TUMA, VASTA-AINEET, IMMUNOBLOTTAUS

Transkriptio

1 TUMA, VASTA-AINEET, IMMUNOBLOTTAUS Lyhenne: S-ANA-IB (20155) Tiedustelut: Laboratorio: (02) , lääkäri: (02) , (02) Yleistä: Ks. myös ENA- JA TUMA-VASTA-AINEIDEN ANALYYSI Tumavasta-aineiden immunofluoresenssimääritys (S-ANA-Ab) antaa harvoin spesifisen diagnoosin. Lisäksi testi voi antaa virheellisesti negatiivisen tuloksen mikäli antigeeni ei ekspressoidu (SS-A). Värjäyskuvio voi kuitenkin antaa viitteen siitä minkä antigeeenin kanssa vasta-aineet reagoivat. Systeemistä autoimmuunitautia sairastavilla potilailla, joilla todetaan korkea tuma vasta-ainetitteri (läiskittäinen, speckled - kuvio), tavataan usein myös vasta-aineita ns. liukoisia tuman antigeeneja (extractable nuclear antigen = ENA) vastaan. ENAantigeeni tarkoitti alunperin niitä tuma-vasta-aineiden kanssa reagoivia liukoisia kanin kateenkorvan uutteen antigeeneja, jotka eivät saostuneet yhdessä DNA:n ja histonien kanssa. Nimitys on säilynyt vaikka kaikki ENA:t eivät ole liukoisia ja osa antigeeneista ei sijaitse tumassa vaan sytoplasmassa. ENA-antigeeneja ovat mm. ribonukleoproteiinit (RNP70k, RNP-A, RNP-C), ribosomaalinen RNP (ribosomin P-proteiinit) sekä ns. Sm-, SS- A/Ro52, SSA/Ro60, SS-B ja Scl-70 antigeenit. ENA-antigeenit on nimetty tautiyhteyden mukaan. Esim. MCTD/ UCTD (mixed connective tissue disease / undifferentiated connective tissue disease) -potilailla esiintyy RNP-vasta-aineita, usein RNP70- antigeenia kohtaan. Osalla SLE-potilaista on vasta-aineita Smantigeenia, osalla Sjögrenin oireyhtymää sairastavista SS-A-ja SS- B-antigeenia, osalla polymyosiittipotilaista JO-1-antigeenia sekä osalla skleroderma-potilaista Scl-70-antigeenia (topoisomeraasi I) kohtaan. Histonivasta-aineet liittyvät lääkeainelupukseen; ribosomi P vasta-aineet SLE:n neuropsykiatrisiin häiriöihin, lupusnefriittiin ja -hepatiittiin.

2 Indikaatiot: Lähete: Näyte: Menetelmät: Tekotiheys: Tulkinta: Tumavasta-aineiden spesifiteetin selvittäminen ja tumavastaainenegatiivisen lupuksen diagnostiikka. SLE:n, skleroderman ja muiden systeemisten autoimmuuni-sairauksien diagnostiikka (seulonta ja spesifiteetti). Lääkeainelupuksen, neurolupuksen, lupusnefriittien, toistuvien aborttien ja vastasyntyneiden sydämen johtumishäiriöiden diagnostiikka. Immunologisten tutkimusten lähete tai asiakkaan oma lähete. Diagnoosi ja tieto taudin aktiivisuudesta ilmoitettava. 1 ml seerumia. Säilyy useita päiviä +4C:ssa. Voidaan lähettää huoneenlämpötilassa. Tumavasta-aineiden immunoblottaus tehdään käyttäen INNOLIAimmunomenetelmää. Vasta-aineita mitataan seuraavia antigeeneja kohtaan: RNP (70kd, A[34kd], C[22kd]), Sm(B/B [27/28kd], D[16kd]), SS-A (Ro52/60kd), SS-B, Scl-70 (Topoisomerasi 1), Jo- 1, Ribosomi P, CENP-B, Histonit (H1, H2A, H2B, H3, H4). Kerran viikossa TUMA/ENA-vasta-aineet systeemisissä autoimmuuni-taudeissa: Positiivinen tuma/ena-vasta-ainelöydös viittaa tiettyyn systeemiseen autoimmuunitautiin, mutta negatiivinen löydös ei sulje sitä pois. Tulkinta ENA-Ab Diagnoosi Yleisyys % RNP MCTD/ UCTD yli 95 SLE Systeeminen skleroderma Sm SLE SS-A Sjögrenin oireyhtymä SLE Neonataalinen lupus, sydämen johtumishäiriö SS-B Sjögrenin oireyhtymä SLE 5 10

