PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT FI B A61K (32) (33) (31) Etuoikeus - Prioritet SE P

Koko: px
Aloita esitys sivulta:

Download "PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT FI 108775 B A61K 391108. (32) (33) (31) Etuoikeus - Prioritet 26.02.1991 SE 9100556 P"

Transkriptio

1 11111! ,1, ,! (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS PATENT- OCH REGISTERSTYRELSEN (51) Kv.lk.7 - Int.kl.7 A61K (21) Patenttihakemus - Patentansökning (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag (24) Alkupäivä - Löpdag (41) Tullut julkiseksi - Blivit offentlig (86) Kv. hakemus - Int. ansökan PCT/SE92/00110 (32) (33) (31) Etuoikeus - Prioritet (73) Haltija - Innehavare SE P 1 Holmgren,Jan, Korvettgatan 1 D, Västra Frölunda, SVERIGE, (SE) 2 Svennerholm,Ann-Mari, Korvettgatan 1 D, Västra Frölunda, SVERIGE, (SE) (72) Keksijä - Uppfinnare 1 Holmgren,Jan, Korvettgatan 1 D, Västra Frölunda, SVERIGE, (SE) 2 Svennerholm,Ann-Mari, Korvettgatan 1 D, Västra Frölunda, SVERIGE, (SE) (74) Asiamies - Ombud: Berggren Oy Ab Jaakonkatu 3 A, Helsinki (54) Keksinnön nimitys - Uppfinningens benämning Menetelmä enterotoksigeenisten E. coli -bakteereiden ihmisessä aiheuttamaa suolistoinfektiota vastaan vaikuttavan rokotekoostumuksen tuottamiseksi Förfarande för framställning av en vaccinkomposition mot tarminfektion förorsakad av bakterien E. coli i människan (56) Viitejulkaisut - Anförda publikationer DE B (A61 K), EP A (A61 K 39/02), GB A (A61 K 39/02), WO A 86/04604 (C12N 1/20) (57) Tiivistelmä - Sammandrag Keksinnön kohteena on menetelmä ihmisessä tämiseksi antamalla ihmiselle, jossa tällaienterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden nen infektio halutaan estää, inaktivoitua E. aiheuttamaa suolistoinfektiota vastaan vai- coli-kantaa käsittävää rokotekoostumusta. kuttavan rokotekoostumuksen tuottamiseksi. Erilaisten tunnettujen kantojen, joista kukin kykenee ilmentämään tietyntyyppisiä pesiytymistekijäantigeeneja, joukosta valittuja E. coli-kantoja kasvatetaan nestemäisessä viljelyalustassa. Lopuksi formaliinilla tapettu E. coli-kanta, jossa mainittujen, tietyntyyppisten pesiytymistekijäantigeenien antigeeniset ominaisuudet ja hemagglutinoivat ominaisuudet ovat säilyneet olennaisesti, sekoitetaan farmaseuttisesti hyväksyttävään täyteaineeseen ja/tai laimentimeen. Keksinnön kohteena on lisäksi menetelmä ihmisessä enterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden aiheuttaman suolistoinfektion es-

2 Uppfinningen avser ett förfarande för framställning av en vaccinkomposition mot tarminfektion förorsakad av enterotoxigena coli-bakterier i människan. E. coli-stammar valda bland olika kända stammar, vilka envar har förmåga att uttrycka en bestämd typ av kolonisationsfaktorantigener, odlas i ett flytande kulturmedium. Slutligen blandas en formalin-avlivad E. coli-stam uppvisande väsentligen bibehällna antigena och hemagglutinerande egenskaper hos nämnda bestämda typ av kolonisationsfaktorantigener med ett farmaceutiskt acceptabelt fyllnadsmedel och/eller utspädningsmedel. Uppfinningen avser därtill ett förfarande för förebyggande av en tarminfektion förorsakad av enterotoxigena E. coli-bakterier i människan genom att tili en människa administrera en vaccinkomposition innefattande en inaktiverad E. coli-stam för förebyggande av nämnda infektion

