Rintasyövän reseptori- ja HER-2 tutkimusten laadunhallinta Jorma Isola Tampereen yliopisto Biolääketieteellisen teknologian yksikkö
Reseptori- ja HER2-tutkimusten erityispiirteitä i ii i Tutkittavia näytteitä on paljon pienikin virheprosentti = paljon potilaita kärsii Suuri merkitys potilaiden hoidon kannalta suurempi kuin esim. histopatologisten harvinaisuuksien pikkutarkalla pohdinnalla
Laboratorioni laadunhallinnan pääpiirteet 1. Huolellisesti testatut analyysimenetelmät - perustuvat tieteelliseen työhömme 2. Laboratoriotyön laatukäsikirja - tärkeä, vaikka sis. paljon itsestäänselvyyksiä 3. Mikroskooppisen tulkinnan kehittäminen - digitaalinen kuva-analyysi 4. Tulostason jatkuva seuranta 5. Ulkoinen laadunarviointi (meillä NordiQC)
1. Huolellisesti lli testatut t t t analyysimenetelmät - Mikä analyysimenetelmä järkevin HER-2:lle???
CISH alunperin kehitettiin laboratoriossani i Kehitettiin ttii vuosina 1999-2000, julkaistiin Tanner M et al. Am J Pathol & Cancer Res => Siirryimme käyttämään CISH:iä primaaritestinä v. 2004 17cen ja HER2IHC sekundääritesteinä V.2007-2008 toimimme referenssilaboratoriona CISH-testin FDA-hyväksynnälle
Omat kokemuksemme HER-2 IHC:sta eivät olleet riittävän ä hyviä Jopa (kallista) HercepTestiä käytettäessä n.5% vääriä määritystuloksia = liikaa Epävarmuuden määrä tulkinnassa lisääntyi (=yhä useammin 2+ => CISH)
Eräs HER2-IHC:n heikko puoli : - PNB-biopsiat ylivärjääntyvät helposti Nykyisin määrityksiä tehdään molemmista näytetyypeistä. Formaliini-fiksaatio tapahtuu eri tavalla. huom! lasien viivakoodaus parantanut logistista laatua Asia on huonosti dokumentoitu tieteell. julkaisuissa
Toki myös CISH/SISH:n tekninen laatu voi vaihdella Diagnostinen CISH-näyte; Tampere lab. lab. työ ja mikroskopointi tulee tehdä huolellisesti SISH; muu laboratorio - peräkkäiset kudosleikkeet samasta kasvainblokista
2. Laboratoriotyön laatukäsikirja
Toimintakäsikirja välttämätön, vaikka labrani tuottaa vain Ts-Res ja Ts-HER2ISH:ta Käytämme Suomen IAP:n suosituksen mukaista Akkreditoinnin ISO15189 mielestäni lähes Akkreditoinnin ISO15189 mielestäni lähes samansisältöinen
3. Mikroskooppisen tulkinnan kehittäminen
ER, PR ja Ki-67 värjäystulos tulee ilmoittaa tarkkoina prosenttilukuina (% pos. soluja) 2010, 12:R56doi:10.1186/bcr2615 ImmunoRatio : laatimamme kuva-analyysiohjelmisto
Vapaasti käytettävissä: ei vaadi ohjelmistoasennuksia http://jvsmicroscope.uta.fi/ immunoratio
ImmunoRatio Olen käyttänyt vsta 2006 diagnostiikassa: yli 3000 analysoitua ER/PR/Ki-67 määritystä Ohjelmistomme on saamassa suosiota: - web-saitillamme on analysoitu jo n. 10.000 kuvaa (n. 6kk:ssa)
Ki-67% määritettynä ImmunoRatio:lla ercent su urvival P 100 90 <20% 80 20% 70 60 50 40 30 20 10 0 0 24 48 72 96 120 144 168 192 216 240 Months Optimaalinen hyvän/huonon ennusteen cut-point lienee 20%
Pe ercent sur rvival ER Survival by ImmunoRatio of ER:Survival <10% (neg) proportions / 10% (pos) 100 90 ER pos 80 n = 163 ER neg 70 60 50 n = 65 40 30 20 10 0 P = NS 0 24 2 48 4 72 6 96 8 120 10 144 12 168 14 192 16 216 18 240 20 Months Years sama tulos kuin kirjallisuudessa ER:lla yleensä
Pe ercent su urvival PR Survival by ImmunoRatio of PR:Survival <10% (neg) proportions / 10% (pos) 100 90 PR pos 80 PR neg 70 n = 116 60 50 40 n = 112 30 20 10 0 p = NS 0 24 2 48 4 72 6 96 8 120 10 144 12 168 14 192 16 216 18 240 20 Years Months sama tulos kuin kirjallisuudessa PR:lla yleensä
CISH:n digikuvantaminen? Myös diagnostiset CISH-määritykset dokumentoidaan digikuvin. ik i x Tärkeä laadunhallinnassa : - jos geenitäplät eivät näy kuvassa => määritys uusittava
Määritysten tulostason jatkuva seuranta
Tulostason seuranta automatisoitu - labrassani automaattisesti puolivuosittain
Seuraamme jatkuvasti myös vastausviivettä
5. Ulkoinen laadunarviointi
Värjäysten ulkoinen laadunarviointi tärkeää -- huom. NordiQC ei sisällä lasien tulkinnan arviointia
Päätelmiä Reseptori-, Ki-67- ja HER2-tutkimusten laadunhallinta koostuu yksinkertaisista asioista L d h lli t t l ähdä tä k ä ä j Laadunhallinta tulee nähdä tärkeänä ja panostaa siihen riittävästi