VIERITESTAUS L3S RYHMÄOPETUS, SYKSY 2012 Kliiniset opettajat: Kristina Hotakainen ja Päivi Lakkisto Sisältö Omien laboratoriotulosten tulkinta Vieritestauksessa huomioitavia asioita Ihopistosnäytteen ottaminen Vieritestaus demonstraatio ja oma harjoittelu Tutustutaan muutamiin käytössä oleviin vieritesteihin ja niiden suoritukseen, käyttöön, tulkintaan ja mahdollisiin ongelmiin
Omien tulosten tulkinta Täydellinen verenkuva 2475 B -PVKT+TKD Sisältää pienen verenkuvan (B-Eryt, B-Leuk, B-Hb, B-HKR, E-MCH, E- MCHC, E-MCV, E-RDW, B-Tromb) + leukosyyttien erittelylaskennan (B-Neutr, B-Lymf, B-Mono, B-Eos, B-Basof) Raudanpuuteanemian tutkimukset 4826 P -Ferrit, Ferritiini, matala raudanpuuteanemiassa 4720 P -TfR, Transferriinireseptori, koholla raudanpuuteanemiassa tai jos erytropoieesin aktiivisuus lisääntynyt Maksatutkimukset 1024 P -ALAT, koholla maksasoluvauriossa 4587 P -AFOS, maksaperäinen AFOS koholla erityisesti sappistaasissa 4597 P GT, koholla mm. sappistaasissa Omien tulosten tulkinta Munuaistutkimukset 4600 P Krea, Kreatiniini, koholla munuaisten vajaatoiminnassa 4507 P KysC, Kystatiini C, koholla munuaisten vajaatoiminnassa 4534 P Urea, koholla munuaisten vajaatoiminnassa Elektrolyytit 3622 P Na, neste- ja elektrolyyttitasapaino 1999 P K, neste- ja elektrolyyttitasapaino Muita 4589 P Amyl, Amylaasi, koholla akuutissa pankreatiitissa 4533 P Uraat, Uraatti, usein koholla kihdissä 4586 P Alb, Albumiini, käytetään nestetasapainon, maksan ja munuaisten tilan, ravitsemustilan, akuutin faasin reaktioiden ja eräiden yleissairauksien seurantaan 4594 P CRP, koholla tulehduksessa
Vieritestauksessa huomioitavaa Vieritesti tehdään lähellä potilasta, tulos saadaan nopeasti Patientnära test, Bedside test, Point of care test Testille oltava lääketieteellinen syy! Välitön vaikutus potilaan hoitoon Tulos tarvitaan nopeasti (päivystys, ambulanssi) Laitteen oltava käyttötarkoitukseen sopiva Tuloksen pitää olla yhtä luotettava kuin laboratoriotestin Laitteen validointi tai verifiointi ennen käyttöönottoa Jatkuva käytönaikainen laadunvarmistus (sisäinen ja ulkoinen) Laitteen käyttäjien koulutus (myös potilaan koulutus jos potilaalla käytössä oma laite) Vieritestauksessa huomioitavaa Tuloksen jäljitettävyys Kenen tulos; potilaan tunnistaminen Kuka ottanut ja analysoinut näytteen Tuloksen kirjaaminen potilastietojärjestelmään ellei se siirry suoraan ATK:lle! Virhelähteet muistettava tuloksia tulkitessa! Näytteenotto Suoritus Ristireaktiot Testin käyttöindikatio ja rajoitukset
Ihopistosnäyte Aiempi nimi: kapillaarinäyte Sisältää kapillaarien, pienten arteriolien ja pienten venulien verta sekä interstitiaalinestettä (kudosnestettä) ja intrasellulaarinestettä (solunsisäistä nestettä) Koostumus poikkeaa esim. laskimo ja valtimonäytteiden koostumuksesta, mutta on lähempänä valtimonäytteen kuin laskimonäytteen koostumusta Käytetään aikuisilla mm. useissa vieritesteissä (POC-testeissä), esim. Hb tai glukoosi, lapsilla voi korvata laskimonäytteen joissain tutkimuksissa Ihopistosnäyte Vastasyntyneiltä ja alle 5 kg painoisilta kantapäästä Isommilta lapsilta ja aikuisilta ei-dominantin käden sormenpäästä (Ensisijaisesti nimettömästä tai keskisormesta, kärkijäsenen sivulta) Kuva 2.1 Laboratoriolääketiede kliininen kemia ja hematologia 2010
