1 Ruora-jakson mikroskopia II: Ruoansulatuskanava ja suu /H. Hervonen ja M. Airaksinen 2013 Mikrokopiatyön kulku: - Mikroskopoidaan valmisteet näyteryhmittäin monisteen ohjeen mukaan. - Täydennetään jo olemassa olevia tietoja oppikirjan avulla, keskustelemalla työparin kanssa ja opettajiin turvautuen. Keskitytään työn kuluessa esille tuleviin seikkoihin. Valmisteet ryhmittäin: I. Suun epiteelit ja ruokatorvi Valmiste 36: Rihmanystyjä Valmiste 37: Vallinysty Valmiste 42: Ikenen limakalvoa Valmiste 44: Ruokatorvi II. Hammas Valmiste 39: Kalkkiliuotettu hammas (poikkileikkaus) Valmiste 41: Hampaan aihe sikiön alaleuassa III. Suolen osat Valmiste 4: Ohutsuolta (jejunum) Valmiste 47: Pohjukaissuolta (duodenum) Valmiste 48:Ohutsuolta (ileum) Valmiste 49: Paksusuolta Valmiste 50: Umpilisäkettä Viitteet kirjaan: RP6p = Ross ja Pawlina: Histology. A Text and Atlas. Lippincott, Williams&Wilkins, 2010 I Suun epiteelit Valmiste 36: Rihmanystyjä, kieli (RP6p. s529-530; plate49a s558-9) Valmisteen kuvaus: Kyseessä on rauta-hematoksyliinivärjätty näyte kielestä. Näytteessä epiteeli erottuu harmaana ja nystyjen pinnan keratiini värjäytyy keltaiseksi. Hyvin värjäytyneessä näytteessä sidekudoksen kollageeni värjäytyy punertavaksi ja kielen lihassolujen sytoplasma keltaisiksi. Luonnollisesti vain osa nystyistä on leikkautunut edustavasti, suuri osa vain tangentiaalisesti. Epäsiistin vaikutelman antavat yhtenäisen epiteelipinnan yläpuolella näkyvät rihmanystyjen pitkien rihmojen osittaiset poikkileikkaukset. Mikroskopia: Pientä ja keskisuurennosta käyttäen tarkastele epiteelin pinnanmuodostumia: Miltä kohdin epiteelin pinnalla esiintyy keratiinia, millä kohdin ei? Mikä merkitys keratiinilla on tässä yhteydessä? Tutki epiteelin ja sidekudoksen suhdetta: Tunkeutuuko sidekudos nystyjen sisään vai ovatko nystyt puhtaasti epiteelin muodostelmia? Mikä on epiteelin alaisen sidekudoksen merkitys epiteelille? Näytteessä oleva poikkijuovainen lihas ansaitsee myös huomion: Kielen sisäisen lihaksiston monen suuntaiset lihassyykimput ovat leikkautuneet pitkittäin ja poikittain. Pitkittäin leikatuista lihassyistä näet poikkijuovat jo keskisuurennoksella, mutta tosi hienosti isolla suurennoksella. Valmiste 37: Vallinysty, kieli (RP6p. s529-530; kuva16.4c s530) Valmisteen kuvaus: Rauta-hematoksyliinivärjäys kielestä. Kudoskompponenttien värjäytyvyys sama kuin edellisessä: Epiteeli harmaa, kollageeni punertava, keratiini (ja proteiinit muutenkin) keltainen. Kielen pintamuodostelmista mukana on joitakin rihmanystyjä ja ainakin yksi selvästi erottuva vallinysty. Mikroskopia: Pienellä suurennoksella vallinysty löytyy helposti. Tarkastele sen erityisominaisuuksia keskisuurennoksella. Pinnan epiteeli: Onko päällä oleva epiteeli keratinisoitunut? Onko vallihautaa vasten olevassa epiteelissä mitään erikoista? Löytyykö makusilmuja? (RP kuva 16.5 s 481ja plate 46 s510-11) Vallihaudan pohjalle laskee von Ebnerin rauhanen (seroosi erityissylkirauhanen). Tunnista rauhasrakenteet, jotka tunkeutuvat syvällekin kielen lihassyykimppujen joukkoon. Mikä merkitys tällä rauhasella on?
