KANTO CHEMICAL CO., INC.

KANTO CHEMICAL CO., INC. C 2014 No.3( 通巻 233 号 ) ISSN 0285-2446 Yersinia enterocolitica 感染症 林谷秀樹 2 下痢性貝毒オカダ酸群の機器分析 鈴木敏之 6 ラボラトリーウォーター 小林礼治 12 感染症四方山話 (9): 家庭でできる微生物実験その2 菊池 賢 18 最近のトピックス 24

Yersinia enterocolitica 感染症 Yersinia enterocolitica 東京農工大学大学院農学研究院動物生命科学部門准教授林谷秀樹 Hideki Hayashidani (Cooperative Department of Veterinary Medicine) Tokyo University of Agriculture and Technology 1. Yersinia enterocolitica とは Y. enterocolitica Yersinia 14 Y. pestis Y. pseudotuberculosis Y. enterocolitica 28 4 Y. enterocolitica Wauters 1 8 5 O 50 O O3 O4,32 O5,27 O8 O9 O13a,13b O18 O20 O21 9 O3 3 4 O5,27 O9 2 1B 1 9 O3 O5,27 O9 European strains O4,32 O8 O13a,13b O18 O20 O21 O8 American strains American strains European strains European strains American strains 100 American strains 1989 Iinuma 2 O8 3 4,5 表 1 病原性 Yersinia enterocolitica 血清型 生物型 分布 分類 ( 毒力 ) O3 3または 4 全世界 O5,27 2 全世界 European Strains O9 2 全世界 ( 弱毒 ) O8 1B 全世界 O4,32 1B 北アメリカ O13a,13b 1B 北アメリカ O18 1B 北アメリカ O20 1B 北アメリカ O21 1B 北アメリカ 2. 疫学 American Strains ( 強毒 ) Y. enterocolitica 1939 1971 EU 2 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

Yersinia enterocolitica 感染症 10 2.5 Y. enterocolitica 1982 1972 100 19 2 Y. enterocolitica Y. enterocolitica O3 O8 Y. enterocolitica O8 Y. enterocolitica 2 Y. enterocolitica Y. enterocolitica O3 O5,27 O9 O8 O8 Y. enterocolitica Y. enterocolitica O8 6 Y. enterocolitica 2 O8 2 7,8 2004 2013 Y. enterocolitica 2003 2 3 3. 臨床症状 Y. enterocolitica 2-5 O3 O5,27 O9 表 2 我が国における Y. enterocolitica による集団感染例 No. 発生年月 発生場所 推定原因食品 患者数 血清型 1 1972 年 1 月 静岡県 小学校 幼稚園 不明 ( 給食 ) 188 人 O3 2 1972 年 7 月 静岡県 小学校 不明 ( 給食 ) 544 人 O3 3 1972 年 7 月 栃木県 中学校 不明 ( 給食 ) 198 人 O3 4 1974 年 4 月 京都府 小学校 不明 ( 給食 ) 298 人 O3 5 1975 年 6 月 宮城県 小学校 不明 ( 給食 ) 145 人 O3 6 1979 年 1 月 宮城県 養護施設 不明 ( 給食 ) 6 人 O3 7 1979 年 11 月 広島県 小学校 不明 ( 給食 ) 184 人 O3 8 1980 年 4 月 沖縄県 小 中学校 加工乳 1051 人 O3 9 1981 年 5 月 岡山県 小 中学校 不明 ( 給食 ) 641 人 O3 10 1984 年 6 月 島根県 小学校 不明 ( 給食 ) 102 人 O3 11 1988 年 12 月 三重県 社員寮 不明 ( 寮の食事 ) 23 人 O5,27 12 1989 年 9 月 三重県 会社 不明 ( 弁当 ) 19 人 O5,27 13 1994 年 7 月 青森県 小学校 公園 不明 ( 湧水 ) 52 人 O3 14 1997 年 6 月 徳島県 病院 学校の寮 不明 ( 仕出し弁当 ) 66 人 O3 15 2004 年 8 月 奈良県 保育園 野菜サラダ 36 人 O8 16 2012 年 8 月 富山県 自宅 不明 ( 簡易水道水 ) 3 人 O8 17 2012 年 8 月 長野県 旅館 不明 ( 旅館の食事 ) 39 人 O8 18 2012 年 8 月 岩手県 旅館 不明 ( 旅館の食事 ) 92 人 O8 19 2013 年 4 月 東京都 学生寮 野菜サラダ 52 人 O8 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 3

