KUHAN KUDUN KÄYNNISTÄMINEN

Samankaltaiset tiedostot
EPFC-työpaja Belgiassa: Kuhan lypsy. Pekka Marttinen RAS-Consulting Innovaatiopäivät, Tampere

TAIMENEN KUTUPESÄINVENTOINTI

Kuhan kasvun ja sukukypsyyden selvitys Tehinselällä Marko Puranen ja Tomi Ranta

Kirjolohen ja siian hyvän kasvun ylläpito kiertovedessä. jälkeen

MANKALAN VOIMALAITOKSEN JA ARRAJÄRVEN SÄÄNNÖSTELYN KALATALOUDELLINEN TARKKAILU VUONNA 2012

Julkaisun laji Opinnäytetyö. Sivumäärä 43

Pielisen Järvilohi ja Taimen hanke. Smolttipyyntiraportti Timo Hartikainen

VESIVILJELYLLÄ KOTIMAISTA KALAA RUOKAPÖYTIIN Ammattiopisto Livia Kalatalous- ja ympäristöopisto Pasi Korvonen

KUHAN KASVUNOPEUS JA SUKUKYPSYYS ETELÄ- KALLAVEDELLÄ

ASKEL OUNASJOELLE 2 HANKKEEN SEKÄ PALUUHANKKEEN LOHIEN YLISIIRRON KÄYTÄNNÖN TOTEUTUS

RANTALA SARI: Sairaanhoitajan eettisten ohjeiden tunnettavuus ja niiden käyttö hoitotyön tukena sisätautien vuodeosastolla

Tuloksia vesihomekyselystä

Kemiönsaaren Nordanån merikotkatarkkailu kesällä 2017

UNELMA uusi viljelylaji nelmasta (Stenodus leucichthys nelma)

Kokemuksia kuhankasvatuksesta merellä

Kun minkinpennut syntyy siinä tulee aina menetyksiä. Eli jos naaras on liian lihava niin ei välttämättä hoida kaikkia pentuja tai jos naaras liian

Pohjois-Karjalan Kalastusaluepäivät Huhmari, Polvijärvi Kari Kujala. Kalanviljelyn kuulumisia

Kalustelevyjen pinnoitusmateriaalien kulutuskestävyyden määritys käyttäen standardia

Anne-Marie Nääppä PAINEPUKUMATERIAALIEN KÄYTTÖOMINAISUUKSIEN SÄILYMINEN

Terveisiä kiertovesiviljelyworkshopista. Kalaterveyspäivä Tampere

Kuhan kasvatus ruokakalaksi

Säännöstelyn vaikutus Pielisen järvikutuiseen harjukseen

Märehtijä. Väkirehumäärän lisäämisen vaikutus pötsin ph-tasoon laiduntavilla lehmillä Karkearehun käyttäjä Ruoansulatus.

PORIN AKVAARIOKERHO KUUKAUDEN KALA

Jussi Klemola 3D- KEITTIÖSUUNNITTELUOHJELMAN KÄYTTÖÖNOTTO

Näsijärven siikatutkimus ja siian luontaisen lisääntymisen selvittäminen

VARESJÄRVI KOEKALASTUS

3 9-VUOTIAIDEN LASTEN SUORIUTUMINEN BOSTONIN NIMENTÄTESTISTÄ


Exercise 1. (session: )

Koulutus kalojen lääkinnästä Hanna Kuukka-Anttila Eläinten terveys ja hyvinvointi yksikkö, Evira. Kalanviljely Suomessa

Joutsijoen sähkökoekalastukset vuonna 2013

Kuvailulehti. Korkotuki, kannattavuus. Päivämäärä Tekijä(t) Rautiainen, Joonas. Julkaisun laji Opinnäytetyö. Julkaisun kieli Suomi

ILMASTOINTI Texa Konfort 780R Bi-Gas

Kokemäenjoen & Harjunpäänjoen sähkökoekalastukset 2011

JÄTEHUOLLON ERIKOISTYÖ

MARJOJEN SÄILYVYYSKOE

KARTOITUSRAPORTTI SIRKKALANKATU 12, TURKU - PARAKIT

Veterelin vet 4 mikrog/ml injektioneste, liuos naudalle, hevoselle, sialle ja kanille

Micomme Medical. XD 100 ventilaattoridesinfektori

KÄYTTÄJÄN OPAS. Yksityiskohtainen käyttöoppaasi. BYDUREON 2 mg injektiokuiva-aine ja liuotin depotsuspensiota varten

LEGO EV3 Datalogging mittauksia

Pielisen Järvilohi ja Taimen hanke. Smolttipyyntiraportti Timo Hartikainen

VAKOLA Koetusselostus 476 VALTION MAATALOUSKONEIDEN TUTKIMUSLAITOS. Test report

Puulaveden villi järvitaimen

Oulujärven kuha. Pasi Korhonen, Metsähallitus Kuhaseminaari Tampere. Luonnonvarakeskus Eräluvat

Martti Naukkarinen Oy WAI Consulting Ltd

KAAPELIN SUOJAAMINEN SUOJAMATOLLA

Täpläravun levinneisyyden rajat ja kannanvaihtelut

Paimionjoki-Hankkeen sähkökoekalastukset v Tomi Ranta, Petri Mäkinen ja Marko Puranen

Original Elche antimicrobi TM desinfiointiaineen testaus Legionella lajeille

Kiimakierron vaiheet. Esikiima

Ympäristötoimien vaikutus tuotantokustannukseen

Mitä tiedetään Oulujärven kuhasta tänään?