2 Valmiste 42: Ikenen limakalvoa (RP6p. s527-8; kuva 16.2 s528) Valmisteen kuvaus: Hematoksyliini-eosiinivärjäys ikenestä. Näytteen toisella pinnalla on epiteeli, toinen pinta on preparoimisen jäljiltä epätasainen ja irrallisten punasolujen pilkuttama. Mikroskopia: Tarkastele epiteeliä. Miten kuvaisit sen pintaa? Onko epiteeli keratinisoitunut, parakeratinisoitunut vai keratinisoitumaton? Miten kuvaisit epiteelin ja sidekudoksen rajapintaa? Miksi tarvitaan vahva kiinnittyminen alustaan? II Hammas Valmiste 39: Kalkkiliuotetun hampaan poikkileikkaus. (RP6p. s534-545; kuva 16.16 s544) Valmisteen kuvaus: HE-värjäys. Kussakin valmisteessa on kolme poikkileikkausnäytettä hieman tasoilta. Yleensä pinnalla nähdään ohut kerros sementtiä, johon kiinnittyneenä nähdään siellä täällä periodontaaliligamentin rippeitä. Leikkeissä, jotka ovat hampaan kruunun tasolta on kiille yleensä lohjennut pois. Koska näyte on vaikea käsitellä nähdään joka valmisteessa ryppyjä, poimuja ja repeymiä, mutta myös erinomaisia kohtia - tarkastele jälkimmäisiä. Mikroskopia: Tunnista eri kerrokset: sementti, dentiini ja pulpa. Hyvästä näytteestä keskity ensin pulpaan. Peruskudoksena näet löyhän, hyytelömäisen kudoksen, jossa erotat verisuonia ja hermojakin. Pulpan laitamilla sijaitsevat odontoblastit yhtenäisenä rintamana. Dentiinissä erotat sisimpänä predentiinin, jonka värjäytyvyys on hieman kypsää dentiiniä vaaleampaa. Tutki dentiinin rakennetta: Erotatko säteittäiset juovat? Mistä ne kertovat?
3 Valmiste 41: Hampaan aihe sikiön alaleuassa (RP6p. s537-543; kuva 16.10 s540) RP s486-91, kuva 16.10. s488-9 Valmisteen kuvaus: HE-värjäys sikiön alaleuasta, joka on kalkkiliuotettu. Kyseessä on joko molaari (kaksihuippuinen hampaan aihe) tai incisiva (yksihuippuinen hampaan aihe). Kalkkiliuotuksesta huolimatta dentiini ja erityisesti kiille ovat niin paljon ympäristöään kovempia, että ne ovat repeytyneet hieman irti ympäristöstään (kuitenkin oikeilla paikoillaan). Mikroskopia: Orientoidu ensin näytteen osiin. Etsi suun limakalvon epiteeli, tunnista hampaan aihe ja sitä osittain ympäröivä kehittyvä alaleuanluu (sidekudossyntyistä hohkaluuta). Hammaspienakudosta saattaa löytyä suun epiteelin ja hampaan aiheen välimaastosta. Tutki hampaan aihetta. Erotatko kiilteen ja ameloblastit (yleensä valitettavasti repeytyneet irti kiilteestä)? Entä dentiinin ja odontoblastit? Dentiinissä näet taas juovikkuuden! Muita kudoksia: Kehittyvän sylkirauhasen tunnistat näytteestä helposti. Useissa näytteissä esiintyy alaleuanluun ja hampaan aiheen välimastossa ison verisuonen ja joskus myös ison hermon poikkileikkaus. Mikähän hermo ja verisuoni on kyseessä? III Ruokatorvi, mahalaukku ja suolikanava Yleisrakenne: (RP6p. s569-572) Valmiste 44: Ruokatorvi (RP6p. s572-4; kuvat 17.2-4; plate50 s606-7) Valmisteen kuvaus: Hematoksyliini-eosiinivärjäys. Rotan ruokatorven poikkileikkaus. Mikroskopia: Tunnista ensin eri kerrokset: epiteeli, sen alainen sidekudos ja lihaskudos. Joissakin näytteissä mukaan on tullut ruokatorven sivulla sijaitseva iso hermo, joka näkyy valmisteessa poikkileikkauksena. Mikähän hermo on kyseessä? Epiteeli on ihmisellä keratinisoitumaton, miten on tämän asian laita rotalla? Mitkä ovat kriteerit? Lihaskudoksen pitkittäisleikkautuneita osista voit määritellä onko kyse sileästä vai poikkijuovaisesta lihaksesta. Kumpaa pitäisi olla?
