LABORATORIO- KÄSIKIRJA 2017 Elintärkeitä vastauksia. movet.fi 1 Movet Laboratoriokäsikirja
2 Movet Laboratoriokäsikirja
Sisällysluettelo Palvelut 006 Näytteiden toimittaminen laboratorioon 006 Lähetteet 006 Tulokset 007 Laskutus 007 Suomalaista palvelua 007 Laatumme tukena Näytteenotto- ja käsittelyohjeita 008 Yleistä 008 Näytetyypit 008 Näytteenottovälineet 008 Häiritsevät tekijät verinäytteissä 010 Näyteputken valintataulukko 014 Eläimen valmistelu verinäytteenottoon 014 Verinäytteenotto 015 Verinäytteen käsittely 016 Sivelynäytteen valmistus verestä 017 Sivelynäytteen valmistus aspiraatista 018 Ulostenäytteet 018 Bakteriologiset näytteet 018 Maitonäytteet utaretulehdustutkimuksiin 019 Karvanäytteet dermatofyyttitutkimukseen 019 Raapenäytteet ulkoloistutkimukseen 019 Nukkatikkunäytteet PCR-tutkimuksiin 019 Näytteet geenitesteihin 019 Näytteet polveutumismäärityksiin 019 Viralliset todistukset Hevosten plasmapankki 020 Plasman luovuttaminen 020 Plasman tilaaminen 020 Plasman toimitus 020 Kiitokset 020 Plasmansiirto varsalle (plasmainfuusio) 020 Infuusio 020 Lähteet Movetin laboratoriojärjestelmän käyttöohjeet 021 Lähetteen tekeminen ja tulostaminen 021 Lähetteiden ja vastausten selaaminen Kliinisen kemian tutkimukset 024 AFOS (alkalinen fosfataasi) (S/P) 025 ALAT (alaniiniaminotransferaasi) (S/P) 026 Albumiini (S/P) 027 Amylaasi (S/P) 028 ASAT (Aspartaattiaminotransferaasi) (S/P) 029 Betahydroksibutyraatti (betahydroksivoihappo) (S/P, erottelu) 031 Bilirubiini, kokonais (S/P) 032 Bilirubiini, konjugoitu (S/P) 033 Bromidi (näytemäärä min. 1 ml) (S/P) 035 Ca (kalsium) (S/P) 037 CK (kreatiinikinaasi) (S/P) 037 Cl (kloridi) (S/P) 038 CRP (C-reaktiivinen proteiini, koira) (S/P/B) 039 Cu (kupari) (S/P) 040 Fe (rauta) (S/P) 041 Fenobarbitaali (S/P) 042 Fibrinogeeni (B/P) 043 Fruktosamiini (S/P/B) 044 GHbA1c (glykohemoglobiini, koira) (B) 045 Glukoosi (P/FP, erottelu) 046 GT (glutamyylitransferaasi) (S/P) 047 Haimalipaasi (kvantitatiivinen, haimaspesifinen) (kissa, koira) (S/P) 048 K (kalium) (S/P, erottelu) 049 Kolesteroli (S/P) 050 Kreatiniini (S/P/B) 051 Laktaatti (FP) 053 LD (laktaattidehydrogenaasi) (S/P) 054 Mg (magnesium) (S/P, erottelu) 055 Na (natrium) (S/P) 056 NEFA (non-esterified fatty acids, vapaat rasvahapot) (nauta) (S, erottelu) 057 Pi (fosfaatti) (S/P, erottelu) 058 Prot (kokonaisproteiini) (S/P) 059 SAA (seerumin amyloidi A) (S/P/B) 060 Sappihapot (S/P/B) 061 Seleeni (S/M) 062 TIBC (kokonaisraudansitomiskyky, UIBC+Fe) UIBC (saturoimaton raudansitomiskyky) (S/P) 063 TLI (trypsin-like immunoreactivity, koira) (S/P) 064 Triglyseridit (S/P) 065 Troponiini I (S/P) 066 Urea (S/P/B) 067 Zn (Sinkki) (S) Hematologiset tutkimukset 070 PVK, perusverenkuva (B) 071 TVK (PVK + 5 os. diffi) (B) 072 Retikulosyytit (kissa, koira) (B) 073 PT (protrombiiniaika, hyytymisaika) (Nasitr) 074 aptt (aktivoitu osittainen tromboplastiiniaika) (NaSitr) 075 Verisolujen morfologia + valkosoluerottelu, 5-os. mikroskopointi (B+lasit) Hormoni- ja vitamiinitutkimukset 078 ACTH (adrenokortikotropiini) (B, eroteltuna + jäähdytettynä!) 080 B12-vitamiini (S/P) 081 E-vitamiini (jäähdytettynä) (S) 3 Movet Laboratoriokäsikirja
082 Folaatti (S/P) 083 Insuliini, perustaso (hevonen, koira) (S/P) 084 ipth (paratyroideahormoni) (B, eroteltuna ja putki oikein täytettynä, kylmälähetys) 085 Kortisoli (S/P) 086 Maidon progesteroni (nauta) 087 Progesteroni (S/P) 088 T4, (tyroksiini, kokonais) (S/P) 089 T4-v (T4-vapaa, koira, kissa) ja T4-v autovasta-aineet poistettu, koira (S/P) 090 Testosteroni (hevonen, koira) (S) 091 TSH (tyreotropiini, koira) (S/P) Vasta-ainetutkimukset 094 Asetyylikoliinireseptori vasta-aineet (Myasthenia gravis) (S) 095 Borrelia vasta-aineet IgG + IgM (koira, kissa, hevonen) ELISA/IFAT (S/P) 096 Brucella canis vasta-aineet -pikatesti, RSAT tai -qpcr 097 Coombsin testi, suora (kissa, koira, hevonen) (B) 098 EHV (hevosen herpesvirus) 1 ja 4 vasta-aineet IFAT (S) 099 Ehrlichia canis vasta-aineet IFAT (S/P) 100 FeLV/FIV pikatesti (S/P/B) 101 Herpesvirus vasta-aineet (koira) IFAT (S/P) 102 Hevosen IgG (kvantitatiivinen varsan vasta-aine) (S/P/B/M) 103 Kissan veriryhmä (A, AB, B) pikatesti (B) 104 Leishmania infantum vasta-aineet ELISA (S/P/B) 105 Leptospira interrogans vasta-aineet MAT (S/P/B) 106 Mycoplasma bovis vasta-aineet ja qpcr (nauta) 107 Naudan IgG (kvantitatiivinen vasikan vasta-aine) (S/P/B/M) 108 Neospora caninum vasta-aineet ELISA (nauta, koira ja muut) (S/M) 109 Punkkivälitteiset pikatesti koira (Amerikkalainen sydänmato, Ehrlichia, Borrelia, Anaplasma) (S/P/B) 110 Reumafaktori (koira) SAT (S) 111 Sarcoptes (kapi/syyhy) vasta-aineet (koira) ELISA (S/P/B) 112 TGA (tyreoglobuliini autovasta-aineet) (koira) ELISA (S/P) 113 Toxoplasma vasta-aineet IgG ja IgM, IFAT 114 Verinäytteiden ristikoe (B + S) Ulostetutkimukset 117 Campylobakteeripikatesti (tunnistaa myös kuljetuksessa kuolleet bakteerit) 118 Clostridium perfringens enterotoxin (ELISA) 119 Cryptosporidia parvum-pikatesti 120 E.coli K99 (F5) pikatesti (nauta) 121 E.coli/2-hem.strept. määrä (hevonen) 122 Giardia (ELISA, qpcr, pikatesti) 123 Lampaan / naudan sisäloiset (McMaster + sed/flot, kokkidien jaottelu koon perusteella) 121 Madon munat, kpl/g (McMaster) (hevonen, nauta, lammas, sika, kani jne.) 127 Naudan Coronavirus pikatesti 128 Parasiitit Baermann, keuhkomatojen diagnosointiin (kissa, koira) 129 Parasiitit sed/flot, tunnistus (kissa, koira, kani, eksoottiset lemmikit jne.) 130 Parvovirus/kissarutto pikatesti (koira, kissa) 131 ph-mittaus (hevonen) 132 Rotavirus pikatesti (koira, kissa, hevonen, nauta, sika, vuohi) 133 Salmonella spp. (viljely) 134 Tritrichomonas foetus (qpcr) Virtsatutkimukset 137 COLA (kystiini, ornitiini, lysiini, arginiini), koira (U) 138 Laaja virtsapaketti (Prot/Krea, Prot, Krea, ph, Om.paino, Gluk, Ketoain, Bil, Hb/Myoglob, Leuk) (U) 140 NAG (virtsan N-asetyyliglukosaminidaasi) 141 Virtsakivianalyysi 142 Virtsan albumiini (mikroalbuminuria) 143 Virtsan Mg 144 Virtsan kortisoli/krea-suhde 145 Virtsan prot/krea-suhde 146 Virtsan sedimentti Allergiatutkimukset 149 Allergiatutkimukset HESKA Sively-, punktio- ym. näytteet 155 Aspiraatin (esim. nivelneste) kokonaisproteiini (S) 156 Aspiraatin solut, mikroskopointi tai koneellinen erottelu (nivelneste, peritoneaalineste jne.) 157 Gram-värjäys 158 Kurarupi (Dermatophilus congolensis) mikroskopointi 159 Lasiaisen Mg (nauta) 160 Trakealiman solut TW/BAL-näyte, mikroskopointi 161 Ulkoloiset/raapenäyte Bakteriologiset ja sienitutkimukset 164 Antibioottiherkkyysmääritykset 165 Bakteeri-, home- ja hiivaviljelyt, aerobi ja anaerobi 167 Dermatofyytit (sieniviljely + PCR tunnistus yleisimmille lajeille) 168 Kontrollibakteeriviljely hoidon jälkeen (ei sisällä tunnistusta) 169 Hiivalääkeherkkyysmääritys Patogeeni PCR -tutkimukset 172 BCV Bovine respiratory coronavirus (qpcr) 173 Bordetella bronchiseptica qpcr kissa/koira/hevonen 174 BRSV Bovine respiratory syncytial virus (qpcr) 175 Brucella canis vasta-aineet -pikatesti, RSAT tai -qpcr 176 CDV Canine distempervirus (penikkatauti) qpcr 177 Chlamydophila felis qpcr 178 CHV Canine herpesvirus (qpcr) 179 Canine parainfluenzavirus 180 Hevosen herpesvirukset 1 ja 4, EHV1 ja EHV4 (qpcr) 181 EVA Hevosen arteriittivirus (qpcr) 4 Movet Laboratoriokäsikirja