DIMLITE Daylight. Sähkönumero Käyttöohje

Ahvenen viljelyn mahdollisuudet Suomessa

Reliable diagnostic support Ultra-light design

LIUOTTAMISEEN, ANNOSTELUUN JA ANTAMISEEN

Tutkimusraportti Hiekkaharjun paloaseman sisäilman hiukkaspitoisuuksista

Arkkitehtuuritietoisku. eli mitä aina olet halunnut tietää arkkitehtuureista, muttet ole uskaltanut kysyä

Halax WC-istuimen ilmanvaihtojärjestelmän vaikutus WC-tilan sisäilman laatuun

Kondroitiinisulfaatti 2% ITSEKATETROINTI

Other approaches to restrict multipliers

ANALYYSIT kuiva-aine (TS), orgaaninen kuiva-aine (VS), biometaanintuottopotentiaali (BMP)

Yhteenvetoa merimetson vaikutuksista kalakantoihin

Risto Juvaste Lokkien iän, lajin ja sukupuolen määritys mittaamalla

RECEPTAL vet 4 mikrog/ml

Riittääkö Selkämerellä kalaa myös lähivuosina ja miten kalasto muuttuu?

Heini Salo. Tuotannonohjauksen kehittäminen digitaalipainossa. EVTEK-ammattikorkeakoulu Mediatekniikan koulutusohjelma. Insinöörityö 15.5.

CNC:N ASETUSAJAN PIENENTÄMINEN

PALUU VAELLUSKALOJEN YLISIIRTOHANKE

Luonnossa menestyvät istukkaat Kalatautien haitallisuuden vähentäminen

Ilmastomuutoksen riskimallinnuksen tuloksia: millaiset ovat tulevaisuuden ilmastoolosuhteet

Testiraportti. Uusi Hansa Oy. Polykarbonaatista valmistetun Kulo kattolumiesteen liimattavuuden testaus

Osasto: Materiaalin käsittely, Rikkihapon annostelu agglomeraattiin kuljettimella

OPAS KOTIPISTOSHOITOON

Läpimurto ms-taudin hoidossa?

Ruokintarytmin vaikutus kasvatetun kuhan tuotanto-ominaisuuksiin

Kokemäenjoen siikatutkimukset

Istukkaitten ja villien taimenten vaellukset Keski-Suomessa. Kalastusaluepäivä Pentti Valkeajärvi Konneveden kalatutkimus ry

Eija Lahtinen Uudet kelikamerat Kaakkois-Suomen tiepiiri

Kuhan alkukasvatus onnistuu Artemia-äyriäisen ja rehun yhteisruokinnalla. Teemu Jokelainen ja Juha Koskela

Testata kalkinhajottajan toimivuutta laboratorio-olosuhteissa.

Uusilla rehuilla kohti ympäristöystävällisyyttä.

Innovaatio-ohjelman Läpivirtauslaitoksen ravinnekuormituksen alentamismenetelmät hankkeen osa Oy Wai Consulting Ltd

YLÄ-LAPIN AIKAISTETTU HIRVIJAHTI - tuloksia vuosilta 2010 ja 2011

ASPIRIININ MÄÄRÄN MITTAUS VALOKUVAAMALLA

Det Norske Veritas Certification AS. TEST PROCEDURE EVALUATION Report. OPERATIVE RECOVERY SOLUTION JMR Ltd;

HEINOLAN KAUPUNGIN JÄTEVEDENPUHDISTAMON SEKOITTUMISVYÖHYKETUTKIMUS KEVÄÄLLÄ 2015

Tutkimus- ja analytiikkaosasto Pvm/Datum/Date Dnro/Dnr/ DNo Kala- ja riistaterveyden tutkimusyksikkö

Efficiency change over time

Riista- ja kalatalouden tutkimuslaitoksen vesiviljely

LAIDUNLINNUT Oy Hemmanet Ab

Biologisten kasvunedistäjien testaus luomuyrttien ja -purjon taimikasvatuksessa

Vaelluskalalajit ja valtion vesiviljelytoiminta

Kaakon jokitalkkari -hanke - mätirasiaistutus

Vesijärvestä Sargassomerelle

Vinkkejä opettajille ja odotetut tulokset SIVU 1

KEMIJOEN KALATALOUDEN JA MONINAISKÄYTÖN KEHITTÄMINEN RAPORTTI MMM ERITYISAVUSTUKSEN KÄYTÖSTÄ VUONNA Lohijokitiimi ry / Jukka Viitala

