MBT Sepsityper IVD Kit

Transkriptio

1 Käyttöohjeet MBT Sepsityper IVD Kit Sarja positiivisten veriviljelyiden mikro-organismien tunnistamiseen IVD MALDI Biotyper -järjestelmällä CARE- tuotteet ovat korkealaatuisia kulutustuotteita, lisävarusteita ja erikoissarjoja, jotka on suunniteltu tukemaan asiakkaitamme ympäri maailman. CARE- tuotevalikoima on optimoitu ja hyväksytty käyttöön kaikkien Bruker Daltonics -järjestelmien kanssa. Kieli: fi Versio D (Syyskuu 2016)

2 1 Käyttötarkoitus 2 2 Tuotekuvaus 2 3 Tarkistus, säilytys ja vakaus Saapumisen jälkeinen tarkistus Säilytys ennen ensimmäistä avausta ja sen jälkeen 3 4 Riski- ja turvallisuustiedot Biologiset riskit Toimenpiteen rajoitukset 4 5 Tarvittavat kemikaalit ja materiaalit Kemikaalit Laitteisto ja kulutustarvikkeet Suositellut materiaalit veriviljelynesteiden keräykseen 6 6 MBT Sepsityper IVDin näytteenvalmistelumenetelmä MBT Sepsityper IVDin käyttökoulutus 7 7 Valmistaja 8 1 Käyttötarkoitus MBT Sepsityper IVD Kit on in vitro - diagnostinen näytteenvalmistelusarja mikro- organismien tunnistukseen positiivisesti merkatuista veriviljelyistä IVD MALDI Biotyperillä. Sitä käytetään yhdessä muiden kliinisten ja diagnostisten toimenpiteiden kanssa helpottamaan esimerkiksi verenkiertotulehduksen varhaista diagnosointia. 2 Tuotekuvaus Kliinisessä käytössä esimerkiksi veriteitse leviävää tulehdusta epäiltäessä potilaalta kerätään noin 10 ml verta veriviljelypulloihin. Pulloja inkuboidaan automaattisessa tunnistusjärjestelmässä, joka ilmoittaa, sisältääkö näyte bakteereita, hiivoja tai sieniä. MBT Sepsityper IVD Kit tuhoaa selektiivisesti verisoluja ja rikastaa mikro- organismit positiivisesti merkatusta veriviljelystä. Näin syntyviä uutteita voidaan analysoida IVD MALDI Biotyper -järjestelmällä. MBT Sepsityper IVD Kit mahdollistaa merkityksellisten mikro-organismilajien erittäin todennäköisen tunnistuksen 30 minuutissa IVD MALDI Biotyper -järjestelmällä. Useissa tapauksissa mikro-organismin lajin tunnistamisen jälkeen voidaan arvioida, kuinka hyvin erilaiset antibiootit tehoavat siihen. Sarja on in-vitro-diagnostinen laite. Sivu 2/8 MBT Sepsityper IVD Kit Käyttöohjeet Versio D

3 Sarjan osat MBT Sepsityper IVD Kit sisältää seuraavat osat: Lysis Buffer Washing Buffer 1,5 ml:n mikrosentrifugointiputket (50 kpl:n pakkaus) Otsikot MBT Sepsityper IVD Kit -pikaopas Tilaustiedot Tuote Osanumero MBT Sepsityper IVD Kit 50 näytteelle # Tarkistus, säilytys ja vakaus 3.1 Saapumisen jälkeinen tarkistus Tarkista MBT Sepsityper IVD Kit sen saapuessa. Jos pakkaus on vaurioitunut, tarkista sisällä olevat putket ja pullot. Jos putket tai pullot ovat vaurioituneita, älä käytä MBT Sepsityper IVD Kit - tarvikesarjaa. Hävitä MBT Sepsityper IVD Kit (putket, pullot ja pakkaus) tuotteen materiaaliturvallisuustiedotteen mukaisesti ja pyydä Brukerilta korvaavaa tuotetta. 3.2 Säilytys ennen ensimmäistä avausta ja sen jälkeen +20 C +25 C Tarkista ennen ensimmäistä avausta, sisältääkö MBT Sepsityper IVD Kit saostumia. Jos Lysis Buffer sisältää saostumia, anna sen olla huoneenlämmössä (20 25 C) vähintään tunnin ajan ja sekoita sisältöä ennen ensimmäistä avausta. MBT Sepsityper IVD Kit pysyy stabiilina pakkauksen avaamisen jälkeen enintään kolme kuukautta huoneenlämmössä (20 25 C). Älä käytä MBT Sepsityper IVD Kitiä pakkaukseen merkityn viimeisen käyttöpäivän jälkeen. Versio D MBT Sepsityper IVD Kit Käyttöohjeet Sivu 3/8

