Referenssimenetelmä, mikä se on?
Määritelmä Referenssimenetelmällä tarkoitetaan menetelmää, jonka arvioitu mittaustarkkuus on pieni verrattuna sen loppukäytön vaatimuksiin. Referenssimenetelmän tarkkuus on aina osoitettava jäljitettävästi vertaamalla sitä joko definitiivimenetelmään tai primääri referenssimateriaaliin. (IUPAC 1995)
Referenssimenetelmiin (RM) liittyviä avainasioita RM liittyy läheisesti kemian metrologiaan Virhekonsepti tunnettava, mittausepävarmuus arvioitava GUM-periaatetta käyttäen Accuracy = Trueness + Precision (huom. kval. konsepti) Jäljitettävyys osoitettava (vrt. mittausepävarmuus) Tunnettava mittausmenetelmien metrologinen hierarkia RM:ien yksi tärkeimmistä käyttöalueista on referenssimateriaalien karakterisointi
Mittausmenetelmien metrologinen hierarkia Jäljitettävyys Rutiinimenetelmät n. 5-10% Referenssimenetelmät n. 1-3 % Definitiivimenetelmät n. 0.1 1% SI Mittausepävarmuus Bias
Tunnetut primääri mittausmenetelmät (definitiivimenetelmät) ID-MS gravimetria titrimetria kulometria jäätymispisteen aleneman mittaaminen Referenssiehdokasmenetelmiä useita
Referenssimenetelmien kehityksestä ID-MS menetelmänä käytössä 1970- luvulta lähtien uranuurtajina Cali, Uriano, Velapoli, Hannestad, Lundblad jne. ID-MS-menetelmien ominaisuuksia mm. erinomainen herkkyys, selektiivisyys, pieni häiriöalttius EU:n standardointikomitea määritteli referenssimittausmenetelmän kuvaamisen 1998 standardissa EN 12286
Referenssimenetelmien (materiaalien) kehityksestä (2) Nykyiset vahvistetut kansainväliset standardit ISO 15193 In vitro diagnostic medical devices - Measurement quantities in samples of biological origin - Presentation of reference measurement procudures ISO 15194 In vitro diagnostic medical devices - Measurement quantities in samples of biological origin - Description of reference materials SFS-EN ISO 15195 Kliininen laboratorio. Referenssimittauslaboratorioiden vaatimukset
Referenssimenetelmien tarve Mittaamisen tarkoitus on kuvata tutkittavan materiaalin tiettyä ominaisuutta Kliinisessä kemiassa rutiinimenetelmien tarkkuuden tärkeys on tiedostettu pitkään Diagnostiikassa käytetyistä n. 400-600 IVD-sovelluksesta vain noin 30:llä on metrologinen jäljitettävyys SI-yksikköön EQA-tavoitearvojen määrittäminen Menetelmien välisten todellisten erojen tutkimiseksi ja tulostasojen harmonisoimiseksi tarvitaan referenssimenetelmiä sekä kansainvälinen järjestäytynyt verkosto, joka koordinoi koko hanketta
Metrologisesta jäljitettävyydestä vastuulliset organisaatiot CCQM General Conference on Weights and Measures BIPM International Bureau of Weights and Measures NMI National Metrology Institute ARML Accredited reference measurement laboratory ML Manufacturer s laboratory
Kansainvälistä aktiviteeteistä JCTLM Joint Committee of Traceability in Laboratory Medicine 2002 lähtien Yhteistyöjulistus BIPM:n, IFCC:n ja ILACin välillä Päätehtävä on ylläpitää tietokantaa referenssimittausjärjestelmästä JCTLM:n Internet-sivustolla sekä kehittää ja ylläpitää kansainvälistä verkostoa asian ympärillä
JCTLM:n tietokannasta Isotope dilution mass spectrometry method for testosterone in blood plasma DGKC definitive method for serum testosterone Applicable matrice(s) Full description of technique(s) Quantity Applicable range Expected uncertainty (level of confidence 95%) lyophilized, fresh, or frozen human serum or plasma ID/GC/MS Amount-of-substance concentration 2 nmol/l to 45 nmol/l 1 % to 3 % Reference(s) Siekmann et al., J. Steroid Biochem., 1979, 11, 117-123 Comment(s) JCTLM DB identification number NRMeth 60 The expanded uncertainty is relative
JCTLM:n tietokannasta Isotope dilution mass spectrometry method for cholesterol in blood plasma DGKC definitive method for serum cholesterol Applicable matrice(s) Full description of technique(s) Quantity Applicable range Expected uncertainty (level of confidence 95%) lyophilized, fresh, or frozen human serum or plasma ID/GC/MS Amount-of-substance concentration 2 mmol/l to 10 mmol/l 0.5 % to 1.5 % Reference(s) Siekmann et al., Z. anal. Chem., 1976, 279, 145-146 Comparability assessment study(ies) Metrologia, 2004, 39, Tech. Suppl., 08001 Comment(s) JCTLM DB identification number NRMeth 46 The expanded uncertainty is relative
JCTLM:n tietokannasta Spectrophotometry method for glucose in blood serum CDC Hexokinase reference method for glucose Applicable matrice(s) Full description of technique(s) Quantity Applicable range Expected uncertainty (level of confidence 95%) human serum Spectrophotometry Amount-of-substance concentration 2.78 mmol/l to 22.2 mmol/l 0.39 % Reference(s) Neese, JW, et al., HEW Pub No. (CDC) 77-8330, HEW, USPHS, CDC, 1976 Comment(s) JCTLM DB identification number NRMeth 34 The expanded uncertainty is relative
Edellytyksiä nimetylle referenssilaboratoriolle/menetelmälle akkreditoitu laboratorio standardien ISO/IEC 17025 ja/tai ISO 15189 mukaan referenssimenetelmä tai referenssiehdokasmenetelmä dokumentoitu kansainväliset kriteerit täyttäen JCTLM:n kriteerit dokumentaation suhteen täyttävä