Käyttöönottopäivä: 21.11.2011 1 (5) SELKÄYDINNESTEEN PERUSTUTKIMUKSET Atk-numero ja -lyhenne 1154 Li-BaktVi 1470 Li-Gluk 2186 Li-Laktaat 2514 Li-Prot 2655 Li-Solut 4059 Li-Syto Likvorin irtosolututkimus (patologia) Johdanto Selkäydinnesteen perustutkimukset tilataan Tamlabissa valintanäytöllä LITUTK. Patologian tutkimukset tilataan erikseen. Indikaatiot Suositeltavat tutkimukset voidaan ryhmitellä seuraavasti: 1. Seulonta: Li-Solut, Li-Prot Seulontatyyppisiä tilanteita ovat esim. röntgentutkimusten yhteydessä otetut likvorinäytteet tai päivystysaikaiset lievät oireistot. 2. Infektioepäily: Li-Solut, Li-Bakt-Vi, Li-Laktaat, Li-Prot, (Li-Gluk) Li-Diffi lasketaan automaattisesti, jos Li-leukosyyttejä on yli 20 x 10 6 /l. Li-Gluk-tutkimuksia kannattaa pyytää poikkeustapauksissa, esim. tuberkuloosiepäilyissä. 3. Vuotoepäily: Li-Solut, Li-Prot, (Li-Spektri) Solut voidaan laskea tarvittaessa kolmesta PERÄTTÄISESTÄ putkesta, jolloin pystytään erottamaan näytteenottoon liittyvä artefaktavuoto likvoritilassa olevasta verestä. Li-Spektriä käytetään pienen vuodon toteamiseen (kuvantamismenetelmän tulos negatiivinen). Mahdolliset ylimääräiset putket tulee merkitä selvästi. 4. Muut epäilyt ja seuranta: Lääkäri erittelee pyynnöt (ks. Taulukko 1), kun kysymyksenasettelu on perusvaihtoehdoista poikkeava. Potilaan esivalmistelu Pistoalueen desinfektio on suoritettava huolellisesti ihokontaminaation välttämiseksi. Näyte Selkäydinneste Selkäydinnesteen näytteenottopakkaukset sisältävät kolme steriloitua putkea korkkeineen sekä perustarrat. Bakteriologisiin määrityksiin tarvitaan putkien lisäksi veri- ja suklaamalja sekä rikastusputki (tioglykollaattiputki), jos potilaan hoitoa ei vielä ole aloitettu. Jos potilaan hoito on jo aloitettu, tarvitaan aerobiveriviljelypullo ja objektilasi. TAYS:n ulkopuolella olevissa toimipisteissä bakteriologista näytettä varten tarvitaan putkien lisäksi aerobiveriviljelypullo ja objektilasi. TAYS:ssa näytteenottotarvikkeita saa poliklinikkalaboratoriosta ja muissa toimipisteissä laboratoriosta.
Käyttöönottopäivä: 21.11.2011 2 (5) Näytteenotto: Minimitilavuutta sovelletaan pieniin lapsiin tai kun normaalitilavuutta ei saada 1. Putki 1 (Li-BaktVi, sisältää värjäyksen) Suositeltava tilavuus 2 ml (30 tippaa), minimitilavuus 0.5 ml (8 tippaa). 2. Näytteenottotilanteesta ja -paikasta riippuen joko a) 1 tippa näytettä tiputetaan viljelymaljoille ja rikastusputkeen tai b) 0.5-2 ml näytettä otetaan ruiskun avulla aerobiveriviljelypulloon (Bactec plus aerobic) ja lisäksi 1 tippa näytettä tiputetaan objektilasille, joka ilmakuivataan. 3. Putki 2 (Li-Prot, Li-Laktaat, Li-Gluk) Li-Prot ja Li-Laktaat: minimitilavuus 0.5 ml (8 tippaa) steriiliin putkeen. Laktaatti-tutkimukseen tuleva näyte: kylmäkuljetus, näyte sentrifugoitava mahdollisimman nopeasti. Li-Gluk: 0.2-2 ml steriiliin putkeen. 