4 Valmiste 47: Pohjukaissuolta (RP6p. s583-597; plate59 s616-7) Valmisteen kuvaus: HE-värjäys. Rotan duodenumin poikkileikkaus. Osa näytteistä on haaleasti värjäytyneitä - siitä huolimatta parusrakenteet erottuvat. Mikroskopia: Tunnista suolen eri kerrokset. Kiinnitä erityistä huomiota muscularis mucosaen paikallistamiseen. Limakalvon rakenteet: villukset ja kryptat sijaitsevat mm:n sisäpuolella, mutta duodenumille tyypillinen rakenne: Brunnerin rauhanen sijaitsee submucosassa, mm:n ulkopuolella. Valmiste 4: Ohutsuolta (jejunum) (RP6p. s583-597; plate60 s618-9) Valmisteen kuvaus: HE-värjäys, rotan ohutsuolen poikkileikkaus. Pitkät villukset ovat osittain leikkautuneet pitkittäin, osittain poikkileikkautuneena näyttävät irrallisilta suolen lumenissa. Yhtä kaikki epiteeli ja lamina propria ovat niissä hyvin tarkasteltavissa. Epätyypillisesti osassa näytteistä esiintyy lymfaattinen kertymä erilaistuneine epiteeleineen, niitähän esiintyy tyypillisesti runsaammin ileumissa. Mikroskopia: Orientoidu näytteeseen pientä suurennosta käyttäen. Etsi eri kerrokset ja tutki mikä sektori näytteestä on edustavin lähempää tarkastelua varten. Tunnista epiteelistä eri solutyypit ja mikrovilluskerros. Mitä soluja ja rakenteita löydät villuksen lamina propriasta? Tunnista vielä muscularis mucosae, submucosan sidekudos, lihaskerrokset ja myenterisen pleksuksen harmosoluryhmät.
5 Valmiste 48: Ohutsuolta (ileum) (RP6p. s583-597; plate61 s620-1) Valmisteen kuvaus: HE-värjäys. Näytteenä pala ihmisen ileumin seinämää - suolen seinämän eri kerrokset siis löytyvät näytteestä, vaikka paikoin limakalvo onkin irronnut submucosasta ja lihaskerroksista. Lisäksi näyte on käpertynyt siten, että limakalvo on näytteen kuperalla puolella. Mikroskopia: Limakalvon yleistarkastelussa kiinnitä huomiotasi villusten määrään ja pituuteen. Tarkemmassa tarkastelussa löydät kryptojen pohjalta Panethin solut (RP kuva 17.24 s542), joiden eritejyväset värjäävät solujen apikaaliosat eosinofiilisesti. Muutkin tälle epiteelille tyypilliset ominaisuudet ovat tarkasteltavissa tässä näytteessä. Valmiste 49: Paksusuolta (RP6p. s597-601; plate62 s622-3) Valmisteen kuvaus: HE-värjäys. Näytteenä pala ihmisen paksusuolen seinämää. Edellisen, valmiste 48:n kaltainen valmiste. Vertaa rakenteita keskenään. Mikroskopia: Tutki limakalvoa ja submucosaa. Löydätkö villuksia? Mitkä ovat epiteelin vallitsevat solutyypit? Tunnista muscularis mucosae. Löydätko lymfaattisia kertymiä submucosasta? Jatkuvatko ne mucosaan asti? Valmiste 50: Umpilisäkettä (RP6p. s601; plate63 s624-5) Valmisteen kuvaus: HE-värjäys, joko rotan umpilisäkkeen poikkileikkauksesta tai pitkittäisleikkaus. Mikroskopia: Umpilisäkkeelle tyypilliset lymfaattisen kudoksen kertymät erottuvat selkeästi submucosassa ja mucosassa.