European Strains O8 American Strains O3 O9 30 Y. enterocolitica HLA B27 4. 病原性 Y. enterocolitica 70 Md DNA DNA YadA YOP Yersinia Outer Membrane Protein DNA American strains 5. 診断 9 VYE virulent Yersinia enterocolitica Y. enterocolitica Y. enterocolitica Yersinia CHROMagar Y. enterocolitica CHROMagar Yersinia 10 Y. enterocolitica Yersinia 1 CIN Y. enterocolitica O3 11 Y. enterocolitica 1/15M 4 3 Y. enterocolitica PCR Realtime-PCR LAMP loop-mediated isothermal amplification 37 37 Y. enterocolitica 37 70kb Y. enterocolitica CIN OXOID CIN Yersinia Y. enterocolitica Y. enterocolitica 1 CIN Y. enterocolitica O3 5 Y. enterocolitica Fukushima CIN 平板培地 CHROMagar Yersinia 平板培地上 図 1 CIN 平板培地ならびに CHROMagar Yersinia 平板培地上の病原性 Yersinia enterocolitica のコロニ -(32 36 時間 ) 4 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

Yersinia enterocolitica 感染症 Y. enterocolitica 25 32 Y. enterocolitica Yersinia 70kb VirF Y. enterocolitica ail PCR Y. enterocolitica 4 160 Y. enterocolitica YOP ELISA Y. enterocolitica O9 Brucella melitensis Vibrio cholerae O1 6. 予防 対策 Y. enterocolitica Y. enterocolitica O8 73 10 7. まとめ Y. enterocolitica Y. enterocolitica O8 Y. enterocolitica Y. enterocolitica Yersinia Y. enterocolitica 参考文献 1 Wauters, G.; Kandolo, K.; Janssens, M. Contrib. Microbiol. Immunol. 1987, 9, 14-21. 2 Iinuma, Y.; Hayashidani, H.; Kaneko, K.; Ogawa, M.; Hamasaki, S. J. Clin. Microbiol. 1992, 30 1, 240-242. 3 Ohtomo, Y.; Toyokawa, Y.; Saito, M.; Yamaguchi, M.; Kaneko, S.; Maruyama, T. Contrib. Microbio.l Immunol. 1995, 13, 48-50. 4 Hosaka, S.; Uchiyama, M.; Ishikawa, M.; Akahoshi, T.; Kondo, H.; Shimauchi, C.; Sasahara, T.; Inoue, M. J. Clin. Microbiol. 1997, 35 12, 3346-3347. 5 Sakai, T.; Nakayama, A.; Hashida, M.; Yamamoto, Y.; Takebe, H.; Imai, S. Jpn. J. Infect. Dis. 2005, 58 4, 257-258. 6 Hayashidani, H.; Ohtomo, Y.; Toyokawa, Y.; Saito, M.; Kaneko, K.; Kosuge, J.; Kato, M.; Ogawa, M.; Kapperud, G. J. Clin. Microbiol. 1995, 33 5, 1253-1257. 7 Longenberger, A.H.; Gronostai, M.P.; Yee, G.Y.; Johnson, L.M.; Lando, J.F.; Voorhees, R.E.; Waller, K.; Weltman, A.C.; Moll, M.; Lyss, S.B.; Cadwell, B.L.; Gladney, L.M.; Ostroff, S.M. Epidemiol. Infect. 2013, 16, 1-11. 8 MacDonald, E.; Heier, B.; Stalheim, T.; Culdjoe, K.; Skjerdal, T.; Wester, A.; Lindstedt, B.; Vold, L. Euro Surveill. 2011, 16 19, pii19866. 9 Fukushima, H.; Gomyoda, M. J. Clin. Microbiol. 1986, 24 1, 116-120. 10 Renaud, N.; Lecci, L.; Courcol, R.J.; Simonet, M.; Gaillot, O. J. Clin. Microbiol. 2013, 51 4, 1184-1187. 11 Kamrun Naher MI Tajul,. Yersinia. 106., 2013, P57. THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 5

