Lumpy skin disease uusi uhka Euroopan karjataloudelle

Transkriptio

1 Lumpy skin disease uusi uhka Euroopan karjataloudelle Eeva Tuppurainen, DVM, MSc, PhD, MRCVS Veterinary Expertise for Controlling Lumpy skin disease, Sheeppox and Goatpox

2 Johdanto Taloudellisesti merkittävä ja helposti ylirajojen leviävä naudan rokkotauti Tehokas torjunta on äärimmäisen vaikeaa ilman laajamittaista rokotuskampanjaa Luokiteltu World Organization for Animal Health(OIE) ilmoitettavien eläintautien joukkoon Aiheuttaja: Lumpy skin disease virus (Capripoxvirus-sukuun, Poxviridaefamily) Muut Capripox-suvun virukset: Sheeppox virus and Goatpox virus Vakaa, suuri kaksi-juosteinen DNA virus, vaipallinen tai vaipaton 90% infektiivisistä viruksista pysyy solujen sisällä suojassa vasta-aineilta Sitkeä virus, selviää hyvin vaihtelevissa olosuhteissa, kestää hyvin kuivumista, ph vaihtelua, jäätymistä ja sulamista

3 Taloudelliset tappiot Tilatasolla: Maidon tuotanto romahtaa ja usein mastiittia Sairas eläin näivettyy ja lihan tuotanto laskee Rokot parantuu arpikudosta muodostamalla, mikä pilaa nahan/vuodan arvon nahkateollisuudessa Sonneilla, lehmillä ja hiehoilla esiintyy hedelmällisyysongelmia and tiineillä eläimillä infektion alkuvaiheessa luomista Kuukausien toipumisaika ja epävarmaa palaako tuotanto enää tautia edeltävälle tasolle Valtakunnallisella tasolla: Sekä taudinpurkauma, että elävän rokotteen käyttö aiheuttaa rajoitteet elävien nautaeläinten sekä nautasta peräisin olevien tuotteiden viennille (EU Directiivi 92/119/EEC) Taudin torjunta kallista Infektoituneet karjat täytyy teurastaa ja massivinen rokotuskampanja Aktiivinen kliininen seuranta ja laboratorio tutkimukset Epäsuorat vaikutukset: eläinten siirrot ja kuljetukset

4 Maantieteellinen levinneisyys Endeminen Afrikassa ja myös monessa Lähi-idän maassa Todennäkoisesti tautia esiintynyt Lähi-Idässä jo pitkään, mutta sitä ei ole raportoitu Vuodesta 2012 LSD levinnyt massiivisesti läpi koko itäisen Välimeren alueen, Lähi-idässä ja Kaukasian maissa Syria, Israel, Libanon, Jordania, Saudi Arabia, Kuwait, Irak ja Iran Turkki, Kyproksen pohjoisosa, Azerbaijan, eteläisen Venäjän osavaltiot Georgia, Dagestan and Chechnya Vuonna 2015 ensimmäiset taudinpurkaukset Kreikassa Nyt tautia myös Bulgariassa ja FYRO Macedoniassa Toukokuu LSD leviää jo nyt ja ei edes vielä vektorien pahin aika

5 Lumpy skin disease ja Lähi-itä Yksittäisiä taudinpurkaumia raportoitu jo vuodesta 1998 Merkittävä elävien nautojen tuoja mm Afrikan Sarven alueelta Lähi-idässä hyvät olosuhteet vektorivälitteisen LSD taudin leviämiselle koska: Nautapopulaatio keskittynyt suhteellisen pienelle hedelmälliselle alueelle jokien varsille ja suistoihin, missä runsaat kausittaiset sateet, seisova vesi ja kuuma ilmasto suosii vertaimevien vektoreiden lisääntymistä Lakisääteisten tuontivaatimusten valvonta on tehotonta, eläimet tuodaan avoimille karanteeni asemille vastaanottaja maassa, eläimet eivät ole suojassa hyönteisiltä, karanteeni asemat yksityisessä omistuksessa Lähi-idässä vaikea kontrolloida eläinten liikkumista, yhteislaitumet ja paimentolaiset Vuodesta 2011 sota Syriassa and Irakissa johtanut hallitsemattomaan pakolaisvirtaan ja usein pakolaiset matkustaa rokottamattomien kotieläinten kanssa, myyden naudat rajalla edulliseen hintaan

