sivu 1/8 TÄS ON PROTSKUU! PROTEIINIEN KEMIAA LUOKKA-ASTE/KURSSI TAUSTA Työ soveltuu peruskoulun yläasteelle ja lukioon. Työn tavoite on tutustua proteiinien kokeellisiin tunnistusmenetelmiin. POHDITTAVAKSI ENNEN TYÖTÄ 1) Mitkä seuraavista ruoka-aineista sisältävät valkuaisaineita eli proteiineja? 2) Missä yhteyksissä olet törmännyt sanaan proteiini tai valkuaisaine? 3) Mitä alkuaineita proteiineissa esiintyy? 4) Piirrä käsitekartta, jossa esiintyvät seuraavat käsitteet: alkuaineet C, H, O, N, S, P karboksyyliryhmä valkuaisaine aminoryhmä aminohappomolekyyli TYÖTURVALLISUUS suojalasit suojatakki suojakäsineet emäksen kanssa oltava varovainen kemikaalien käyttöturvatiedotteet liitteenä
sivu 2/8 TYÖ I: VALKUAISAINEEN OSOITTAMINEN Arvioitu aika Työhön kuluu aikaa noin 30 minuuttia. Reagenssit Tarvikkeet Valkuainen erotettuna kananmunasta Kuparisulfaatti- ja NaOH liuos Tutkittavat ruoka-aineet (kananmuna, vesi, sokeri, liha) Keitinlasi (400 ml) vesihauteeseen kuumennusvälineet koeputkia tussi pipetti Työn suoritus Pohdi, missä näytteissä on oletettavasti valkuaisainetta? (Hypoteesi) Millaisia aineita kuparisulfaatti- ja NaOH liuos ovat? Kopioi allaoleva taulukko vihkoosi havaintojen tekemistä varten. (Jätä reilusti tilaa havaintojen kirjaamiselle!) Merkitse tussilla tyhjät koeputket: kananmuna, vesi, sokeri, liha Lisää kaikkiin koeputkiin noin 2 ml kuparisulfaattiliuosta. Lisää kuparisulfaatin päälle pisaroittain ja sekoitellen niin paljon NaOH-liuosta, että alussa turkoosi liuos muuttuu siniseksi Lisää 1-3 ml kananmunanvalkuaista ja saman verran vastaavasti muita tutkittavia aineita omiin koeputkiinsa. Lämmitä koeputkia vesihauteessa. (Huom! Jos näytteenä käytetään maitoa, ei liuosta pidä kuumentaa kovin pitkään, sillä maitoa tutkittaessa saattaa sen laktoosi pelkistää kuparin keltaiseksi.) Havainnot Tarkkaile, mitä koeputkissa tapahtuu lämmön noustessa. Kirjaa havaintosi taulukkoon vihkoosi kaikista näytteistä.
sivu 3/8 Pohdintaa työn jälkeen Toteutuiko hypoteesisi? Mitä voit havaintojen perusteella päätellä? Ruoka-aine Havainnot Valkuaisainetta? kyllä/ei Kananmuna Vesi Liha Sokeri
sivu 4/8 TYÖ II: MAIDON PROTEIININ TUTKIMINEN Arvioitu aika Reagenssit Tarvikkeet Noin 30 min. Maito etikka (väkiviinaetikka; etikkahappopitoisuus 10%) NaOH CuSO 4 (proteiinin toteamiseen) 100 ml mittalasi 100 ml keittopullo suurempi astia vesihaudetta varten lämpölevy statiivi ja kouria 2 kpl 100 ml dekantterilaseja lämpömittari suppilo suodatinpaperi Työn suoritus Mittaa 50 ml maitoa 100 ml:n keittopulloon ja lämmitä maito vesihauteessa 40 ºC:seen. Vesihauteeseen kannattaa kraanasta ottaa jo valmiiksi lämmintä vettä. Lisää etikkaa tipoittain, kunnes maito saostuu. Sekoita jokaisen etikkalisäyksen jälkeen, jotta näet, milloin etikkaa on lisätty tarpeeksi (katso kuva 2). Anna seoksen jäähtyä. Suodata seos suodatinpaperin läpi dekantterilasiin. (jatkuu)
sivu 5/8 Tee heralle (liuos dekantterilasissa) ja suodatinpaperille jääneelle seokselle valkuaisaineen osoitusreaktiot (ks. edellinen työ). Havainnot Mitä havaitsit? Sisälsikö hera proteiineja? Pohdintaa työn jälkeen Alla on kaavio maidon ravintoaineiden kokeellisen erottamisen eri vaiheista. Minkä osan kaaviosta toteutit juuri? Millä menetelmällä esim. laktoosi saadaan erotettua maidosta kaavion perusteella?
