Bakteeriviljelynäytteen hyväksymiskriteerit. Primaarinäytteen värjäys ja viljely. Markku Koskela, yl Nordlab Oulu, mikrobiologia
Bakteeriviljelynäytteet Ainutkertaisia. Uutta näytettä ei saada tai se ei edusta samaa tilannetta kuin edellinen näyte. Kaikki mahdolliset ihmisestä otetut näytteet: Kudosta, eritettä, märkää; hoitovälineiden osia. Ottokohta: infektiokohdasta, ei sen vierestä! Infektion aktiivivaiheessa; se ei aina toteudu! Määrä: vahtelee 0,05 ml yli 100 ml. Laatutavoite: tuore ja runsas näyte!
Viljelykelpoisen näytteen saamisen edellytykset Näytteiden ottajilla, kuljettajilla ja lab.henkilökunnalla on oikeat ohjeet ja niitä noudatetaan Laboratorion ohjekirja ajan tasalla ja www-muodossa! Kuvalliset ohjeet näyteastioista ja välineistä. Kuvalliset ohjeet näytteen ottamisesta. Tarkat ohjeet näytteen säilyttämisestä ennen lähetystä Tarkat ja toimivat näytteen kuljetus- ja lähetysohjeet Päivystysajan ja viikonlopun toimintaohjeistus kunnossa!
Viljelynäytteen yleiset hyväksymiskriteerit Näyte on otettu, säilytetty ja kuljetettu nopeasti tutkittavaksi mahdollisimman alkuperäisessä muodossa niin, että: Infektion aiheuttajat ovat viljelyllä löydettävissä. Mikrobilajien määrät ovat säilyneet alkuperäisinä: Merkittävät patogeenit eivät ole tuhoutuneet Mikään mikrobi ei ole lisääntynyt kuljetuksen aikana niin, että se haittaisi varsinaisten patogeenien löytämistä. Näytteestä voidaan tehdä myös bakteerivärjäykset Leukosyytit ja bakteerit ovat säilyneet värjäyskelpoisina.
Viljelynäytteen yleiset hyväksymiskriteerit Näyte on toimitettu sille sopivassa, suljetussa astiassa ja se ei ole kontaminoitunut kuljetuksen aikana. Näyte on säilytetty ja kuljetettu oikealla tavalla. Näytteen kuljetus ei ole kestänyt liian kauan. Näytteen mukana on sen lähete, jossa on kaikki tutkimuksen kannalta tarpeelliset tiedot.
Näytelähetyksen ja näytteen hyväksymisvaiheet 2.Paikall.lab. näytteiden vastaanotto 3. KS:n lab. näytteiden vastaanotto 1.Näytteen ottopaikka 4. Mikrob. lab. näytteiden vastaanotto 5. Mikrob. lab. näytteiden tarkastus ja kirjaaminen
1. Näytteen arviointi näytteenottopaikalla Onko otettu laboratorion ohjekirjan ohjeitten mukaisesti oikealla tavalla oikeaan astiaan? Onko näytemäärä riittävä? Tarra- ja lähetetiedot? Lisätietoja mikrobiologian laboratoriosta!
2. Näytteen arviointi paikallisessa laboratoriossa Näyttääkö otetun laboratorion ohjekirjan ohjeitten mukaisesti? Onko näyte oikeassa astiassa? Onko astia kiinni? Onko astiassa tarra(t) ja niissä riittävät tiedot? Onko tehty lähete ja siinä riittävän näköiset tiedot? Vastaavatko lähetteen ja näytteen tiedot toisiaan? Selvästi tutkimuskelvottoman näytteen tilalle tulee yrittää saada uusi näyte!!! Lisätietoja mikrobiologian laboratoriosta! Mikrobiologian viljelynäytteet omaan pakettiin, jossa ne toimitetaan avaamatta mikrobiologian labraan asti!
3. Näytelähetyksen arviointi ks:n laboratorion näytteiden vastaanotossa Tuliko lähetys aikataulun mukaisesti? Oliko pakkaus ehjä? Reklamaatiokäytäntö? Näytteiden lämpötila kuljetuksen aikana? Hyväksymisrajat +4 - +25 C. Seurantajärjestelmä? Lämpötila-anturi? Hyväksyminen. Kriteerit, mihin näytetyyppeihin poikkeava lämpötila voi vaikuttaa. Jäätyminen ja ylikuumeneminen vaikuttavat viljelynäytteisiin! Poikkeavan tilanteen kirjaamistapa? Miten tieto saadaan yhdistettyä jokaiseen jäätyneeseen tai ylikuumentuneeseen viljelynäytteeseen? Lapulla vai atk:lla?
4. Näytelähetyksen arviointi mikrobiol. laboratorion näytteiden vastaanotossa Mikrobiologian näytepakkausten avaaminen ja kunnon tarkistaminen. Näytteet pintapuolisesti ok? Näytteiden lämpötila kuljetuksen aikana? Hyväksymisrajat +4 - +25 C. Poikkeavan kuljetuksen huomioiminen, sen näytteiden kunnon arviointi. Tieto näytteiden kirjaajille -> tutkimusvastauksen kommentiksi. Tarkempi arviointi näytteiden kirjaamisen yhteydessä.
Mikrobiologian laboratorion näytepakkausjakelu
Ulostepurkki hanskassa. Mikrobiologian laboratorioon. Potilaan ja lähettäjän tiedot puuttuvat. Tarra unohtunut!
