ATP-mittarit, mikrobien identifiointimenetelmä ja CO 2 -tuotannon mittaaminen

Koko: px

Aloita esitys sivulta:

Download "ATP-mittarit, mikrobien identifiointimenetelmä ja CO 2 -tuotannon mittaaminen"

Marika Koskinen
5 vuotta sitten
Katselukertoja:

1 ATP-mittarit, mikrobien identifiointimenetelmä ja CO 2 -tuotannon mittaaminen HAMK, Hämeenlinna, Petri Muranen

2 Hygienia ja omavalvonta a) Mikrobiologiset menetelmät Swab-testit kuivamaljat kontaktimaljat laskeumamaljat Dipslide-pintanäytteenottoputket

3 Hygienia ja omavalvonta b) Luminometria / ATP 3M Clean-Trace ATP järjestelmä: 3M Clean-Trace Surface ATP pintanäytteille 3M Clean-Trace Water ATP vesinäytteille

4 Miten ATP-menetelmä eroaa mikrobiologisista menetelmistä? ATP Mikrobiologinen menetelmä reaaliaikainen kokonaislika helppo, ei pitkäaikaista koulutusta kasvuviive 1-3 vrk mikrobit vaatii koulutusta

5 1. ATP-menetelmä ATP (adenosiinitrifosfaatti) on runsasenerginen yhdiste = siihen varastoituu energiaa ATP:tä on kaikissa elävissä soluissa: ruoka hiiva bakteerit homeet

6 ATP-menetelmä perustuu lusiferaasi-entsyymin toimintaan: ATP + lusiferaasi = valoa

7 ATP-menetelmä mittaa kokonaislikaa mitä enemmän likaa (ATP:tä) sitä enemmän syntyy valoa sitä suurempi mittaustulos (Relative Light Unit, RLU) nopea, helpokäyttöinen reaaliaikainen toistettavat tulokset = luotettava trendianalyysi pitkäaikainen säilytys: jääkaapissa +2-8 o C. Ota tikut huoneenlämpöön vähintään 10 minuuttia ennen käyttöä lyhytaikainen säilytys : huoneenlämmössä +21 o C 28 päivän ajan

8 Pintanäytteenotto Pidä tikkua peukalon jaetusormen välissä niin, että tikkua on helppo pyörittää. Älä koske tikun pumpulipäähän tai varteen! Paina tikkua kohti pintaa. Pyöritä samallalabema tikkua ja kerää Life science näytettä and koko biotechnology pumpulipäällä! expert

9 Paina tikku putkeen. Aktivoi tikku painamalla sinisestä päästä niin pitkälle, että tikun pumpulipää uppoaa putkessa olevaan nesteeseen. Pidä putkea peukalon ja etusormen välissä. Heiluttele puolelta toiselle vähintään 5 sekuntia.

10 Näytteenotto nesteestä Ota näyte nesteestä. Laita tikku putkeen ja aktivoi se painamalla punaisesta päästä: muovipää uppoaa nesteeseen. Pidä putkea peukalon ja etusormen välissä ja heiluttele puolelta toiselle vähintään 5 sekuntia.

11 Mittaus avaa luminometrin kansi, aseta tikku sisään ja paina Mittanäyte lue tulokset suhteellisina RLU-yksiköinä

12 Tulokset

13 LM1

14 Tulosten toistettavuus useita eri luminometritoimittajia variaatiokerroin (CV%) kertoo poikkeamasta eli kuinka lähellä mittaustulokset ovat toisiaan suuria eroja testien suorituskyvyssä = mittausten toistettavuudessa 3M Clean-Trace 9% Kilpailija 1 25% Kilpailija 2 50% Kilpailija 3 75%

15 Number of Results toistettavuuden vaikutus käytännössä: turhaa siivousta Tulosjakauma CV=38% Tulosjakauma CV=8% RLU of Result tuhlataan aikaa ja rahaa, ei vaarallista ~15% VÄÄRIÄ POSITIIVISIA, jos testin toistettavuus on huono (CV >38%)

16 Number of Results toistettavuuden vaikutus käytännössä: ei siivota riittävästi Tulosjakauma CV=38% Tulosjakauma CV=8% RLU of Result liian optimistinen kuva hygieniatasosta, VAARALLISTA!! ~15% VÄÄRIÄ NEGATIIVISIA, jos testin toistettavuus on huono (CV >38%)

17 erilainen signaalin tulkinta 3M Clean-Trace photomultiplier Kilpailija 1 photodiode erot tikuissa 3M Clean-Trace koko tikun pää mitataan Kilpailija 1 vain huuhteluvesi mitataan