3 ' Menetelmä enterotoksigeenisten E. coli -bakteereiden ihmisessä aiheuttamaa suolistoinfektiota vastaan vaikuttavan rokotekoostumuksen tuottamiseksi 5 Formaliinilla tapettujen, pesiytymistekijäantigeenia (CFA) ilmentåvien E. coli-organismien valmistus ja käyttö ihmisissä enterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden aiheuttamaa suolistoinfektiota/ripulia vastaan vaikuttavaa rokottamista varten 10 Oheisen keksinnön kohteena on formaliinilla tapettujen, pesiytymistekijåantigeenia (colonization-factor-antigen; CFA) ilmentåvien E. coli-organismien preparointi ja käyttö ihmisissä enterotoksigeenisten E. coli-bakteeiden aiheuttamaa suolistoinfektiota/ripulia vastaan vaikuttavaa rokottamista 15 varten. Erityisesti, keksinnön kohteena on menetelmä ihmisessä enterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden aiheuttamaa suolistoinfektiota torjuvan rokotekoostumuksen tuottamiseksi, sekä 20 menetelmä ihmisesså enterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden aiheuttaman suolistoinfektion eståmiseksi. Enterotoksinogeenisen Escherichia coli-bakteerin (ETEC) aihe-. uttama ripuli on huomattava terveysongelma erityisesti kehi- - '25 tysmaissa sekä näissä maissa matkustelevien henkilöiden kes- kuudessa. Kehitysmaissa esiintyvään akuuttiin ripuliin koh-. distetuissa sairaalatutkimuksissa ja kliinisissä tutkimuksissa ETEC on tunnistettu %:ssa tapauksista, keskiarvon ollessa noin 20 % alle 5-vuotiaista lapsista ja hieman suu- 30 rempi vanhempien henkilöiden joukossa. Samoin ETEC on tunnis-... tettu teollisuusmaista kehitysmaihin matkustaneissa henkilöisså esiintyvän akuutin ripulin aiheuttajaksi vähintään kolmasosassa tai jopa puolessa kaikista ripulitapauksista ETEC:n aiheuttama sairaus vaihtelee lievästä ripulista, johon ei liity nestehukkaa, koleran kaltaiseen tautiin. Monet kehitysmaiden lapset sairastuvat ensimmäisen viiden elinvuotensa aikana joka vuosi 1-2 kertaa ETEC:n aiheuttamaan ripuliin. Vaikka suurin osa ETEC-infektioiden oireista on suhteellisen

4 lieviä, niin kuitenkin ETEC aiheuttaa kehitysmaissa joka vuosi enemmän kuimiljardi ripulitapausta, joihin kuolee yli mil-joona lasta. Niinpä kaikilla sellaisilla toimenpiteillä, jotka vähentäisivät ETEC:n aiheuttamaa kuolleisuutta ja sai- 5 rastumistiheyttä edes osittain, olisi suurta merkitystä julkisen terveydenhuollon kannalta. Tällä hetkellä saatavana ei ole ihmisessä käyttökelpoista rokotetta ETEC-ripulia vastaan. Kuitenkin jokin aika sitten 10 kehitetyn, suun kautta otettavan kolerarokotteen laajoissa kenttäkokeissa todettiin, ettei tämän rokotteen B-alayksikkökomponentti, joka ristireagoi immunologisesti ETEC:n lämpölabiilin enterotoksiinin (LT) kanssa, tuottanut huomattavaa suojaa ainoastaan koleraa, vaan myöskin LT:tä tuottavan 15 ETEC:n aiheuttamaa ripulia vastaan. Suoja ETEC-infektiota vastaan oli erityisen selvä sellaista sairautta vastaan, johon sairauteen liittyi voimakasta, hengenvaarallista nestehukkaa, ja joka sairaus saatiin vähenemään 86 1 tällä rokotteella ensimmäisen kolmen kuukauden aikana immunoinnin jäl- 20 keen. SAIRAUDEN JA IMMUNITEETIN MEKANISMI. Jotta ETEC kykenisi aiheuttamaan sairauden, sen on kyettävä pesiytymään ohutsuoleen ja tuottamaan LT:ta ja/tai låmpöstabiilia enterotoksiinia -.25 (ST, STa). E. coli LT on rakenteeltaan ja toiminnaltaan samankaltaista kuin koleratoksiini, sen koostuessa toksiiniak- - : tiivisesta A-alayksiköstä, joka on kiinnittynyt viiteen B-. : alayksikköön, jotka välittävät sitoutumista solukalvoresepto- reihin. ST-molekyyli on pieni polypeptidi, joka koostuu vain :..: : : aminohappojäånnöksestå, ja joka kiihottaa guanylaattisyklaasiaktiivisuutta suolistosoluissa. Toisin kuin LT, joka on vahva immunogeeni, ST ei ole immunogeeninen, ellei sitä ole konjugoitu kokeellisesti suurempaan kantajaproteiiniin. Pelkästään ST:tä ja LT/ST:tä tuottavat kannat ovat ripulin huomattavia syitä endeemisillä alueilla, kun taas pelkkää LT:tä tuottavat kannat aiheuttavat usein sairautta kehitysmaihin matkustavien henkilöiden keskuudessa. Enterotoksiiniprofiililtaan erilaisten ETEC-kantojen osuus vaihtelee maasta toiseen.

