud-malja) suoraa bakteeri- ja sieniviljelyä varten Mikrotioputki bakteerin ja sienten rikastusviljelyä varten Anaerobiampulli bakteeri- ja sieniviljelyitä varten (kun näytettä yli 0,5 ml) tai purkki (kudosnäyte, vierasesine, säilytysliuos, näyte nukleiinihapon osoitusta varten) Virusviljelynäytteen kuljetusputki Acanthamoebanäytteen kuljetusputki Steriilejä vanutikkuja ja hiospäisiä objektilaseja (tavallisia ja rengaslaseja). Lasien kuljetuskotelo Potilastarrat ja näytteen laadun ja ottokohdan ilmaisevat lisätietotarrat Lähete Potilaan henkilötiedot, tutkimuksen pyytäjä ja vastausosoite Kliininen kysymyksen asettelu ja diagnoosi Näytteen ottoalueen anatominen sijainti ja näytteenottopaikka, oikea vai vasen puoli mainittava. Mahdolliset altistavat sairaudet, toimenpiteet ja lääkitys ennen näytteen ottamista ja sen jälkeen. Tarrat Kutakin näytettä varten tilataan potilastarra ja sen oheen tulostuva näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. Kun samaan astiaan otettavasta näytteestä pyydetään useampia tutkimuksia, astiaan liimataan ensisijaisesti pyydetyn tutkimuksen tarrat ja muut tarrat lisätään sulkupussiin, jossa näyteputki lähetetään mikrobiologian laboratorioon. Yleistä silmänäytteistä ja silmänäytteiden ottamisesta Silmänäytteitä otetaan toisesta tai molemmista silmistä samalla kertaa. Näytteitä voidaan ottaa silmän eri paikoista, samoin esimerkiksi sarveiskalvon eri kohdista. Siksi näytteenottopaikka on tarkasti ilmaistava jokaisen näytteen osalta lähetteessä ja näyteastiassa (putki, objektilasi tms.). Puudutteet voivat olla toksisia mikrobeille, joten ainakin sidekalvonäyte tulisi ottaa ennen paikallispuudutusaineen käyttöä. Puudutteen käyttö on mainittava lähetteen tarkenteessa. Syville silmänäytteille on olennaista näytteen vähyys, mikä asettaa lisävaatimukset mikrobiologisen tutkimuksen onnistumiselle ja kuinka monta eri tutkimusta näytteestä saadaan tehtyä. Siksi bakteeri- ja sieniviljelyissä on OML:ssä käytössä suoran maljaviljelyn lisäksi rikastusviljely elatusaineputkeen (mikrotioputki) otetusta näytteestä. Samoin klamydia- ja herpes -keratiittien diagnostiikassa käytetään antigeenitutkimuksia nukleiinihappotutkimusten lisäksi.

3 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- / 8 Sidekalvonäyte ja kyyneltiehye-erite bakteeri- ja sieniviljelyitä varten (Pu-BaktVi, -GcVi, Pu-SienVi) Sidekalvonäyte otetaan yleensä alaluomen sidekalvolta potilaan katsoessa ylöspäin. Poista kuivunut märkäerite keittosuolaan kastelluilla vanupuikoilla ja sideharsotaitoksilla. Vedä luomea sormella alaspäin ja ota näyte vanutikulla () sidekalvoa sivellen niin että se ei kosketa muuta ihoa ja ympäristöä. Sulje tikku geelikuljetusputkeen (). Liimaa putken kylkeen potilastarra ja lisätarra peräkkäin niin, että ne voi lukea viivakoodilukijalla. (). Lähetä putki suojapussissa (4) mikrobiologian laboratorioon. Tutkimus: Pu-BaktVi Näytteen laatu: SIDEKALVOERITE Näytteen tarkenne: oikea tai vasen 4 Näyte kyyneltiehyestä otetaan avaamalla tiehyt varovasti sormella silmän sisänurkasta kyynelpussin kohdalta painaen niin, että näytteeksi saadaan tuoretta tiehyestä tulevaa märkäistä eritettä, jota imeytetään vanutikkuun. Tikku suljetaan geelikuljetusputkeen ja lähetetään mikrobiologian laboratorioon. Vrt. sidekalvonäytteen käsittely. Bakteeriviljelynäyte silmäproteesin käyttäjän silmäkuopan pohjalta (Pu-BaktVi) Näyte otetaan vanutikulla tulehtunutta silmänpohjaa sivellen. Tikku suljetaan geelikuljetusputkeen ja lähetetään mikrobiologian laboratorioon. Vrt. sidekalvonäytteen käsittely. Hoitopiilolasi, piilolinssi, piilolinssin säilytysliuos; syvät vierasesineet (Pu-BaktVi, Pu-SienVi) Näyte tai sen osa siirretään aseptisesti steriiliin putkeen, jossa on muutama tippa steriiliä keittosuolaa. Piilolinssin säilytysliuosta - ml steriilissä putkessa. Sulje putken korkki aseptisesti ja hyvin. Kiinnitä potilas- ja lisätietotarrat näyteastiaan () ja sulje se suojapussiin ja lähetän mikrobiologian laboratorioon. Tutkimus: Pu-BaktVi,Pu-SienVi Näytteen laatu: PIILOLINSSI Näytteen tarkenne: oikea tai vasen Acantamoeba-viljelyä varten tarvitaan erillinen näyte piilolinssistä ja sen säilytysliuoksesta. Ne voidaan lähettää sellaisenaan steriilissä putkessa. Piilolinssin voi lähettää myös Acanthamoeba-näytteen kuljetusputkessa (joita saa OML:sta). Kts. sarveiskalvonäytteen Acanthamoebaviljelynäyte.