182 FCoV Feline Coronavirus/FIP (qpcr) 183 FCV Feline calicivirus qpcr 184 FeLV kissan leukemiavirus ja FIV kissan immuunikatovirus qpcr (B erottelematta) 185 FHV Feline herpesvirus qpcr 186 Giardia (ELISA, qpcr, pikatesti) 187 Influenssa A -virus (qpcr) (hevonen, koira) 188 Microsporum canis qpcr (omasta viljelystä) 189 Mycoplasma bovis vasta-aineet ja qpcr (nauta) 190 Mycoplasma felis qpcr 191 Mycoplasma spp (qpcr) 192 PCV2 Porcine Circovirus tyyppi 2 qpcr (S/B/Swab) 193 Pälvisilsa l. Trichophyton verrucosum (viljely + qpcr) 194 Streptococcus equi subsp. equi (pääntauti)(qpcr) 195 Strongylus vulgaris - iso sukkulamato (qpcr) (hevonen) 197 Tritrichomonas foetus (qpcr) 198 Utaretulehdus-PCR: 15 patogeenia + betalaktamaasigeeni Geenitestit: perinnölliset ominaisuudet / sairaudet sekä polveutumismääritykset 202 Alaskanmalamuutin polyneuropatia 203 Burmankissan GM2 gangliosidoosi 204 Burmankissan head defect 205 Burmankissan hypokalemia 206 Burmankissan naamioväritys 207 CEA (Collie Eye Anomaly, Choroidal Hypoplasia, koira) 208 DM (Degenerative myelopathy, koira) 209 EIC (Exercise induced collapse, koira) 210 FN (familiaarinen nefropatia l. munuaissairaus) 211 GSD 4 (Glykogeenin varastoitumissairaus tyyppi IV, NFO) 212 HCM Maine Coon ja Ragdoll (hypertrofinen kardiomyopatia, kissa) 213 HNPK (Hereditary nasal parakeratosis, kuivakirsuisuus) 214 ICT-A (Kultaisennoutajan iktyoosi) 215 Kissan veriryhmä (genotyyppi: veriryhmä b:n kantajuus) 216 Kystinuria (koira) 217 Long hair / short hair (kissa) 218 Luonnontöpöhäntä (t-box, koira) 219 MDR1 (multidrug resistance, koira) 220 MPS (Mucopolysaccharidosis tyyppi VII) 221 Nautojen geneettiset testit 223 PDE/NME (Susceptibility to Pug dog encephalitis/ Necrotizing Meningoencephalitis, mopsi) 224 PKD (Polykystinen munuaissairaus, kissa) 225 PKinase def (Pyruvaattikinaasin puutos, kissa) 226 PLL (primaarinen linssiluksaatio, koira) 227 PRA rdac (etenevä verkkokalvon rappeuma, kissa) 228 PRA-rcd1 (etenevä verkkokalvon surkastuma, koira) 229 PRA-rcd2 (etenevä verkkokalvon surkastuma, koira) 230 PRA-rcd3 (etenevä verkkokalvon surkastuma, koira) 231 PRA-rcd4 (etenevä verkkokalvon surkastuma, koira) 232 prcd-pra (etenevä verkkokalvon surkastuma, koira) 233 PSSM1 (Polysaccharide Storage Myopathy, hevonen) 234 Siamese colourpoint (kissa) 235 SMA (perinnöllinen spinaalinen lihasatrofia, kissa) 236 VWD1 (von Willebrandin tauti tyyppi 1, koira) 237 Väritys agouti (kissa) 238 Väritys amber (kissa) 239 Väritys chocolate (kissa) 240 Väritys cinnamon (kissa) 241 Väritys diluutio (D-lokus, koira) 242 Väritys diluutio (kissa) 243 DNA-tunniste ja polveutuminen (B) koira, kissa ja nauta Liitteet 246 Aivolisäke- ja lisämunuaisperäisten tautien diagnostiikka 247 Akuutin faasin tulehdusmerkkiaineet 249 Cushingin ja addisonin taudin diagnosoinnissa käytettäviä tutkimuksia 251 Eri ikäisten varsojen ja pentujen viitearvoja 252 Eri ikäisten varsojen sekä kissan- ja koiranpentujen viitearvoja 253 Diabeettisen ketoasidoosin (DKA) diagnosointi 255 Haasteena haima - Kuinka spesifinen on spesifinen 259 Hevosten metabolisen oireyhtymän EMS diagnosoinnista 260 Hevosten Cushingin taudin PPID diagnosoinnista 261 Hivenaineet hevosten ruokinnassa 264 Insuliini ja hevosen metabolinen oireyhtymä (Equine Metabolic Syndrome, EMS) 265 Koirien Cushingin oireyhtymä eli hyperadrenokortisismi 266 Koirien hypotyreoosi 267 Saostus vs. dialyysi T4-autovasta-aineiden poistamisessa 268 Tietoa qpcr:stä 269 Varsan ensimmäiset 24 tuntia ovat elintärkeitä Keskusteleva ja ystävällinen asiakaspalvelija. Uutta tuottava, luotettava edelläkävijä. Nopea, ajatteleva huippuosaaja. Julkaistu 11/2016 Ajantasaisin tieto mm. sopivista näytetyypeistä löytyy aina laboratoriojärjestelmästä. Huomioithan että painetun kirjan tieto voi olla vanhaa jo painopäivänä, sillä tieto muuttuu tutkimuksen myötä. Movet Oy pidättää oikeuden muutoksiin. 5 Movet Laboratoriokäsikirja
Palvelut Näytteiden toimittaminen laboratorioon EU-lainsäädäntö edellyttää, että postin kuljetettavaksi tarkoitetut biologiset (veri)näytteet tulee pakata asianmukaisesti niin, ettei muulle postille aiheudu vaaraa. Vastauslähetyslaatikoita saa tilattua veloituksetta osoitteesta www.movet.fi tai sähköpostilla: tilaukset@movet.fi Näyteputket pakataan selkeästi merkittyinä ehjään, suljettavaan muovipussiin, jonka sisälle laitetaan imupaperia. Pussi pakataan Movetilta saataviin kelta-mustaraidallisiin lähetyslaatikoihin, joiden mukana toimitetaan myös pussi ja imupaperi. Näyteputkia ei saa lähettää kirjekuoressa. Näytteitä ei kannata jättää postilaatikkoon, vaan ne tulee viedä sisälle postitoimistoon tai asiamiespostiin, etenkin mikäli näytteillä on jäätymis- tai lämpenemisvaara. Lähetyksen päällä tulee olla merkintä: "Eläinperäinen näyte - Vapautettu". Movetille lähetettyjä, yli jääneitä näytteitä voidaan käyttää tutkimustarkoituksiin, kuten uusien menetelmien kehittämiseen. Näytteiden yksilöiviä tietoja ei koskaan julkaista. Tutkimuskäytön voi erikseen kieltää sähköisellä lähetteellä lähetekohtaisesti. Lähetys on valmiiksi maksettu vastauslähetys: Movet Oy, Kuopio Tunnus 5017683 70006 VASTAUSLÄHETYS Postin lauantaijakelu Lauantaijakeluun lähetettävässä laatikossa on oltava seuraavat tarrat: Pikakirjeeseen kiinnitettävät Exprèsviivakooditarrat ja lauantaijakelua osoittava tarra. Laatikko tulee jättää kuljetettavaksi postin toimipisteeseen. Sitä ei siis saa jättää kirjelaatikkoon. Lähetystä voi seurata seurantakoodin avulla Postin seurantasivulla. Veloitamme lauantailähetyksistä hinnaston mukaisen hinnan laskutuksen yhteydessä. Matkahuolto Noudamme näytteitä Kuopion matkahuollosta. Ilmoita lähetyksen saapumisaika ja lähetyksen tiedot laboratorioon