2 / 27.9.207 /8 Luokka Laatuj. Työohjeet Versio/pvm 2 / 27.9.207 Laatijat Vastuuhenkilö Hyväksyjä Tämä ohje koskee Näyte Kauppila Jaana; Kauranen Jari; Savolainen Laura Kauranen Jari Hörkkö Sohvi Bakteeri- ja sieninäyte* Sidekalvoerite, kyyneltiehyt-erite, enukleoidun silmän erite Kajaani; Kemi; Kokkola; Oulu; Rovaniemi SILMÄN ALUEEN MIKROBIOLOGISET NÄYTTEET Kuntaliiton nro, Tutkimus tutkimuspyyntö 3492 Pu-BaktVi2 (3508 Pu-SienVi) Bakteeriviljely,pintanäyte Sieniviljely Näyteastia Geelikuljetusputki, (suklaa- ja sabouraudmaljat) Sarveiskalvonäyte, etukammioneste ja lasiainen 349 Pu-BaktVi 3508 Pu-SienVi (59 BaktVr) Bakteeriviljely, syvänäyte Sieniviljely. Huom! Oulussa tulee bakteerivärjäys pyytää tarvittaessa erikseen: 59 -BaktVr.) Suklaa-ja sabouraud.- maljat, mikrotioputki**, objektilasi ja kuljetuskotelo Hoitopiilolasi, piilolinssi, piilolinssin säilytysliuos; syvät vierasesineet Märkä- ja kudosnäytteet silmän ympäristön absessista ja haavasta Klamydia- ja gc-näyte Side-/sarveiskalvonäyte Mykobakteerinäyte Mikä tahansa silmästä tai sen ympäristöstä otettu näyte Virusnäyte Side-/sarveiskalvo-näyte Sarveiskalvonäyte, etukammioneste, lasiainen Parasiittinäyte Sarveiskalvonäyte, piilolasi, lasiainen 349 Pu-BaktVi 3508 Pu-SienVi 349 Pu-BaktVi 3508 Pu-SienVi 738 -CtGcNhO 506 -GcVi 282 -TbVi 4490 -TbNhO 2975 -VirVi 860 -HSVNhO 78 -VZVNho 75 -CMVNh 808 -AcantVi 730 -ToxoNhO Bakteeriviljely, syvänäyte Sieniviljely Bakteeriviljely, syvänäyte Sieniviljely Chlamydia trachomatis ja gonokokki, nukleiinihapot Gonokokkiviljely Mykobakteeriviljely, sis. Tb-värjäyksen M.tubercul. nukl happo Virusviljely Herpes simplex-, Varicella-Zoster- ja sytomegaloviruksen nukleiinihapon osoitukset Acanthamoeba, viljely Toksoplasma gondiin nukleiinihapon osoitus Steriili putki. Kudosnäytteelle lisätään muutama tippa steriiliä keittosuolaa. Geelikuljetusputki, anaerobiampulli tai steriili putki (kiinteä kudos) Klamydiaputki eli Abbott multi-collect Specimen Collection Kit Geelikuljetusputki Steriili putki Virusviljelyputki Steriili putki / ruisku (kts. näytteen-otto ohjeet) Acanthamoeba-näyteputki Steriili putki *Samasta näytteestä voidaan tehdä sekä bakteeri- että sienitutkimukset mikrobiologian laboratoriossa **OYS:n sisäiseen käyttöön tarkoitettu silmän bakteeri- ja sieniviljelynäytteen kuljetus- ja rikastusviljelyputki, jossa vähäinenkin bakteeri- ja sienimäärä voi lisääntyä tunnistettavaksi.