下痢性貝毒オカダ酸群の機器分析 Instrumental analysis of diarrhetic shellfish toxin okadaic acid analogues ( 独 ) 水産総合研究センター中央水産研究所水産物応用開発研究センター衛生管理グループグループ長 博士鈴木敏之 Toshiyuki Suzuki National Research Institute of Fisheries Science はじめに 1 HPLC 3 LC/MS/MS 4 2015 1 EU LC/MS/MS LC/MS/MS 4 1 2 下痢性貝毒オカダ酸 (okadaic acid;oa) 群による中毒と化学的性状 51 5 4 6 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

下痢性貝毒オカダ酸群の機器分析 OA 6 10 1 Dinophysis 7 7 3 dinophysistoxin-3 DTX3 8 Dinophysis 1 dinophysistoxin-1 DTX1 1 OA Prorocentrum lima Dinophysis 9 10 OA OA DTX5 OA 群の LC/MS 及び LC/MS/MS 分析 図 1 オカダ酸 (OA), ジノフィシストキシン (DTX) 群の化学構造 LC/MS LC/MS/MS C8 C18 2mm LC 4 OA DTX 11 OA DTX1 M-H Selected Ion Monitoring SIM M-H m/z 255 Multiple Reaction Monitoring MRM THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 7

2 Dinophysis fortii 50 LC/MS/MS DTX1 2 Pectenotoxin-2 PTX2 12 Dinophysis LC/MS/MS 50 図 3 LC/MS/MS によりホタテガイから検出される様々な DTX3 群 図 2 有毒藻類 Dinophysis fortii 50 細胞から得られる LC/MS/MS クロマトグラム OA DTX1 DTX3 7 DTX3 DTX3 LC/ MS/MS 13 DTX3 M-H MRM DTX3 C16 0 7-O-16:0-DTX1 DTX3 3 4 5 DTX3 MS/MS MS/MS 4 DTX1 DTX3 LC/MS/MS OA 10 MS/MS M+NH 4 + M+H + M+Na + OA 図 4 様々な脂肪酸が結合した DTX3 の MS/MS フラグメントイオン 図 5 DTX3 の MS/MS フラグメンテーションダイアグラム 8 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

下痢性貝毒オカダ酸群の機器分析 LC/MS/MS Dinophysis acuta OA OA D8 MS/ MS 6 7 7 5ppm OA LC/MS/MS LC/MS/MS / LC/MS/MS qtof LC/MS/MS MS/MS 図 6 OAジオールエステル (OA D8) のMS/MSフラグメントイオン図 7 OAジオールエステル (OA D8) のMS/MSフラグメンテーションダイアグラム OA LC/MS/MS EU SOP Standard Operating Procedures 14 LC/MS/MS OA LC/MS/MS OA 15 OA 120 OA 群のカラムスイッチング自動前処理蛍光 HPLC 分析 OA HPLC Lee 1987 16 LC/MS LC/MS/MS OA ADAM OA OA HPLC 17 OA 8 9 OA LC/MS LC/MS/ MS DTX3 OA DTX1 OA 4.6mm 2.0mm 1/5 HPLC LC/MS LC/MS/MS LC/ MS LC/MS/MS OA HPLC THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 9

機器分析用 OA 群標準品 図 8 OA 群分析用カラムスイッチング自動前処理 HPLC システム 図 9 ホタテガイから検出される OA 蛍光誘導体のクロマトグラム OA OA National Research Council NRC NRC DTX3 OA OA DTX1 OA 14 17 OA DTX1 CODEX OA 160 g/kg OA OA LC/MS/MS OA 10 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