sivu 6/8 TYÖ III: OSMOOSI KANANMUNASSA Työssä poistetaan kemiallisesti hapon avulla kananmunasta kuori. Munankuoren sisällä oleva ohut proteiinikalvo toimii osmoottisena seinämänä, joka päästää lävitse pieniä molekyylejä, kuten vettä. Arvioitu aika Reagenssit Tarvikkeet Työhön kuluu aikaa yhteensä 2 vrk + 2 vrk + 30 min. Työn suoritus Viinietikkaa, jossa etikkahappopitoisuus on n. 5% tai etikkaa laimennettuna. Siirappia, laimennettu vedellä (1 osa siirappia, 1 osa vettä) 2 kpl 250 ml keitinlasi (tai vastaava) muovikelmua Kuoren poisto Aseta muna 250 ml lasiastiaan Täytä astia etikalla tai viinietikalla Peitä astia muovikelmulla ja puhkaise kelmuun muutama reikä. Odota 2 vuorokautta Kirjaa ylös havaintosi kaksi kertaa päivässä Tutki kananmunaa kaksi päivää myöhemmin: Kaada etikkaliuos varovasti pois astiasta. Tutki munaa. Kuinka se on muuttunut? Kirjaa ylös havaintosi. Aseta muna toiseen astiaan ja lisää vedellä laimennettua siirappia niin että muna peittyy. Odota toiset 2 vuorokautta Toiset kaksi vuorokautta myöhemmin: Tutki munaa. Kuinka se on muuttunut? Mitä kuorelle on tapahtunut?
sivu 7/8 Havainnot Mitä kaasua reaktiossa muodostuu? Munan kuori on CaCO 3 :a. Kirjoita reaktioyhtälö hapon ja kuoren välillä. Pohdintaa työn jälkeen Munan kuori koostuu kemiallisesti kalsiumkarbonaatista, CaCO3. Työssä happo ja CaCO 3 reagoivat keskenään, jolloin kalsiumkarbonaatti syöpyy. Pohdi, missä muualla voisit havaita saman ilmiön? (Vinkki: esim. marmori ja kalkkikivi koostuvat kemiallisesti kalsiukarbonaatista!)
sivu 8/8 TYÖ IV: ANANAKSEN ENTSYYMIT JA LIIVATE Liivate on eläinperäinen proteiini, joka normaalisti hyydyttää nesteen, esimerkiksi veden. Tässä työssä tutkitaan hedelmien entsyymien vaikutusta proteiinin toimintaan. Arvioitu aika Välineet 10 minuuttia + 2-3 tuntia liivatteen hyytymiseen Työn suoritus Havainnot 2-3 astiaa liivatetta (joko jauheena tai lehtinä) tutkittavia aineita: tuoretta ananasta, purkkiananasta (kiiviä) jos käytät liivatejauhetta, keitä vesi, liuota liivate kuumaan veteen ja sekoittele hetki liota liivatelehdet kylmässä vedessä ja liuota ne kuumaan veteen laita jokaiseta tutkittavaa ainetta hieman omalle lautaselleen ja kaada liuosta päälle anna olla viileässä vähintään 2-3 tuntia Tutki, mitä tutkittaville aineille on tapahtunut, ja kirjaa havaintosi vihkoosi. Pohdintaa työn jälkeen Miten selittäisit tapahtuneen?