Arcticfood fromfinland

Transkriptio:

Opinnäytetyö (AMK) Kala- ja ympäristötalouden ko Iktyonomi 2016 Juuso Jalkanen KUHAN KUDUN KÄYNNISTÄMINEN

OPINNÄYTETYÖ (AMK) TIIVISTELMÄ TURUN AMMATTIKORKEAKOULU Kala- ja ympäristötalouden koulutusohjelma 2016 Ohjaajat: Raisa Kääriä, Pasi Korvonen Juuso Jalkanen KUHAN KUDUN KÄYNNISTÄMINEN Kuhan (Sander lucioperca) kiertovesiviljely on lisääntymässä Suomessa. Viljelyn lisääntyessä myös tarvittavan alkumateriaalin eli poikasten tarve kasvaa. Poikasten hankkiminen tapahtuu nykyään käytännössä luonnonravintolammikkoviljelyn kautta eli kudun tapahduttua normaalien vuodenaikojen mukaan. Intensiiviviljelyssä poikasia voidaan kuitenkin tarvita myös luontaisen kutuajan ulkopuolella. Opinnäytteen tarkoituksena oli osoittaa kokeella, kuinka eri kirjallisuuslähteissä kuvattu kuhan kudetusmenetelmä toimii. Kudetusmenetelmän testausta varten rakennettiin koejärjestelyt neljälle altaalle. Koe tapahtui Clewer Oy:n tiloissa kylmähuoneessa. Kuhat valittiin Clewer Oy:n kiertovesijärjestelmästä. Kuhille järjestettiin säädettävän kylmäkoneen avulla yhdeksän viikkoinen talvi 5-6 vedessä. Päivän pituus muutettiin kuuteen tuntiin. Talvea seurasi 12 viikkoinen kevät 13-14 asteissa vedessä valoisien tuntien kasvaessa 16 tuntiin. Siirtymä talvesta kevääseen tapahtui viikon aikana lämpöä tasaisesti nostaen ja päivänpituus muutettiin kymmeneen tuntiin. Vuodenaikojen järjestämisellä pyrittiin kypsyttämään kuhien sukutuotteet kudun onnistumiseksi. Kevätviikolla 12 kahteen naaraaseen ja kahteen urokseen injektoitiin hormonit (naaraille koriongonadotropiinia ja uroksille karpinaivolisäkettä) kudun laukaisemiseksi. Kutu tapahtui turoon 48 tunnin sisällä. Tulosten perusteella kokeeseen valittu lämpö- ja valojaksotus kehitti yhden naaraan sukutuotteet tasolta 1 tasolle 3. Kahdella koiraista maiti kehittyi kovasta valuvaksi. Hormonien käyttö laukaisi näiden kolmen kuhan lisäksi yhden aiemmin kehittymättömän naaraan kudun. ASIASANAT: Sander lucioperca, kuha, kutu, lämpötilaolot, hormonikäsittely, katetri

BACHELOR S THESIS ABSTRACT TURKU UNIVERSITY OF APPLIED SCIENCES Fisheries and Environmental Care 2016 Instructors: Raisa Kääriä, Pasi Korvonen Juuso Jalkanen STARTING THE SPAWNING OF PIKEPERCH Rearing of pikeperch (Sander lucioperca) in recirculating aquaculture systems (RAS) in Finland is increasing. As rearing is increased, the required amount of starting material, fry, is growing. Today obtaining fry occurs in practice through natural food ponds when spawning occurs through the normal seasons. In intensive aquaculture fry may be needed even outside the natural spawning season. The purpose of the thesis is to show experimentally how the pikeperch spawning method described in different literary sources works. For testing the spawning method a test system consisting of four tanks was built. The experiment took place in Clewer Ltd's property in the freezer room. Pikeperches were chosen from Clewer big RAS tank. A nine-week winter was held in water of 5 to 6 degrees by using an adjustable freezer machine. The length of the day was changed to six hours. The winter was followed by a 12-week spring in water of 13-14 degrees and the bright hours were raised to 16. The transition from winter to spring took place during one week by raising the temperature evenly. The day length was changed to ten hours. The purpose of simulating the seasons was maturing the oocytes for successful spawning. In the spring week 12 two females and two males were injected with hormones to trigger spawning. Spawning occurred to nest within 48 hours. According to the results one of the females matured oocytes from level 1 to level 3 in the selected temperature and light periodicity. The sperm of two males developed into ripen. In addition to these the use of hormones triggered the spawning of one previously undeveloped female. KEYWORDS: Sander lucioperca, pikeperch, spawning, thermal regime, spawning agents, catheter