下痢性貝毒オカダ酸群の機器分析 DTX1 OA Prorocentrum lima OA 10 OA DTX1 図 10 OA 群生産藻類 Prorocentrum lima の大量培養 参考文献 1,,,,,.. 2013, 54 3, 265-274. 2.. 56 5 19 37 1981 3 Oshima, Y. J. AOAC Int. 1995, 78 2, 528-532. 4 Suzuki, T.; Quilliam, M.A. Anal. Sci. 2011, 27 6, 571-584. 5 Yasumoto, T.; Oshima, Y.; Yamagudhi, M. Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fisheries. 1978, 44 11, 1249-1255. 6 Yasumoto, T.; Murata, M.; Oshima, Y.; Sano, M.; Matsumoto, G.K.; Clardy, J. Tetrahedron. 1985, 41 6, 1019-1025. 7 Lee, J.S.; Igarashi, T.; Fraga, S.; Dahl, E.; Hovgaard, P.; Yasumoto, T. J. Appl. Phycol. 1989, 1 2, 147-152. 8 Suzuki, T.; Ota, H.; Yamasaki, M. Toxicon. 1999, 37 1, 187-198. 9 Yasumoto, T.; Seino, N.; Murakami, Y.; Murata, M. Biol. Bull. 1987, 172 1, 128-131. 10 Suzuki, T.; Beuzenberg, V.; Mackenzie, L.; Quilliam, M.A. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004, 18 10, 1131-1138. 11 Gerssen, A.; Mulder, P.P.J.; McElhinney, M.A.; J. de Boer. J. Chromatogr. A. 2009, 1216 9, 1421-1430. 12 Suzuki, T.; Miyazono, A.; Baba, K.; Sugawara, R.; Kamiayam, T. Harmful Algae. 2009, 8 2, 233-238. 13 Suzuki, T.; Kamiyama, T.; Okumura, Y.; Ishihara, K.; Matsushima, R.; Kaneniwa, M. Fish. Sci. 2009, 75 4, 1039-1048. 14 EU reference laboratory for marine biotoxins ed. EUharmonised standard operating procedure for determination of lipophilic marine biotoxins in molluscus by LC-MS/MS Version 4. Vigo. 2011. 15 Ito, S.; Tsukada, K. J. Chromatogr. A. 2002, 943 1, 39-46. 16 Lee, J.S.; Yanagi, T.; Kenma, R.; Yasumoto, T. Agric. Biol. Chem. 1987, 51 3, 877-881. 17 Uchida, H.; Watanabe, R.; Matsushima, R.; Uchida, N.; Nagai, H.; Kamio, M.; Murata, M.; Yasumoto, T.; Suzuki, T. J. AOAC. Int. 2014, 97 2, 391-397. THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 11

ラボラトリーウォーター Laboratory Water 日本ポール株式会社バイオファーマ事業部ラボ製品ユニットユニットマネージャ 小林礼治 Reiji Kobayashi (Manager) Nihon Pall Ltd. BioPharmaceuticals Division Laboratory Business Unit はじめに National Institutes of Health NIH Laboratory Water 2013 3 1 1. 概略 2. 水中の汚染物質 12 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

ラボラトリーウォーター THMs 3. 水中の汚染物質の測定 3)TOC(Total Organic Carbon) TOC TOC TOC UV TOC TOC TOC TOC 200ppb 1 5ppb HPLC LC/MS TOC TOC 1) 比抵抗値 25 18.3M -cm 25 2) 導電率 RO 18.2M -cm 0.055µS/cm / 4) 生菌数検査 5) エンドトキシン試験 LPS LAL 2 5EU/mL /ml 0.004 0.001EU/mL THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 13

TOC 4. 水の精製方法 UV 1) 蒸留 2) ろ過 RO UF MF MF 10 25µm 0.2 0.45µm UF RO RO RO RO RO RO UV 3) 脱イオン DI Type I RGW 5 DI 4) 電気再生式イオン交換 EDI EDI EDI 14 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