3 Scl-70 Systeeminen skleroderma **) Rajoittunut skleroderma 20 JO-1 Polymyosiitti/ dermatomyosiitti Myosiitti/fibrosoiva alveoliitti 70 PCNA *) SLE (myös muissa taudeissa) 5 Ribos P SLE 5 20 CENP-B***) Rajoittunut skleroderma (CREST) 80 Systeeminen skleroderma 15 *) Proliferating cell nuclear antigen l. sykliini, KS. TUMA-VA **) 2/3 osalla Scl-70 positiivisista on systeeminen skleroderma ***) Ks. S-SENTROMEERI, VASTA-AINEET. CENP-B-vasta-aineet korreloivat sentromeerivasta-aineisiin, jotka on osoitettu IF-tekniikalla. Tulkinta, Ks. myös, S-HISTONI, VASTA-AINEET Terveillä henkilöillä ei esiinny ENA vasta-aineita. Monet positiivisista vasta-ainelöydöksistä ovat diagnostisia, esim. Sm-va SLE:n, Scl-70 Skleroderman ja JO-1 polymyosiitin diagnostiikassa. On kuitenkin muistettava, että negatiivinen ENAvasta-ainelöydös ei sulje pois systeemistä autoimmuunisairautta. Anti-RNP vasta-aineita todetaan lähes 100 %:lla MCTD/UCTDpotilaista. Löydös ei kuitenkaan ole spesifinen: SLE:ssa tavataan matalia anti-rnp tiittereitä %:ssa; lisäksi positiivisia tiittereitä todetaan joskus sklerodermassa. MCTD-potilaita seurattaessa onkin havaittu, että vuosien kuluessa monella taudinkuva muuttuu joko SLE:ksi tai sklerodermaksi tai nivelreumaksi. IMMUNOBLOTTAUS-analyysillä voidaan osoittaa vasta-aineita spesifisiä U1-RNA-partikkeliin liittyneiden proteiinien (70kD, A = 34kD, C = 22kD) peptidirakenteita kohtaan. Myös näillä on diagnostista merkitystä: mm. 70K-peptidi-vasta-aineet yksin esiintyessään liittyvät MCTD-potilailla erosiiviseen artriittiin, kun taas Sm (B/B = 27/28K) -proteiinin vasta-aineet liittyvät kuumeiluun, sklerodaktyliaan ja muihin iho-oireisiin. Sklerodermassa ( systemic sclerosis ) esiintyy tumavasta-aineita n. 70 %:lla potilaista. Diffuusissa ( truncal/proximal ) sklerodermassa tuma-vasta-aineet voivat olla joko nukleolaarisia antigeeneja (50 %:lla) (RNA ym.) tai liukoista ENA-antigeenia (Scl- 70-vasta-aineet) Kohtaan. Lisäksi rajoittuneessa sklerodermassa (ns. CREST-syndroma) n. 70 %:lla esiintyy vasta-aineita

4 sentromeeri/kinetochori antigeeneja kohtaan (Ks. tämä). Koska CREST-syndroman prognoosi on parempi, ja vain näillä potilailla esiintyy sentromeerivasta-aineita, on sklerodermaa epäiltäessä aina syytä tutkia kaikki edellä mainitut vasta-aineet. Skleroderman lisäksi sentromeerivasta-aineita on osoitettu myös primaarisessa biliaarisessa kirroosissa (PBC). SS-A ja SS-B vasta-aineita löytyy n. 60 %:lla Sjögrenin syndromaa sairastavista potilaista, sekä %:lla SLE-potilaista. SS-Avasta-aineet ovat yleisiä Sjögrenin syndromassa (n. 60 %:lla), mutta niitä esiintyy myös tumavasta-ainenegatiivisessa SLE:ssa (Subacute cutaneous lupus erythematosus, SCLE, 60 %:lla) ja neonataalisessa iholupuksessa (30 %). SS-A ja SS-B-vastaainepositiivisia äitejä seurataan raskauden aikana ja lapsia syntymän jälkeen: osa lapsista sairastuu neonataaliseen lupukseen ja toisille kehittyy kongenitaalinen A-V-blokki. Sydämen johtumishäiriö (totaali A-V-blokki) liittyy erityisesti SS-A-vastaaineisiin, mutta useimmiten potilailla (ja heidän äidillään) todetaan myös SS-B-vasta-aineita. SS-A-vasta-aineita on todettu joskus myös primaarissa biliaarisessa kirroosissa ja autoimmuunihepatiitissa sekä trombosytopenioissa (trombosyyteissä ristiinreagoiva antigeeni). ENA vasta-aineiden esiintymiseen näyttää liittyvän oireita useista elimistä (vaskuliitteja). Toisaalta sekä anti-rnp, anti-sm että anti- SS-B positiivisilla SLE-potilailla esiintyy vähemmän nefriittejä kuin SLE:ssa yleensä. Samoin MCTD:ssa (anti-rnp-positiivinen) vaikeita munuais-muutoksia esiintyy vähemmän (n.25 %:lla) kuin SLE:ssa. MCTD:n taudinkuva saattaa kuitenkin muuttua vuosien seurannan aikana vaikeammaksi. MCTD-potilaat näyttävät vastaavan hyvin kortikosteroidihoidolle, mutta pitkään jatkuneessa taudissa esiintyy kortikosteroidiresistenttejä skleroderman kaltaisia iho-oireita. MCTD:n prognoosi on suunnilleen sama kuin SLE:n: 10-vuoden eloonjäämisluku on yli 80 %. Vasta-aineita ribosomaalisia P-proteiineja kohtaan esiintyy 5 20 %:lla SLE-potilaista. Ne liittyvät erityisesti neuropsykiatrisiin häiriöihin (depressio, psykoosi). Lisäksi niitä esiintyy lupusnefriiteissä ja -hepatiiteissa. Histonivasta-aineet liittyvät lääkeainelupukseen. Kirjallisuus: Agmon-Levin N1, Damoiseaux J, Kallenberg C, Sack U, Witte T, Herold M, Bossuyt X, Musset L, Cervera R, Plaza-Lopez A, Dias C, Sousa MJ, Radice A, Eriksson C, Hultgren O, Viander M,

5 Khamashta M, Regenass S, Andrade LE, Wiik A, Tincani A, Rönnelid J, Bloch DB, Fritzler MJ, Chan EK, Garcia-De La Torre I, Konstantinov KN, Lahita R, Wilson M, Vainio O, Fabien N, Sinico RA, Meroni P, Shoenfeld Y. International recommendations for the assessment of autoantibodies to cellular antigens referred to as anti-nuclear antibodies. Ann Rheum Dis. 2014;73: Viander M, Hietarinta M. Lassila O. Screening of ENA antibodies by EliA Symphony vs. routine immunodiffusion and/or immunoblotting a two-year patient material study from Turku University Hospital. 4th International Congress on Autoimmunity, Budapest päivitetty /ah