Ihopistosnäyte Pisto tehdään automaattilansetilla, joka tekee viiltohaavan Verenkierron parantamiseksi voidaan pistokohtaa ensin lämmittää Ensimmäinen pisara pyyhitään pois. Sormea puristetaan sen tyvestä näytteen saamiseksi. Vältettävä voimakasta puristusta erityisesti pistokohdan läheisyydessä, koska se voi aiheuttaa hemolyysiä ja näytteen kontaminoitumista kudosnesteellä tulokset saattavat vääristyä. Testit, joiden suoritukseen ryhmäopetuksessa tutustutaan Glukoosi Hemoglobiini Virtsan liuskatesti INR
Glukoosi Yksi tavallisimpia vieritestejä, suurin osa potilaiden itsensä tekemiä mittauksia Ryhmäopetuksessa HEMOCUE Glucose 201+ -laite Mittausmenetelmä: muunneltu glukoosidehydrogenaasi-menetelmä Reagenssit valmiina näytekyvetissä Näyte: Kapillaarinäyte tai laskimonäyte (EDTA tai hepariini) Näyte analysoitava mahdollisimman pian näytteenoton jälkeen Laitteen mittausalue 0 24.6 mmol/l Jos tulos ylittää 24.6 mmol/l, laite ilmoittaa koodin HHH tai overrange. (Laite saattaa antaa mittausalueen ylittävän tuloksen jälkeen virheellisesti seuraavan määrityksen tulokseksi 0 mmol/l. Tällaisessa tilanteessa sammuta laite, käynnistä uudelleen ja uusi määritys.) Laitteen säännöllinen puhdistus tärkeää: laitteen sisään joutunut veri voi aiheuttaa huomattavankin virheen tuloksiin! Mittausta häiritseviä tekijöitä: veren korkea glukoosiamiinipitoisuus (>90 mg/dl), erittäin lipeeminen näyte, kokoverinäytteen methemoglobiini-pitoisuus yli >10 % Glukoosi testin suoritus Vedä kyvettipidike ulos valmiustilaan Kytke virta (vasen näppäin) Kun näyttöön ilmestyy kolme vilkkuvaa viivaa, laite on valmis mittaukseen Ihopistosnäyte mikrokyvettiin potilaan sormenpäästä tai kantapäästä Tee pistos lansetilla Pyyhi kolme ensimmäistä pisaraa pois (yksi pisara jos veri ei tule vuolaasti) Ota näyte neljännestä veripisarasta Vie kyvetin kärki keskelle pisaraa ylhäältä päin suorassa asennossa ja varmista, että kyvetin kärki pysyy veripisaran sisällä koko näytteenoton ajan. Pidä kyvettiä pisarassa kunnes kyvetin koko reagenssialue täyttyy ja vielä hetki tämän jälkeenkin. Kyvetin on täytyttävä yhdellä kertaa. Älä yritä täyttää kyvettiä uudestaan Pyyhi kyvetin ulkopinnat molemmin puolin Tarkista, ettei kyvetissä ole ilmakuplia! Jos mittausalueella on ilmakuplia, ota uusi näyte. Aseta kyvetti pidikkeeseen ja työnnä pidike laitteen sisään (mittausasento). Ennen mittausta kyvetti on säilytettävä vaaka-asennossa. Verellä täytetty kyvetti on mitattava 40 sekunnin kuluessa sen täyttämisestä! Glukoosipitoisuus on luettavissa 40-240 sekunnin kuluessa näytöltä. Tulos jää näyttöön niin pitkäksi aikaa, kun kyvettipidike on mittausasennossa.