5 Monissa ETEC-kannoissa tarttumista suoliston limakalvoon välittävät antigeenisesti erilaiset ripsut (fimbria). Ihmiselle patogeenisista kannoista on tunnistettu kolme pääasiallista tarttujaa; niitä kutsutaan pesiytymistekijäantigeeneiksi CFA/I, 5 CFA/II ja CFA/IV (jotka käytettiin aikaisemmin nimitystä PCF8775). CFA/I on yksinkertainen homogeeninen ripsuantigeeni, kun taas CFA/II käsittää coli-pinta-antigeenit (CS-antigeenit) CS1, CS2 ja CS3 ja CFA/IV käsittää CS4-, CS5- ja CS6-antigeenit. Vaikka näiden erilaisten pesiytymistekijöiden esiintyminen 10 vaihteleekin maantieteellisesti, niin kuitenkin antigeeneja CFA/I, CFA/II tai CFA/IV tavataan tavallisesti puolessa tai jopa kolmessa neljäsosassa niistä ETEC-bakteereista, jotka on eristetty kliinisesti merkittävää ripulia sairastaneista tapauksista. Todennäköisesti myös muita tarttujia tullaan kuiten- 15 kin vielä tunnistamaan. Endeemisillä alueilla ETEC-infektion suurimmat määrät todetaan nuorissa lapsissa. Niiden havaintojen, että sairastuvuus vähenee iän kasvaessa ja että oireettomien tapausten osuus on suu- 20 rempi aikuisissa kuin lapsissa, perusteella voidaan päätellä, että ihmisessä voi kehittyä luonnostaan suojaava immuniteetti. Samoin matkustajissa, jotka oleskelevat pitkiä aikoja näissä suuren riskin maissa, kehittyy jonkinlaista vastustuskykyä ETEC-ripulia vastaan. Edelleen eläimissä ja vapaaehtoisissa.25 ihmisissä suoritetut kokeet ovat osoittaneet, että ETEC-infektio voi johtaa olennaiseen immuniteettiin homologisille organismeille altistumista vastaan. Olemassa on näyttöä siitä, että sekä antibakteerinen että anti- ' :30 toksinen immuniteetti myötävaikuttavat suojaukseen ETEC-ripulia vastaan. ETEC:ta vastaan kohdistuvan antibakteerisen immuniteetin voidaan katsoa johtuvan suureksi osaksi erilaisia pesiytymistekijäantigeeneja (CFA) vastaan vaikuttavasta immuniteetista, vaikka 0-antigeenia vastaan vaikuttavilla vasta-aineilla : :35 voi myöskin olla merkitystä suojauksessa homologisia 0-ryhmiä käsittävää ETEC:tä vastaan. Eläimissä anti-cfa-vasta-aineet ovat suojanneet altistumiselta homologisia CFA-antigeeneja