4 4 Riski- ja turvallisuustiedot Lysis Buffer luokitellaan vaaralliseksi kemikaaliksi: VAARA (H: 315, 318) 1 Lue lisätietoja ladattavasta materiaaliturvallisuustiedotteesta osoitteesta Lisäkemikaalit ja -materiaalit voivat olla tarpeellisia näissä käyttöohjeissa kuvattuihin toimenpiteisiin. Lue tarkasti valmistajan antamat varoitukset, ohjeet tai materiaaliturvallisuustiedotteet ja noudata yleisiä turvallisuusohjeita, kun käsittelet kemikaaleja, biologisesti vaarallisia tai muita materiaaleja. 4.1 Biologiset riskit MBT Sepsityper IVD Kit ja IVD MALDI Biotyper - järjestelmä käsittelevät mahdollisesti vaarallista biologista materiaalia. Kaikkien näiden järjestelmiä käyttävien on luettava kaikki tarvittavat terveyttä ja turvallisuutta koskevat varotoimet ja noudatettava niitä. Kaikkia potilasnäytteitä ja viljelyitä on pidettävä mahdollisesti tartuntavaarallisina. Vain pätevä laboratoriohenkilöstö saa käyttää MBT Sepsityper IVD Kit - tarvikesarjaa ja IVD MALDI Biotyper - järjestelmää. He ovat myös vastuussa kaikkien tarvittavien varotoimenpiteiden noudattamisesta käsiteltäessä mahdollisesti tartuntavaarallista materiaalia. On hyvin tärkeää käyttää asianmukaisia henkilökohtaisia suojaimia koko ajan. Tämä tarkoittaa laboratoriotakkia, suojaavia hanskoja ja suojalaseja. Varmista aina, että henkilökohtaiset suojaimet ovat hyvässä kunnossa. MBT Sepsityper IVD - käsittelyn aikana joitakin reagensseja sekoitetaan mikrobien ja siten mahdollisesti vaarallisen biologisen materiaalin kanssa. Lisäksi jotkin käytetyt tarvikkeet ja kulutustarvikkeet ovat kosketuksissa mikrobeihin. Käyttäjän vastuulla on käsitellä huolellisesti asianomaisia aineita, tarvikkeita ja kulutustarvikkeita sekä hävitettävä ja dekontaminoitava ne oikein kansallisten tai paikallisten turvallisuussäännösten mukaisesti. 4.2 Toimenpiteen rajoitukset Monimikrobisten infektioiden tai kontaminaatioiden (sekaviljelyt) tunnistus biokemiallisilla menetelmillä voi antaa vääriä tuloksia. Kun käytetään MBT Sepsityper IVD Kitiä, tulokset voivat olla epäselviä. Tällaisissa tapauksissa tunnistetaan yleensä vain yksi mikro-organismi, tunnistusta ei pystytä tekemään tai järjestelmä luo sekaviljelyä koskevan vinkin (vain MBT Sepsityper IVD Modulessa). 1 H315: Ärsyttää ihoa; P264: Pese kädet huolellisesti käsittelyn jälkeen; P280: Käytä suojakäsineitä/suojavaatetusta/silmiensuojainta/kasvonsuojainta; P302+P352: JOS KEMIKAALIA JOUTUU IHOLLE: pese saippualla ja vedellä; P321: Erityishoitoa tarvitaan (katso ensihoito-ohjeet materiaaliturvallisuustiedotteesta); P332+P313: Jos ilmenee ihoärsytystä: hakeudu lääkäriin; P362+P364: Riisu saastunut vaatetus ja pese ennen uudelleenkäyttöä. H318: Vaurioittaa vakavasti silmiä. P280: käytä suojakäsineitä/suojavaatetusta/silmiensuojainta/kasvonsuojainta. P305+P351+P338: JOS KEMIKAALIA JOUTUU SILMIIN: Huuhdo huolellisesti vedellä usean minuutin ajan. Poista piilolinssit, jos sen voi tehdä helposti. Jatka huuhtomista; P310: Ota välittömästi yhteys MYRKYTYSTIETOKESKUKSEEN. Sivu 4/8 MBT Sepsityper IVD Kit Käyttöohjeet Versio D