ラボラトリーウォーター 5) 吸着 TOC TOC 6)UV 酸化 UV 185nm 254nm TOC ISO 2 Type Grade ISO ACS American Chemical Society 2M -cm@25 表 2 EN ISO 3696:1995 3) Parameter Grade 1 Grade 2 Grade 3 試験方法 ph at 25 電気的導電率 ms/m at 25 max 酸化物質酸素 (O) 含有量 mg/l, max 吸光度 at 254nm/ パス長 1cm abs. unit, max Not Not applicable applicable (Note 1) (Note 1) 0.01 0.1 (Note 2) (Note 2) Not applicable (Note 3) 0.001 0.01 5.0-7.5 0.5 0.08 0.4 Not specified Subclause 7.1 Subclause 7.2 Subclause 7.3 Subclause 7.4 5. 超純水のグレード 蒸発後残留物 110 加熱 mg/kg, max Not applicable (Note 3) 1 2 Subclause 7.5 American Society for Test and Materials ASTM D1193, ASTM D1596, International Organization for Standardization ISO 3639, Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI, NCCLS C3-A4 NCCLS 1 Type I Type II, Type III 表 1 NCCLS(National Committee for Clinical Laboratory Standards Reagent Grade Water Specifications) 2) Parameter Type I Type II Type III 生菌数, max(cfu/ml) 10 1000 ph, units 5-8 比抵抗値, min(mω cm) 10 1.0 0.1 シリカ, max(mg/l) 0.05 0.1 1.0 粒子 有機物 0.22µm ろ過カーボンろ過 シリカ (SiO 2) 含有量 mg/l, max 0.01 0.02 Not specified Subclause 7.6 Note1: 高純度水の ph 値測定は困難であり 測定値も信用することは難しいため Grage1/2では数値を設定しない 1mS/m=10µS/cm Note2: Grade1/2の導電率は新鮮な水に適合する 保存された水は空気中の CO2やガラス容器からのアルカリ物質などで汚染される可能性があり 導電率に影響をするため Note3: Grade1の酸化物質と蒸発後の残留物についてはこの純度レベルの試験要求に適合させることは難しいので特定しない しかし Grade1の水質は他の要求とその調整方法の要求により保証される CLSI 3 ASTM D1193 NCCLS Type I, Type II CLRW Clinical Lab Reagent Water SRW Special Reagent Water, Instrument Feed Water Type I, Type II JIS K0557 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 15

表 3 Clinical Lab Standard Institute( 旧 CLS), C3-A4 Reagent Laboratory Water 2) Parameter CLRW SRW Instrument Feed TOC WFI USP 表 5 USP27 Pharmaceutical Grade Water 4) 生菌数, max(cfu/ml), plate count ph, units 10 Application Defined Application Defined 有機物 導電率 Parameter 仕様 <0.5 ppm <1.3ms/cm at 25 インライン測定 比抵抗値, min(mω cm) 10 シリカ 粒子 コロイド 0.22µm ろ過 Application Defined Application Defined Application Defined エンドトキシン by LAL 純水注射用水 (WFI) 生菌数 ( ガイドラインのみ ) 純水注射用水 (WFI) <0.2 EU/ml 100 cfu/ml 10 cfu/100ml 有機物 (TOC), (ppb) 500 エンドトキシン Application Defined Application Defined Application Defined 表 6 College of American Pathologists National Committee for Clinical Laboratory Standards(CAP/NCCLS)Type 4) Parameter Type Ⅰ Type Ⅱ Type Ⅲ ASTM 4 Type I, II, III, IV D1193-06-20111 Type A, B, C 導電率 (ms/m at 25 ) 0.1 1.0 10 比抵抗値 (MΩ/cm at 25 ) 10 1 0.1 総シリカ (mg/l) 50 100 1,000 ph NA NA 5.0-8.0 生菌数 (CFU/ml) 10* 1000 表 4 American Society for Testing and Material ASTM D1193-06(2011) Reagent Grade Water Specifications 2) 粒子 0.22mm フィルター ** 比抵抗値 (min.) MΩ cm(25 ) Parameter Type Ⅰ Type Ⅱ Type Ⅲ Type Ⅳ 18.0 1.0 4.0 0.2 ph(25 ) NA NA NA 5~8 有機物 活性炭フィルター ** * Type Ⅰ はおそらくバクテリアフリー ** プロセス仕様 ( エンドユーザーの測定ではない ) 全有機体炭素 TOC(max.), µg/l 50 50 200 表 7 JIS K0557 用水 排水の試験に用いる水 5) 項目 A1 A2 A3 A4 ナトリウム (max.), µg/l 1 5 10 50 塩化物イオン (max.), µg/l 1 5 10 50 用途 洗浄水 一般化学分析 試薬調製化学分析 有機物試験 微量成分化学分析 総シリカ (max.), µg/l 3 3 500 NA 生菌数 (max.) (CFU/100ml) Type A Type B Type C 1 10 1000 エンドトキシン (EU/ml) <0.03 0.25 NA USP WFI USP USP USP 電気伝導率 ms/cm(25 ) 比抵抗 MΩ cm(25 ) 全有機体炭素 (TOC)mgC/L 亜鉛 µgzn/l シリカ µgsio 2/L 塩化物イオン µgcl /L 硫酸イオン µgso 4 2 /L 5 0.1 0.1 0.1 0.2 1 1 1 1 0.5 0.2 0.05 0.5 0.5 0.1 0.1 50 5.0 2.5 10 2 1 1 10 2 1 1 16 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