6 ,T mentävälle ETEC:lle. Samoin sekä eläimissä että vapaaehtoisissa ihmisissä suun kautta tai suoliston sisäisesti toteutettu immunointi antigeeneja CFA/I, CFA/II tai CFA/IV ilmentävillä ETECkannoilla on indusoinut suojaavan immuniteetin myöhemmin tapah- 5 tuvaa homologisen CFA/CS-tekijän käsittävälle E. coli:lle altistumista vastaan. Luonnollisesti indusoitunut antitoksinen ETEC-immuniteetti kohdistuu vain LT:tä vastaan, koska luonnollinen ST ei ole immuno- 10 geenista. Anti-LT-immuunivaste kohdistuu pääasiassa molekyylin B-alayksikköosaa vastaan, joka B-alayksikköosa ristireagoi immunologisesti koleratoksiinin B-alayksiköiden kanssa. Tämä selittää sen, miksi, kuten edellä on mainittu, suun kautta tapahtuva immunointi kolera-b-alayksiköllä saattaa indusoida suojan 15 ETEC-ripulia vastaan [1]; mielenkiintoista oli todeta, ettei suoja indusoitunut vain pelkkää LT:tä vaan myös LT/ST:tä tuottavia ETEC-kantoja vastaan [1]; tätä havaintoa tukivat myös ne havainnot, jotka oli tehty eläimissä joko kolera-b-alayksiköllä tai LT-B-alayksiköllä tapahtuneen immunoinnin jälkeen (julkai- 20 sematon tulos). Tunnettua on myös se, että ihmisessä kliininen ETEC-sairaus saa aikaan merkittäviä antitoksisia sekä antibakteerisia immuunivasteita suolistossa, mikä johtaa LT:ta sekä homologisia CFA- 25 ja 0-antigeeneja vastaan vaikuttavan spesifisen IgA-vasta-ainetiitterin suurenemiseen suoliston huuhtelunesteessä [2]. Sekä anti-enterotoksiini- että anti-pesiytymistekijävasta-aineet kykenevät suojaamaan toisistaan riippumatta kokeellista ETECinfektiota vastaan, ja kun niitä on läsnä yhdessä suolistossa, 20 näiden vasta-ainespesifisyyksien on todettu toimivan yhdessä synergistisesti suojauksessa ETEC-sairautta vastaan [3]. Toisin kuin anti-lt-immuniteetin hyvin vakiintunut suojaava toiminta ETEC-sairautta vastaan, anti-st-immuniteetin merkitys 35 suojauksessa on vielä selvittämättä. Vaikka luonnollisessa tilassa oleva ST ei olekaan immunogeenista, niin kuitenkin se saattaa johtaa ST:tä neutraloivien vasta-aineiden muodostumi-

7 seen, kun sitä käytetään kantajaproteiiniin kytkettynä. Tämän perusteella voidaan päätellä, että myös rokotteella indusoitu anti-st-immuniteetti saattaa olla saavutettava tavoite. Kuitenkin tähän saakka testatuissa erilaisissa ST-kantaja-konjugaa- 5 teissa, jotka on saatu joko kemiallisella kytkentätekniikalla tai yhdistelmä-dna-tekniikalla, on säilynyt merkittävää, vaikkakin joskus heikentynyttä toksista aktiivisuutta. Tästä syystä viime aikoina on valmistettu useita synteettisesti muokattuja ST-peptidejä ST:n kaltaisten ei-toksisten epitooppien tunnista- 10 miseksi. Samankaltaisia peptidejä koodaavia synteettisiä oligonukleotidejä on myös tehty ja se on fuusioitu koleran B-alayksikköä koodaavaan geeniin, ja kun näitä kimeerisiä geenejä on istutettu Vibrio cholerae-organismiin, ne ovat koodanneet täydellisesti ei-toksisen, ST:n ja B-alayksikön välisen fuusiopro- 15 teiinin syntymistä suurina pitoisuuksina. Koe-eläinten immunointi tällaisilla kemiallisesti saaduilla tai geneettisesti tehdyillä ei-toksisilla, peptidin ja B-alayksikön välisillä konjugaateilla on johtanut anti-st-vasta-ainevasteiden kehittymiseen, neutraloivan aktiivisuuden ollessa tähän saakka kuiten- 20 kin vain heikko. MAHDOLLISET ROKOTTEET. ETEC-bakteereiden tärkeimpiin suojaaviin antigeeneihin ja ETEC-infektioita vastaan vaikuttaviin varsinaisiin immuunimekanismeihin liittyvien tietojen perusteella 25 voidaan vetää se johtopäätös, että tehokasta ETEC-rokotetta tulisi antaa suun kautta, ja että se johtaa sekä pesiytymistä vastustavien että antitoksisten immuunivasteiden kehittymiseen suolistossa. Niinpä rokotteen tulisi sisältää yhdistelmänä bakteerisolusta ja toksiinista peräisin olevia antigeeneja. laisia mandollisia, eläviä tai inaktivoituja ETEC-rokotteita on tarkasteltu näiden vaatimusten pohjalta. Elävät rokotteet. Tarkastelun kohteeksi voidaan ottaa elävät bakteerit, jotka ilmentävät tärkeimpiä CFA-antigeenejä ja tuot- :S5 tavat B-alayksikköä tai jotakin samankaltaista enterotoksoidia, koska tällainen rokote saattaisi johtaa suoliston paikallisen immuunijärjestelmän pysyvään antigeeniseen stimuloitumiseen