5 Huomautus Sekaviljelyvinkki viittaa vahvasti, mutta ei varmasti, useisiin organismeihin näytteessä. Toisaalta useita organismeja sisältävä näyte ei välttämättä luo sekaviljelyvinkkiä. Siksi kokeneiden kliinisen mikrobiologian ammattilaisten tulee arvioida kaikkien MALDI Biotyper -analyysien tavoin myös Sepsityper-näytteiden lopulliset tulokset. Mikrobiologisten käytäntöjen mukaisesti sekaviljelyiden tunnistaminen positiivisista veriviljelyistä tehdään usein jatkoviljelemällä kukin veriviljelynäyte agarmaljassa (puhtausmäärityslevyssä). Puhtausmäärityslevyn pesäkkeet tutkitaan seuraavana päivänä. Heterogeeniset pesäkkeet viittaavat siihen, että näytteessä oli useita mikro-organismien lajeja. Jokainen MBT Sepsityper IVD Kitillä tehty veriviljely tulee vahvistaa tarkistamalla, että puhtauslevyjen pesäkkeet ovat homogeenisiä, ja pesäkkeiden morfologia on vahvistettava IVD MALDI Biotyper -järjestelmällä. 5 Tarvittavat kemikaalit ja materiaalit 5.1 Kemikaalit MBT Sepsityper IVD Kit -tarvikesarjan osien Lysis Buffer ja Washing Buffer lisäksi MBT Sepsityper IVDin näytteenvalmistelua varten tarvitaan seuraavat kemikaalit ja materiaalit. Saat parhaat tulokset käyttämällä vasta valmistettuja liuottimia, jotka ovat mahdollisimman puhtaita (esimerkiksi HPLClaadun tai CHROMASOLV LC-MS -liuottimia). Etanoli, absoluuttinen Muurahaishappo Asetonitriili HPLC-laadun vesi IVD Bacterial Test Standard (IVD BTS, # , Bruker Daltonik GmbH) IVD Matrix HCCA-portioned (IVD HCCA, # , Bruker Daltonik GmbH) Standardiliuotin (asetonitriiliä 50 %, vettä 47,5 % ja trifluorietikkahappoa 2,5 %) valmistaja Sigma- Aldrich (# 19182) tai SOLUTION OS, valmistaja VWR International GmbH (# PRLS , 250 ml), Bruker Daltonik GmbH:n testaama suositellaan IVD BTS:n ja IVD HCCA:n liuotukseen. 5.2 Laitteisto ja kulutustarvikkeet Käsittelyä varten valittu MALDI-kohdelevy Vortex-sekoitin Pöytäsentrifugi Putkiteline Pipetit Pipetin kärjet Versio D MBT Sepsityper IVD Kit Käyttöohjeet Sivu 5/8

6 5.3 Suositellut materiaalit veriviljelynesteiden keräykseen BD 1 Vacutainer -verenkeräysputki (8,5 ml), BD # BD Vacutainer Eclipse -verenkeräysneula, BD # BD Vacutainer -neulankuljetin, BD # Huomautus Muut keräysmenetelmät ovat mahdollisia. Lue tarkasti valmistajan antamat varoitukset, ohjeet tai materiaaliturvallisuustiedotteet ja noudata yleisiä turvallisuusohjeita, kun käsittelet kemikaaleja, biologisesti vaarallisia tai muita materiaaleja. 6 MBT Sepsityper IVDin näytteenvalmistelumenetelmä Veriviljelynesteiden keräys 1. Desinfioi veriviljelypullon sisäpinta 70-prosenttisella etanolilla tai samankaltaisella liuoksella. 2. Kerää riittävästi veriviljelynesteitä. Näytteenvalmistelu MBT Sepsityper IVD Kit:lla Huomautus Lisätoimenpiteet, jotka tulee suorittaa aktiivihiiltä sisältäviä biomérieux- veriviljelypulloja käytettäessä, on painettu kursiivilla. 3. Siirrä 1 ml veriviljelynestettä Eppendorf-putkeen. 4. Lisää 200 µl Lysis Bufferia ja sekoita vorteksoimalla 10 (± 5) sekunnin ajan. a. Lisää 800 µl tätä seosta SigmaPrep -spin-kolonniin (Sigma-Aldrich SC1000-1KT). b. Sentrifugoi 2 minuutin ajan nopeudella kierrosta minuutissa ja hävitä sitten suodatin. c. Jatka vaiheeseen Sentrifugoi putkea 2 minuutin ajan nopeudella kierrosta minuutissa. 6. Poista supernatantti pipetoimalla ja hävitä se. 7. Lisää 1 ml Washing Bufferia ja suspendoi pelletti uudelleen pipetoimalla ylös ja alas. 8. Sentrifugoi putkea 1 minuutin ajan nopeudella kierrosta minuutissa. 9. Poista supernatantti pipetoimalla ja hävitä se. Uuttomenetelmä ja näytteiden valmistelu MALDI-kohdelevylle 10. Lisää 300 µl HPLC-laadun vettä ja suspendoi pelletti uudelleen pipetoimalla ylös ja alas. 11. Lisää 900 µl etanolia ja sekoita suspensiota. 12. Sentrifugoi putkea 2 minuutin ajan nopeudella kierrosta minuutissa. 13. Poista supernatantti pipetoimalla ja hävitä se. 14. Sentrifugoi putkea 2 minuutin ajan nopeudella kierrosta minuutissa. 15. Poista etanolijäänteet pipetoimalla ja hävitä ne. 16. Anna pelletin kuivua 5 (±1) minuuttia huoneenlämmössä. 1 Becton, Dickinson and Company Sivu 6/8 MBT Sepsityper IVD Kit Käyttöohjeet Versio D