Hemoglobiini Tavallisin vieritesti Ryhmäopetuksessa HEMOCUE Hb 201+ -laite Mittausmenetelmä: muunneltu atsidimethemoglobiini-menetelmä Reagenssit valmiina näytekyvetissä Näyte: kapillaariverinäyte Mittaus mieluiten mahdollisimman nopeasti kapillaarin täyttämisestä, mutta viimeistään 10 min kuluessa (Voidaan tehdä myös laskimonäytteestä (EDTA tai hepariini)) Laitteen mittausalue 0 256 g/l (Tuloksen ylittäessä 256, näyttöön ilmestyy koodi HHH) Seuraavat tekijät EIVÄT häiritse määritystä Triglyseridit alle 11 mmol/l Bilirubiini alle 680 mol/l Leukosyytit alle 600 x 10 9 /l Hemoglobiini testin suoritus Vedä kyvettipidike ulos valmiustilaan Kytke virta (vasen näppäin) Kun näyttöön ilmestyy kolme vilkkuvaa viivaa, laite on valmis mittaukseen Ihopistosnäyte mikrokyvettiin potilaan sormenpäästä tai kantapäästä Tee pistos lansetilla Pyyhi kolme ensimmäistä pisaraa pois (yksi pisara jos veri ei tule vuolaasti) Ota näyte neljännestä veripisarasta Vie kyvetin kärki keskelle pisaraa ylhäältä päin suorassa asennossa ja varmista, että kyvetin kärki pysyy veripisaran sisällä koko näytteenoton ajan. Pidä kyvettiä pisarassa kunnes kyvetin koko reagenssialue täyttyy ja vielä hetki tämän jälkeenkin. Kyvetin on täytyttävä yhdellä kertaa. Älä yritä täyttää kyvettiä uudestaan Pyyhi kyvetin ulkopinnat molemmin puolin Tarkista, ettei kyvetissä ole ilmakuplia! Jos mittausalueella on ilmakuplia, ota uusi näyte. Aseta kyvetti pidikkeeseen ja työnnä pidike laitteen sisään (mittausasento). Ennen mittausta kyvetti on säilytettävä vaaka-asennossa. Verellä täytetty kyvetti on mitattava 10 min kuluessa sen täyttämisestä! Hemoglobiinipitoisuus on luettavissa 15-60 sekunnin kuluessa näytöltä. Tulos jää näyttöön niin pitkäksi aikaa, kun kyvettipidike on mittausasennossa.
Virtsan liuskatesti 1881 U-KemSeul: leukosyytit, glukoosi, proteiini, ketoaineet, hemoglobiini, nitriitti, ph, suhteellinen tiheys Päivystyksessä usein ainoa saatavilla oleva virtsan perustutkimus Seulontaliuska, laboratoriossa luenta reflektanssifotometrillä Ryhmäopetuksessa Multistix 8 SG liuskat, Clinitek Status laite Näytteen edustavuus tärkeä! Vakioitu näyte luotettava Vakioimaton näyte (esim. kertanäyte, laimea tai väärin säilytetty): tulkintaan suhtauduttava varauksella. Edustavassa näytteessä suhteellinen tiheys yli 1.015. Makroskooppisesti veristä virtsaa ei kannata tutkia Näyte otetaan säilöntäaineettomaan putkeen Näyte säilyy jääkaappissa 24 tuntia, huoneenlämmössä 8 tuntia Jos liuska luetaan visuaalisesti tulos on suuntaa antava! Tulosten tulkinta Hb: hematurian seulonta. Herkkyys n. 10 solua x 10 6 /l sentrifugoimatonta virtsaa = n. 1-2 punasolua/ näkökenttä. Positiivisena vaatii aina jatkoselvittelyitä. Leukosyytit: pyurian osoittaminen. Herkkyys n. 2 (-4) granulosyyttiä/näkökenttä (n. 20 x 10 6 /l sentrifugoimatonta virtsaa). Vastaavuus ei ole kovin tarkka johtuen leukosyyttien hyvin nopeasta hajoamisesta virtsan epäfysiologisessa ympäristössä. Proteiini: seuloo munuaistauteja. Mittaa pääasiassa virtsan albumiinia. Herkkyysraja n. 0.2 