Otanta ja idätysnäytteiden valmistus Metsäpuiden siementen idätystestit ISTA:n säännöt ja nykykäytännöt Pekka Helenius Metla / Suonenjoki / Metsäntutkimuslaitos Skogsforskningsinstitutet Finnish Forest Research Institute www.metla.fi
Otanta ISTA:n sääntöjen mukaan Otannan tavoitteena on saada siemenerästä näyte, 1. jossa on testeihin ja muihin määrityksiin tarvittava määrä siementä, ja 2. jossa eri osatekijöiden (puhdas siemen, muut siemenet, roskat ym.) esiintymistodennäköisyys on sama kuin siemenerässä
Otannan merkitys? Idätystestissä saadun tuloksen luotettavuus riippuu pääasiassa kahdesta tekijästä: 1. Idätysnäytteen edustavuus (otanta) 2. Itse idätystesti (näytteiden valmistus, testausolosuhteet, testaaja jne.) Useimmissa tapauksissa idätystestin luotettavuutta heikentää enemmän otannan epätarkkuus kuin varsinaisen testauksen epätarkkuus ISTA Handbook on seed sampling
Siementen lajittuminen Siilot ym. kartiomaiset säiliöt koosta riippumatta tyhjenevät ensin keskeltä ja vasta lopuksi reunoilta ja kulmista Kevyet ainekset esim. roskat ja tyhjät siemenet ajautuvat pakkausten reunoille (huomioitava näytteenotossa) Itämiskyvyn muutos varastoinnin aikana pakkauksen eri osissa?
Otantataajuus riippuu pakkausten koosta ja lukumäärästä Kun siemenerä pakkauksissa, joiden koko on välillä 15 100 kg otetaan osanäytteet ao. taulukon mukaan: Pakkausten lukumäärä siemenerässä Osanäytteiden lukumäärä (vähintään! / mitä enemmän, sitä parempi) 1 4 pakkausta 3 osanäytettä jokaisesta pakkauksesta (mutta joka pakkauksesta on otettava yhtä monta osanäytettä) 5 8 pakkausta 2 osanäytettä jokaisesta pakkauksesta (mutta joka pakkauksesta on otettava yhtä monta osanäytettä) 9 15 pakkausta 1 osanäyte jokaisesta pakkauksesta (mutta joka pakkauksesta on otettava yhtä monta osanäytettä) 16 30 pakkausta Yhteensä 15 osanäytettä 31 59 pakkausta Yhteensä 20 osanäytettä 60 tai enemmän Yhteensä 30 osanäytettä
Otanta, kun siemenerä on pakkauksissa, joiden koko on alle 15 kg Pakkaukset yhdistetään näytteenottoyksiköiksi, joiden massa ei ylitä 100 kg Esimerkiksi 3 kg:n siemenerä, joka on pakattu 0,5 kg:n pakkauksiin (6 kpl), muodostaa yhden näytteenottoyksikön Esimerkiksi 120 kg:n siemenerä, joka on pakattu 5 kg:n pakkauksiin (24 kpl), muodostaa kaksi näytteenottoyksikköä Näytteenottoyksikköä pidetään "pakkauksena" ja osanäytteet otetaan kuten edellä Osanäytteet voidaan ottaa siemenerästä satunnaisesti tai systemaattisesti; esim. joka kolmas pakkaus jne.