18 Raja-arvot Käyttäjien määriteltävissä omassa työympäristössään. Kansainvälisissä tutkimuksissa 250 RLU:ta katsottu hyväksi tasoksi sairaaloissa Esimerkkejä: Käyttöpaikka OK?? Hälytys Tavallinen osasto < > 1000 Teho-os., leikkausos. < > 500 Välinehuolto ja sterilointipalvelut < > 200

19 Sovellusalueet ja asiakkaat siivousyritykset uimahallit terveystarkastajat sairaalat elintarviketeollisuus (käytössä jo 20 vuotta) Atria, Saarioinen, HK Valio panimot (Hartwall, Pyynikki) Lisätietoja:

20 2. Mikrobien identifiointimenetelmä Biolog MicroLog Manual tunnistaminen perustuu bakteerien sormenjälkeen : 96 reaktiota mikrokuoppalevyllä yhdellä kerralla

21 71 hiilenlähdettä + 23 kemiallista herkkyystestiä hapan ph sokerit NaCl maitohappo Gram+ Gramheksoosi-PO4:t aminohapot heksoosihapot karboksyylihapot, esterit ja rasvahapot pelkistysvoima

22 helppoa ja yksinkertaista: ei tarvita värjäyksiä, oksidaasitestiä, katalaasitestiä, vaan aerobiset G+ ja G- bakteerit samalla levyllä vaaditaan puhdasviljelmä ja yksi pesäke pesäke siirrostetaan siirrostusliemeen, joka sekoitetaan siirrostusliemi lisätään levylle => inkuboitumaan 18 tunniksi tulosten tulkinta seuraavana päivänä kunkin kuopan väriä verrataan valkoiseen taustaan (pos, neg, rajat.) tulos syötetään ohjelmaan, joka vertaa sitä tietokantaan => nimi tietokannassa yli 1800 G+ ja G- mikrobia: 267 hiivaa, 361 anaerobia jne

23 täysin automaattinen semi-automaattinen manuaalinen

24 Asiakkaat Allergan MedImmune Pfizer Apotex Banner Pharmacaps Amylin Alcon Biogen IDEC Sun Pharmaceuticals Bausch and Lomb Bayer Sanofi Actavis Baxter Roche Teva GSK Novartis Ciba Vision Genentech Bristol Myers Squibb Neogen MSD Fresenius Kabi Sandoz Lisätietoja: Mead Johnson

25 3. Panimohiivan laaduntarkkailu hiivalla on merkittävä panos oluiden makuun ja laatuun, siksi on tärkeää saada luotettavaa tietoa sen toiminnasta fermentointikyvyn määrittäminen tapahtuu mittaamalla hiivojen metabolian tuottaman hiilidioksidin määrää CO 2 -tuotannon määrä korreloi hiivan kunnon kanssa ANKOMin valmistama GPM-laitteisto (Gas Production Measurement) on automaattinen mittausjärjestelmä kaasunmuodostuksen seurantaan

26 RF1-moduli Puhdistusportti Poistoventtiili kaasunäytteille Pullokoot 100, 250, 500 ja 1000 ml

27 Langattomuus / etämittaukset kukin RFS-yksikkö voi johtaa 50 modulia ja inkubointipaikat voivat sijaita hajallaan: langattomuus tarjoaa joustavuutta

28 GPM-laitteiston etuja pullojen inkubointi ja mittaukset tuotantolämpötilassa nopea, tuloksia saadaan riittävästi jo 2-3 tunnissa: jos hiiva on kunnossa, kaasua muodostuu nopeasti (1 bar / alle 140 min) automaattinen järjestelmä korkissa on painetunnistin, joka mittaa kumuloituvaa painetta ja lähettää tiedot inkubointilämpötilan ja mittausaikaväli (esim sek) säädettävissä

29 Käytössä panimoteollisuudessa, esim. Carlsbergillä useita satoja Starter Pack Lisätietoja:

30 Kiitos tarkkaavaisuudesta!

31 Labema kartalla Labema Suomi 1988 Labema OÜ Tallinna 1998 UAB Labema Vilna 2017 SIA Labema Riga (syksy 2018)

Samankaltaiset tiedostot

e-water PINTAHYGIENIAN JA SIIVOUSTYÖ LAADUN VARMISTUS Suomen Vesikoulutus Puhdasvesi Risteily 2016

e-water PINTAHYGIENIAN JA SIIVOUSTYÖ LAADUN VARMISTUS Suomen Vesikoulutus Suomen Puhdasvesi Yhtiöt Suomen Vesikoulutus Suomen Vesi-isännöinti www.puhdasvesi.fi e-water.fi -palvelu e-water.fi on Suomen