2 / 27.9.207 2/8 Välineet (kts kuvaliite: Mikrobiologian näytteenottovälineet) Näytteenottokohdan puhdistukseen tarvittavat välineet Steriilit näytteen ottamiseen tarvittavat välineet (vanutikut, rikkaneula, kyretit, leikkausveitset, ym.) Steriili vanutikku ja geelikuljetusputki (sivelynäyte bakteeri- ja sienitutkimuksiin) Elatusainemaljat (suklaamalja, sabouraud-malja) suoraa bakteeri- ja sieniviljelyä varten Mikrotioputki bakteerin ja sienten rikastusviljelyä varten Anaerobiampulli bakteeri- ja sieniviljelyitä varten (kun näytettä yli 0,5 ml) Steriili putki tai purkki (kudosnäyte, vierasesine, säilytysliuos, näyte nukleiinihapon osoitusta varten) Virusviljelynäytteen kuljetusputki Acanthamoebanäytteen kuljetusputki Steriilejä vanutikkuja ja hiospäisiä objektilaseja. Lasien kuljetuskotelo Potilastarrat ja näytteen laadun ja ottokohdan ilmaisevat lisätietotarrat Lähete Potilaan henkilötiedot, tutkimuksen pyytäjä ja vastausosoite Kliininen kysymyksen asettelu ja diagnoosi Näytteen ottoalueen anatominen sijainti ja näytteenottopaikka, oikea vai vasen puoli mainittava. Mahdolliset altistavat sairaudet, toimenpiteet ja lääkitys ennen näytteen ottamista ja sen jälkeen. Tarrat Kutakin näytettä varten tilataan potilastarra ja sen oheen tulostuva näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. Kun samaan astiaan otettavasta näytteestä pyydetään useampia tutkimuksia, astiaan liimataan ensisijaisesti pyydetyn tutkimuksen tarrat ja muut tarrat lisätään sulkupussiin, jossa näyteputki lähetetään mikrobiologian laboratorioon. Yleistä silmänäytteistä ja silmänäytteiden ottamisesta Silmänäytteitä otetaan toisesta tai molemmista silmistä samalla kertaa. Näytteitä voidaan ottaa silmän eri paikoista, samoin esimerkiksi sarveiskalvon eri kohdista. Siksi näytteenottopaikka on tarkasti ilmaistava jokaisen näytteen osalta lähetteessä ja näyteastiassa (putki, objektilasi tms.). Puudutteet voivat olla toksisia mikrobeille, joten ainakin sidekalvonäyte tulisi ottaa ennen paikallispuudutusaineen käyttöä. Puudutteen käyttö on mainittava lähetteen tarkenteessa. Syville silmänäytteille on olennaista näytteen vähyys, mikä asettaa lisävaatimukset mikrobiologisen tutkimuksen onnistumiselle ja kuinka monta eri tutkimusta näytteestä saadaan tehtyä. Siksi bakteeri- ja sieniviljelyissä on NordLab Oulun mikrobiologian laboratoriossa käytössä suoran maljaviljelyn lisäksi rikastusviljely elatusaineputkeen (mikrotioputki) otetusta näytteestä.
2 / 27.9.207 3/8 Sidekalvonäyte ja kyyneltiehye-erite bakteeri- ja sieniviljelyitä varten (Pu-BaktVi2, -GcVi, Pu-SienVi) Sidekalvonäyte otetaan yleensä alaluomen sidekalvolta potilaan katsoessa ylöspäin. Poista kuivunut märkäerite keittosuolaan kastelluilla vanupuikoilla ja sideharsotaitoksilla. Vedä luomea sormella alaspäin ja ota näyte vanutikulla () sidekalvoa sivellen niin että se ei kosketa muuta ihoa ja ympäristöä. Sulje tikku geelikuljetusputkeen (2). Liimaa putken kylkeen potilastarra ja lisätarra peräkkäin niin, että ne voi lukea viivakoodilukijalla. (3). Lähetä putki suojapussissa (4) mikrobiologian laboratorioon. 