4 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- 4 / 8 Sarveiskalvonäytteet bakteeri- ja sienitutkimuksia varten (Pu-BaktVi, Pu-SienVi) Lääkäri ottaa näytteet rikkaneulalla, kyretillä tms. ja steriilillä vanutikulla sarveiskalvon kohdasta, jossa epäilty infektio näkyy parhaiten. Suora maljaviljely. Ota maljat lämpenemään huoneen lämpöön 0 minuuttia ennen näytteen ottamista. Ota näyte vanutikulla ja viljele se sillä suklaa- ja sabouraud-maljoille hajotusviljelmiksi (,,). Kiinnitä maljojen pohjiin näytetarrat (4) ja toimita maljat heti sen jälkeen mikrobiologian laboratorioon hiilidioksidikaappiin inkuboitumaan.,, 4 Näyte mikrotioputkeen, joita saa OML:sta. Ota näyte vanutikulla ja siirrä se aseptisesti syvien silmänäytteiden kuljettamiseen tarkoitettuun pieneen kierrekorkilliseen elatusaineputkeen, mikrotioputkeen, sekoittamalla se näytetikun vanupäästä putkessa olevaan nesteeseen. () Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti. Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.() Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms).

5 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- 5 / 8 Bakteerivärjäysnäyte objektilasille (-BaktVr) Ota tehdassteriili hiospäinen objektilasi pakkauksestaan. Merkitse sen taustapuolelle rasvakynällä ympyrä (halkaisija n.,5 cm ). Ota näyte vanutikulla ja sivele se objektilasille ympyrän sisälle. () Kirjoita lyijykynällä lasin hiospäähän potilaan nimi ja syntymäaika, näytteen laatu (sik tai sak), näytteen ottopaikka (os./pkl) ja päivämäärä. () Sulje lasi objektilasien kuljetuskoteloon ja kiinnitä siihen potilastarra ja sen viereen näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. () Toimita lasi kotelossaan mikrobiologian laboratorioon tutkittavaksi. Chlamydia trachomatis-antigeenitutkimusnäyte side-/sarveiskavolta rengaslasille. (-ChtrAg) Tarkoituksena on saada näytteeksi Chlamydia trachomatiksen infektoimia epiteelisoluja objektilasille niin paljon, että niistä voidaan diagnoosi tehdä. Tavallisin virhe on liian niukkasoluinen näyte!! Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu soluja. Siirrä solut vanusta rengaslasille vanutikkua lasin pintaa pitkin kiertäen. (). Ilmakuivaa näyte lasille. Kirjoita lyijykynällä lasin hiospäähän potilaan nimi ja syntymäaika, näytteen laatu (sik tai sak), näytteen ottopaikka (os./pkl) ja päivämäärä. () Sulje lasi objektilasien kuljetuskoteloon ja kiinnitä siihen potilastarra ja sen viereen näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. () Toimita lasi kotelossaan mikrobiologian laboratorioon tutkittavaksi.

6 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- 6 / 8 Herpesvirus-antigeenäyte sarveiskalvolta. (-HSVAg) Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu soluja. Siirrä soluja vanusta kaksirenkaisen objektilasin molempiin renkaisiin vanutikkua lasin pintaa pitkin kiertäen. (). Varmista, että soluja tulee tarpeeksi kumpaankin renkaaseen. Ilmakuivaa näyte lasille. Kirjoita lyijykynällä lasin hiospäähän potilaan nimi ja syntymäaika, näytteen laatu (sik tai sak), näytteen ottopaikka (os./pkl) ja päivämäärä. () Sulje lasi objektilasien kuljetuskoteloon ja kiinnitä siihen potilastarra ja sen viereen näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. () Toimita lasi kotelossaan mikrobiologian laboratorioon tutkittavaksi. Chlamydia trachomatis- ja gonokokki nukleiinihappotutkimusnäyte, Herpesvirus nukleiinihappotutkimusnäyte side-/sarveiskavolta (-CtGcNhO, -HSVNhO) Ota steriili putki ja lisää siihen 5 tippaa steriliä keittosuolaa. Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu infektoituneita soluja. Siirrä näyte aseptisesti putkeen ja sekoita se vanusta keittosuolaan. () Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. () Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.() Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). () Kutakin tutkimusta varten oma putki.

