Norovirustartunnat ja niiden estäminen Hoitoon liittyvät infektiot ja sairaalahygienia ilman rajoja, Evira/Helsingin yliopisto
Esityksen aiheita Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä Noroviruksen siirtymiskokeet Noroviruksen tuhoutuminen pinnoilta UV säteilyn avulla
Norovirus on tehokas leviämään Matala infektiivinen annos Korkea pitoisuus virusta oireilevien ulosteessa ja oksennuksessa Pitkä viruksen eritysaika, jopa 8 vk perusterveillä Tartunnan saaneet voivat olla oireettomia Kestävä ympäristössä Leviää useita reittejä pitkin (feko-oraalisesti)
Noroviruksen leviämisreitit Ympäristön pinnat Mathijs ym. 2012
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä 1. Pintanäytteenottomenetelmän kehittäminen norovirukselle 2. Noroviruksen esiintymisen selvittäminen A. Tiloissa, joissa epäily noroviruksen aiheuttamasta epidemiasta B. Tiloissa, joissa ei ole (tiedossa) käynnissä olevaa norovirusepidemiaa I. Ravintolat II. Elintarviketeollisuuden tilat
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä Pintanäytteenottomenetelmän kehittäminen Norovirus lisättiin pisaroina tutkittavalle pinnalle ja pisaroiden annettiin kuivua Näyte otettiin hankaamalla pintaa kostutetulla näytteenottovälineellä (näytteenottotikku tai liina) D MK P
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä Virus irrotettiin näytteenottovälineestä puskuriliuokseen Puskuriliuoksesta eristettiin viruksen perimä Viruksen läsnäolo osoitettiin reaaliaikaisella käänteiskopiointi-pcr:llä
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä Tulokset Saanto: pinnan pyyhkimisen jälkeen näytteenottovälineestä osoitettu virusmäärä suhteessa pinnalle alun perin lisättyyn virusmäärään 100 90 80 70 60 % 50 40 30 20 10 0 PBS Glycine buffer ph 9.5 Polyesteri Mikrokuitu Nukkatikku Puuvilla
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä Kuinka pitkään pintanäytettä voi säilyttää? Miten hyvin virukset selviävät pintanäytteessä Viileässä? Huoneenlämmössä?
Noroviruksen siirtymiskokeet Vastasivat kysymyksiin: 1. Siirtyykö norovirus käsistä suojakäsineisiin käsineiden pukemisen aikana? 2. Siirtyykö norovirus käsin koottavaan voileipään 1. Työntekijän käsistä? 2. Voileivän raaka-aineesta (kurkku)? 3. Kuinka paljon käsissä pitää olla noroviruksia, jotta yksikin virus siirtyy voileipään? 4. Kuinka moneen voileipään noroviruksia siirtyy 1. Työntekijän käsistä? 2. Voileivän raaka-aineesta?
Noroviruksen siirtymiskokeet Hiiren norovirus: Ihmisen norovirus:
Noroviruksen siirtymiskokeet Käsineiden pukeminen:
Noroviruksen siirtymiskokeet Näytteenotto käsineiden pinnalta
Noroviruksen siirtymiskokeet Viruksen perimän puhdistaminen -> perimän osoitus
Noroviruksen siirtymiskokeet Noroviruksen ja hiiren noroviruksen lisääminen pinnoille:
Noroviruksen siirtymiskokeet 1. Kurkusta otettiin kiinni vasemmalla kädellä, veitsestä oikealla
Noroviruksen siirtymiskokeet 2. Kurkusta leikattiin kuusi viipaletta
Noroviruksen siirtymiskokeet 3. Viipaleet aseteltiin leivän päälle oikealla kädellä
Noroviruksen siirtymiskokeet 4. Avustaja otti pintanäytteet puskuriliuokseen kastetulla polyesteritikulla -> perimän osoitus
Noroviruksen siirtymiskokeet Virus Käsi Kuivaus min Tutkittu käsi Viruksen siirtyminen Siirtynyt määrä %, KA Hiiren norovirus 60 Vasen 3/3 1.5 60 Oikea 3/3 2.6 60 Vasen 1/3 0.0 60 Oikea 3/3 0.1 Ihmisen norovirus 0 Vasen 3/3 11.4 0 Oikea 2/3 2.1 60 Vasen 3/3 0.1 60 Oikea 2/3 0.1 0 Vasen 3/3 32.4 0 Oikea 3/3 8.7 60 Vasen 3/3 3.6 22.1.2015 60 Oikea 2/3 0.2
Noroviruksen siirtymiskokeet 2,4 %, 1,2 %, 1,1 % (3/3) ~10 6 hiiren noroviruspartikkelia 0,06 % (1/3) 0,2 %, 0,3 % (2/3)