SISÄLTÖ 1 JOHDANTO 5 2 AINEISTO JA MENETELMÄT 6 2.1 Koe aika- ja paikka 6 2.2 Järjestelmä 6 2.3 Kuha materiaali 8 2.4 Ruokinta 8 2.5 Lämpö- ja valojaksotus 9 2.6 Kutu 9 2.7 Sukutuotteiden kehitys 10 2.8 Hormonikäsittely 12 3 TULOKSET JA NIIDEN TARKASTELU 14 3.1 Sukutuotteiden kehitys 14 3.2 Katetrointi 15 3.3 Johtopäätökset 15 LÄHTEET 17

5 1 JOHDANTO Kuhan intensiiviviljelyssä poikasten saanti on riippuvainen luonnonravintolammikkoviljelystä. Kuhan poikasten omavarainen tuotanto vähentäisi tai poistaisi tämän riippuvuuden. Myös ruokakalajalostuksen emojen valinnan kannalta tällä olisi merkitystä. Tämän opinnäytteen tarkoituksena oli kokeilla eri kirjallisuuslähteissä kuvailtua kuhan kudetusmenetelmää ja seurata lämpötila- ja valomanipulaation vaikutuksia sukutuotteiden kehitykseen. Kokeessa kokeiltiin myös kuhien hormonikäsittelyä. Mädin kehitystä seurattiin katetroimalla kuhia ja kuvaamalla sukusolujen kehitysastetta asteikolla 1-4. Koiraiden kutuvalmiutta seurattiin silmämääräisesti maidin valuvuuden mukaan. Keväällä neljään kutuvalmiiseen kuhaan injektoitiin hormonit. Hormonikäsittelyä pidetään välttämättömänä kuhan kudun laukaisemiseksi (Jokelainen ym. 2009, 10). Kokeessa kuhien annettiin kutea turoihin. Vaihtoehtoinen tapa olisi ollut mädin lypsy ja keinohedelmöitys. Kokeen tuloksellisuutta arvioitiin sukutuotteiden kehittymisellä ja silmämääräisesti kudun onnistumisella. Kuitenkin tärkeämpänä seikkana saadut kokemukset ja kehitysajatukset nousevat opinnäytteen tärkeimmäksi tulokseksi.

6 2 AINEISTO JA MENETELMÄT 2.1 Koe aika- ja paikka Koe järjestettiin Turussa Clewer Technology Oy:n kiertovesikasvatushallin kylmähuoneessa. Koe aloitettiin 11.11.2014 ja poikaset kuoriutuivat 20.4 2015. Koetta edelsi noin kahden viikon järjestelmän rakennus ja testaus. 2.2 Järjestelmä Koetta varten rakensin neljän altaan järjestelmän Clewer teknologian kalankasvatushallin kylmähuoneeseen (kuva 1). Huone sopi kokeeseen hyvin, sillä siellä oli käytettävissä termostaatilla säädettävä sisäilman viilennys. Ilmanlämpötilaa säätämällä hallittiin näin myös järjestelmän vedenlämpötilaa. Koe toteutettiin kiertovesitekniikalla, jotta järjestelmän vesi saatiin jäähdytettyä kylmäkoneella. Kylmäkoneeseen liitettiin lämpötila-anturi puhelinhälytyksellä, jos viilennyksessä ilmenisi ongelmia. Hälytyksiin ei tosin ollut aihetta. Altaiksi muokkasin neljä kappaletta kuutiometrin kokoisia kontteja. Altailta vesi poistui lappoa hyväksi käyttäen pumppusumppuun, josta vesi pumpattiin uppopumpulla edelleen happitorniin. Happitornin vesi hapetettiin noin 90% kylläisyyteen ja johdettiin omalla painollaan takaisin altaille. Järjestelmään liitettiin myös UV-valo, jonka läpi pumpattiin osa järjestelmän vedestä veden desinfioimiseksi. Veden ammoniakin poistoa varten asennettiin Clewer teknologian kehittämä pieni bioreaktori, jonka läpi ajettiin osa järjestelmän vedestä. Bioreaktoriin puhallettiin kompressorilla ilmaa bakteerien hapen saannin turvaamiseksi ja reaktorin pyörimisliikkeen ylläpitämiseksi. Veteen tiputettiin myös jatkuvasti pisara ruokasooda liuosta veden ph tason hallitsemiseksi. Kiintoainesta poistettiin pumppusumppuun asetetulla sukalla, joka puhdistettiin tarvittaessa. Kiintoainesta poistettiin myös manuaalisesti lappoamalla likaa ja ulostetta altaista.