5. Näytteen ja lähetteen arviointi näytteen kirjaamisen yhteydessä. Hyväksymis- ja hylkäämiskriteerit Näyte ja lähete Näytteelle on oltava lähete. Sähköinen tai paperinen. Näyteastiassa oltava tarra(t), joissa tarvittavat tiedot. Potilastietotarra: potilaan ja näytteen pyytäjän tiedot Lisätietotarra: anatomisen näytteenottopaikan tiedot, näytteen laatu ja näytteenottoaika. Näytteen ja lähetteen tietojen yhteen sopivuuden tarkastaminen. Tietojen riittävyys tutkimuksen suorittamiseksi? Puuttuvat näyte- ja lähetetiedot on täydennettävä ja tarkistettava näytteen ottajalta.
5. Näytteen ja lähetteen arviointi näytteen kirjaamisen yhteydessä. Hyväksymis- ja hylkäämiskriteerit Näyte ja lähete Useampi näyte samasta potilaasta. Onko ne eritelty selvästi näytteenottokohdan ja laadun perusteella? Esim. lonkkaleikkauksessa potilaasta on otettu näytteitä 10 kpl, jotka on laboratoriolle numeroitu 1,2,3, 10. Näytteenottopaikat on kirjattu leikkauskertomukseen, josta kliinikko löytää ne viljelytulosten arviointia varten. Paras käytäntö sovittava asiakkaiden kanssa!!
5. Näytteen ja lähetteen arviointi näytteen kirjaamisen yhteydessä. Hyväksymis- ja hylkäämiskriteerit Näyte ja lähete Väärän henkilön tiedot lähetteessä ja/tai näyteastiassa. Näyte tutkitaan, mutta vastataan vasta, kun näytteen ottaja on korjannut oikean potilaan tiedot, hyväksynyt tutkimuksen tekemisen ja sen tulosten vastaamisen oikealle potilaalle ja kirjallisesti ottanut vastuun tapahtuneesta.
5. Näytteen ja lähetteen arviointi näytteen kirjaamisen yhteydessä. Hyväksymis- ja hylkäämiskriteerit Näytteen laadun sopivuus pyydettyyn tutkimukseen. Saako tutkimuksen vaihtaa? Pu-BaktVi1 vai Pu-BaktVi2? Näytetyyppikohtaiset ohjeet! Viljeltävät maljat ja putket Uloste purkissa ja/vai tikussa? Tikkunäytteestä ei tehdä värjäystä.
5. Näytteen ja lähetteen arviointi näytteen kirjaamisen yhteydessä. Hyväksymis- ja hylkäämiskriteerit Näytteen viljely- ja värjäyskelpoisuuden arviointi Vanhentunut näyteastia. Tarkasta Exp day! Tyhjä näyteastia. Ei tutkimuksia. Kommentti! Jäätynyt, ylikuumentunut tai kuivunut näyte ei kelpaa viljelytutkimuksiin. Kommentti! Ylipitkä (yli 2 vrk) näytteen toimitusaika. Näyte tutkitaan, mutta vastaukseen kommentti, että tulos voi olla epäluotettava ylipitkästä toimitusajasta johtuen.
5. Näytteen ja lähetteen arviointi näytteen kirjaamisen yhteydessä. Hyväksymis- ja hylkäämiskriteerit Näytteen viljely- ja värjäyskelpoisuuden arviointi Väärin ajoitettu näyte: virtsan rakkoaika alle 4 tuntia. Siitä vastaukseen kommentti. Ulostenäyte: tutkitaan vaikka ei olisikaan juokseva. Yskös, imulima, BAL. Tutkitaan, mutta kommentti jos yli 1 vrk:n vanha näyte. Värjäyksellä näytteen laadun arviointi: märkäinen vai sylkeä!? Tubitutkimusnäytteet: otettava eri päivinä noin viikon sisällä. Säilytys viileässä. Ei mädänneitä ysköksiä!!
Toistuvasti epäkelpo näyte Näyte silmämääräisesti huono Viljelytulosten perusteella näyte ollut huono ->Yhteys näytteen ottajaan ja oikeiden näytteen ottotapojen opastus
Näytteen primaarikäsittely Värjäys ja viljelyt Näytteen mukainen viljely ja värjäyslasien tekeminen ->gram- ja akridiinioranssivärjäysten välitön tulostus ->viljelyn tarkentaminen värjäystulosten perusteella (selektiivisiä maljoja) ->värjäystulosten huomioiminen viljelmien tulkinnassa.
1000x Haavamärän gramvärjäys: Grampositiivinen kokki (ryhmäkokki?) Haavamärän aerobikasvu verimaljalla: Staphylococcus aureus
Absessimärän gramvärjäys: Grampositiivinen kokki ja gramnegatiivinen sauva Verimaljalla kasvoi vain E coli Streptokokkiverimaljalta löytyi B-streptokokki
Kudosnäytteen gramvärjäys: 1.Gramnegat sauvoja 2.Gramposit (?) itiöllisiä sauvoja Anaerobiverimalja 2 vrk Näytteestä kasvoi aerobisesti 1) Enterobacter cloacae (gramnegatiivinen sauva) ja anaerobisesti 2) Clostridium sporogenes (grampositiivinen itiöllinen sauva)
Liuskatumaisia leukosyyttejä Sauvabakteereita Akridiinioranssivärjäys (AO-värjäys) on ainakin 10-kertaa gramvärjäystä herkempi. Kuvassa gramvärjäyksessä näkyy vain leukosyyttejä kun AO-värjäyksessä erottuu myös sauvabakteereita! Näytteestä kasvoi E coli (aerobi) ja Bacteroides fragilis (anaerobi).
Kiitos mielenkiinnosta