Esimerkki 1 3 kg:n siemenerä 0,5 kg:n pakkauksissa (6 kpl) = 1 näytteenottoyksikkö otetaan 3 osanäytettä 0,5 kg 0,5 kg 0,5 kg 0,5 kg 0,5 kg 0,5 kg Esimerkki 2 120 kg:n siemenerä 5 kg:n pakkauksissa (24 kpl) = 2 näytteenottoyksikköä otetaan 6 osanäytettä 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg 5 kg
Siemenerä liian epätasalaatuinen? Osanäytteitä kannattaa verrata silmämääräisesti toisiinsa Mikäli eroja (väärä laji, roskat jne.) on nähtävissä, otantaa ei kannata jatkaa ennen kuin siemenerä on sekoitettu ja pakattu uudelleen Mikäli osanäytteiden välillä ei ole silmin nähtäviä eroja, osanäytteet voi yhdistää kokoomanäytteeksi
Näytteenottomenetelmät Lokerokaira isot siemenerät (kairan on yllettävä pakkauksen pohjaan asti) tarkistettava, ettei putkien väliin jää siemeniä kairassa ei saa olla muoviosia (staattinen sähkö) osanäytteitä otetaan pakkauksen eri osista varottava siementen vaurioittamista kairaa suljettaessa Jakolaite puolittaa siemenerän kahteen yhtä suureen osaan pienet siemenerät (riippuu jakolaitteen koosta: 3 18 litraa) jakolaite on kalibroitava ennen näytteenottoa näytteenotto tasaisella alustalla Käsin koivun siemen
Näyte kosteuden määritystä varten 1. Siemenerästä otetaan tarvittava määrä osanäytteitä, jotka yhdistetään kokoomanäytteeksi 2. Kokoomanäytteestä otetaan erilleen 50 g siemeniä (vähintään kolme lusikallista, kauhaisua tms.), jotka suljetaan heti ilmatiiviisti kaksinkertaiseen muovipussiin tai muovipulloon 3. Muovipussi tai pullo avataan vasta kun näyte laitetaan siihen 4. Muovipussi suljetaan niin, että siitä poistetaan ilma 5. Muovipulloa käytettäessä tulee huolehtia siitä, että se tulee täyteen ja korkki suljetaan ilmatiiviisti 6. Näytteenotto tehdään alusta loppuun asti siemenvaraston sisällä
Kokoomanäytteen pienentäminen Osanäytteistä muodostuva kokoomanäyte on usein suurempi kuin idätys- ym. testeissä tarvittava määrä Kokoomanäyte pienennetään hyvin puhdistetulla ja kalibroidulla mekaanisella jakolaitteella Ennen pienentämistä kokoomanäyte sekoitetaan hyvin Yleisjakolaite (soil divider)
Idätysnäytteiden valmistus Tehdään puhdas siemen -fraktiosta 400 siementä sadan siemen toistoina (4 100) Siemenet asetellaan kostealle alustalle tasaisin välein ja riittävän kauas toisistaan Tilajärjestyksen takia toistot voidaan jakaa edelleen pienempiin osiin, esim. 8 50 siementä tai 16 25 siementä
Siementen laskenta idätystestiin Käsin: Siemenet ripotellaan paperille yhtenäiseen kasaan, sekoitetaan kasa ja tehdään siitä jono. Siemenistä lasketaan vuorotellen 20 siemenen toistoja siinä järjestyksessä kun ne ovat jonossa Vakuumilaskurilla: Siemenet kaadetaan laskentapäähän (reiät ylöspäin) imun ollessa kytkettynä pois käynnistetään imu ja kaadetaan ylimääräiset siemenet pois Laskurilla ei saa imeä siemeniä esim. pöydän pinnalta (näytteeseen valikoituu kevyimmät siemenet)
Muun tyyppisiä siemenlaskureita ei saa käyttää osanäytteiden valmistamiseen! 30 25 Tyhjiä siemeniä, % 20 15 10 5 0 Toisto 1 Toisto 2 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 Malja, nro
Näytteenottovälineiden desinfiointi Homeet ym. patogeenit voivat levitä siemenerästä toiseen joko näytteenotossa tai idätysnäytteiden valmistuksen aikana Näytteenottovälineet (kaira, jakolaite jne.) ja idätysnäytteiden valmistuksessa tarvittavat instrumentit (pinsetit, vakuumilaskurin pää) tulee desinfioida esim. denaturoidulla etanolilla siemenerien välillä