aina matkahuollon kautta lähettäessäsi, jotta tiedämme noutaa paketin ajoissa. Lähetyksen tulee olla perillä Kuopion matkahuollossa ennen klo 14.00. Suoraan laboratoriolle Näytteet voi tuoda myös suoraan laboratorioon Bioteknia 1 rakennukseen klo 8.00 16.00 välisenä aikana. Aukioloaikojen ulkopuolella näytteet voi jättää alaoven postiluukkuun. Arkisin ennen klo 13.00 saapuneista näytteistä kliinisen kemian, hormoni- ja vitamiinitutkimusten sekä pikatestien tulokset valmistuvat yleensä samana päivänä. PCR-tutkimuksia ja ELISA-testejä tehdään 1-2 kertaa viikossa. Progesteronimittaukset ja utaretulehdustutkimukset tehdään maitonäytteistä päivittäin. Yhteistyölaboratorioissa tehtävät tutkimukset valmistuvat yleensä kahden viikon kuluessa. Jokaisen tutkimuksen kohdalla on kerrottu niiden tarkempi valmistumisaika. HUOM! Mikäli lähetys on kiireellinen ja haluat varmistaa sen saapumisen meille seuraavaksi aamuksi, varusta ko. lähetys myös pikakirjeen tarroilla ja viivakoodilla, joita saat lähimmästä Postista. Lähetteet Suosittelemme tekemään sähköiset lähetteet Movetin laboratoriopalvelussa (https://movet.provet.fi). Provet Net, Provet Win ja Terakuun klinikkaohjelmistoista lähetteet saa siirtymään suoraan järjestelmäämme. Tällöin myös tulokset siirtyvät automaattisesti suoraan potilaskortille. Tarvittaessa voit tulostaa paperilähetteen osoitteesta www.movet. fi ja laittaa sen täytettynä näytteen mukaan lähetyslaatikkoon. Jos et voi käyttää verkkoyhteyttä, voit kirjoittaa lähettäjän ja eläimen tiedot sekä haluamasi tutkimukset tyhjälle paperille. Lähetteettä toimitetuista näytteistä on oltava seuraavat tiedot: Eläimen nimi ja mahdolliset rekisteröintinumerot/tiedot Eläimen omistaja yhteystietoineen Näytteen lähettäjä (mikäli eri kuin omistaja yhteystietoineen Pyydetyt tutkimukset Laskutusosoite ja -sähköposti Laskunmaksajan y-tunnus tai hetu Puhelinnumero Tulokset Asiakkaanamme saat halutessasi välittömästi ilmoituksen tutkimusten valmistumisesta tekstiviestillä. Valmiit tulokset toimitamme myös sähköpostiisi. Tutkimusvastaukset säilyvät laboratoriopalvelumme palvelimella, josta saat ne myöhemminkin käyttöösi. Mikäli omistajan 6 Movet Laboratoriokäsikirja
sähköpostiosoite on täytetty lähetteelle, toimitamme tulokset myös siihen automaattisesti. Tulosten mukana toimitetaan täysikasvuisten eläinten viitearvot, jotka laboratoriojärjestelmä hakee lähetteelle valitun eläinlajin perusteella. Nuorille eläimille löytyy viitearvoja mm. tämän kirjan lopusta. Laboratoriopalvelun osoite: https://movet.provet.fi/ Laskutus Laskun toimitustavan voit valita laboratoriojärjestelmässä Omat tiedot -kohdassa. Mikäli muuta ei ole ilmoitettu, toimitamme laskun näytteenlähettäjän sähköpostiin. Pyydettäessä voimme toimittaa laskun myös verkkolaskuna tai postitse. Postituksesta veloitamme yksityisasiakkailta toimistokuluja 5 euroa. Vaadimme lähetteille laskun maksajan y-tunnuksen tai henkilöllisyystunnuksen yksilöintiä varten. Eläinlääkäriasiakkaita laskutamme kerran kuukaudessa ja yksityisasiakkaita aina pian tulosten valmistumisen jälkeen. Voimme laskuttaa eläinlääkäreiden lähettämistä näytteistä myös suoraan eläinten omistajia. Tällöin laskun lähetys tapahtuu aina postitse ja tutkimuksista veloitetaan kuluttajahinnaston mukainen hinta. Mikäli lasku osoitetaan suoraan eläimen omistajalle, tulee lähetteelle täyttää täydelliset osoitetiedot (nimi, katuosoite, postinumero ja postitoimipaikka) sekä asiakkaan y-tunnus tai henkilötunnus. Mikäli omistajan sähköpostiosoite on täytetty, lähetetään siihen tulokset automaattisesti. Henkilötietorekisteriselosteen löydät nettisivuiltamme. Suomalaista palvelua Movet on kantanut avainlippumerkkiä ilolla ja ylpeydellä toukokuusta 2014 lähtien. Pyrimme tukemaan ja edistämään suomalaista työtä, sekä aktiivisesti kehittämään uusia tutkimuksia eläinten hyvinvoinnin parantamiseksi. Laatumme tukena Olemme myös mukana valtakunnallisessa veren progesteronitulostasojen laaduntarkkailussa. Movet on Eviran rekisteröimä laboratorio seuraavien ilmoitettavien eläintautien osalta Brucella canis, Brucella spp. Salmonella (ei vielä tuotantoeläimille*) Tritrichomonas foetus Kampylobakteeri naudoilla, sioilla, lampailla ja vuohilla sekä linnuilla Maksamato naudoilla, lampailla ja vuohilla Mycoplasma bovis Nautojen pälvisilsa Naudan punatauti Naudan virusripuli (Corona) Naudan keuhkomato Sikojen Clostridium perfringens Sikojen kapi (Sarcoptes scabiae var. suis) Hevosten herpesvirukset 1 ja 4 (Equine herpesvirus) Pääntauti (Streptococcus equi) Virusarteriitti (EVA) Hevosinfluenssa A Hevossyyhy (Sarcoptes equi) Lammassyyhy (Psoroptes ovis) Kettusyyhy eli Sarcoptes koirilla ja turkiseläimillä Leishmania koirilla Penikkatauti (Canine distempervirus) koirilla ja turkiseläimillä Toksoplasmoosi koirilla ja kissoilla Kissarutto Kansallisen eläintautilain mukaisesti Movet saa rekisteröinnin myötä Movet analysoida näytteitä listattuihin tauteihin liittyen. Tulokset kyseisten tautien osalta raportoidaan Eviralle lain vaatimassa laajuudessa. *Olemme akkreditoimassa salmonellalaboratoriota ja haemme FINAS-akkreditointia, samoin kuin EVIRA:n hyväksyntää salmonellatutkimuksille tuotantoeläinten osalta vuoden 2016 2017 aikana. Tarkista Movetin kotisivuilta tai laboratoriostamme päivitetty tieto salmonellavalvontaohjelman mukaisten näytteiden analysoinnin osalta. "Labquality tarjoaa ulkoisen laadunarvioinnin kierroksia kaikille laboratoriolääketieteen erikoisaloille. Ulkoisen laadunarvioinnin avulla laboratoriot voivat seurata ja parantaa analytiikkansa tasoa, ja saada suoriutumisestaan ulkopuolisen, riippumattoman arvioinnin." Olemme rakentamassa standardin ISO/IEC 17025 mukaista laadunhallintajärjestelmää ja sen myötä tulemme hakemaan akkreditointia laboratoriopalvelujemme tietyille pätevyysalueille vuoden 2016-2017 aikana. Kliinisen kemian tutkimuksemme perustuvat kansainvälisen kattojärjestön (IFCC) suosittelemiin menetelmiin. Varmistamme tutkimustulosten paikkansapitävyyden päivittäin tarkistamalla analyyseissa käytettävien reagenssien ja laitteiden toimivuuden sisäisillä kontrolliajoilla. Osallistumme Eviran organisoimiin utaretulehdusnäytteiden ulkoisiin laadunvarmistuskierroksiin. Suomen Kennelliitto on hyväksynyt Movetin viralliseksi laboratorioksi seuraavien testien osalta Polveutumisen varmistus (ISAG standardin mukainen mikrosatelliittimarkkereihin perustuva määritys) DNA-tunnisteet (ISAG standardin mukainen mikrosatelliittimarkkereihin perustuva määritys) T-box luonnontöpöhäntä, julkaistu mutaatio suoralla määrityksellä PLL (primaarilinssilukasaatio), julkaistu mutaatio suoralla määrityksellä FN (familiaarinen nefropatia cockerspanielit), julkaistu mutaatio suoralla määrityksellä prcd-pra (etenevä verkkokalvon surkastuma), julkaistu mutaatio suoralla määrityksellä. Dobermannien viralliset maksatutkimukset AFOS ja ALAT 7 Movet Laboratoriokäsikirja