4. Putki 3 (Li-Solut, Li-Diffi) Suositeltava tilavuus 2 ml (30 tippaa), minimitilavuus 1 ml (15 tippaa). Näyte on tutkittava 2 tunnin sisällä (hypotonisessa liuoksessa solut hajoavat nopeasti). 5. Mahdolliset lisä-/erikoisputket Erityistutkimusten näyteputket ja vaaditut tilavuudet on tarkistettava erikseen, ks. Taulukko 1. Likvorin irtosolututkimusta varten ks. kyseinen tutkimus (patologia). Jokaisessa putkessa tulee olla potilaan tunnistetiedot, hoitoyksikkö, putken ottojärjestys, päivämäärä, kellonaika ja pyydetyt tutkimukset. Taulukko 1. Selkäydinnestetutkimuksissa käytettävät lisä- ja erikoisputket:
Käyttöönottopäivä: 21.11.2011 3 (5) Atk-n:o Lyhenne Tutkimuksen nimi Näytetilavuus Minimi Huomautuksia Putkijärj. 1828 -CrneAg Cryptococcus neoformans, antigeeni 1 ml 0.5 ml 1 3508 Pu-SienVi Sieni, viljely (syväsieniviljely) 1 ml 0.5 ml 4437 -TbEVi Mycobacterium, erikoisviljely 1 ml 0.5 ml Sis. värjäyksen Sis. värjäyksen 1 1 4244 -MycoNhO Mycobacterium, nukleiinihappo (kval) 1 ml 1 ml 1 2975 -VirVi Virus, viljely 2 ml 1.5 ml 1 1715 -CMVNh 1730 -ToxoNhO 4404 Li-HSVNhO Cytomegalo virus, nukleiinihappo, kvantitatiivinen Toxoplasma, nukleiinihapon osoittaminen Herpes simplex virus, nukleiinihappo (kval) 1 ml 1 ml 1 1 ml 0.5 ml 2 1 ml 0.5 ml 2 3975 Li-BorrAb Borrelia, vasta-aineet 1 ml 0.5 ml S 2 4407 Li-HSVAb Herpes simplex virus, vasta-aineet 1 ml 0.3 ml S 2 3394 Li-VirAb Virus, vasta-aineet 2 ml 1.5 ml S 2 4813 -HIVAgAb HIV, antigeeni ja vasta-aineet 1 ml 0.5 ml 2 4749 Li-CMVAb Cytomegalo virus, vasta-aineet 1 ml 0.5 ml S 2 3450 Li-IgGInd Immunoglobuliini G, indeksi 0.5 ml 0.3 ml S 2 2287 Li-LZM Lysotsyymi 0.5 ml 0.3 ml 3 1470 Li-Gluk Glukoosi 2 ml 0.2 ml P 3 15001 Li-Vara Varanäyte 2 ml 1 ml S 4 6168 Li-IgG-Oc Immunoglobuliini G, oligoklonaalinen (isoelektrinen fokusointi) 1 ml 1 ml S 5 3661 Li-ADA Adenosiinideaminaasi 1 ml 0.2 ml 6 3426 Li-ACE Angiotensiini-1-konvertaasi 1 ml 0.5 ml 6 2664 Li-Spektri Spektri (320-650 nm) 1 ml 0.5 ml Ruskea putki (BIL!) 7
Käyttöönottopäivä: 21.11.2011 4 (5) 1190 Li-Blastit Blastisolut 1 ml 0.5 ml EDTA-putki 8 1338 Li-Faagit Erytro- ja siderofaagit 1 ml 0.5 ml EDTA-putki 8 2991 S-ADA 1092 fs-ace Adenosiinideaminaasi, seerumi Angiotensiini-1-konvertaasi, seerumi 1 ml 0.2 ml - 1 ml 0.5 ml - 2287 S-LZM Lysotsyymi, seerumi 0.5 ml 0.3 ml - Lyhenteet: P = samanaikainen plasmanäyte; S = samanaikainen seeruminäyte 1 ml Näytteen säilytys ja kuljetus TAYS:ssa näytteet toimitetaan viipymättä Laboratoriokeskukseen, näytteiden vastaanottoon (FM Delta, 3. krs). Päivystysaikana on syytä ilmoittaa näytteistä kliinisen kemian laboratorion päivystäjille, puh. 311 76536. Hatanpään sairaalasta bakteriologiset näytteet lähetetään päiväaikaan tunnin sisällä näytteenotosta FM Deltaan: - arkipäivisin ma - pe klo 7.30-16.00, näytteestä ilmoitetaan märkäviljelyihin, puh. 311 76552 - lauantaisin klo 7.30-15.00, näytteestä ilmoitetaan mikrobiologian päivystäjälle, puh. 311 76571 - sunnuntaisin ja pyhäpäivinä klo 10.00-14.00, näytteestä