g/l, herkkyys ei riitä diabeettisen tai esim. hypertoniaan liittyvän munuaisvaurion varhaistoteamiseen. Nitriitti: bakteriurian osoittaja (vähintään 10 5 /ml organismia). Havaitsee vain pääasiassa gram-negatiivisia bakteereja, jotka pelkistävät nitraatteja nitriiteiksi (E. coli). Pelkistysreaktioon tarvitaan riittävä inkubointiaika (tunteja) rakossa. Glukoosi: diabeteksen seulonta ja seuranta päivystystilanteessa. Muuten seurannassa käytetään veren glukoosia. ph: merkitystä lääkeaineiden, myrkkyjen ja niiden metaboliittien poistumisen sekä happoemästaseen seurannassa ja virtsatiekivien hoidossa. Ketoaineet: osoittaa lähinnä asetoasetaattia. Käytetään diabeteksen ja munuaissairauksien toteamisessa ja seurannassa, erityisesti raskauden aikana. Ketoainetestistä saadaan helposti heikosti positiivisia tuloksia paaston aikana.
Seulontaliuskojen ominaisuuksia ja virhelähteitä Osatutkimus Väärä positiivinen tulos Väärä negatiivinen tulos U Gluk-O - Hapettavat pesuaineet. - C-vitamiinin runsas käyttö. (Näytteen askorbiinihappopitoisuus yli 300 mg/l voi aiheuttaa negatiivisen tuloksen, jos näytteessä on pieni määrä glukoosia (4 7 mmol/l)). - Virtsatieinfektio, jossa bakteerit käyttävät glukoosin. U Keto-O - Sulfhydryyliryhmiä sisältävät lääkeaineet (mm. kaptopriili, L- dopa) - Värilliset virtsat. - Näytteen virheellinen säilytys. - Liuskakoe ei totea asetonia eikä beetahydroksivoihappoa --> ei sovellu ketoosin kvantitointiin. U Hb-O - Mittaa hemoglobiinia ja myoglobiinia, korkeat pitoisuudet aiheuttavat positiivisen tuloksen. - Mikrobien peroksidit. - Hapettavat pesuainejäämät (mm. hypokloriitti). - C-vitamiinin runsas käyttö. - Hyvin konsentroitunut näyte. - Näytteen korkea nitriittipitoisuus. U Prot-O - Emäksinen virtsa (ph > 9). - Voimakkaasti puskuroitu virtsanäyte. - Kvaternäärisiä ammoniumyhdisteitä sisältävät virtsanäytteet. - Puhdistusainejäämät (klorheksidiini). - Liuska ei reagoi kaikkien virtsaan erittyvien proteiinien kanssa (mm. tubulaariset proteiinit, immunoglobuliinien kevyet ketjut). - Värillinen virtsa (mm. punajuuren värjäämä) Seulontaliuskojen ominaisuuksia ja virhelähteitä Osatutkimus Väärä positiivinen tulos Väärä negatiivinen tulos U Nitr-O - Virtsaa värjäävät lääkkeet (mm. fenatsopyridiini) - punajuuri - Bakteerien kasvu huoneenlämmössä säilytetyssä näytteessä - Kaikki VTI:n aiheuttajabakteerit (muu kuin E. coli) eivät muuta nitraattia nitriitiksi. - Niukasti kasviksia sisältävä, nitraattiköyhä ruokavalio. - Näytteen rakkoaika liian lyhyt. - C-vitamiinin runsas käyttö. (Näytteen askorbiinihappopitoisuus yli 750 mg/l voi aiheuttaa väärän negatiivisen tuloksen, jos näytteessä on nitriittiä 1 mg/l tai vähemmän.) U Leuk-O - Hapettavat pesuainejäämät. - Voimakas väri virtsassa (punajuuret, verisyys). - C-vitamiinin runsas käyttö. - Lääkitys (kefalosporiini, kefaleksiini, gentamysiini,nitrofurantoiini, tetrasykliini). - Näytteen korkea proteiini- ja glukoosipitoisuus (yli 160 mmol/l). - Liian tuore näyte (alle 15 min). - Näytteessä on lymfosyyttejä, jotka eivät sisällä esteraasia.