Näytteenotto- ja käsittelyohjeita Yleistä Oikein otettu ja käsitelty näyte on luotettavien tulosten määrittämisen kulmakivi. Yleisimmät tutkimustuloksia vääristävät seikat liittyvät näytteenottotekniikkaan, näyteputkien käsittelyyn tai näytteenottoajankohtaan. Edustavan näytteen saaminen ei vaadi suurta erityisosaamista, perustiedot näytteenotosta sekä -käsittelystä ja niiden huolellisesta noudattamisesta riittävät. Näyteputkia ja näytteenottovälineitä voi tilata Movetilta. Neuvomme myös näytteenottoa, -säilytystä ja -lähetystä koskevissa kysymyksissä numerossa 050 5020 770. Kysymyksiä voi lähettää sähköpostilla osoitteeseen info@movet.fi. Näytetyypit Tutkimusten yhteydessä käytetään seuraavia lyhenteitä ilmaisemaan näytetyyppiä, josta tutkimus voidaan tehdä. S-seerumi P-Li-hepariiniplasma B-EDTA-kokoveri (tai -plasma) FP-sokeri- / laktaattiputket F-uloste U-virtsa M-maito Näytteenottovälineet Veriputkia, näytteiden palautuslaatikoita, neuloja ja holkkeja sekä muita näytteenottovälineitä Movetille lähetettäviä näytteitä varten voit tilata meiltä nettisivujen kautta (www. movet.fi) tai sähköpostilla (tilaukset@movet.fi). Näyteputken valinta -taulukosta voit tarkistaa millaiseen putkeen otetusta näytteestä haluamasi tutkimukset voidaan tehdä. Häiritsevät tekijät verinäytteissä Verinäytteistä tehtävien määritysten luotettavuuteen voivat vaikuttaa häiritsevästi näytteen tietyt ominaisuudet. Näistä yleisimpiä ovat lipemia, hemolyysi ja ikteria. Analyysiä voidaan pitää merkitsevän herkkänä kyseiselle tekijälle, mikäli tekijä voi muuttaa tulosta yli 10 %. 8 Movet Laboratoriokäsikirja
Lipemia Yksi yleisimmistä kliinisiä laboratoriomäärityksiä häiritsevistä tekijöistä on näytteen lipeemisyys, mikä tarkoittaa näytteessä olevista rasvoista, yleisimmin triglyserideistä eli glyserolin rasvahappoestereistä johtuvaa seerumi- tai plasmanäytteen sameutta. Lipemia vääristää useiden määritysten tuloksia (esim. kreatiniini). Triglyseridejä on veressä rasvaa sisältävän ravinnon nauttimisen jälkeen, koska osa ravinnon rasvoista on triglyseridimuodossa. Tämän lisäksi rasvojen kuljetus ja jatkokäsittely elimistössä tapahtuu suurelta osin triglyserideinä. Myös jotkut sairaudet ja rasvaaineenvaihdunnan häiriöt aiheuttavat triglyseridien jäämistä pitkittyneesti tai pysyvästi vereen. Tällaisia ovat esimerkiksi hoitamaton (tai huonosti hoidettu) diabetes, haimatulehdus ja rasvamaksa. Lipeemisyys voidaan poistaa näytteestä esimerkiksi sentrifugoimalla pitkään hyvin suurella g-arvolla (ns. ultrasentrifugaatio), jolloin seerumia/plasmaa kevyempi rasvaosa siirtyy näytteen pinnalle. Toinen tapa on saostaa rasvat liukenemattomiksi yhdisteiksi ja sentrifugoida ne näyteputken pohjalle. Saostaminen voi kuitenkin vaikuttaa myös mitattavien analyyttien pitoisuuksiin. Ikteria Näytteen korkea bilirubiinipitoisuus aiheuttaa seerumin/ plasman värjäytymisen oranssin ruskeaksi, jolloin puhutaan ikteriasta. Ikteria häiritsee monia laboratoriomäärityksiä, eikä sitä voida poistaa näytteestä. Näytteen ikteerisyydestä lisätään kommentti lähetteelle tulosten tulkintaa varten. Influence of hemolysis on routine clinical chemistry testing. Lippi G, Salvagno GL, Montagnana M, Brocco G, Guidi GC. Clin Chem Lab Med. 2006; 44(3):311 316. Interferences in immunoassays. Schiettecatte J, Anckaert E, Smitz J. Advances in immunoassay technology. ISBN 978-953- 51-0440-7. Antibody interference in thyroid assays: a potential for clinical misinformation. Despres N, Grant AM. Clin Chem. 1998; 44(3), 440 454. Erroneous laboratory results: what clinicians need to know. Ismail Y, Ismail AA, Ismail AA. Clin Med. 2007; 7:357 61 Poistamme lipemian näytteistä sentrifugoimalla. Lipemiasta lisätään lähetteelle myös kommentti tulosten tulkintaa varten. Hemolyysi Hemolyysi tarkoittaa seerumi-/plasmanäytteen punaista väriä, joka johtuu hajonneista punasoluista vapautuneesta hemoglobiinista. Se häiritsee useita määrityksiä, eikä sitä voida poistaa näytteestä. Näytteen täydellinen hemolyysi estää analyysien tekemisen kokonaan. Tiettyjen analyyttien, kuten kaliumin, fosfaatin tai foolihapon pitoisuudet muuttuvat hemolyysin seurauksena, koska verisolut sisältävät näitä aineita enemmän kuin veriplasma. Hemolyysiä aiheuttavat mm. voimakas staasi näytteenotossa, pieni näytemäärä antikoagulanttimäärään nähden sekä kokoverinäytteen jäätyminen ja kuumeneminen. Näytteen hemolyysistä lisätään kommentti lähetteelle tulosten tulkintaa varten, eikä hemolyysille herkkiä määrityksiä tehdä näytteestä lainkaan ilman erillistä pyyntöä. 9 Movet Laboratoriokäsikirja
Näyteputken valintataulukko Tutkimusryhmä ja tutkimuksen nimi Seerumi LiHepariini EDTA Sitraatti Fluoridi Kliinisen kemian tutkimukset (G)HbA1c (glykohemoglobiini) X X Kokoveri AFOS (alkalinen fosfataasi) ** X X ALAT (alaniiniaminotransferaasi) * ** X X Albumiini X X Amylaasi X X ASAT (aspartaattiaminotransferaasi) ** X X Betahydroksibutyraatti X X Bilirubiini, kokonais **** X X Bilirubiini, konjugoitu **** X X Bromidi X X min. 1 ml Ca (kalsium) X X CK (kreatiinikinaasi) ** X X Cl (kloridi) X X CRP (C-reaktiivinen proteiini) ** X X Fe (rauta) * ** X X Fenobarbitaali X X Fibrinogeeni X X X Fruktosamiini X X X GLDH (glutamaattidehydrogenaasi) (S/P) ** X X Glukoosi X X Erottelu heti GT (glutamyylitransferaasi) * ** X X K (kalium) ** X X Erottelu Kolesteroli X X Kreatiniini ** X X X Laktaatti LD (laktaattidehydrogenaasi) X X Lipaasi (kvantitatiivinen, haimaspesifinen) X X Mg (magnesium) * ** *** X X Erottelu Na (natrium) X X NEFA (non-esterified fatty acids, vapaat rasvahapot) X Erottelu Pi (fosfaatti) ** *** X X Erottelu Prot (kokonaisproteiini * ** X X SAA (seerumin amyloidi A) X X X Sappihapot X X X TLI (trypsin-like immunoreactivity) X X Triglyseridit X X Troponiini I X X X 10 Movet Laboratoriokäsikirja