2 3 Tutkimus: Pu-BaktVi2 Näytteen laatu: SIDEKALVOERITE Näytteen tarkenne: oikea tai vasen 4 Näyte kyyneltiehyestä otetaan avaamalla tiehyt varovasti sormella silmän sisänurkasta kyynelpussin kohdalta painaen niin, että näytteeksi saadaan tuoretta tiehyestä tulevaa märkäistä eritettä, jota imeytetään vanutikkuun. Tikku suljetaan geelikuljetusputkeen ja lähetetään mikrobiologian laboratorioon. Vrt. sidekalvonäytteen käsittely. Bakteeriviljelynäyte silmäproteesin käyttäjän silmäkuopan pohjalta (Pu-BaktVi2) Näyte otetaan vanutikulla tulehtunutta silmänpohjaa sivellen. Tikku suljetaan geelikuljetusputkeen ja lähetetään mikrobiologian laboratorioon. Vrt. sidekalvonäytteen käsittely. Hoitopiilolasi, piilolinssi, piilolinssin säilytysliuos; syvät vierasesineet (Pu-BaktVi, Pu-SienVi) Näyte tai sen osa siirretään aseptisesti steriiliin putkeen, jossa on muutama tippa steriiliä keittosuolaa. Piilolinssin säilytysliuosta -2 ml steriilissä putkessa. Sulje putken korkki aseptisesti ja hyvin. Kiinnitä potilas- ja lisätietotarrat näyteastiaan () ja sulje se suojapussiin ja lähetän mikrobiologian laboratorioon. Tutkimus: Pu-BaktVi,Pu-SienVi Näytteen laatu: PIILOLINSSI Näytteen tarkenne: oikea tai vasen Acantamoeba-viljelyä varten tarvitaan erillinen näyte piilolinssistä ja sen säilytysliuoksesta. Ne voidaan lähettää sellaisenaan steriilissä putkessa. Piilolinssin voi lähettää myös Acanthamoeba-
2 / 27.9.207 4/8 näytteen kuljetusputkessa (joita saa NordLab Oulun mikrobiologian laboratoriosta). Kts. sarveiskalvonäytteen Acanthamoebaviljelynäyte. Sarveiskalvonäytteet bakteeri- ja sienitutkimuksia varten (Pu-BaktVi, Pu-SienVi) Lääkäri ottaa näytteet rikkaneulalla, kyretillä tms. ja steriilillä vanutikulla sarveiskalvon kohdasta, jossa epäilty infektio näkyy parhaiten. Suora maljaviljely. Ota maljat lämpenemään huoneen lämpöön 30 minuuttia ennen näytteen ottamista. Ota näyte vanutikulla ja viljele se sillä suklaa- ja sabouraud-maljoille hajotusviljelmiksi (,2,3). Kiinnitä maljojen pohjiin näytetarrat (4) ja toimita maljat heti sen jälkeen mikrobiologian laboratorioon hiilidioksidikaappiin inkuboitumaan. 2 3,2,3 Näyte mikrotioputkeen, joita saa NordLab Oulun mikrobiologian laboratoriosta (040-635633). Ota näyte vanutikulla ja siirrä se aseptisesti syvien silmänäytteiden kuljettamiseen tarkoitettuun pieneen kierrekorkilliseen elatusaineputkeen, mikrotioputkeen, sekoittamalla se näytetikun vanupäästä putkessa olevaan nesteeseen. () Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti. Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). 4 2
2 / 27.9.207 5/8 Bakteerivärjäysnäyte objektilasille (-BaktVr) Ota näyte vanutikulla ja sivele se objektilasille ympyrän sisälle. () Anna näytteen kuivua lasille. Kirjoita lyijykynällä lasin hiospäähän potilaan nimi ja syntymäaika, näytteen laatu (sik tai sak), näytteen ottopaikka (os./pkl) ja päivämäärä. (2) Sulje lasi objektilasien kuljetuskoteloon ja kiinnitä siihen potilastarra ja sen viereen näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. Toimita lasi kotelossaan mikrobiologian laboratorioon tutkittavaksi. 2 Chlamydia trachomatis- ja gonokokki nukleiinihappotutkimusnäyte, Herpesvirus nukleiinihappotutkimusnäyte side-/sarveiskavolta (-CtGcNhO, -HSVNhO, -VZVNhO) Ota steriili putki ja lisää siihen 5 tippaa steriliä keittosuolaa. Ota näyte vanutikulla side- /sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu infektoituneita soluja. Siirrä näyte aseptisesti putkeen ja sekoita se vanusta keittosuolaan. () Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. (2) Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). (3) 3 2
2 / 27.9.207 6/8 Virusviljelynäyte side-/sarveiskavolta. (-VirVi) Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu viruksen infektoimia soluja. Siirrä näyte aseptisesti virusviljelynäytteen kuljetusputkeen sekoittamalla se näytetikun vanupäästä putkessa olevaan nesteeseen.() Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). 2 Acanthamoeba-viljelynäyte sarveiskavolta. (-AcantVi) Ota näyte tukevavartisella vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu ameban infektoimia soluja. Siirrä näyte aseptisesti Acanthamoebanäytteen kuljetusputkeen sekoittamalla se näytetikun vanupäästä putkessa olevaan nesteeseen.() Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). 2
