Alkiohuuhtelun järjestäminen lalla järjestäminen lalla Mikä alkio on? Viikon ikäinen, munasolu + siitö Koko noin 1/10 mm Pyöreä pallo, jossa kuori eli zona sisällä soluja Solut vielä kaikki sanlaisia voidaan irrottaa muuta solu iln että alkio kärsii Irrallaan kohdunsarven kärjessä Eläinlääkäri Kirsi Vara, Faba Miten alkiota saadaan? Naudalta irtoaa yleensä vain yksi munasolu Superovulaao: annetaan FSH hormonia: > useita munasoluja irtoaa yhtä aikaa prostaglandiini hormonilla eläin tulee kiian siemennetään huuhdellaan alkiot viikon kuluttua SUPEROVULAATIO LUOVUTTAJA ALKIOHUUHTELU SIEMENNYS Vasikoita alkioista ALKIOT KÄSITTELYT, PAKASTUS ALKIONSIIRTO VASTAANOTTAJAT KIIMOJEN SYNKRONOINTI VASIKAT Follikliaallot määrittävät huuhteluaikataulua Halutaan paljon jälläisiä Hieho: siemennyskokoinen munasarjatoiminta käynnistynyt säännöllinen kiikierto Lehmä: palautunut poikimisesta munasarjatoiminta käynnistynyt säännöllinen kiikierto hyvä yleiskunto Huuhdeltava eläin 1
Vastaanottaja Ei haluta oa jälläistä Terve Hedelmällisyys ok Kiikierto käynnissä Kohtu palautunut poikimisesta Huuhtelun unnittelu Hyvä aloittaa pian eläimen poikimisen jälen Hieholla vähän ennen vuoden ikää Yhteys huuhteluryhmän eläinlääkäriin Tarkka kiinseuranta ja muisinpanot Mahdollisimn tasainen ruokinta ja olohteet Tee muutto karsinaan/parteen ajoissa Totuta eläin käsittelyyn Aikataulutus Ohjel aloitetaan 9 12 vrk aloituskiista Tärää etää seisovan kiin ajankohta Kiin päätyttyä ilmoitetaan huuhtelueläinlääkärille > unnittelee huuhteluohjeln sekä vastaanottajien synkronoinnit > lähettää ohjeet lalle ja lan eläinlääkärille Yhteistyötä! Perusteelliset kirjalliset ohjeet Aina voi kysyä!! Jalostusasiantunja valitsee eläimet ja siemennyssonnin O eläinlääkäri tarkastaa eläimet lalla Seminologi siementää Alkionsiirtoseminologi avustaa huuhtelupäivänä Tila: xxx, xxxx HUUHTELUOHJELMA Huuhteleva ell: Kirsi Vara p. 040 3115 329 HUUHDELTAVA ELÄIN: Lola PVM LÄÄKITYS PVM LÄÄKITYS 23.2 kierukka 1.3 pg 1.3 pg: 680 + ALOITUSKIIMAN PVM : 4-5.3 HUUHTELUN JÄLKEINEN : 30.3.2015 2
+ + HUUHTELUN JÄLKEINEN : 30.3.2015 HUUHTELUN JÄLKEINEN : 30.3.2015 + Muuta vinkki Siemennyssonnin valinta Riittävä annosmäärä Varoita päivystystä huuhtelusiemennyksistä Vastaanottajia tarvitaan edes muuta Muista sekoittaa hormonin neste ja kuiva aine Säilytä hormoni jääkaapissa ja yritä olla pudottatta pulloa Muista prostaglandiinit! Kerro, jos sinulla on jossakin varapakasteita Tehdään unnitel varapakasteista Soita jos vähänkin epäilyttää meneekö oiin Siirrä tai myy alkiot! HUUHTELUN JÄLKEINEN : 30.3.2015 Mitä huuhteluljalta löytyy? Alkiohuuhtelussa Suomessa saadaan skimäärin noin 7 siirtolpoista alkiota (vaihteluväli 0 50) Usein myös hedelmöittymättömiä munasoluja ja alkioita joiden hitys on pysähtynyt Noin 10 15 % huuhteluista ei tuota lainkaan siirtolpoisia alkioita 350 Alkiohuuhtelut 2008 2014 300 250 200 150 100 50 0 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 Convenonal Sexed 3