Tutkimusryhmä ja tutkimuksen nimi Seerumi LiHepariini EDTA Sitraatti Fluoridi UIBC (saturoimaton raudansitomiskyky) ** *** TIBC (kokonaisraudansitomiskyky, UIBC+Fe) ** X X Urea X X X Hematologiset tutkimukset PVK, perusverenkuva ja TVK, Täydellinen verenkuva aptt (aktivoitu osittainen tromboplastiiniaika) PT (protrombiiniaika, hyytymisaika) Hormoni-/vitamiinitutkimukset ACTH (adrenokortikotropiini) E-vitamiini ipth (paratyroideahormoni) B12-vitamiini **** X X Folaatti ** **** X X Insuliini X X Kortisoli X X Progesteroni X X T4, (tyroksiini, kokonais) X X TSH (tyreotropiini) X X T4-v (T4-vapaa) X X T4-v autovasta-aineet poistettu X X Vasta-ainetutkimukset X X X X X X X X Kokoveri Oikea täyttö ja erottelu Oikea täyttö ja erottelu Erottelu < 1 h, jäähdytys Erottelu < 1 h, jäähdytys Coombsin testi, suora (koira, kissa, hevonen) X Kokoveri Kissan veriryhmä (A, AB, B) pikatesti X Kokoveri Asetyylikoliinireseptori vasta-aineet (Myasthenia gravis) EHV (hevosen herpesvirus) 1 ja 4 vasta-aineet IFAT Leishmania vasta-aineet ELISA X X X Sarcoptes (kapi/syyhy) vasta-aineet (koira) ELISA X X X X X * Lipemia häiritsee määritystä (saadaan yleensä poistettua) ** Hemolyysi häiritsee määritystä *** Ikteria häiritsee määritystä **** Suojattava valolta 11 Movet Laboratoriokäsikirja
Tutkimusryhmä ja tutkimuksen nimi Seerumi LiHepariini EDTA Sitraatti Fluoridi Mycoplasma bovis vasta-aineet ELISA (nauta) Neospora caninum vasta-aineet ELISA (nauta, koira ja muut) Borrelia vasta-aineet IgG + IgM (kissa, hevonen) IFAT Borrelia vasta-aineet IgG + IgM (koira) ELISA Brucella canis vasta-aineet -pikatesti (koira) (jäähdytettynä) Herpesvirus vasta-aineet (koira) IFAT X X TGA (tyreoglobuliini autovasta-aineet) (koira) ELISA X X Toxoplasma vasta-aineet IgG + IgM (koira, kissa) X X Canine 4Dx koira (Amerikkalainen sydänmato, Ehrlichia, Borrelia, Anaplasma) pikatesti X X X X X X X X X X FeLV/FIV pikatesti X X X Hevosen IgG (kvantitatiivinen varsan vasta-aine) X X X Naudan IgG (kvantitatiivinen vasikan vasta-aine) X X X Virtsatutkimukset Alb (mikroalbuminuria) Mg (virtsan magnesium) NAG (virtsan N-asetyyliglukosaminidaasi) Virtsan kortisoli/krea-suhde Virtsan prot/krea-suhde Bakteeriviljelyt Stabilur-putki tai säilöntäaineeton Stabilur-putki tai säilöntäaineeton Stabilur-putki tai säilöntäaineeton Stabilur-putki tai säilöntäaineeton Stabilur-putki tai säilöntäaineeton Bakteerinäytteenottotikku * Lipemia häiritsee määritystä (saadaan yleensä poistettua) ** Hemolyysi häiritsee määritystä *** Ikteria häiritsee määritystä **** Suojattava valolta 12 Movet Laboratoriokäsikirja
Virtsan bakteeriviljelyt Sieniviljelyt Patogeeni PCR-tutkimukset Geenitestit: Perinnölliset ominaisuudet ja sairaudet Polveutumismääritykset Culture tai säilöntäaineeton, Bakteerinäytteenottotikku tai maljalle/ uricultille viljeltynä Hammasharja tai kuiva raapenäyte Pyyhkäisynäytteille nukkatikku Poskisoluharja Cytobrush Plus 2 kpl/ eläin tai ED- TA-kokoveri EDTA kokoveri (tai poskisoluharja 3 kp/ eläin) * Lipemia häiritsee määritystä (saadaan yleensä poistettua) ** Hemolyysi häiritsee määritystä *** Ikteria häiritsee määritystä **** Suojattava valolta Poskisoluharja GEENITESTIT Nukkatikku VIRUS-/BAKTEERIPCR-TUTKIMUKSET CULTURE-virtsaputki STABILUR-virtsaputki Bakteerinäytteenottotikku BAKTEERIVILJELYT 13 Movet Laboratoriokäsikirja
Eläimen valmistelu verinäytteenottoon Eläimen tulisi paastota, eli olla syömättä useita tunteja, mielellään 10 12 tuntia, ennen näytteenottoa. Ruuan rasvojen aiheuttama plasman/seerumin sameneminen (lipemia) häiritsee useita mittauksia. Yleensä eläimelle kuitenkin on hyvä antaa hieman juomaa paaston aikana kuivumisen välttämiseksi. Kuivuminen voi osaltaan aiheuttaa vääristymiä joihinkin tutkimuksiin. Eläin olisi hyvä pitää rauhallisena ja levossa muutamia tunteja ennen näytteenottoa sekä näytteenoton aikana, ellei haluta nimenomaan saada rasitusarvoa jostakin tietystä tutkimuksesta (esim. laktaatti, hemoglobiini yms.). Verinäytteenotto "Verinäytteen saa ottaa vain eläinlääkäri tai muu näytteenottoon asianmukaisen koulutuksen saanut ja riittävät tiedot ja taidot omaava henkilö. "(HE 30/1999) Näytteenotto-olosuhteet voivat vaikuttaa ratkaisevasti laboratoriotutkimusten suorittamiseen ja tulosten oikeellisuuteen. Väärin otettu näyte voi vaarantaa eläimen terveyden ja/tai pilata näytteen. Movet Oy ei vastaa virheellisistä näytteistä. Näytteet, tutkimuspyynnöt ja tulokset liitetään potilaan tietoihin lähettäjän antamien tietojen perusteella. Movet Oy:n vastuu rajoittuu tutkimusten uudelleen analysointiin joko samasta tai uudesta näytteestä. Mikäli uuden näytteen toimittaminen ei ole kohtuudella mahdollista, voidaan tutkimukset tapauskohtaisesti jättää veloittamatta. Missään tapauksessa Movet Oy:n vastuu ei ylitä pyydettyjen tutkimusten hintaa, eikä Movet Oy vastaa välillisistä vahingoista miltään osin. Näyte tulisi ottaa eläimen kokoon nähden mahdollisimman sopivalla neulalla (esim. hevonen 18G, koira 20G, kissa ja pieni koira 21G), jotta näyte saadaan otetuksi mahdollisimman nopeasti ja vaurioittamatta suonta ja verisoluja. Neulan pistämisen tulisi tapahtua nopealla ja määrätietoisella liikkeellä, jotta verisuoni vaurioituisi mahdollisimman vähän pistämisestä. Mikäli erottunut seerumi/plasma on punertavaa, on tapahtunut punasolujen hajoamista (hemolyysi). Näyte olisi hyvä ottaa alipaineiseen vakuumiputkeen, mikä oikein käytettynä täyttyy haluttuun tilavuuteen automaattisesti. Mikäli neulan ja vakuumiputken välissä käytetään letkua (esim. jos eläin on rauhaton), letkun tulee antaa täyttyä verellä koko matkaltaan putkiholkkiin asti, ennen kuin vakuumiputki asetetaan holkkiin. Muutoin näytemäärä jää liian pieneksi. Näytteen voi ottaa myös ns. avo-ottona korkittomaan putkeen. Tällöinkin näytemäärän on oltava sopiva kyseiselle putkityypille. Jos verimäärä on liian suuri, putkessa olevan hyytymisenestoaineen (plasmaputket) tai hyytymisaktivaattorin (seerumiputket) määrä ei ole riittävä. Tällöin plasmassa saattaa tapahtua ei toivottua hyytymistä, tai seerumi ei hyydy riittävästi. Välittömästi näytteenoton jälkeen näyteputkea sekoitetaan kääntelemällä putkea rauhallisesti ylösalaisin 8 10 kertaa. Tällä varmistetaan näytteen ja putkessa olevien säilöntä yms. aineiden riittävä sekoittuminen. Putkea ei saa ravistaa, jotta solut eivät vaurioidu. Yleisin syy epäluotettaviin laboratoriotutkimustuloksiin on väärin sekoittunut näyte. Sivelyvalmiste verisolujen mikroskopointia (diffiä) varten on tehtävä välittömästi näytteenoton jälkeen (EDTA-putki), viimeistään kuitenkin 2 tunnin kuluessa näytteenotosta. Sivelyvalmiste olisi syytä kiinnittää lasiin tuoreella metanolilla ennen näytteen lähettämistä. Huom! Lähettäkää 2 4 sivelyvalmistetta jokaisesta näytteestä, jotta voimme varmistaa tulosten oikeellisuuden. 14 Movet Laboratoriokäsikirja