ラボラトリーウォーター 6. カスカーダ超純水システム ( 日本ポール 社製 ). 4. UV 1 5 30L Type Type 1 2L 1) 超純水システム Type ASTM, CAP, ISO3696, CLSI HPLC UHPLC AA ICP-OES LC/MS LC/MS/MS GC/MS ICP-MS TOC PCR DNA 2) 純水システム Type ASTM, CAP.ISO3696, CLSI JIS K0557 A3 ph 3) 製品仕様 水質 Cascada II.I タイプ 純水 (Type Ⅱ) 超純水 (Type Ⅰ) 比抵抗 (MΩ cm@25 ) >5 18.2 TOC (ppb) <30 5*** バクテリア (CFU/mL) <0.1* <0.1* 粒子 (>0.2µm) <1/mL* <1/mL* エンドトキシン (EU/mL) <0.001** <0.001* * バクテリア用 POU 設置時 ** エンドトキシン用 POU 設置時 *** 供給水の TOC が 2ppm 以下の場合 水質 Cascada III.I タイプ 純水 (Type Ⅱ) 超純水 (Type Ⅰ) 比抵抗 (MΩ cm@25 ) 18.2 TOC(ppb) 5*** バクテリア (CFU/mL) <0.1* <0.1* 粒子 (>0.2µm) <1/mL* <1/mL* エンドトキシン (EU/mL) <0.001* * バクテリア用 POU 設置時 ** エンドトキシン用 POU 設置時 *** 供給水の TOC が 2ppm 以下の場合 水質 Cascada III タイプ 純水 (Type Ⅲ) イオン除去率 >99% 有機物除去率 >99% バクテリア (CFU/mL) <0.1* 粒子 (>0.2µm) <1/mL* * バクテリア用 POU (0.2µm) 設置時 水質 Cascada I タイプ 超純水 (Type Ⅰ) 比抵抗 (MΩ cm@25 ) 18.2 TOC(ppb) 5*** バクテリア (CFU/mL) <0.1* 粒子 (>0.2µm) <1/mL* エンドトキシン (EU/mL) <0.001* * バクテリア用 POU 設置時 ** エンドトキシン用 POU 設置時 *** 供給水の TOC が 2ppm 以下の場合 参考文献 1 National Institute of Health. Laboratory Water - It s Importance and Application. 2013, 22p. 2 Clinical and Laboratory Standards Institute. Preparation and Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Fourth Edition. CLSI document C3-A4-AMD. 2006, 49p. 3 BS EN ISO 3696:1995. Water for analytical laboratory use - Specification and test methods. 4 "USP, ASTM, and CAP pure water standards - 2008". NALCO Cal Water. http://www.cal-water.com/pdf/whitepapers/usp_ and_astm_pure_water_standards.pdf 5 JIS K 0557:1998.. THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 17

感染症四方山話 (9): 家庭でできる微生物実験その 2 Various topics concerning infectious diseases (9) Microbiological experiments in the home (2) 東京女子医科大学感染症科教授菊池賢 Ken Kikuchi, MD, PhD.(Professor) Department of Infectious Diseases, Tokyo Women s Medical University 1. はじめに THE CHEMICAL TIMES 9 4 1 8 2010, No.3 217 1 2. テーマの選択 : 身の回りから抗菌物質を探そう 1 2 3 200 innate immunity 18 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

感染症四方山話 (9): 家庭でできる微生物実験その 2 6 8mm 1-80 Aspergillus oryzae rice agar 1 Bacillus subtilis subsp. natto 3. 材料と方法材料 機器 1 9 4 3g 4 2 1 g 3g THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 19

