Liikuntalääketieteen päivät 7.11.2013 Ajankohtaista dopingaineista ja testeistä 2013 Timo Seppälä LKT, Farmakologian dosentti ADT:n lääketieteellinen johtaja
1) Testosteronista a) Yksilölliset (geneettiset) erot testosteroni/epitestosteronisuhteissa (T/E) b) Urheilijan biologinen passi (ABP; Steroid module) 2) Punasolutuotanto ja hapensaanti a) Mahdolliset parantamiskeinot b) Urheilijan biologinen passi (ABP; Haematological module) 3) Kasvuhormonitesti
Testosteronin dopingkäytön osoittaminen: CH 3 CH OH 3 O 1 T/E-suhde (> 4) + follow up 2 IRMS (=isotope-ratio mass spectrometry) 3 Urheilijan biologinen passi (ABP; Steroid module)
T/E-suhde vaihtelee luontaisesti ongelmia valvonnassa
Rane A, Ekström L: Androgens and doping tests: genetic variation and pit-falls. Br J Clin Pharmacol. 2012 Jul;74(1):3-15 Määritetään virtsasta T/E UGT2B17 CYP17 PDE7B CYP = Sytokromi P450 UGT = Uridiiniglukuronosiilitransferaasi PDE = Fosfodiesteraasi
Rane A, Ekström L: Androgens and doping tests: genetic variation and pit-falls. Br J Clin Pharmacol. 2012 Jul;74(1):3-15 Testosteronin ja epitestosteronin glukuronisaatio UGT2B-entsyymien polymorfia erilaisia konjugaatiometaboliitteja eri suhteissa eri henkilöillä T/E-suhteissa yksilöllistä vaihtelua
Rane A, Ekström L: Androgens and doping tests: genetic variation and pit-falls. Br J Clin Pharmacol. 2012 Jul;74(1):3-15 Testosteroni Epitestosteroni T/E UGT2B17-genotyypin vaikutus T/E-suhteeseen
Rane A, Ekström L: Androgens and doping tests: genetic variation and pit-falls. Br J Clin Pharmacol. 2012 Jul;74(1):3-15 Rodulliset erot T:E-suhteessa testosteronin annon jälkeen
Urheilijan biologinen passi (ABP; Steroid module) Androgeenireseptori Ym. Ym. Perättäisten mittausten perusteella muodostetaan yksilölliset raja-arvot: T/E < 4 T/E > 4
Punasolutuotantoa ja hapensaantia lisäävät aineet ja menetelmät Geenien säätely (HIF-polku) HIF-1 stabilisaattorit (mm. EPO-tuotanto lisääntyy) FG-4592/ASP1517: inhibitor of HIF prolyl hydroxylase p.o., research chemical, Phase III Geenidoping (EPO-geeni) GATA-inhibiittorit (aktivoivat EPO-promoottoria) Muu vaikuttaminen geeneihin rhepo:n useat johdannaiset, esim. CERA EPO-mimeetit (esim. peginesatide; Hematide) Keinotekoiset hemoglobiinit (Hemopure, Oxyglobin) Hapen kuljettimet (perfluorokarbonit) Hemoglobiinin rakennetta muuttavat aineet (RSR-johdokset) Veren vaihto
Urheilijan biologinen passi (ABP; Haematological module) The following Markers are considered within the Athlete Biological Passport haematological module: HCT: Hematocrit HGB: Haemoglobin RBC: Red blood cells count RET%: The percentage of reticulocyte RET#: Reticulocytes count MCV: Mean corpuscular volume MCH: Mean corpuscular haemoglobin MCHC: Mean corpuscular haemoglobin concentration Further calculated Markers specific to the haematological module include OFF-hr Score (OFFS), which is a combination of HGB and RET%1, and Abnormal Blood Profile Score (ABPS), which is a combination of HCT, HGB, RBC, RET%, MCV, MCH, and MCHC2.
EPO/ESA ABP
Verenvaihto ABP
Hematologisen seurannan tulkinnassa huomioitavia asioita: a) Gender, date of birth, sport, and discipline b) Location and date of each Sample collection; c) Information on the transport conditions of the Sample(s); d) Whereabouts information for the month prior to each Sample collection which includes: In- and out-of-competition activities; and Location information that demonstrates relevant altitude exposure. e) Information on blood loss or gain (pathology or transfusion) in the three months preceding each Sample collection; and f) Information on use of hypoxic devices (altitude simulation).
Kasvuhormoni (hgh) Aivolisäke Luiden pituuskasvu Lihasmassan kasvu
Kasvuhormonin analyysi Mittaus tehdään verinäytteestä GH Pulsoiva eritys Elimistön omassa GH:ssa useita erikokoisia isoformeja: 22 kda isoformia n. 70% Rekombinanttivalmisteessa ainoastaan 22 kda muotoa Rekombinantti GH 22 kda GH 100% Elimistön Oma GH 22 kda GH 20 kda GH Hapan GH Pilkkoutunut GH Ym. GH 70% 20% Miehet Naiset Kit 1: reca pit A 22 kda 20 kda + 20 kda + Hapan GH + pilkkoutunut GH + ym. 1,81 1,46 Kit 2: recb pit B 22 kda 20 kda + 20 kda + Hapan GH + pilkkoutunut GH + ym. 1,68 1,55
Rec/Pit 22 kda-pitoisuus A-kit A-kit B-kit B-kit
Näytteiden suhteet (Kit 1) sijoitettuna log-linear jakaumaan Log-linear jakauma W = WADA:n arvioima 99,99 %:n raja-arvo 1,81 V = Veerpalun A- ja 2,62 B-analyysi 2,73 Havaintojen lukumäärä 99,99 % 0,01 % 0 1 2 3 1,81 RecGH/PitGH-suhde W A B V