6 Kliiniset oireet Inkubaatio aika 4-7 päivästä viiteen viikkoon Vireeminen vaihe alkaa kuumepiikillä, eläin ei syö ja maitoa ei heru Rokot alkavat ilmestyä, mutta niitä on alussa vaikea havaita, varsinkin jos eläimillä on pitkä talvikarva Rokkojen läpimitta 1-5 cm, pään alueelta helpompi huomata, voi sijaita missä vaan keholla Imusolmukkeet selvästi suurentuneet (varsinkin prescapular and precrural) Kuolaa, silmä- ja sierainvuotoa Rokkomuutoksia suun, nenän ja silmien limakalvoilla Ontumista ja turvotuksia jaloissa, varsinkin nivelien kohdilla Helluvaisen turvotusta Eläinkokeissa kaikki eläimet tulevat vireemiseksi, vaikka kaikille ei tule ihomuutoksia tai muita ulkoisia oireita

7 LSD tyypilliset ihomuutokset Ihorokot helppo huomata lypsylehmillä, lihakarjalla voi jäädä havaitsematta jopa viikoiksi Rokkoja voi olla vain muutama tai ne voivat peittää koko vartalon Viikossa kahdessa ihomuutoksen päälle alkaa muodostua rupi, joka lähtee ajastaan ja jättää paikalle avoimen haavauman, umpeutuu pian, mutta on altis kärpäsille Joskus ihomuutokset jäävät paikoilleen pitkäksi aikaa (sitfasts) Rokkoja voi olla myös silmän sarveiskalvolla

8

9

10

11

12

13

14 Erotusdiagnostiikka Pseudo lumpy skin disease; BHV-2 (Bovine herpes virus- 2) ihomuutokset pinnallisemmat ja taudin kesto lyhyempi Parapox (bovine papular stomatitis)vain suun limakalvoilla Hyönteisten puremat ja urtikaria Varhaiset sieni-infektioden (ringworm) aiheuttamat muutokset Demodicosis Besnoitiosis (esiintyy laajalti Afrikassa, viime aikoina myös Keski- ja Länsi-Euroopassa) Onchocerciosis Afrikassa

15 Epidemiologia Sairastuvuus vaihtelee 5-45% välillä ja kuolleisuus on yleensä matala <10% Yleensä lämpiminä ja kosteina vuodenaikoina, jolloin vertaimevien hyönteisten ja punkkien lukumäärä on suurimmillaan ja hyönteiset aktiivisia - ei kuitenkaan rajoitu siihen Tautipurkaumat esiintyy yleensä sykleinä ja useita vuosia saattaa kulua välillä ilman yhtään tapausta Missä virus säilyy taudinpurkausten välillä? Ei oireettomia taudinkantajia Rokot saattavat säilyä iholla jopa kolme kuukautta ja virus selviytyy hyvin kuivien rupien sisällä

16 Taudille alttiit muut eläinlajit Ei zoonoosi Naudat ja aasialainen vesipuhveli LSD virus lisääntyy paikallisesti lampaassa ja vuohessa aiheuttamatta kliinisiä oireita LSD on varmistettu springbok antiloopilla, impalalla and kirahvilla Seropositiivisia: Afrikan puhveli, juovaknu ja eland antilooppi, kirahvi, impala ja isokudu Villien märehtijöiden rooli taudinvälittäjinä?