7 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- 7 / 8 Virusviljelynäyte side-/sarveiskavolta. (-VirVi) Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu viruksen infektoimia soluja. Siirrä näyte aseptisesti virusviljelynäytteen kuljetusputkeen sekoittamalla se näytetikun vanupäästä putkessa olevaan nesteeseen.() Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.() Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). Acanthamoeba-viljelynäyte sarveiskavolta. (-AcantVi) Ota näyte tukevavartisella vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu ameban infektoimia soluja. Siirrä näyte aseptisesti Acanthamoebanäytteen kuljetusputkeen sekoittamalla se näytetikun vanupäästä putkessa olevaan nesteeseen.() Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.() Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). ()

8 POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAAN- 8 / 8 Näytteet silmän sisältä (etukammioneste, lasiainen,ym) (Pu-BaktVi, Pu-SienVi, -HSVNhO, -VZVNhO, -CMVNh, -ToxoNhO, -VirVi-, TbVi, -TbNhO) Ennen näytteen ottamista kliinikon tulee selvittää ja päättää, mitä kaikkia tutkimuksia näytteestä pyydetään, sillä silmän sisältä saatavien näytteiden pieni määrä rajoittaa niistä tehtävien tutkimusten lukumäärää. Yhteen tutkimukseen tarvitaan 0 00 µl näytettä, joten sitä joudutan laimentamaan, mikä taas heikentää tuloksen luotettavuutta. Olisi suotavaa, että bakteeri-, sieni- ja virusviljelytutkimuksiin saataisiin oma niihin jaettava näyte ja nukleiinihappotutkimuksiin toinen niihin jaettava näyte. 0, ml:n (laimennetusta) näytteestä voi tehdä -(4) nukleiinihappotutkimusta. Lääkäri ottaa näytteet operaation yhteydessä. Näyte otetaan aseptisesti neulalla ja ruiskulla etukammiosta ja/tai lasiaisesta aspiroimalla ruiskussa olevaan keittosuolaan, jolloin (laimennetun) näytteen kokonaistilavuus on 0, ml. Viljely- ja värjäysnäytteen jakaminen eri tutkimuksia varten. Tarkemmat kuvalliset ohjeet: kts sarveiskalvonäytteiden käsittely..bakteeriviljely (Pu-BaktVi): Tiputa ruiskusta tippa tuoreelle suklaamaljalle..sieniviljely (Pu-SienVi): Tiputa ruiskusta tippa tuoreelle Sabouraud-maljalle..Bakteerivärjäysnäyte ( -BaktVr): Tiputa yksi tippa näytettä hiospäiselle objektilasille neulaa lasille koskettamatta. 4.Virusviljely ( VirVi). Tiputa ruiskusta tippa virusviljelyputkeen neulaa putkeen koskettamatta. 5.Mikrotioputkinäyte. (Pu-BaktVi) Siirrä näytteen loppuosa ruiskusta neulalla aseptisesti mikrotioputkeen ruiskuttamalla näyte elatusaineeseen, aspiroimalla elatusainetta ruiskuun ja huuhtelemalla ruiskun sisäosa sillä putkeen. Nukleiinihappotutkimusnäyte (-HSVNhO, -VZVNhO, -CMVNh, -ToxoNhO). Sulje näytteenottoruisku aseptisesti steriilillä korkilla. Liimaa ruiskuun ensisijaisesti pyydettävän tutkimuksen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. Sulje ruisku ja muiden tästä näytteestä pyydettävien nukleiinihappotutkimusten tarrat sulkupussiin. Lähetä pussi heti mikrobiologian laboratorioon. Märkä- ja kudosnäytteet silmän ympäristön absessista tai haavasta. Kts. ohje: Absessin (paiseen) ja märkänäppylöiden bakteeri- ja sieniviljelynäyte. Silmän mykobakteeritutkimusnäytteet (-TbVi, -TbVr, -TbNhO) Näytteet (kiinteä tai nestemäinen) steriilissä kierrekorkillisessa putkessa. Lisää putkeen -5 tippaa keittosuolaa näytteen kuivumisen estämiseksi. Mykobakteeriviljelytutkimuksen (-TbVi) voi pyytää myös mikrotioputkeen otetusta näytteestä (vrt. edellä). Kiinnitä putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra ja lähetä se mikrobiologian laboratorioon. Näytteiden säilyttäminen ja lähettäminen Toimita näytteet laboratorioon mahdollisimman pian, mielellään saman päivän aikana. Säilytä niitä huoneen lämmössä (lähetys samana päivänä) tai jääkaapissa viilennettynä (säilytys yli yön tai viikonlopun). Lisätiedot: OYS, mikrobiologian laboratorio: p