7 Järjestelmän kokonaistilavuus oli noin 4,5 kuutiometriä. Raikastusvettä järjestelmään johdettiin 7dl/min, joka johdettiin kylmähuoneen läheisyydessä sijainneesta isosta kalankasvatusaltaasta. Ylimääräinen vesi poistui altaaseen tehtyä ylivuotoa myöden lattiakaivoon. Valaistukseksi asetettiin 60W lamppu, jota säädeltiin kellokytkimellä päivän ja yön muodostamiseksi. Yövalaistuksena toimi pienitehoinen LED-lamppu joka paloi jatkuvasti ja näin myös yöllä päivävalaistuksen sammuttua. Valaistusta lukuun ottamatta minkäänlaista hajavaloa huoneeseen ei päässyt. Kuva 1. Järjestelmä.

8 2.3 Kuha materiaali Kuhat valittiin kokeeseen Clewer technologyn kalanviljelyaltaasta. Kuhat olivat 4 vuoden ikäisiä ja painoltaan n. 1,5kg 2,5 kg. Kalat nuotattiin altaasta ja valittiin käsin kokeeseen sopivimmat yksilöt. Yhteensä järjestelmään asetettiin 14 kuhaa. Kuhat olivat kiertovesikasvatettuja ja ne olivat olleet ainaisessa juhannuksessa, sillä valaistus kasvatushallissa on ympärivuorokautinen. Kutuasun puuttumisen takia koiraiden ja naaraiden erottaminen ei ollut kokeen alussa ulkoisesti mahdollista. Villeillä kuhilla vatsa on koirailla usein tummempi, mutta tämän kokeen kuhilla ei näin ollut (Kucharczyk ym. 2007, 20). Kokeen 14 kuhasta 8 kuhaa selvisi kokeen loppuun asti. 6 kuhaa kuoli talven ja kevään aikana. Kuolemien tarkkaa syytä ei saatu määritettyä, mutta todennäköisimmät selitykset tappioihin lienevät käsittely ja siitä syntynyt stressi. Huomion arvoista on, että myös Paraisten ammattiopisto Livian tiloihin murtovedelle siirretystä 36 kpl erästä noin 80% kuoli. Nämä kalat olivat varalla myöhempää käyttöä varten, mutta Paraisten kalat jätettiin kuitenkin kokeen ulkopuolelle. Molemmissa tapauksissa kuolleisuutta esiintyi pitkin koetta. 2.4 Ruokinta Kuhia ruokittiin 9mm Biomarin Efico Sigma- rehulla. Ruokinta tehtiin kerran päivässä käsin ja se perustui ruokahaluun. Talvella kuhien ruokahalu oli olematonta ja ruokinta koostui yksittäisistä pelleteistä. Vedenlämmityksen jälkeen kevään ensimmäisellä viikolla ruokahalu palautui vähitellen. Ruokintaa lisättiin viidestä grammasta kahteenkymmeneen grammaan per päivä. Yliruokintaa tuli välttää vedenlaadun pitämiseksi hyvänä. Altaat puhdistettiin lapolla ruokintojen jälkeen. Veden laatua seurattiin koko kokeen ajan. Laatu pyrittiin pitämään yleisesti tiedetyissä kuhalle sopivissa rajoissa.

9 2.5 Lämpö- ja valojaksotus Kuhat (14kpl) asetettiin altaisiin 11.11.2014. Aloitus lämpötila oli sama kuin ison järjestelmän (17,6). Lämpöä laskettiin viikonajan säätämällä koehuoneen kylmäpuhallusta kylmemmäksi, joka jäähdytti järjestelmän veden 7 asteeseen. Edelleen järjestelmää viilennettiin ja vesi pyrittiin pitämään 5-6 yhdeksän viikkoisen talvijakson ajan. Valaistus huoneessa muutettiin talvenomaiseksi. 6 tuntinen päivä järjestettiin lampulla ja kellokytkimellä. Pimeänaikaan heikkoa valoa toi pienitehoinen led-lamppu. Talvijakson jälkeen järjestelmän vedenlämpöä ryhdyttiin nostamaan 13 asteeseen. Viikon ajan lämpötilaa kohotettiin noin 1-2 astetta päivässä. Päivänpituus muutettiin valaistuksella 10 tuntiin. Vedenlämmön noustua kevät lämpötilaan, valaistusta lisättiin 16 tuntiin. Kevätjakso kesti 11 viikkoa, jonka jälkeen valittuihin kuhiin injektoitiin hormonit. 2.6 Kutu Kutua varten valittiin kaksi naarasta ja kaksi koirasta. Toisen naaraan mäti oli kehittynyt tasolta 1 tasolle 3. Toisella naaraista kehitystä ei ollut tapahtunut. Koiraat olivat kevyesti painaen valuvia. 14.4.2015 Naaraisiin injektoitiin kumpaankin (2,5ml/750IU) hcg hormonia eli koriongonadotropiinia. Koiraisiin injektoitiin suolaliuokseen (1ml) liuotettua karpin aivolisäkettä (4mg). Pistokset annettiin selkälihakseen selkäevän alapuolelle. Kuhat nukutettiin ennen toimenpidettä. Kuhat siirrettiin yhteen altaaseen, minne asetettiin noin pohjan pinta-alan kokoinen riisinjuurituro. Kutu tapahtui 16.4 eli noin 48 tunnin kuluessa jolloin takertunut mäti näkyi turossa (kuva 2). Emot avattiin varmistukseksi siitä, että kaikki olivat laskeneet sukutuotteensa. Altaaseen jätettiin yksi koiras hoitamaan mätiä. Onnistunutta hedelmöitystä voidaan katsoa tapahtuneen, sillä poikaset kuoriutuivat 20.4.2015. Mädistä kuoriutui silmämääräisesti arvioiden joitakin satoja poikasia.