7 17. Lisää 2 50 μl 1 70-prosenttista muurahaishappoa ja suspendoi pellettiä huolellisesti uudelleen pipetoimalla ylös ja alas. 18. Lisää yhtä suuri määrä asetonitriiliä ja sekoita suspensiota pipetoimalla ylös ja alas kahdesta kolmeen kertaan. 19. Sentrifugoi putkea 2 minuutin ajan nopeudella kierrosta minuutissa. 20. Lisää 1 µl supernatanttia MALDI-kohdelevyn paikkaan. 21. IVD-järjestelmän validointia varten aseta 1 µl sekoitettua IVD BTS-liuosta 2 vähintään yhteen MALDI-kohdelevyn paikkaan. HUOMIO: viivästyneet/hävinneet/puuttuvat tunnistustulokset mahdollisia Kun näyte on kuivunut, IVD HCCA - matriisiliuos on lisättävä puolen tunnin kuluessa. Tunnistustulokset näytteestä, jota on käsitelty IVD HCCA - matriisiliuoksella puolen tunnin jälkeen kuivumisesta, tulee hävittää. Kyseisen näytteen valmistelu tulee toistaa vapaassa näytesijainnissa tai MALDI-kohdelevyn puhtaassa eri sijainnissa. 22. Anna näytteiden kuivua huoneenlämmössä. 23. Käsittele kutakin näytettä 1 µl:lla sekoitettua IVD HCCA -matriisiliuosta Anna matriisilla käsiteltyjen näytteiden kuivua huoneenlämmössä. 25. Testimikro-organismin näyte on nyt valmis tunnistusprosessiin. Aseta MALDI-kohdelevy MALDI- TOF-massaspektrometriin ja käsittele se ohjelmiston käyttöoppaan mukaisesti. 6.1 MBT Sepsityper IVDin käyttökoulutus Saatavilla on MBT Sepsityper IVDin käyttökoulutus, joka on suunniteltu parantamaan MBT Sepsityper IVD Kit -tarvikesarjalla tehtävän näytteiden valmistelun luotettavuutta ja onnistumistodennäköisyyttä 1 Pellettiin lisättävän muurahaishapon ja asetonitriilin määrän tulee olla verrannollinen pelletin kokoon. Jos pelletit ovat hyvin pieniä, voidaan kumpaakin pellettiin lisätä vain 2 μl. 2 Valmistettu IVD Bacterial Test Standard -käyttöohjeiden mukaan 3 Valmistettu IVD Matrix HCCA-portioned -käyttöohjeiden mukaan Versio D MBT Sepsityper IVD Kit Käyttöohjeet Sivu 7/8

8 7 Valmistaja Bruker Daltonik GmbH Fahrenheitstraße Bremen Saksa Tuki Sähköposti: biotyper.support@bruker.com Puhelin: +49 (421) Faksi: +49 (421) Myyntitiedot Sähköposti: care@bruker.com Puhelin: +49 (421) Internet: # Kuvaukset ja tekniset tiedot korvaavat kaikki aiemmat tiedot, ja niitä voidaan muuttaa ilman ilmoitusta. Copyright 2016 Bruker Daltonik GmbH Sivu 8/8 MBT Sepsityper IVD Kit Käyttöohjeet Versio D