Sydän, verenkierto ja munuainen FARMAKOLOGIAN KURSSITYÖ
Sydän, verenkierto ja munuainen jakso: FARMAKOLOGIAN KURSSITYÖ Farmakologian kurssityössä tutustutaan verisuonen tonuksen fysiologiseen säätelyyn ja siihen vaiku7aviin lääkeaineisiin. Verisuonen sileälihaksen tonukseen vaiku7avat verenkierrossa kulkevat aineet, fysikaaliset ja kemialliset ärsykkeet (kuten verenpaineen muutokset, hankauskulutus, ph, hypoksia), verisuonen sisäkerroksen eli endoteelin tuo7amat aineet sekä ionikanavissa tapahtuvat muutokset. Lisäksi useat sairaudet, kuten kohonnut verenpaine, diabetes ja sepelvalbmotaub, vaiku7avat verisuonen toimintaan. Kurssityössä demonstroidaan rotan aortasta valmistetun suonirenkaan supistusta ja relaksaabota elinhaudesysteemissä. Aor7apreparaaE on kyvebssä koukkujen varaan kiinnite7ynä. KyveBssä on glukoosia ja elektrolyy7ejä sisältävää Krebsin ringer- liuosta, jota kuplitetaan hapensaannin turvaamiseksi. Käyte7ävät reagenssit pipetoidaan suoraan kyveein. Koukut on yhdiste7y jännitysblaa mi7aavaan anturiin jonka mi7aama jännityksen muutos on nähtävillä mi7alai7een monitorista. Anturi Suoni
Kurssityössä käyteeävät aineet: asetyylikoliini (ACh) angiotensiini I (Ang I) angiotensiini II (Ang II) kaptopriili (Kapto) losartaani (Lo) noradrenaliini (NA) nifedipiini (Nif) natriumnitroprussidi (SNP) Työn suoritus Jokaiselle työparille tulee käy7öön kaksi verisuonipreparaaea (KyveBt A ja B). PipetoinB tehdään kurssityömonisteen antamassa järjestyksessä. Pipetoitaessa varo7ava antureihin kytke7yjä koukkuja. Vaihe 1: Pipetoi kyveein A) 10 µl Noradrenaliini (10-4 M) à 0,1 µm pitoisuus kyvebssä. NA 0,1 µm Pipetoi kyveein B) 10 µl Kaptopriili (10-2 M) - > anna vaiku7aa. Vaihe 2: KyveEin A) 10 µl Asetyylikoliini (10-3 M) (vaiheessa 1 oli pipetoitu NA 10-4 M) (NA 10-4 M) + ACh 1 µm
Huuhtele kyvee A) ringerillä. (EI kyvee B!) KyveE tyhjennetään ja täytetään kontrollilaabkon kyveeä vastaavan numeron kytkimistä. Varo ylivuotoa. Kysymyksiä: Mitä kliinisiä vaikutuksia erilaisilla α ja β - reseptoreihin vaiku7avilla lääkeaineilla on? Miten adrenaliini vaiku7aa verisuoniin, sydämeen ja keuhkoihin? Vaihe 3: KyveEin A) 10 µl Angiotensiini I (10-3 M) Ang I 1 µm KyveEin B) 10 µl Angiotensiini I (10-3 M) (vaiheessa 1 oli pipetoitu 10 µl kaptopriili 10-2 M) (Kapto 10 µm) + Ang I 1µM
Vaihe 4: KyveEin B) 10 µl Angiotensiini II (10-3 M) (vaiheessa 1 oli pipetoitu Kapto ja vaiheessa 3 Ang I) (Kapto 10 µm +Ang I 1 µm ) + Ang II 1 µm Vaihe 5: KyveEin A) 10 µl Nifedipiini (10-2 M) (Ang I 1 µm) + Nif 10 µm KyveEin B) 10 µl Nitroprussidi (10-3 M) (Kapto 10 µm +Ang I + Ang II) + SNP 1 µm Huuhtelu ringerillä x 2 (A&B)
Kysymyksiä: Miksi nitro laajentaa verisuonia asetyylikoliinia tehokkaammin? Miksi nitro ei tarvitse endoteelia vaiku7aakseen? Miten nitro au7aa angiinakohtauksessa? Miksi kalsiumsalpaaja vaiku7aa jo supistuneeseen suoneen? Mihin elimistö tarvitsee angiotensiinia ja mitkä tekijät säätelevät sen tuotantoa? Vaihe 6: Ylimääräisiin kyve7eihin (Kurssityön pitäjät tekevät) 10 µl Angiotensiini II (10-3 M) + 10 µl losartaani (10-2 M) Käsittely Ang II 1 µm + (Los 10 µm) 200 µl Kaliumkloridi (KCl, 3 M) KCl 30 mm Huuhtelu ringerillä x 2 Kysymyksiä: Mitä käytännön eroa on ACE- estäjillä ja AT 1 - reseptorisalpaajilla? Mitä kliinistä käy7öä kaliumkloridilla on?