ilmoitetaan mikrobiologian päivystäjälle, puh. 311 76571 Iltaisin tai kun nopea kuljetus ei ole mahdollista, bakteriologisia näytteitä inkuboidaan + 35 C:ssa ennen lähettämistä. Muualta tulevia bakteriologisia näytteitä on inkuboitava + 35 C:ssa ennen lähettämistä. Kuljetuksen aikana näyte ei saa jäähtyä alle + 20 C. Objektilasit säilytetään huoneenlämmössä. Menetelmä Li-Solut: värjäämättömän näytteen suora kammiolaskenta. Li-Diffi: kammiolaskenta Samson-värjätystä näytteestä. Mikrobiologian ja patologian tutkimukset: ks. kyseiset tutkimukset. Tulos valmiina Päivystystutkimuksena likvorista tehdään Li-Solut, Li-Diffi, Li-Laktaatti, Li-Proteiini (ja Li-Glukoosi). Hätätapauksissa erikseen pyydettäessä tehdään myös Li-BaktVr. Muut selkäydinnesteen perustutkimukset tehdään arkipäivisin maanantaista perjantaihin.
Käyttöönottopäivä: 21.11.2011 5 (5) Viitearvo Li-Eryt: alle 2 x 10 6 /l. Likvorin punasolupitoisuus pysyy samana perättäisissä näytteissä, jos verta vuotaa likvortilaan. Artefaktavuodossa punasolupitoisuus laskee. Li-Leuk: alle 5 x 10 6 /l. Suurempi määrä viittaa infektioon, ellei punasoluja ole yli 2000 x 10 6 /l. Vastatyntyneellä voi normaalistikin olla leukosyyttejä jopa 40-50 x 10 6 /l. Pitoisuus on aikuisten tasolla n. kuukauden kuluessa. Leukosytoosi yli 500 x 10 6 /l viittaa bakteerimeningiittiin. Li-Diffi: Tutkimus tehdään, kun Li-Leuk on yli 20 x 10 6 /l. Erittelylaskennassa leukosyytit jaetaan kypsiin neutrofiilisiin ja eosinofiilisiin granulosyytteihin (Li-Neut+Eo) sekä lymfosyytteihin ja monosyytteihin (Li-Lymf+Mo). Neutrofiilien lisääntyminen likvorissa viittaa bakteeriperäiseen meningiittiin ja lymfosyyttien lisääntyminen virus- tai tuberkuloottiseen meningiittiin. Eosinofiilien lisääntyminen voi johtua parasiitti- tai sieni-infektiosta tai allergisesta reaktiosta. Li-Prot: Viiteväli on iästä riippuva, ks tutkimus Proteiini (selkäydinnesteestä). Li-Laktaat: Alle 2.7 mmol/l. Tutkimuksella pyritään erottelemaan bakteeri- ja virusperäistä meningiittiä. Laktaattipitoisuus nousee valtaosassa bakteerimeningiiteistä. Tulkintarajana virus- ja bakteerimeningiittien erottelussa on noin 4 mmol/l, jota suuremmat arvot viittaavat bakteerimeningiittiin. Li-Gluk: Tutkimusta on käytetty bakteeri- ja virusperäisen meningiitin erotusdiagnostiikassa, jolloin alle 3 mmol/l pitoisuudet ovat viitanneet bakteerimeningiittiin. Glukoosimäärityksillä on vain vähän erillistä arvoa, jos Li-Laktaattimääritys on nopeasti saatavilla. Tulkinta Patologian tutkimuksista annetaan lausunto. Lisätiedot Päiväaikaisia tutkimuksia (kuten Li-Prot yleensä, Li-Prot-Fr ja Li-IgGInd) voidaan pyytää myös päivystysaikaan otetuista näytteistä, jolloin näyte analysoidaan myöhemmin. Virhelähteet Potilaan paastoamattomuus saattaa kemiallisissa analyyseissa vaikuttaa määritetyn aineen pitoisuuteen. Kuljetusviive vähentää laktaattipitoisuutta, minkä takia näyte on toimitettava viipymättä laboratorioon.