Verinäytteen käsittely Plasmaa tai seerumia eroteltaessa putket sentrifugoidaan 2000 g noin 10 15 minuuttia (kierrosnopeus ei ole sama kuin g-arvo, käytettävä sentrifuugi ja roottori vaikuttavat tiettyä kierrosnopeutta vastaavaan g-arvoon). Li-hepariiniputki (vihreä korkki): solut sentrifugoidaan tai annetaan laskeutua putken pohjalle (puolesta tunnista tuntiin). Solujen päälle erottunut plasma pipetoidaan esim. muovisella pasteurpipetillä erotteluputkeen. Seerumiputkissa (punainen korkki) hyytymän annetaan muodostua 30 60 minuuttia, ja se työnnetään putken pohjalle (esim. pasteur-pipetillä). Solujen annetaan laskeutua tai putki sentrifugoidaan, ja erottunut seerumi pipetoidaan erotteluputkeen. Glukoosimääritykset tehdään natriumfluoridiputkesta (harmaa korkki) tai vaihtoehtoisesti Li-hepariini- tai seerumiputkesta. Putki sentrifugoidaan mahdollisimman pian näytteenoton jälkeen. Solujen päälle erottunut plasma pipetoidaan esim. muovisella pasteurpipetillä erotteluputkeen. Plasman erottelu soluista on ensiarvoisen tärkeää luotettavan tuloksen saamiseksi. Myös laktaattimääritykset tehdään natriumfluoridiputkesta. Hyytymisaikamääritykset (PT ja aptt) voidaan tehdä vain natriumsitraattiputkeen (vaaleansininen korkki), joka on täytetty tasan merkkiviivaan, otetusta näytteestä. Verenkuvamääritykset tehdään ensisijaisesti EDTA-putkesta (violetti korkki). Näytteet tulee säilyttää jääkaapissa ennen postitusta tai laboratorioon toimittamista. Tekstin värikoodit viittaavat Movetilta saataviin Vacueten putkiin. Jos käytössäsi ei ole sentrifuugia, voit lähettää näytteet sellaisenaan, sentrifugoimme ne puolestasi. ACTHn, ipthn, Glukoosin, magnesiumin, kaliumin, fosfaatin sekä NEFAn ja betahydroksibutyraatin määrittämistä varten seerumi tai plasma on aina kuitenkin eroteltava mahdollisimman pian näytteenoton jälkeen. Huomioithan etteivät kokoverinäytteet kestä jäätymistä tai kuumenemista. 15 Movet Laboratoriokäsikirja
Sivelynäytteen valmistus verestä valkosoluerottelua (5 os. mikroskopointi) varten STOP! a. b. Remu Minkkinen 1.1.2016 c. d. Huom! Sivelynäyte tulee tehdä alle 2 h vanhasta näytteestä. 1. Pipetoidaan / Lasikapillaarilla otetaan tippa (5 10 μl) hyvin sekoitettua EDTA-verta lähelle objektilasin mattapään puoleista reunaa 2. Vetolasi asetetaan 30-45 asteen kulmaan pisaran etupuolelle ja lasin reuna vedetään pisaraan kiinni (kuva a.) 3. Pisaran annetaan levitä reunan ja lasin väliin (kuva b.) 4. Vetolasi työnnetään objektilasin toiseen päähän niin, että veri leviää tasaisesti 3-4 cm matkalle (kuva c.) 5. Sivelynäyte kuivataan nopeasti leyhyttelemällä tai mieluummin hiusten kuivaajalla 6. Lasit merkitään lyijykynällä samalle puolelle, jolla veri on (kuva d.) 7. Ilmakuivatut objektilasit fiksoidaan 10-20 min vedettömällä metanolilla 8. Lasien annetaan kuivahtaa pystyasennossa 9. Kuivattu lasi lähetetään suojakotelossa analysoitavaksi Mikäli et ole voinut fiksoida näytettä, laita siitä merkintä lähetteeseen. Muista: Objektilasin on oltava puhdas ei sormenjälkiä tai "roskaa" Vedon olisi oltava tasainen Veri ei saa johtua työnnettävän lasin eteen, jolloin solut rikkoontuvat Metanolin on oltava ehdottomasti vedetöntä (vaihda päivittäin) Sivelynäytteitä olisi hyvä olla 2 4 kpl, jotta voidaan varmistaa tuloksen oikeellisuus Mitä vähemmän näytteessä on soluja, sitä pienemmästä määrästä levitteen tekeminen onnistuu hyvin. Oikein ohutta verta voi käyttää esim. 3 µl 16 Movet Laboratoriokäsikirja
1.1.2016 Musti Korhonen Sivelynäytteen valmistus aspiraatista mikroskopointia varten (Nivelnesteet, TW- ja BAL-näytteet jne.) 1.1.2016 a. Musti Korhonen b. Musti Korhonen 1.1.2016 c. d. Musti Korhonen 1.1.2016 Musti Korhonen 1.1.2016 Huom! Näytteet säilyvät aina paremmin lasille levitettyinä. Mikäli näytteessä on selkeästi soluja, voit tehdä levitteen suoraan aspiraatista. Mikäli tarvitaan tulokset soluerottelusta, tulee kirkas, vähäsoluinen neste konsentroida ennen levitteen tekemistä. Kirkkaan näytteen konsentroiminen 1. Sentrifugoidaan näytettä esim. 2000 rpm 10 min 2. Kaadetaan tai pipetoidaan suurin osa kirkkaasta nesteestä pois 3. Sekoitetaan putken pohjaan painuneet solut takaisin jäljelle jääneeseen nesteeseen kääntelemällä putkea 4. Tehdään levite tästä konsentroidusta näytteestä 5. Laita lähetteelle kommentti mikäli näytettä on tarvinnut konsentroida ennen levitteen tekemistä Näytteen levittäminen lasille 1. Pipetoidaan isohko tippa hyvin sekoitettua aspiraattia tai konsentraattia keskelle objektilasia (kuva a.) 2. Lasketaan toinen lasi tipan päälle (kuva b.) 3. Annetaan aspiraatin levitä lasien väliin ja liu'utetaan lasit napakalla liikkeellä erilleen toisistaan (kuva c.) 4. Kuivataan levite mahdollisimman nopeasti leyhyttelemällä tai mieluummin hiusten kuivaajalla 5. Merkitään lasit lyijykynällä samalle puolelle, jolle levite on tehty (kuva d.) 6. Kuivattu lasi lähetetään suojakotelossa analysoitavaksi Muista: Objektilasin on oltava puhdas ei sormenjälkiä, pölyä tai muuta roskaa Vedon olisi oltava tasainen Levitteitä olisi hyvä tehdä 2 4 kpl Levitteiden lisäksi kannattaa lähettää myös alkuperäistä näytettä EDTA-putkessa ja/tai seerumiputkessa 17 Movet Laboratoriokäsikirja
Ulostenäytteet Sisäloistutkimuksiin ja pikatesteihin Ulostetta otetaan useammalta päivältä noin teelusikallinen puhtaaseen purkkiin, pussiin, putkeen tai vastaavaan. Näyte suljetaan tiiviiseen pussiin ja pakataan lähetyslaatikkoon. Näyte tulisi toimittaa laboratorioon mahdollisimman nopeasti näytteenoton jälkeen. Näyte säilyy noin viikon jääkaappilämpötilassa, mutta se ei saa jäätyä. Madonmunien määritykseen ja ph:n mittaukseen (hevonen) Tuoretta ulostetta kerätään ½ 2 munkkia puhtaaseen pussiin, esim. minigrip. Ulostetta kannattaa kerätä kolmelta peräkkäiseltä päivältä, jolloin saadaan edustavampi tulos. Eri päiviltä kerätty uloste voidaan yhdistää samaan pussiin. Mikäli näytettä on kerätty useammalta päivältä, laitetaan tieto näytteen mukaan tai lähetteeseen. Uloste säilyy noin viikon jääkaappilämpötilassa, mutta se ei saa jäätyä. Näyte lähetetään pahvilaatikossa postitse tai toimitetaan suoraan laboratorioon. Lantanäytteitä ei tarvitse pakata keltaraidalliseen lähetyslaatikkoon, vaan ne voidaan lähettää myös tavallisessa pahvilaatikossa. Kirjekuoressa lähettämistä ei suositella. ph:n mittausta varten ulostetta tarvitaan vain yhdeltä päivältä. Sama määrä riittää kuin madonmunatutkimukseenkin. Uloste tulee kuitenkin