Preanalytiikka mikrobiologissa tutkimuksissa Risto Hilla HUSLAB Prosessivastaava, Preanalytiikan linja Helsinki ja Itä-Uusimaa
Esityksen sisältö Perustuu HUSLABin ohjeistukseen ja käytäntöihin. Mikrobiologisista näyteastioista Näytteen kelvollisuuden arviointi viljelyyn, hylätäänkö vai ei? Tyypillisiä ongelmatilanteita, mitä tekisit jos
Tutkimusmenetelmä/-pyyntö määrittelee näyteastian Viljely - > mikrobin on säilyttävä elinkykyisenä näytteenotosta viljelyvaiheeseen. Antigeeni/vasta-aineen osoitus -> mikrobin ei tarvitse säilyä hengissä NHO - > mikrobin ei tarvitse olla hengissä, mutta putkessa ei saa olla inhibiittoreita eikä DNA jäämiä.
Mikrobiologisten näytteiden kuljetusastioita: Rikastavat, selektiiviset ja tutkimuskohtaiset veriviljelypullot anaerobiampulli nestekuljetusputki (klamydia/gc) säilöntäaineellinen virtsaputki nestekuljetusputki(virusviljely) ECO-FIX sis. metyyli-, etyyli-, Isopropyyli alkoholi rikastava ja selektiivinen emrsa (sis. antibioottia) formaliinipurkki
Bakteriologisten näytteiden kuljetusastioita: yleisnäyteastiat geelikuljetusputki nestekuljetusputki Tehdaspuhdas kuiva purkki/putki
Näytteen kelvollisuuden arviointi viljelyyn 1) Puuttuvat/virheelliset tiedot näyteastiassa tai tutkimuspyynnössä. 2) Rikkoutunut tai väärä näyteastia. 3) Näytelaatu ei vastaa tutkimuspyynnössä olevaa tai tutkimukseen soveltumaton näytelaatu. 4) Niukka näyte. 5) Vanhentunut näyte. 6) Väärin säilytetty näyte.
1. Puuttuvat/virheelliset tiedot näyteastiassa tai tutkimuspyynnössä. Näyte hylätään: Jos potilastiedot puuttuu näyteastiasta, näytteitä ei tutkita. Poikkeuksena ainutlaatuiset näytteet, joiden alkuperä saadaan varmistettua esim. soittamalla ja jos näytteen mukana tulee työkortti. Vastaukseen lisätään kommentti ja tietojärjestelmään tarkat tiedot kenelle soitettu ja mitä sovittu. Jos näytetunnisteet ovat epäselvät, eikä tutkimuspyynnön tehneeltä asiakkaalta saada vahvistusta näytetunnisteen oikeellisuudesta. Huomioitavaa: Jos tutkimuspyynnössä ei ole riittävästi tietoja, esim. näytelaatu- ja ottopaikka tai näytelaatu ei vastaa tutkimuspyynnössä olevaa, selvitetään em. tiedot tutkimuksen tilaavasta yksiköstä.
2. Rikkoutunut/vuotanut/väärä näyteastia. Näyte hylätään: Jos näyteastia on rikkoontunut ja näyte on valunut astiasta. Jos näytelaatuna uloste- tai kyseesä on tubinäyte (tartuntavaara) Jos näyteastia on väärä, pyydetty esim. Pu-BaktVi2 ja näyteastia sisältää mikrobien kasvua estäviä aineita. Poikkeus: Ainutlaatuiset näytteet (likvori,lapsivesi, luuydin) pyritään kuitenkin tutkimaan, vaikka näyteastia olisi vuotanut. Näyteputken ulkopinta pyyhitään esim. 70%:lla etanolilla. Huomioitavaa: Muut samassa lähetyksessä olleet näytteet ovat voineet kontaminoitua. Näytteet vastataan aina ja kommentoidaan tapauskohtaisesti! Näytteitä lähettävän yksikön on erityisesti kiinnitettävä huomiota näytteisiin, joissa on vuotoriski.