4g 100 3 100 3 100 OK 5mm 5 2 GIA 図 1 培地材料 図 2 抗菌力を調べた試料 図 3 寒天を入れた容器 20 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

感染症四方山話 (9): 家庭でできる微生物実験その 2 図 4 指標微生物として使用したドライイーストと納豆 図 7 ストローで培地に穴を穿つ 図 5 培地作成用耐熱ガラス容器 ( パスタ用 ) 図 8 試料添加後の培地 図 6 綿棒で培地に菌液を塗布する 図 9 試料添加終了した培地 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 21

2L 方法 1. 1 12 >37 2. 3 3. 4. 300ml 1 1 4g 1 3g 50 30ml 5. 1 100 ml 6. 1 100 ml 7. 6 8. 7 9. 8 図 10 納豆菌の発育阻止円上より左回りにアルコールゲル バジルペースト チューブ入りにんにく おろし生にんにく ( 緑色に変色 ) おろし生にんにくで大きな阻止円が観察出来る アルコールでは阻止円内部に芽胞から発育したと思われる数個のコロニーが観察出来る 図 11 チューブ入りにんにくによる納豆菌の発育阻止円拡大図 22 THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 )

感染症四方山話 (9): 家庭でできる微生物実験その 2 10. 9 11. 37 1 12 12. 24 4. 結果 10, 11 1 表 1 各試料の抗菌活性 試料 標的微生物に対する阻止円直径 (mm) 納豆菌 パン酵母 ( イースト ) チューブ入り生姜 7 0 チューブ入りからし 0 0 チューブ入りにんにく 14 8 チューブ入りわさび 0 0 チューブ入り西洋わさび 0 0 チューブ入り梅肉 80 0 チューブ入りバジルペースト 0 0 辣油 0 0 おろし生にんにく 55 35 アルコールゲル 13 14 5. おわりに Allimax Allimax Malt extract agar 4g 3g Pure malt 300ml THE CHEMICAL TIMES 2014 No.3( 通巻 233 号 ) 23

. 1 5 30L 1 2L 特長 1 2 前処理モシ ュール 3.2インチカラーテ ィスフ レイ 圧力センサー ( 特許 ) 加圧ホ ンフ ( 特許 ) 前処理機能前処理カートリッシ 供給水質に適合した4 種類 ( 精密ろ過 活性炭 ) のツインカートリッシ 漏水検知漏水検知センサー ROシステム RO 製造量 高純度 2 段階 RO 製造システム ( 特許 ) 5/10/20/30L/h RO 水高回収キット マルチステーシ モニタリンク 6ヵ所の比抵抗計 導電率計 3ヵ所の流量計 3ヵ所の圧力計 イオン交換カートリッシ RO 水 DI 水 低 TOC 低ホウ素用カートリッシ 2 段階システム 高容量ツインカートリッシ 本体テ ィスフ レイ 7インチ液晶カラータッチハ ネル インターフェース 操作 設定 履歴 メンテナンス 問合せ画面 日本語対応 ソフトウェア更新可能 テ ータアクセス SDカート RS232C 対応 専用フ リンター漏水検知漏水検知センサー 消毒タンク循環システム 完全消毒システム ( 純水ルーフ 超純水ルーフ ) タンク貯水の水質維持 TypeⅡ 純水の採水 ( カスカータ Ⅱ.Ⅰシリース のみ ) 35 70 105L タンク水質モニタリンク タンク貯水水質を比抵抗計でモニター ( 業界初 ) タンクUVランフ 254nm UVランフ ( オフ ション ) タンク機能タンクレヘ ルセンサー 5 段階レヘ ル表示 オートストッフ 機能 タンク容量 35/70/105Lの3 種類 耐震機能転倒防止用フックテ ィスヘ ンサー 2.4インチカラーテ ィスフ レイ フレキシフ テ ィスヘ ンサー ( 本体 ) リモートテ ィスヘ ンサー 3 2 RO 採水機能 採水機能 4 段階採水スヒ ート 定量採水 コンハ クト設計 フットスイッチフ ラク アント フ レイ方式 C K