Seksattu siemen huuhteluissa Alkioiden genomimääritys Sex: hiehot Norali: hiehot Sex: lehmät Norali: lehmät n 335 1753 122 509 Siirtok. Alkiot/huuhtelu 6,5 7,2 5,0 9,2 Deg/huuhtelu 1,7 1,6 1,9 1,4 Ufo/huuhtelu 2,9 2,3 5,1 2,3 Yht/huuhtelu 11,2 11,1 11,9 12,9 Tavoitteena 10 solua alkiossasta Genomimääritys alkiosta Ensin katsotaan kupuoli Lehmä määritys päättyy yleensä tähän Alkiot siirtoon/pakkaseen Sonni katsotaan genomit Alkiot pakkaseen odottaan tulosta Hollan, Saksa, Ranska Ranska: ineyttävyys 48 % genomimääritetyillä pakasteilla Tiineyttävyys vaihtelee 33 65% välillä Ovum Pick Up eli OPU Munasolujen räys eläimen munasarjoista ultraääniavusteises munasolujen kypsytys laboratoriossa hedelmöitys viljely 4
OPU OPU & alkioiden in vitro tuotanto LUOVUTTAJA OPU 1978: ensimmäinen koeputkilapsi Louise Brown MUNASOLUT ALKIONSIIRTO 1981: enimmäinen koeputkivasikka Virgil ALKIOTUOTANTO LABORATORIOSSA OPU ALKIOT VASTAANOTTAJAT VASIKAT 1987: OPU tekniikka toimivaksi naudalla (Tanska, Hollan) SONNI SIEMEN Suomessa OPU käyttöön 1998, ensimmäinen koeputkivasikka Nopu 1999 OPUn käyttökohteet OPU Euroopan mittakaavassa Jalostusohjelt perinteisen alkiohuuhtelun rinnalla Työkaluna pidemmälle vietyjen lisääntymistekniikoiden ja biotekniikan hittämisessä (transgeeniset eläimet, kloonaus) Lähde: AETE 5
Alkioita / OPU / eläin Lähde: AETE Tehotonta? Miksi tehdä OPUa? Jokainen munasoluerä voidaan haluttaessa hedelmöittää eri sonnilla useita eri paritushdolliuksia, myös seksattu siemen Voidaan rätä 1 2 rtaa / viikko Voidaan rätä myös alkuineyden aikana (3 ensimmäistä ineyskuukautta) Eläin, josta ei saada huuhtelella alkioita voi toimia OPU:ssa hyvin Alkiohuuhtelu 6 siirtolpoista alkiota/ huuhtelu 10 huuhtelua / vuosi 60 alkiota / vuosi OPU 2 OPU sessiota / luovuttaja / viikko 1,5 2 alkiota / sessio 150 alkiota / vuosi Luovuttaja Santapaiset kriteerit kuin alkionluovuttajalla: Geneikka Terve Kuntoluokka SEN SIJAAN voi olla ine 35 vasikkaa / vuosi 70 vasikkaa / vuosi Tarvittava välineistö Ultraäänilaite jossa sektorianturi kiinnitettävissä neulanohjaimeen Alipainepumppu Neulat, letkut, räysputt... 6
OPU Toimenpide Epiduraalipuudutus (Tarvittaessa vyt rauhoitus) Suolen tyhjennys, noralit puhdistukset Anturi + neulanohjain + neula emätmeen, käsin rektaalises ohjataan munasarja anturin päätä vasten neula follikliin, munasolu ja folliklineste letkua pitkin puten CERVIX OVARY OPERATOR HAND US PROBE WITH NEEDLE VAGINAL WALL Haasteita Tulevaiuden visiot Pitkään jatkuvassa räämisessä eläimen hyvinvoin? OPU alkioiden pakastaminen Biopsian otto (genomimääritys) ja biopsioidun alkion pakastaminen OPU VikingGenecsin jalostusohjelan 2014 syksyllä, alkuun tutkimusta ja hitystyötä yhdessä MTT:n kanssa Täydentämään huuhteluja, ei korvaaan huuhtelutoimintaa An Müllerian hormoni Kiitos! Folliklien granulosasolujen erittämä hormoni Ennustaa 3 7 mm mittaisten folliklien määrää munasarjoissa rtoo perovulaaovasteesta eli alkiomäärästä Näytteenoton ajankohta ei ole riippuvainen kiikierron vaiheesta 7