2 / 27.9.207 7/8 Näytteet silmän sisältä (etukammioneste, lasiainen,ym) (Pu-BaktVi, Pu-SienVi, -HSVNhO, -VZVNhO, -CMVNh, -ToxoNhO, -VirVi-, TbVi, -TbNhO) Ennen näytteen ottamista kliinikon tulee selvittää ja päättää, mitä kaikkia tutkimuksia näytteestä pyydetään, sillä silmän sisältä saatavien näytteiden pieni määrä rajoittaa niistä tehtävien tutkimusten lukumäärää. Yhteen tutkimukseen tarvitaan 0 200 µl näytettä, joten sitä joudutan laimentamaan, mikä taas heikentää tuloksen luotettavuutta. Olisi suotavaa, että bakteeri-, sieni- ja virusviljelytutkimuksiin saataisiin oma niihin jaettava näyte ja nukleiinihappotutkimuksiin toinen niihin jaettava näyte. 0,2 ml:n (laimennetusta) näytteestä voi tehdä 3-(4) nukleiinihappotutkimusta. Lääkäri ottaa näytteet operaation yhteydessä. Näyte otetaan aseptisesti neulalla ja ruiskulla etukammiosta ja/tai lasiaisesta aspiroimalla ruiskussa olevaan keittosuolaan, jolloin (laimennetun) näytteen kokonaistilavuus on 0,2 ml. Viljely- ja värjäysnäytteen jakaminen eri tutkimuksia varten. Tarkemmat kuvalliset ohjeet: kts sarveiskalvonäytteiden käsittely..bakteeriviljely (Pu-BaktVi): Tiputa ruiskusta tippa tuoreelle suklaamaljalle. 2.Sieniviljely (Pu-SienVi): Tiputa ruiskusta tippa tuoreelle Sabouraud-maljalle. 3.Bakteerivärjäysnäyte ( -BaktVr): Tiputa yksi tippa näytettä hiospäiselle objektilasille neulaa lasille koskettamatta. 4.Virusviljely ( VirVi). Tiputa ruiskusta tippa virusviljelyputkeen neulaa putkeen koskettamatta. 5.Mikrotioputkinäyte. (Pu-BaktVi) Siirrä näytteen loppuosa ruiskusta neulalla aseptisesti mikrotioputkeen ruiskuttamalla näyte elatusaineeseen, aspiroimalla elatusainetta ruiskuun ja huuhtelemalla ruiskun sisäosa sillä putkeen. Nukleiinihappotutkimusnäyte (-HSVNhO, -VZVNhO, -CMVNh, -ToxoNhO). Sulje näytteenottoruisku aseptisesti steriilillä korkilla. Liimaa ruiskuun ensisijaisesti pyydettävän tutkimuksen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. Sulje ruisku ja muiden tästä näytteestä pyydettävien nukleiinihappotutkimusten tarrat sulkupussiin. Lähetä pussi heti mikrobiologian laboratorioon. Märkä- ja kudosnäytteet silmän ympäristön absessista tai haavasta. Kts. ohje: Absessin (paiseen) ja märkänäppylöiden bakteeri- ja sieniviljelynäyte. Silmän mykobakteeritutkimusnäytteet (-TbVi, -TbVr, -TbNhO) Näytteet (kiinteä tai nestemäinen) steriilissä kierrekorkillisessa putkessa. Lisää putkeen 2-5 tippaa keittosuolaa näytteen kuivumisen estämiseksi. Mykobakteeriviljelytutkimuksen (-TbVi) voi pyytää myös mikrotioputkeen otetusta näytteestä (vrt. edellä). Kiinnitä putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra ja lähetä se mikrobiologian laboratorioon. Näytteiden säilyttäminen ja lähettäminen Toimita näytteet laboratorioon mahdollisimman pian, mielellään saman päivän aikana. Säilytä niitä huoneen lämmössä (lähetys samana päivänä) tai jääkaapissa viilennettynä (säilytys yli yön tai viikonlopun). Lisätiedot: NordLab Oulu, mikrobiologian laboratorio: p. 040-6356305.
2 / 27.9.207 8/8 Muutokset tässä versiossa: Vastuuhenkilö vaihtunut s.: Sarveiskalvonäyte, etukammioneste, lasiainen: lisätty Oulussa bakteerivärjäys erikseen tilattavaksi tutkimukseksi. Lisätiedot puhelinnumero muuttunut