8 suolessa tapahtuvan monistumisen seurauksena. Koska erilaiset pesiytymistekijät eivät kuitenkaan ilmenny tavallisesti samassa kannassa ja koska eri CFA-antigeeneja koodaavien geenien kloo- naaminen samaan isäntäorganismiin ei ole ollut mandollista, 5 niin tällaiset rokotteet perustuvat välttämättä, ainakin tällä hetkellä, useiden erilaisten kantojen seokseen. Tällaiseen rokotteeseen liittyy kuitenkin lukuisia ongelmia. Niistä voidaan mainita yhden rokotteeseen sisällytetyn kannan liian voimakas kasvu siten, että muut tukahtuvat; toksisuuden palautuminen sen seurauksena, että toksiinia koodaavia plasmideja siirtyy kantaan; enterotoksoidin alhainen tuotanto in vivo-kasvun aikana; sekä rokotekantojen heikko hengissäpysyminen säilytyksen aikana. Tästä syystä suun kautta annettavia eläviä ETEC-rokotteita ei ole vielä odotettavissa. Ei-elävät rokotteet. Tärkeimpiä rokotteeseen sisällytettäviä somaattisia antigeeneja ovat ne CFA:t, joita esiintyy runsaasti ETEC-kannoissa eri maantieteellisillä alueilla. Näistä antigeeneista voidaan mainita CFA/I, CFA/II ja CFA/IV sekä mandolli- 20 sesti muutama muu, vielä määrittelemätön CFA. Puhdistettujen 25 CFA-antigeenien valmistus voi kuitenkin olla suhteellisen kallista, ja edelleen, suun kautta tapahtuneen antamisen jälkeen eristettyjen CFA-antigeenien on todettu hajoavan herkästi ihmisen ruuansulatuskanavassa [4, 5]. Käytännöllisempänä tapana muodostaa rokote saattaa olla valmistaa tapettuja ETEC-bakteereeita, jotka ilmentävät pinnallaan tärkeimpiä CFA-antigeeneja, ja yhdistää nämä organismit asianmukaiseen toksoidikomponenttiin. Rokotteen valmistukseen liit- :30 tyvistä huomattavista ratkaistavista ongelmista voidaan mainita (a) sellaisen toimenpiteen löytäminen, jolla toimenpiteellä rokotekannat voitaisiin tappaa turvallisesti siten, että erilaisten CFA-antigeenien antigeeniset ominaisuudet ja tarttumisominaisuudet (hemagglutinoivat ominaisuudet) kuitenkin säilyvät :35 (ihanteellisessa tapauksessa tämän toimenpiteen tulisi myös stabiloida CFA-antigeenit hajoamista vastaan ihmisen suolistoympäristössä), ja (b) sellaisten olosuhteiden löytäminen, jois-