10 Kuva 2. Takertunutta mätiä turosta poimittuna. 2.7 Sukutuotteiden kehitys Mädin kehitystä naaraissa seurattiin tarkastelemalla sitä mikroskoopilla. Mikroskoopilla mäti määritettiin erilaisille tasoille asteikolla 1-4, jotka kuvaavat mädin kehitysastetta viimeisen ollessa pisimmälle kehittynyt. Mm. Korbuly ym. kuvaavat tutkimuksessaan tasojen eri vaihtelua (2009, 61). Ennen lähempää tarkastelua mäti täytyi käsitellä. Saadut sukutuotteet kirkastettiin liuoksella, joka oli sekoitus etanolia, formaliinia ja etikkahappoa suhteessa 6:3:1. Mätiä sekoitettiin liuoksessa muutaman minuutin ajan. Käsittelyssä mädin takertuvuus poistui ja sen määrittäminen helpottui, Tätä määritystä varten sukutuotteita täytyi katetroida gonadeista (kuva 3). Ensimmäinen katetrointi tehtiin kokeen alussa mädin kehitysasteen ja sukupuolen määrittämiseksi. Koe altaisiin valikoiduista kaloista ei kaikista saatu sukupuolta määritettyä.

11 Katetrointi onnistui pääosin vain naaraille, koiraiden ahtaamman sukuaukon takia. Kuitenkin myös varmistamattomat kuhat pidettiin mukana kokeessa. Varmistetuista naaraista sukutuotteet määritettiin kaikki tasolle yksi. Katetrina käytettiin 3mm paksua ja sisähalkaisijaltaan 2mm paksua taipuisaa silikoni letkua, joka liitettiin 5ml injektioruiskuun pienen imun aikaansaamiseksi. Katetroitavat kalat nukutettiin aina ennen toimenpidettä bentsokaiinilla (pitoisuudella 0,04g/l). Katetri desinfioitiin alkoholilla toimenpiteen jälkeen seuraavaa kalaa varten. Kuva 3. Katetrointia. Kuhat on nukutettava näytteenoton ajaksi, koska toimenpide voi viedä muutaman minuutin. Lisäksi kuha on herkkä kala eikä se saa liikkua katetroinnin aikana. (Kucharczyk ym. 2007, 26). Katetroinnin suoritti kaksi henkilöä. Avustaja nosti märkää pyyhettä apuna käyttäen nukutetun kuhan pöydälle pitäen kuhaa vatsapuoli ylöspäin, jolloin toinen

12 kykeni asettamaan katetrin varovasti sukuaukkoon. Katetrin ollessa sisällä, hennolla imulla ja samanaikaisella katetrin poisvedolla sukutuotetta saatiin näytteeksi. Ensimmäinen katetrointi tehtiin kokeen alussa (11.11) mädin kehitysasteen ja sukupuolen määrittämiseksi. Talvijakson ja kuuden viikon kevään jälkeen (3.3) tehtiin seuraava tarkastus. Kahdennellatoista kevät viikolla (14.4) suoritettiin kolmas seuranta. 2.8 Hormonikäsittely Intensiiviviljelyssä hormonien käyttö on välttämätöntä ja viljellyistä kaloista saatujen sukutuotteiden laatu ei ole hyvä ilman niitä. Hormonien käyttö parantaa kudun ajoituksen lisäksi myös sukutuotteiden määrää ja laatua, mutta se myös vaikuttaa kutuvalmiiden emojen määrään. (Korbuly 2010, 32.) Kuhan kudun laukaisemiseksi on maailmalla käytetty erilaisia hormoneja, kuten Istukkagonadotropiinia (hcg), karpin aivolisäkettä (CPH) ja luteinisoivaa hormonia (LH). Ovulaatio ja spermiaatio laukaistaan esimerkiksi hcg:llä tai karpin aivolisäkkeellä. Annoksina mainitaan hcg 200IU / painokilo naaraille ja koiraille vastaavasti 100IU. Aivolisäkettä annetaan naaraille 3-5 mg / painokilo ja ja koiraille puolet vähemmän. Riippuen mädin kypsyysasteesta hormonit annetaan useana (3-5) annoksena. Aivolisäkettä annetaan kahtena annoksena ja pistojen välillä suositellaan 12 tuntia (Steffens ym. 1996, 629). Monet lähteet suosittelevat istukkagonadotropiinia kuhan hormonikäsittelyyn ja onnistuneiden kokeiden lisäksi sekä edullisuus, että saatavuus ovat valintaa puoltavia tekijöitä (Jokelainen ym. 2009, 10 ja Fontaine ym. 2013, 819). Tästä syystä tässäkin kokeessa valittiin naaraille hormoniksi hcg. Kaupallinen valmiste oli Chorulon vet ja se oli kaksi osainen. Toisessa pullossa oli pulverina itse vaikuttava hormoni, ja toisessa liuotinaine injektioannostuksen mahdollistamiseksi.