toimittaa laboratorioon mahdollisimman tuoreena, sillä bakteeritoiminta muuttaa ulosteen ph:ta. Bakteriologisiin tutkimuksiin, kuten salmonellaviljelyyn Pyöritetään näytteenottotikkuun ulostetta ja tikku suljetaan kuljetusputkeensa (Transpocult). Lisäksi ulostetta tulisi lähettää n. teelusikallinen puhtaassa purkissa, putkessa tai muussa vastaavassa. Näytteet suljetaan tiiviiseen pussiin ja pakataan lähetyslaatikkoon. Näytteen voi tuoda myös suoraan laboratorioon. Näyte tulisi toimittaa laboratorioon mahdollisimman nopeasti näytteenoton jälkeen. Näyte säilyy n. kaksi vuorokautta jääkaappilämpötilassa. Näyte ei saa jäätyä. Bakteriologiset näytteet Viljely: iho ja limakalvot Poistetaan mahdollinen kuivunut erite/kudos. Märkäinen alue puhdistetaan huolella fysiologista keittosuolaliuosta ja/tai steriiliä sidetaitosta käyttäen. Näyte otetaan hankaamalla näytteenottotikkua tai steriiliä vanupuikkoa infektiopesäkkeen pohjalla varoen kontaminoimasta tikkua ihon normaaliflooralla. Näytetikku suljetaan bakteerinäytteenkuljetusputkeen (elatusaine). Viljely: korva Näyte otetaan pyöräyttämällä näytteenottotikkua tai steriiliä vanupuikkoa korvakäytävässä ja sulkemalla tikku bakteerinkuljetusputkeen. Viljely: silmän sidekalvo Ylimääräinen märkä puhdistetaan pyyhkimällä silmä esim. fysiologisella keittosuolaliuoksella, jonka jälkeen näyte otetaan steriiliin veteen tai fysiologiseen suolaliuokseen kastetulla vanupuikolla varoen koskemasta luomien ihoa. Näyte suljetaan bakteerinkuljetusputkeen. Viljely: virtsa Näyte tulisi ottaa mahdollisimman puhtaasta keskivirtsasta tai mieluiten punktoimalla. Virtsanäyte voidaan lähettää Uricultille tai maljalle viljeltynä. Koko virtsa tulee lähettää kylmälähetyksenä, mikäli se ei ole Urine culture -putkessa. Viljely: utaretulehdus Maitonäyte otetaan samoilla tekniikoilla kuin PCR-menetelmässä (s. 18), paitsi on käytettävä ehdottomasti steriilejä säilöntäaineettomia putkia, eikä näytettä saa pakastaa. Mahdollisimman nopea toimitus laboratorioon. Gram-värjäys Näyte otetaan puhtaalla pumpulitikulla ja levitetään suoraan objektilasille. Lasi ilmakuivataan ja siihen merkitään lyijykynällä potilaan nimi sekä näytenumero ja näytteenottokohta, mikäli samasta eläimestä otetaan useampia näytteitä. Nestemäinen erite voidaan ottaa sellaisenaan steriiliin putkeen ja lähettää huoneenlämmössä laboratorioon. Maitonäytteet utaretulehdustutkimuksiin Koska PCR-menetelmä tunnistaa hyvin herkästi pienetkin määrät utaretulehdusta aiheuttavia bakteereita, joita on myös ympäristössä ja lannassa, tulisi näytteenotossa olla hyvin huolellinen ja noudattaa annettuja ohjeita. Näin vältetään virheelliset tulokset sekä mahdolliset uusintanäytepyynnöt. PCR-tutkimusta varten näyte otetaan säilöntäaineelliseen putkeen. Lääkityksen jälkeen kontrollinäytteen voi ottaa 2 vk solutuksen loputtua. Viljelyä varten näytettä ei saa ottaa säilöntäaineelliseen putkeen. 1. Etenkin subkliinisissä tulehduksissa paras näytteenottoaika on ennen lypsyä. Oireilevalta eläimeltä näyte voidaan ottaa muulloinkin. 2. Pese utare, josta olet ottamassa näytettä, huolellisesti: pyyhi 3 kertaa puhtaalla vedellä tai pyyhkeellä, lypsä muutama suihke hukkaan, pyyhi puhtaalla pyyhkeellä ja lypsä vielä suihke hukkaan. 3. Käytä näytteenotossa kertakäyttöhanskoja. Näin estetään bakteerien siirtyminen käsien iholta näytteeseen. 18 Movet Laboratoriokäsikirja
4. Avaa näytteenottoputki niin, ettet koske putken tai korkin sisäpintaan. Varo tiputtamasta putkessa olevaa säilöntäainetablettia. 5. Mikäli tabletti, korkki tai putki putoaa, ota uusi puhdas putki! 6. Ota puhdistetusta utareesta yksi - kaksi suihketta putkeen, niin että pidät putkea vaakatasossa. Näin vältetään ympäristöstä tulevien bakteereiden joutuminen näytteeseen. 7. Jokaisesta tutkittavasta neljänneksestä otetaan oma näyte. Putkeen merkitään lehmän nimi/nro sekä vedin OE/OT/VE/VT. 8. Mikäli otat näytteen putkeen, jossa ei ole säilöntätablettia, pakasta näyte ennen lähettämistä, tai teippaa putki kiinni kylmävaraajaan (-20 C) ennen lähettämistä. Mycoplasma bovis -PCR tutkimusta varten laboratorio yhdistää neljännesten näytteet. Karvanäytteet dermatofyyttitutkimukseen Varsinkin silloin, kun epäillään eläimen kantavan tautia oireettomasti, harjataan koko eläin puhtaalla hammasharjalla, jonka jälkeen harja suljetaan puhtaaseen paperiseen kirjekuoreen. Lisäksi mahdollisen karvattoman laikun reunalta nypitään muutamia huonokuntoisia karvoja niiden kasvusuuntaan ja myös mahdollista rupea rapsutetaan kirjekuoreen. Infektioaluetta voi pyyhkiä ensin alkoholiliuoksella bakteerikasvun vähentämiseksi. Näytettä ei saa ottaa muovipussiin bakteerikasvun estämiseksi. Jos infektio on kynnessä, voidaan kynnestä lähettää pala laboratorioon suljettuna paperiseen kirjekuoreen. Raapenäytteet ulkoloistutkimukseen Näyte otetaan hieromalla parafiiniöljyä (jos ei ole, käytä ruokaöljyä) näytteenottokohtaan. Puhtaalla veitsellä raaputetaan voimakkaasti ihon pinnasta epiteelikerrosta ja öljyä, jotka siirretään puhtaaseen putkeen tai suljettavaan astiaan. Öljyn lisäys ja raaputus toistetaan kunnes epiteeli on rikki verinahkaan asti. Karvanäyte nypitään toiseen puhtaaseen putkeen. Nukkatikkunäytteet PCR-tutkimuksiin Näyte otetaan useampaan nukkatikkuun, pumpulipuikkoon tai muuhun pehmeään näytteenottotikkuun infektoituneen alueen eritteestä (yksi näyte jokaiselta erittävältä alueelta). Taudinaiheuttajakohtaisia ohjeita näytteenottopaikasta löytyy tutkimuskohtaisilta sivuilta. Jos erittäviä alueita on useita, tulee näytteet ottaa niistä erillisiin tikkuihin (esim. nenästä, suusta sekä oikeasta ja vasemmasta silmästä kaikista omiin tikkuihinsa). Tikkujen annetaan kuivahtaa ja ne suljetaan omiin kuljetusputkiinsa tai esimerkiksi puhtaisiin erotteluputkiin. Putkiin merkitään selkeästi eläimen tiedot ja näytteenottokohdat. Näytteet geenitesteihin Geneettiset testit tutkitaan pääasiallisesti EDTAkokoverestä tai poskisolunäytteistä. Poskisolunäyte voidaan ottaa aikaisintaan tunnin kuluttua siitä kun eläin on syönyt, koska eläimen suussa ei saa olla ruokaa näytettä otettaessa. Samasta syystä pennut tulee pitää poissa nisältä sekä erossa toisistaan vähintään 60 minuuttia ennen näytteenottoa. DNA-tutkimuksia ei voida tehdä pelkästä syljestä, vaan näytteeksi tarvitaan soluja. Näytteenottoon suositellaan poskisoluharjoja (cytobrush, 2 kpl/eläin), joita saa veloituksetta Movetilta. Harja laitetaan eläimen suuhun, posken ja ikenen väliin. Harjaa pyöritetään useita