9 sa olosuhteissa päästään CFA-antigeenien voimakkaaseen ilmentymiseen bakteereiden pinnalla, kun niitä kasvatetaan nestemäisessä alustassa fermentorissa, suuressa mitassa tapahtuvan rokotetuotannon helpottamiseksi. 5 Hyvin tunnettu ja siitä syystä edullinen menetelmä bakteereiden inaktivoimiseksi siten, että niitä voidaan käyttää koko soluihin perustuvissa rokotteissa, on formaliinikäsittelyn käyttö. Tähän tarkoitukseen käytetään tavallisesti 1M olevaa formalii- 10 nipitoisuutta. Olemme todenneet, että CFA:ta ilmentävien ETECbakteereiden käsittely tavallisesti rokotteen valmistuksessa käytetyillä menetelmillä tappoi turvallisesti ETEC-organismit, mutta tämä käsittely tuhosi samalla suurimman osan CFA-antigeenisisällöstä tai se tuhoutui kokonaan, mistä syystä nämä mene- 15 telmät eivät sovi hyvin inaktivoitujen, mutta CFA-immunogeenisyyttä vielä käsittävien ETEC-kantojen valmistamiseksi. Tämän mukaisesti Levine [6] on kuvannut Tacket:in et al. rajallisen menestyksen, joka liittyi yhden kannan formaliinilla käsiteltyjen ETEC-organismien käyttöön IgA-vasta-ainetuotannon stimuloi- 20 miseksi ja vapaaehtoisten henkilöiden suojaamiseksi. Rokote oli valmistettu E. coli-kannasta E A, joka on 06:H16-biotyypin A-kanta, joka ilmentää CS1- ja Cs3-ripsuja, muttei muodosta LT:ta eikä ST:ta. Aikaisemmin elävänä, suun kautta annettavana rokotteena käytettäessä vain yhdellä E A-kannan - 25 annoksella saatiin merkittävä suoja vapaaehtoisissa serotyyppiä 0139:H28 olevan LT + /ST + ETEC-kannan kokeellista altistamista vastaan, joka kanta ilmentää CS1:tä ja CS3:ea. (Tutkimuslaitoksen U.S. Army Vaccine Production Facility of the Walter Reed Army Institute of Research, Forest Glen, Maryland, tutkijat :30 olivat inaktivoineet E A-bakteerit formaliinilla). Tacket:in et al. mukaan yhdeksälle vapaaehtoiselle annettiin kanden viikon välein kolme rokoteannosta (joista jokainen sisälsi 5x10 10 inaktivoitua bakteeria) yhdessä NaHCO 3 :n kanssa. Näistä yhdeksästä vapaaehtoisesta kanden seerumissa todettiin 35 CFA-vasta-aineen merkittävää kohoamista, kun taas neljässä näistä yhdeksästä vapaaehtoisesta suoliston SIgA-anti-ripsuvasta-aine oli kohonnut selvästi. Sitten toteutettiin pieni