13 Chorulon vet annokset pistettiin kahdelle naaraalle. Kaksi koirasta saivat karpinaivolisäke injektiot. Karpinaivolisäkkeet jauhettiin hienoksi ja liuotettiin fysiologiseen suolaliuokseen. Korbuly ym. (2009) tuli tulokseen, että 1000IU:ta hcg:tä ei riittänyt ja tarvittiin tehoste piikki (500IU:ta). 12 tunnin päästä toisen piston jälkeen kaikki ovuloivat. (Korbuly ym. 2009, 62-63). Jos kuhien sukupuolta ei voida määrittää, järkevintä on antaa kaloille sama annos hormonia sukupuolesta riippumatta (Kucharczyk ym. 2007, 37). Alavi ym. (2013, 814) sai 100% kuhista ovuloimaan, kun kuhat piikitettiin selkälihakseen hcg:llä (500IU ja 750 IU). Kuoriutumisprosentti oli myös paras hcg annoksilla 500IU ja 750IU. Korbuly ym. (2010,35), sai kokeessaan yhdellä pistoksella 600IU:ta vatsaonteloon kaikki ovuloimaan 55 tunnissa. Yhdellä pistoksella kalat ovuloivat myös nopeammin. Mäti oli hänen kokeessaan tasolla II. Kokeessa kumpikin naaras sai 750IU hcg:tä ja koiraat kumpikin 4mg karpinaivolisäkettä liuotettuna fysiologiseen suolaliuokseen. Annokset annettiin yhdellä kerralla eikä tehostepiikkiä tarvittu. Injektointi paikkoina kirjallisuudessa mainitaan vatsaontelo, rintaevän alunen ja selänalueen lihas (Kucharczyk ym. 2007, 36). Tässä kokeessa pistopaikaksi valittiin selkälihas kummallekin hormonille ja kaikille neljälle kuhalle. Injektoinnin suoritti kaksi henkilöä, kuten katetroinninkin. Toinen henkilö nosti nukutetun kuhan pöydälle märkää pyyhettä apuna käyttäen. Tällä kertaa kuhan selkäpuoli ylöspäin, jotta toinen kykeni pistämään hormonin selkälihakseen.

14 3 TULOKSET JA NIIDEN TARKASTELU 3.1 Sukutuotteiden kehitys Kokeen alussa tehdyssä katetroinnissa kaikkien naaraiden mäti oli kehittymätöntä ja saaduista sukutuotteista määritettiin mäti kaikista naaraista tasolle 1. Suuresta osasta kaloja määritykseen ei saatu sukutuotteita. Näistä suuri osa oletettiin koiraiksi. Kaikki kalat kuitenkin pidettiin kokeessa ja jaoteltiin määrityksen perusteella altaisiin oletuksena, että kylmä jakso laukaisisi kehitystä ja sukutuotteita saataisiin myöhemmin tai ulkoinen tunnistus olisi helpompaa kutupiirteiden vahvistuessa. 14 kuhasta 8 selvisi koko kokeen. Näistä 4 oli koiraita ja 4 naaraita. Altaassa A1, jossa kuhat saatiin varmistettua kokeen alussa naaraiksi, kehitystä tapahtui 3.3 mennessä yhdellä kalalla tasolta 1 tasolle 2. Ennen injektiota 14.4 tämän mäti oli kehittynyt tasolle 3 (kuva 4). Muilla naarailla kehitystä ei tapahtunut. Altaan A2 neljä kuhaa olivat katetroinnin perusteella epävarmoja eli sukupuolta ei saatu määritettyä. Nämä kuhat osoittautuivat myöhemmin koiraiksi. Kahdella näistä maiti lähes valui, ennen hormoni injektointia. Nämä kaksi valuvaa siirrettiin altaaseen A1, kahden naaraan kanssa. Kaksi muuta avattiin ja varmistettiin koiraiksi. Kuva 4. Vasemmalla mäti tasolla 1 ja oikealla mäti tasolla 3.