3. Näytteenlaatu ei vastaa tutkimuspyynnössä olevaa Näytelaatua on usein vaikea arvioida visuaalisesti, mutta jotain voi tehdä: Onko näyteastiassa kudospalaa, vierasesinettä, katetrinkärkeä yms.. Pyydetty ulosteviljely ja tikku näyttää puhtaalta.. Veriviljelypullon neste on kirkas Onko tapahtunut kirjausvirhe - >soitto tutkimuksen tilaajalle
4. Niukka näyte/huonosti otettu Yleensä kyseessä steriilin alueen näyte. Pyritään kuitenkin viljelemään. Käytetään tapauskohtaista harkintaa. Jos pyydetty useampi tutkimus, neuvotellaan tilaajan kanssa mitkä ovat tärkeimmät tutkimukset tehdä. Niukkaa näytettä vastattaessa on hyvä kommentoida tuloksen luotettavuutta. Pelkkää sylkeä ei kannata viljellä ysköksenä -> pyydetään uusi näyte.
5. Vanhentunut näyte Mikrobit säilyvät yleensä asianmukaisessa näyteastiassa hyvin ad 48 h, osa jopa viikkoja. Poikkeuksia kuitenkin löytyy. Mikrobien määräsuhteet voi kuitenkin alkaa muuttumaan nopeasti. Osa rikastuu, osa kuolee -> esim. N.gonorrhoeae (määrä alkaa vähentyä 6 h:ssa) -> Yli 48 h vanhat uloste- ja GC-viljelyt kommentoidaan
6. Väärin säilytetty näyte Ohjekirjassa on kuvattu näytteen säilytyslämpötila ja viitteellinen aika. Aluekuljetuksissa (HUSLAB) lämpötilaseurantarajat (+2 30 C ) mikrobiologisille näytteille. Perusohjeistus: Bakteriologiset viljelynäytteet voidaan säilyttää huoneenlämmössä, mutta yön yli säilytys jääkaappilämpötilassa. Veri- ja likvorviljelyitä ei saa laittaa jääkaappiin. U-BaktVi näyte ei säily säilöntäaineettomassa putkessa huoneenlämmössä. Toimitaan tapaus/tutkimus kohtaisesti. Vastataan aina ja kommentoidaan.
Muuta: ainutkertaisen näytteen kohdalla yritetään kaikki mitä voidaan, mutta aina tärkeätä kommentoida vastauksessa (tulosta arvioiva kliinikko ei osaa ottaa huomioon näytteen tutkimiseen liittyvää epävarmuutta, ellei sitä hänelle kerrota) Helposti uudelleen otettavan näytteen kohdalla pyydetään herkemmin uusi näyte, jos todetaan että näytteessä on preanalyttinen poikkeama.
Nukleiinihappotutkimusten (NhO) näytteet Herkkiä menetelmiä, koska ympäristöstä näytteeseen joutuneen yksittäisen viruksen tai bakteerin DNA:n osa, voi johtaa väärään positiiviseen tulokseen. Jos näytteenottajalla esim. huuliherpes, ei olisi suotavaa ottaa NhO näytteitä tai vähintään tulisi käyttää hengityssuojainta. NhO näytteiden ottoa tulisi välttää tilassa, jossa on ripuloivia potilaita. NhO näyte otetaan aina omaan putkeen (tehdaspuhdas ja kierrekorkillinen). Näyteastia suljetaan välittömästi. Jos näytettä joudutaan pipetoimaan, käytettävä biosuojakaappia ja filtterikärkiä.
Tyypillisiä ongelmatilanteita: Ps-StrVi: Näyte saapuu virusviljelyputkessa. -> ei tutkita. Vastataan kuitenkin kommentilla (Näyte väärässä putkessa). U-BaktVi: Näyte saapuu säilöntäaineettomassa putkessa huoneenlssä >30 min. -> ei tutkita. Vastataan kuitenkin ja kommentoidaan. -MRSAVi: Näytteessä kahden eri potilaan henkilötiedot. - > ei tutkita. Soitto tutkimuksen tilaajalle. Näyte selektiivisessä MRSA-putkessa ja pyydetty BaktVi. - > ei tutkita. Vastataan kommentin kera. Syvämärkänäyte 3 vrk aikaisemmin -> tutkitaan ja kommentoidaan.
Mikrobiologisen preanalytiikan kulmakiviä: Oikea tutkimuspyyntö ja riittävät esitiedot. Potilaan ohjaus: suullinen ja ymmärrettävä ohjeistus. Hoitoyksiköiden ohjeistus ja näytteenoton osaamisen ylläpito. Näytteenottajan teoria- ja käytännön osaaminen. Saatavilla oikeat välineet. Toimiva ja nopea näytelogistiikka. Muistetaan työ- ja potilasturvallisuus.
Mikrobiologian laboratorio on yksi tärkeä steppi mahdollisten preanalyyttisten poikkeamien bongaamisessa.. LAB