17 Vertaimevät hyönteiset Mekaaninen tartunta vektorin suuosien välityksellä Useimmat vertaimevät hyönteislajit Vektori syö ja vaihtaa isäntäeläintä tiheästi Lajin suhteellinen merkitys todennäkoisesti vaihtelee riippuen taudinpurkauksen sijainnista, paikallisesta ilmastosta, vuodenajasta, lämpötilasta, ilmankosteudesta ja kasvillisuudesta Kokeellisesti Aedes aegypti hyttynen Useasti epäilty Stomoxys calcitrans-kärpänen, kokeellista tietoa sheeppox viruksen välittäjänä Eurooppalaiset hyönteiset? Pystyyko virus lisääntymään hyönteisissä????

18 Punkit Mekaaninen tartuntamalli: Afrikkalaiset punkkilajit: Rhipicephalus appendiculatus punkki urokset (ja ehkä myös Amblyomma hebraeum) Rhipicephalus (Boophilus) decoloratus naaras siirtää virusta munien välityksellä toukkiin (mekaaninen tartunta) Eurooppalaiset punkit? Kuinka kauan virus säilyy infektiivisenä vektorin suuosissa Voivatko punkit toimia biologisina vektoreina?

19 Punkit vektoreina

20 Punkki eläinkokeet

21 Muita tartuntamekanismeja 1/2 Pian kliinisten oireiden ilmaantumisen jälkeen infektoituneet eläimet alkavat erittää virusta sylkeen, kyynelnesteeseen ja sieraineritteisiin Yhteiset juomakupit ja syöttökaukalot, nuolukivet Tartunta istukan välityksellä vasikoiden tiedetään syntyneen rokkojen peittämänä Imevät vasikat saattavat saada infektion emän vetimistä tai maidosta, joskin maternaaliset vasta-aineet suojaavat vasikkaa

22 Muita tartuntamekanismeja 2/2 Tartunta siemennesteen välityksellä, joko luonnollisessa astunnassa tai keinosiemennyksen aikana Iatrogeninen tartunta: eläinlääkärin kontaminoituneet neulat, rokotuskampanjat Onko suorakontakti niin tehoton kuin väitetään? Ilmavirtausten ja tuulten rooli hyönteisten kuljettajana biologinen vain mekaaninen vektori? Linnut

23 Diagnostic methods for LSDV Sample Infective virus Viral antigen Antibodies Virus isolation Molecular methods Neutralisation test ELISA IFAT AGID IPMA General gel-based or realtime PCR Species specific PCR Field or vaccine strain PCR Pen-side test

24 Capripoxvirus real-time PCR (LSDV, SPPV & GTPV)

25 A gel-based species-specific PCR for SPPV and GTPV/LSDV Size of the amplicon

26 FRET species-specific real-time PCR Targets 200bp region in the GPCR gene Based on different melting point temperatures detected using Fluorescence Melting Curve Analysis (FMCA) Requires a real-time PCR machine which can accommodate the Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) technology FRET channel: FAM excitation/cy5 emission

27 Species-specific inverted FRET assay Allows differentiation using the normal PCR channels (Cy5 channel) Uses the same primers Slightly altered labelling of the donor probe Publication shortly Contact info Dr Charles Lamien, IAEA

28 Species-specific snapback assay Amplification of 96 bp fragment of the RPO30 -gene Snapback tail added to the 5 end of the forward primer: 100% match with GTPV, T:A mismatch with SPPV and T:G with LSDV Snapback primer serves as primer and a probe Intercalating dye (EvaGreen) between double stranded DNA bonds which is released when the bonds break during melting Two melting peaks: one for the stem and one for the amplicon High Resolution Melting points and Fluorescent melting curve analysis (FMCA)

29 Methods to differentiate between attenuated and virulent strains LSDV SPPV

30 Lumpy skin disease Kiitokset kuulijoille! Kysymykset ja kommentit tervetulleita! Eeva S.M. Tuppurainen, DVM, MSc, PhD, MRCVS Tel