kertoja, jotta soluja irtoaa suun limakalvoilta. Harjojen annetaan kuivua hetken ennen kuin ne suljetaan omiin pakkauksiinsa. Harjapakkaukseen merkitään eläimen tiedot ja se laitetaan kirjekuoreen. Myös kirjekuori merkitään selkeästi eläimen tiedoilla. Vaihtoehtoisesti näyte voidaan ottaa pumpulipuikoilla. Pumpulipuikosta käytetään näytteenottoon vain toista päätä. Käyttämätön pää leikataan irti ja heitetään pois. Näytteenotto suoritetaan samoin kuin poskisoluharjalla. Riittävän solumäärän saamiseksi käytetään vähintään neljää pumpulipuikkoa. Puikkojen annetaan kuivua hetken, jonka jälkeen ne suljetaan ensin erillisiin pieniin muovipusseihin, joihin merkitään eläimen tiedot. Muovipussit laitetaan eläimen tiedoilla varustettuun kirjekuoreen. Joihinkin geneettisiin tutkimuksiin käy näytteeksi myös jouhinäyte (hevoset, naudat). Jouhet nypitään juurineen ja teipataan esimerkiksi puhtaalle paperille, johon merkitään myös eläimen tiedot. Jouhia tarvitaan yhteensä 20 30 kappaletta. Tutkimukseen tarvitaan karvatupet, joten latvat voidaan leikata näytteestä pois lähettämisen helpottamiseksi. Näytteeksi ei saa käyttää valmiiksi irronneita jouhia. Mikäli samasta eläimestä halutaan tehdä useampia geenitestejä, kannattaa jokaista varten ottaa omat näytteet. Näytteet polveutumismäärityksiin Polveutumismäärityksiin suosittelemme EDTAkokoverinäytettä, jossa DNA-määrä on varmasti riittävä. Otamme vastaan myös poskisolunäytteitä (aina 3 poskisoluharjaa/eläin). Nautojen polveutuminen voidaan tutkia myös jouhinäytteestä. Viralliset todistukset Mikäli tuloksista tarvitaan virallinen todistus, tulee eläinlääkärin tunnistaa eläin (mikrosiru ym.) ja liittää tästä asianmukainen todistus näytteen ja lähetteen mukaan. Todistuksen tulee sisältää eläinlääkärin allekirjoitus ja leima. Valmiita pohjia löytyy mm. kissa- ja Kennelliitolta. Tarkista lomakevaatimukset taholta, jonne haluat tulokset toimittaa. Koirien polveutumismäärityksiä varten tarvitaan Kennelliiton virallinen polveutumis- tai DNA-tunnistelomake. Virallisia testejä ei saa luovuttaa eläimen omistajan lähetettäviksi, vaan näytteenottaja on vastuussa näytteiden oikeellisuudesta laboratorioon toimittamiseen saakka. 19 Movet Laboratoriokäsikirja
Hevosten plasmapankki Movet noudattaa luovuttajahevosten valinnassa Eviran ohjeistusta. Eläinlääkäri tekee luovuttajille terveystarkastuksen ja laboratorio tarkistaa plasman vasta-ainepitoisuuden kvantitatiivisella mittauksella. Plasman luovuttaminen Hevosten omistajat voivat ilmoittaa hevosensa luovuttajiksi. Plasmaa voidaan tulla keräämään, mikäli samalla tallilla on 5 10 luovuttajaa. Järjestämme keräyksen plasmatarpeen mukaan. Plasmankeräyksissä eläinlääkärinämme toimii Johanna Sokka. Yhdeltä luovuttajalta saatu plasma voi pelastaa useamman varsan hengen. Luovutuksen jälkeen hevosen on hyvä olla kevyemmällä liikutuksella parin päivän ajan, ja hevosen rauhoittamisesta luovutuksen ajaksi seuraa 4 vrk dopingvaroaika. Muuten luovutuksesta ei aiheudu rajoituksia hevosen käyttöön. Hyvän mielen lisäksi omistaja saa hevoselleen eläinlääkärintarkastuksen ja verikoetulokset (Laaja terveyspaketti) sekä lahjakortin madonmunatutkimukseen. Plasman tilaaminen Plasma tilataan suoraan laboratoriosta numerosta 050 502 0770 (aukioloaikojen ulkopuolella 050 337 9034). Kiireettömät tilaukset voi tehdä myös nettisivuilla olevan tilauslomakkeen kautta. Plasmaa myydään yksittäisinä pusseina ja plasmansiirtoyksikköinä, joihin sisältyy 3 pussia yksikköönsä. Yksi pussi sisältää 350 450 ml plasmaa. Saatavilla on myös plasmansiirtoletkuja infuusiota varten. Hintoihin sisältyy hoidon jälkeen tehtävä vasta-ainemääritys varsalle. Toimitus veloitetaan erikseen. Plasman toimitus Plasmaa toimitetaan pääasiassa laboratorion aukioloaikoina arkisin klo 8 16 ja lauantaisin klo 9 14. Tarvittaessa plasmaa pystyy hakemaan suoraan laboratoriolta myös iltaisin ja sunnuntaisin. Kauemmas plasman toimitus tapahtuu pääasiassa matkahuollon ja postin kautta. Tarvittaessa voidaan käyttää myös kuriiripalveluita. Toimitus ei sisälly plasman hintaan, vaan se veloitetaan erikseen. Kiitokset Plasmapankin toiminnan aloittamisen mahdollisti Suomen Punaisen Ristin Veripalvelu välinelahjoituksellaan. Kiitos kuuluu luonnollisesti myös veren keräämisen hoitaneelle eläinlääkärille hoitajineen sekä hevosensa luovuttajiksi ilmoittaneille omistajille. Plasmansiirto varsalle (plasmainfuusio) Plasmaa annetaan yleensä varsalle, jolla on täydellinen tai osittainen vasta-ainepuutos. Puutos voi johtua muun muassa seuraavista syistä: Emä on valuttanut eniten vasta-aineita sisältänyttä ternimaitoa jo ennen syntymää Ternimaito on ollut huonolaatuista Varsa ei osaa/jaksa nousta juomaan riittävän ajoissa (vasta-aineet imeytyvät korkeintaan 12 h syntymän jälkeen) vasta-aineet eivät syystä tai toisesta ole imeytyneet varsan suolistosta Infuusio Ennen infuusiota pakastettu plasma sulatetaan ja se lämmitetään ruumiinlämpöiseksi (37 C) esimerkiksi vesihauteessa. Sulatusta ei saa tehdä mikroaaltouunissa. Annostelu tehdään jugularis-laskimon kautta aseptisesti. Annosteluun käytetään infuusioon tarkoitettua plasmansiirtoletkua, jossa on suodatin mahdollisten mikrohyytymien poistamiseksi. Ennen Infuusiota varsan yleiskunto tarkistetaan: mitataan ruumiinlämpö, auskultoidaan sydän ja keuhkot/hengitystiet sekä tarkistetaan limakalvojen väri. Ensimmäinen pussi (n. 350 ml) tiputetaan varovaisuutta noudattaen ja mahdollisia siirtoreaktioita seuraten: sydämen syke, mahdolliset rytmihäiriöt, hengitysfrekvenssi, lämpötila. Mikäli oireita ilmenee, hidastetaan infuusionopeutta tai oireiden vakavuudesta riippuen, pysäytetään infuusio välittömästi. Suositeltava annos on 10 20 ml plasmaa/kg/tunti, jolloin 45 50 kg varsalle voidaan annostella 1 yksikkö (1 l) 30 minuutissa. Yksi yksikkö muodostuu kolmesta pussista. Tiputusnopeus tulee harkita aina tapauskohtaisesti riippuen varsan yleiskunnosta. Annostelun jälkeen otetaan seerumi- tai Li-hepariininäyte IgG-pitoisuuden mittaamista varten. Mittaus kuuluu plasmayksikön hintaan. Mikäli IgG-pitoisuus on liian alhainen, annostellaan seuraava yksikkö. Yksi plasmayksikkö (3 pussia) nostaa IgG-pitoisuutta yleensä 400 600 mg/dl, mutta tulehdustilanteessa saavutettu taso voi laskea. Yksiköiden annostelun välin tulisi olla vähintään 6 tuntia. Lähteet ELL Sokka Johanna Demodex klinikkaeläinhoitajien ry:n jäsenlehti, Heino Päivi: Hevosten veripankki Yliopistollisessa Eläinsairaalassa. Movet Oy 20 Movet Laboratoriokäsikirja