Noroviruksen siirtymiskokeet ~10 6 hiiren noroviruspartikkelia 11,7 %, 5,2 %, 2,2 % (3/3)
Noroviruksen siirtymiskokeet ~10 6 hiiren noroviruspartikkelia 0,1 %, 0,3 %, 0,8 % (3/3) 0,1 %, 0,1 % (2/3)
Noroviruksen siirtymiskokeet MuNoV: 1.2% ± 0.6% (3/3) HuNoV GII: 1.5% ± 1.9% (3/3) MuNoV: 0.7% ± 0.5% (3/3) HuNoV GII: 0.5% ± 0.4% (3/3)
Noroviruksen siirtymiskokeet Norovirus levisi herkästi työntekijän käsineiden välityksellä Virus levisi kontaminoituneesta raakaaineesta vain pistemäisesti Noin 1000 virusta käsissä voisi riittää monen voileipäannoksen kontaminoitumiseen Antti Mikkelä, Evira
Noroviruksen esiintymisen selvittäminen A. Tiloissa, joissa epäily noroviruksen aiheuttamasta epidemiasta B. Tiloissa, joissa ei ollut (tiedossa) käynnissä olevaa norovirusepidemiaa I. Ravintolat II. Elintarviketeollisuuden tilat
Tilat, joissa ei epäilyä noroviruksen aiheuttamasta epidemiasta I. Ravintolat Näytteenotto maalis-huhtikuussa 2012 kolmesta ravintolasta ja niiden läheisyydessä olevista yleisö- WC tiloista Yhteensä 256 näytettä neljällä näytteenottokerralla Aho ym. 2013
Tilat joissa ei epäilyä Paljon positiivisia sittenkin epidemia käynnissä? Aho ym. 2013
Tilat joissa ei epäilyä II. Elintarviketeollisuuden tilat Näytteitä otettiin sellaisenaan syötäviä elintarvikkeita valmistavien yritysten linjastoista ja taukotiloista Yksittäiset näytteenottokerrat Vuoden seurantatutkimus Vuoden seurantatutkimuksen aikana yritysten työntekijät täyttivät puolen vuoden välein kyselylomakkeen, jossa kysyttiin työntekijöiden vatsatautisairastumisista
Vatsataudin oireita Keväällä 38,9 %:lla Syksyllä 20,3 %:lla Noin 50 % vastaajista myönsi työskennelleensä päivinä, jolloin heillä oli ollut vatsataudin oireita Eläinlääke-tieteellinen 31 tiedekunta / Maria 21.9.2015 Rönnqvist/ Tekes kokous
Tilat joissa ei epäilyä Näytteenottokerta Linja Taukotila Työntekijöiden WC Kevät 2010 3/30 (GII) 2/30 (GII) 0/30 Vuoden seuranta 2011 Kevät 2012 0/36 4/132 (GII) 2/tammi 1/touko 1/marras 0/30 2/30 (GII) 4/30 (GII) -
UV säteilyn vaikutus noroviruksiin pinnoilla Norovirusta esiintyy melko yleisesti ympäristön pinnoilla Tarvitaan tehokas menetelmä näiden virusten tuhoamiseksi (pinnoilta ja ilmasta) Vahvoja kemikaaleja ei voi käyttää kaikille pinnoille Pintojen UV desinfiointi tavanomaisen puhdistuksen jälkeen Toimiiko UV säteily norovirusten tuhoamiseen pinnoilta?
UV säteilyn vaikutus noroviruksiin pinnoilla Norovirusta ei pysty viljelemään soluviljelmässä, vaan osoitus perustuu geenimonistusmenetelmiin (PCR) PCR menetelmillä voidaan saada positiivinen tulos vaikka virus ei olisi enää infektiivinen Näytteille pyritään kehittämään esikäsittelyjä, joiden avulla geenimonistusmenetelmillä saadaan viljelyä vastaavia tuloksia
UV säteilyn vaikutus noroviruksiin Hiiren noroviruksen reagoiminen UV käsittelyyn lasipinnalla 5 4 Log (PCR yksiköt) 3 2 Ei entsyymikäsittelyä Entsyymikäsittely 1 0 UV (mj/cm2) Soluviljelytulos
Lopuksi lisälukemista Väitöskirja: http://www.evira.fi/files/attachments/fi/tieteellinen_tutkimus/ronn qvist_vaitoskirja.pdf Suomenkielinen julkaisu: Rönnqvist, M., Maunula, L. Kättelitkö itsellesi noroviruksen? Suomen Sairaalahygienialehti 2015: nro 2, s. 80-84.
Kiitokset Helsingin yliopisto Leena Maunula Elina Aho Kirsi Söderberg Carl-Henrik von Bonsdorff Mari Nevas Tekes hanke, Virushallinta EVIRA: Pirkko Tuominen, Jukka Ranta, Antti Mikkelä VTT: Marjaana Rättö, Satu Salo, Hanna Miettinen, IrinaTsitko TEKES Helsingin ympäristökeskus Yhteistyöyritykset Rahoittajat