Virtsan liuskatesti testin suoritus Näytteet tutkitaan huoneenlämpöisinä Näyte sekoitetaan juuri ennen analysointia Näytteen annattava seistä väh. 15 min antamisen jälkeen. Mittaus 30 min kuluessa näytteen annosta ellei näytettä siirretä näytteenottoastiasta säilöntäaineettomaan virtsaputkeen Tarvikkeet valmiiksi Laite käynnistetään strip test start tästä 8 sekuntia aikaa kastaa liuska ja asettaa se koneen liuskauraan Testiliuskan oikea kastaminen Kaikki tyynyt kastuvat Vedetään pois liuskan reuna näyteastian reunaa vasten Liuskan pohjan/reunan kuivaus esim. käsipyyhkeeseen Liuska nopeasti pidikkeeseen! Liuskapidikkeen puhdistus/ kuivaus mittauksen jälkeen
INR-vieritestaus Varfariinihoito (Marevan ) vaatii säännöllistä seurantaa INRmittauksin Mitataan tromboplastiiniaikaa, mutta laite antaa tuloksen valmiiksi laskettuna INR-arvona INR = (a/b) (ISI) jossa a=näytteestä mitattu (potilaan) hyytymisaika, b=reagenssierän keskimääräinen normaali hyytymisaika ja ISI=reagenssin herkkyyttä kuvaava indeksi Hoitoalue 2.0-3.0 (2.5-3.5) Tulos alle 2 = tukosriski kasvaa Tulos yli 3 = vuotoriski kasvaa Menetelmä vieritesteissä: ns. Quickin menetelmä INR-vieritestaus Hyvin toteutettuna INR-vieritestaus parantaa varfariinihoidon tehoa ja turvallisuutta. Vieritestaus ei sovellu hoidon aloitusvaiheeseen, vasta stabiilissa vaiheessa Kotisairaanhoidossa enenevästi käytössä, myös INRpoliklinikat, lapset, muu omaseuranta rajoitetusti Näytteenotto ja näytteen lisääminen näyteliuskalle vaativaa ja tuloksen kannalta kriittistä käyttäjien ohjeistus ja laadunvarmennus oleellisen tärkeitä!
INR testin suoritus Kädet pestään lämpimällä vedellä Laite tasaiselle alustalle ja virta päälle Liuska laitteeseen Tarkistetaan liuskaerän oikea koodi Jos koodi on oikein, painetaan M-napista, laite lämmittää liuskan Kun liuska lämmennyt, on 180 s aikaa ottaa näyte EI käytetä DESINFIOINTIAINETTA! Pyyhkäistään pistokohta kuivalla lapulla. Tutkimus tehdään ENSIMMÄISESTÄ PISARASTA! Veripisara saatava liuskalle 15 s kuluessa pistosta (ennen kuin hyytyminen käynnistyy) Laite aloittaa mittauksen jos liuskalle on saatu riittävä määrä verta tulos tulee näytölle Lopuksi vieritestien harjoittelu 2-3 henkilön ryhmissä.