10 altistustutkimus, jossa neljä rokotetta saanutta henkilöä ja 10 vertailuhenkilöä altistettiin patogeeniselle ETEC-kannalle E24377A (0139:H28, CS1, CS3, LT -F /ST + ). Merkkejä suojauksesta ei todettu: ripulia esiintyi kandessa rokotetussa henkilössä nel- 5 jästä ja kuudessa vapaaehtoisessa kymmenestä. Alalla ei olla kuvattu CFA-antigeenien ilmentymistä nestemäisessä alustassa. Tällaista ilmentymistä ei olla todellakaan pidetty tähän saakka mandollisena, koska nestemäisen alustan 10 tiedetään tukanduttavan CFA-antigeenien ilmentymistä, ja sen sijaan indusoivan mannoosille herkkää tyyppiä 1 olevien karvojen ilmentymistä [7]. Alustavissa yrityksissä kehittää rokotteiden prototyyppejä, 15 jotka perustuvat erilaisia CFA-antigeeneja ja CS-proteiineja ilmentäviin ETEC-bakteereihin [8], oli käytettävä organismien kasvatusta kiinteillä agarmaljoilla, mikä on suuressa mitassa tapahtuvan rokotetuotannon vakava este. Oheisen keksinnön puitteissa on nyt kehitetty toimenpide, joka sallii CFA-antigeenien 20 yhtä hyvän ilmentymisen ETEC:n pinnalla nestemäisessä alustassa ravistelukasvatuksena toteutetun kasvatuksen aikana kuin CFA:lle edullisessa agarmaljakasvatuksessa vallitsevissa optimaalisissa olosuhteissa, ja keksinnön puitteissa on myös osoi- tettu, että CFA ilmentyy voimakkaasti E. coli:n pinnalla fer mentorikasvatuksen aikana vallitsevissa olosuhteissa. Keksin- nössä on myös kuvattu toimenpide, jonka avulla nämä nestemäi- sessä alustassa ja fermentorissa kasvatetut E. coli-bakteerit inaktivoidaan formaliinilla siten, että testatut ETEC-rokote- kannat saadaan tapetuiksi turvallisesti, ja joka samalla sekä ''0 säilöö että stabiloi bakteeripinnalla olevat CFA:t määrätyllä kvantitoitavalla tavalla. Kuvion 1 selitys: Ruotsalaisille aikuisille vapaaehtoisille annettiin kolmena immunointina (4,) ETEC-rokotteen prototyyppiä :35 0., 14. ja 28. vuorokautena ja suoliston huuhtelunäytteitä kerättiin välittömästi ennen immunointia ja sitten 9 vuorokautta toisen ja kolmannen immunoinnin jälkeen. Puhdistettuja CFA/I-,

11 CFA/II- (CS1+CS3) ja CTB- (GM1-ELISA) antigeeneja vastaan vaikuttavat ELISA IgA-tiitterit määritettiin ja jaettiin kunkin näytteen kokonais-iga-pitoisuudella. 5 Keksinnön yksi piirre kohdistuu menetelmään ihmisessä enterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden aiheuttamaa suolistoinfektiota vastaan vaikuttavan rokotekoostumuksen tuottamiseksi. Tässä menetelmässä vähintään yhtä, erilaisten tunnettujen kantojen, joista kukin kykenee ilmentämään tietyntyyppisiä pesiy- 10 tymistekijäantigeeneja, joukosta valittua E. coli-kantaa kasvatetaan sopivissa olosuhteissa nestemäisessä viljelyalustassa, jossa nämä tietyntyyppiset pesiytymistekijäantigeenit kykenevät ilmentymään voimakkaasti E. coli-bakteereiden pinnalla, ennaltamäärättyyn tiheyteen, minkä jälkeen bakteeriviljelmä otetaan 15 talteen ja se suspendoidaan uudelleen suolaliuokseen, ja saatuun suspensioon lisätään, samalla kevyesti sekoittaen, formaliinia 0,2 M olevaksi lopulliseksi pitoisuudeksi, mitä seuraa inkubointi 37 C:n lämpötilassa samalla jatkuvasti sekoittaen noin 2 tunnin ajan, mitä seuraa inkubointi 4 C:ssa tun- 20 nin ajan, jolloin tuloksena on formaliinilla tapettu E. colikanta, jossa mainittujen, tietyntyyppisten pesiytymistekijäantigeenien antigeeniset ominaisuudet ja hemagglutinoivat ominaisuudet ovat säilyneet olennaisesti, minkä jälkeen nämä formaliinilla tapetut E. coli-bakteerit sekoitetaan farmaseutti-, 25 sesti hyväksyttävään täyteaineeseen ja/tai laimentimeen sopi- vaksi pitoisuudeksi. Keksinnön tämän piirteen eräässä suoritusmuodossa mainittu nes- temäinen viljelyalusta käsittää 1 % (paino/tilavuus) kasamino- 'po happoja, 0,15 % (p/t) hiivauutetta, 0,4 mm MgSO 4, 0,04 mm MnC1 2 sekä ionittomaksi tehtyä vettä, ph-arvon ollessa 7,4, ja viljely tapahtuu voimakkaasti sekoittaen tai käyttäen muuta sellaista tapaa, jolla päästään voimakkaaseen ilmastumiseen, noin 37 C:n lämpötilassa vähintään 4-6 tunnin ajan, ennenkuin bakteerit otetaan talteen sentrifugoimalla tai suodattamalla tai muulla tavalla.

