Allergeenien testaus Erihyvä Erityisruokavaliot, tarpeita ja mahdollisuuksia Tutkimus, tuotekehitys ja analytiikka 10.05.2017, Turku Timo Tumelius, FM Tieteellinen yhteyspäällikkö, Labema Oy
Ruoan allergeenit Luontaisesti esiityviä proteiineja ruoka-aineissa Ruoka-allergialle ei tunneta lääkitystä Ainoa onnistunut menetelmä hallita ruoka-allergeeneja on tarkkailla ruuan sisältämiä proteiineja seuraavien systemaattisten toimintatapojen kautta: GMP Good Manufacturing Practice HACCP Hazard Analysis and Critical Control Points SSOP Sanitation Standard Operating Procedures
Directiivi 2000/13/EC päivitettynä Directiivillä 2007/68/EC listaa 14 allergiaa aiheuttavaa ainesosaa, jotka täytyy ilmoittaa pakkausmerkinnöissä Cereals vilja Crustacean äyriäiset Fish kala Egg kananmuna Peanut maapähkinä Soybean soija Milk maito Nuts pähkinät Celery selleri Mustard sinappi Sesame seesaminsiemen seeds Sulphur rikkidioxidi dioxide Lupine lupiini Molluscs nilviäiset
Ruoka-allergeenien kontrollointisuunnitelma Mitkä seikat täytyy ottaa huomioon: näytteenottosuunnitelma, näytteidenoton taajuus, näytteenottotyyppi, menetelmän tarkoitukseen sopivuus, menetelmän hyväksynnät ja validointi, herkkyys, spesifisyys, tarkkuus, näytematriisin vaikutus, koulutus, tulosten tallentaminen, laboratoriopalvelut ja akkreditointi, kustannukset ja aika Reveal 3-D & Reveal Veratox
Allergeenitestejä Labemalta ja Neogenilta Maito Maapähkinä Kananmuna Soija Gliadiini/Gluteeni Sinappi Manteli Hasselpähkinä Saksanpähkinä Seesami Äyriäiset Lupiini
Testien formaatit: Kittivaihtoehdot, vasta-ainepohjaisia 1. Kvantitatiivinen kuoppalevytesti (Microwell): Veratox ja Alert 2. Seulontatesti, paikanpäällä tapahtuva (on-site lateral flow) testi: Reveal 3-D
Reveal 3-D -Testi Testin formaatti Tunnistusraja Soveltuvuus Lateral Flow ja 3D-tekniikka (vasta-aine), ei lisävälineitä Matala 5-10 ppm taso ruoka-aineille, riippuu testistä Pintanäytteet, CIP viimeiset huuhteluvedet Pakkauksen testimäärä Testausaika 10 testiä <10 min / näyte
Reveal 3-D -Testit Almond Casein Egg Gluten Hazelnut Peanut Shellfish Soya Manteli Gliadiini Muna Gluteeni Hasselpähkinä Maapähkinä Äyriäiset Soija 0 sts 00 sts 902086G 902075M 902082Q 901031P 902087E 901041L 902081S 902093K UUTUUDET Maito Sinappi Puupähkinät 902089Z 902079D 902102M 901036D 902090R 902077H 902091P 902104H
Reveal 3-D -Testipakkaus Puskurijauhepussi (10) Näyteputki ja korkki (10) Reveal 3-D testi-väline (10) Näytteenottotikku (10)
Reveal 3D Testin työnkulku huuhtelunäytteet Avaa puskuripussi ja kaada sisältö näyteputkeen. Lisää 0,25 ml näytettä putkeen, tai puoli korkkia. / tai 1ml Sulje valkoinen korkki ja ravista minuutin ajan. (Lisää putkeen toisen puskuripussin sisältö, ja ravista jälleen minuutin ajan )
Reveal 3D Testin työnkulku pintanäytteet Avaa puskuripussi ja kaada sisältö näyteputkeen. Kuivat pinnat: Kostuta näytteenottotikku liuoksessa. Ota näyte 10*10 cm 2 alueelta Katkaise tikun pää putkeen. Sulje valkoinen korkki ja ravista minuutin ajan. Lisää putkeen toisen puskuripussin sisältö, ja ravista jälleen minuutin ajan
Reveal 3D Testin työnkulku näytteen testaus Täytä korkki näyteputken nesteellä. Vaahdon tulisi pysyä näyteputkessa. Kasta Reveal 3-D laitteen pää korkin sisältämään nesteeseen. Varmista, että aukko on täynnä nestettä. Jätä aukko nesteeseen kunnes näet nesteen liikkuvan testi-ikkunassa. Aseta laite tasaiselle pinnalle ja anna testin kehittyä 5 minuuttia. Huomio: On tärkeää asettaa laite tasaiselle pinnalle heti kun neste on saavuttanut testi-ikkunan, jotta neste virtaa tasaisesti koko testerin läpi
Reveal 3-D -Testin tulokset Ei O-viivaa, T-viiva heikko tai sitä ei ole ollenkaan (Overload ) VARMA POSITIIVINEN POSITIIVINEN T-viiva näkyvissä (Above detection limit) Vasemmalta oikealle: Negatiivinen; Positiivinen; Vahva Positiivinen Ei T-viivaa (Undetectable) NEGATIIVINEN
Reveal 3-D -validaatio * Limit of Detection Reveal 3-D 1ppm 5ppm 10ppm 20ppm >50ppm Gluteeni Keksit Vauvanruoka Tumma suklaa Kaseiini Suklaakakku Margariini Punaviini Hasselpähkinä Maitosuklaa Aamiaismurot Tumma suklaa Maapähkinä Suklaalla kuorrutettu rulla Rapeat patukat Kana Nugget Manteli Tumma suklaa Jogurtti Tomaattikastike Äyriäinen Kasvisöljy Majoneesi Kananmuna Margariini Tumma suklaa Kalakakku Jäätelö Jauhettu valkoinen kala Soija Sianlihamakkara Margariini Jäätelö
Veratox Allergeeni Kitti (S-ELISAs) Kit Kvantitatiiviset tulokset ruokaainenäytteistä Tarvitsee sekoittavan vesihauteen, kuoppalevylukijan ja monikanavapipetin Kolme 10 minuutin inkubaatiota Testi 38 näytteelle (+kontrollit) Ei tarvita monimutkaisia kemiallisia testejä eikä liuottimia
Veratox-Testin kulku Pipetoi 150 ul uutettua näytettä ja standardeja kuoppalevyn (siirto)kaivoihin Pipetoi 100 ul kuoppalevyn vasta-ainekaivoihin Pese 5X Pipetoi 100 ul Conjugate liuosta Pese 5X 10 min 10 min Pipetoi 100 ul Substraatti-liuosta 10 min Pipetoi 100 ul Red Stop-liuosta Lue 650 nm 20 minuutin sisällä
Veratox Testin työnkulku
Alert Allergeeni Kitti (S-ELISA) Kit Tarkoitettu skriinaukseen 1 standari, johon tulosta verrataan Tarvitsee sekoittavan vesihauteen, ja pipetin Kolme 10 minuutin inkubaatiota Testi 24 näytteelle Ei tarvita monimutkaisia kemiallisia testejä eikä liuottimia Visuaalisesti tai lukulaitteella luettava testi
Alert-Testin työnkulku
Kiitos mielenkiinnosta - Tervetuloa keskustelemaan näyttelyständillemme!