15 3.2 Katetrointi Katetrointi on melko vaivaton tapa saada sukutuotteiden kehitys selville. Kuitenkin, käytäntö osoitti ongelmalliseksi koiraiden määrityksen. Koiraiden katetrointi voi vaurioittaa sukutiehyitä. Joidenkin katetroitujen ja myöhemmin avattujen koiraiden sukutiehyiden päät olivat arpeutuneet. Arpeuma huomattiin avattaessa koiras ja oli huomattavissa siinä gonadissa, jossa katetri oli todennäköisesti käynyt. Kuitenkin osalla koiraista ei ongelmia esiintynyt. Naarailla katetrointi ei tuottanut ongelmia. Katetrin käyttäytyminen sukuaukossa oli merkkinä sukukypsyydestä. Mikäli katetri meni helposti sukuaukkoon, oli odotettavissa sukutuotteita. Koirailla sukuaukon huomattiin turpeavan vasta maidin kehityttyä hyvin pitkälle, jolloin maiti valui ilman katetrointia vain kevyesti painaen. 3.3 Johtopäätökset Kokeen tulosten perusteella sukutuotteiden kehityksen osalta lämpö- ja valomanipulaation vaikutusta ei voida arvioida, koska kokeen havaintojen määrä jäi kuolemien takia pieneksi. Neljästä naaraasta yhden mäti kehittyi lähelle kutuvalmiutta ja neljästä uroksesta kahden maiti kehittyi kokeen aikana, joten tulosta voinee pitää rohkaisevana. Täsmällisten lämpösummien ja valaistuksen määrän hakeminen lähelle optimaalista voi olla vaikeaa. Kirjallisuudessa esitetyt lämpö- ja valojaksot ovat hyvin suuntaa antavia ja niissäkin esiintyy vaihtelua. Kantojen erot ja erilainen viljelyhistoria selittänevät omalta osaltaan vaihtelua. Kuitenkin, kirjallisuuden mukaan mädin kypsyminen kylmässä on välttämätöntä elinkykyisten poikasten tuottamiseksi. Tämän kaltaisten koejärjestelyjen rakentaminen isommassa mittakaavassa esim. kiertovesilaitokselle, lienee usein rajallisen tilakapasiteetin takia vaikeaa. Ulkoilmaolosuhteissa talvikausina kypsytetyt kuhat lienevät kannattavin vaihtoehto.

16 Kokeeseen saadut emot olivat mielenkiintoinen lähtökohta kiertovesihistoriansa takia. Suuremmilla kappalemäärillä kuhaparven kypsytys kylmässä vedessä, ilman katetroinnin tarvetta yksilöllisesti, voisi olla tuloksellisempaa. Näin käsittelystä johtuvat stressi sekä vauriot vähenisivät ja tuloksetkin voisivat olla parempia. Havaintomäärään kasvaessa myös lämpö- ja valojaksotuksen hakeminen olisi tuloksellisempaa. Hormonikäsittelyn vaikutus on kirjallisuudenkin mukaan selvempi, joten sen vaikutus varsinkin kehittymättömän naaraan ovulaation laukaisemiseen oli tärkeä havainto. Kuten kirjallisuudessakin mainittiin, hormonit käynnistivät kudun. Koiraiden kohdalla hormonien vaikutusta on hankalampi arvioida. Kudun ajoituksen kannalta niillä näyttäisi kuitenkin olevan merkitystä. Intensiiviviljelyä ajatellen ajoituksen onnistuminen ja manipulaatio on suuressa roolissa.

17 LÄHTEET Alavi, S.; Kristan, J.; Stejskal, V. 2013. Hormonal induction of ovulation in pikeperch (Sander lucioperca L.) using human chorionic gonadotropin (hcg) and mammalian GnRH analogue. Aquacult Int 21:811 818 Fontaine, P.; Kaszubowski, R. Zarski, A. 2013. Effect of different commercial spawning agents and thermal regime on the effectiveness of pikeperch, Sander lucioperca (L.), reproduction under controlled conditions. Aquacult Int 21:819 828 Jokelainen, T.; Koskela, J. & Suomalainen, L-R. 2009. Kuhan kasvatus ruokakalaksi Kirjallisuuskatsaus. Helsinki: Riista- ja kalatalouden tutkimuslaitos. Korbuly, B.; Grozea, A.; Cean, A. & Bănăţean-Dunea, I. 2009. Premilinary study on the effiency of several ovulation inducing hormones on pikeperch (sander lucioperca). Korbuly, B.; Grozea, A.; Cean, A.; Bănăţean-Dunea,I. & Păcală, N. 2010. Spawning Latency Period in Hormonal Induced Reproduction of Pikeperch (Sander Lucioperca). Kucharczyk, D.; Kestemont, P.; Mamcarz, A. 2007. Artificial reproduction of pikeperch. Steffens, W., Geldhauser, F., Gerstner, P. & Hilge, V. 1996. German experiences in the propagation and rearing of fingerling pikeperch (Stizostedion lucioperca). Annales Zoologici Fennici 33: 627 634.