12 Keksinnön tämän piirteen toisessa suoritusmuodossa tietyntyyppisiä pesiytymistekijäantigeeneja ilmentävät kannat on valittu ihmisen suoliston pesiytymistekijäantigeenien CFA/I, CFA/II 5 (CS1, CS2, CS3) sekä CFA/IV (CS4, CS5, CS6) joukosta. Keksinnön tämän piirteen muussa suoritusmuodossa lisätään vielä happoa neutraloivaa puskuria sekä valinnaisesti ylimääräisiä antigeenisia komponentteja, jotka indusoivat immuniteettia esi- 10 merkiksi endotoksiineja vastaan. Keksinnön toinen piirre kohdistuu menetelmään ihmisessä enterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden aiheuttaman suolistoinfektion estämiseksi siten, että sopiva määrä rokotekoostumusta, 15 joka käsittää immunoivana komponenttinaan vähintään yhtä, erilaisten tunnettujen kantojen, joista kukin kykenee ilmentämään tietyntyyppisiä pesiytymistekijäantigeeneja, joukosta valittua inaktivoitua E. coli-kantaa, joissa kussakin kannassa näiden tietyntyyppisten pesiytymistekijäantigeenien antigeeniset omi- 20 naisuudet ja hemagglutinoivat ominaisuudet ovat säilyneet olennaisesti, annetaan ihmiselle, jossa tällainen infektio halutaan estää. Keksinnön tämän piirteen edullisen suoritusmuodon mukaisesti 25 antaminen tapahtuu suun kautta. Keksinnössä on kuvattu toimenpiteitä, joiden avulla, fermento- ria käyttäen valittuja E. coli-bakteerikantoja voidaan kasvat- taa suuriin tiheyksiin nestemäisessä väliaineessa bakteereiden :30 menettämättä kykyään ilmentää erilaisia CFA-antigeeneja, CFA/I, CFA/II ja CFA/IV mukaan lukien, minkä jälkeen bakteerit voidaan käsitellä siten, että organismit saadaan tapetuiksi turvalli- sesti CFA-antigeeneja kuitenkaan tuhoamatta. Näiden toimenpiteiden ansiosta tällaisia inaktivoituja E. coli-organismeja :'35 voidaan käyttää turvallisina, ei-elävinä, suun kautta annettavina, ihmisessä enterotoksigeenisten E. coli-bakteereiden aiheuttamaa suolistoinfektiota/ripulia vastaan vaikuttavana

13 rokotteena. Seuraavassa on esitetty esimerkkejä toimenpiteistä näiden bakteerirokotekomponenttien saamiseksi sekä menetelmistä, joilla saadaan selville niiden käyttökelpoisuus suoliston limakalvojen immunogeeneina Menetelmä, jolla päästään toivottujen, erityyppisten CFAantigeenien (CFA/I, CFA/II ja CFA/IV) voimakkaaseen ilmentymiseen E. coli-organismien pinnalla nestemäisessä alustassa tapahtuvan kasvatuksen aikana, eikä, kuten aikaisemmin on esitet- 10 ty, vain agarmaljoilla tai muilla kiintellä alustoilla. 2. Tämän menetelmän onnistunut soveltaminen näiden CFA-antigeenien voimakkaaksi ilmentämiseksi E. coli-bakteerin pinnalla, näitä bakteereita fermentorissa, nestemäisessä alustassa kasva- 15 tettaessa. 3. Toimenpide valikoitujen E. coli-organismien inaktivoimiseksi formaliinilla siten, että immunologinen reaktiivisuus spesifisten vasta-aineiden kanssa sekä erilaisten CFA-antigeenien hem- 20 agglutinoiva aktiivisuus säilyvät lähes täydellisesti. 4. Kokeet, jotka osoittavat, että kaniinien immunointi nesteessä kasvatetuilla, formaliinilla käsitellyillä E. coli-organismeilla johtaa spesifisten, erilaisia CFA-antigeeneja vastaan 25 vaikuttavien vasta-aineiden yhtä suurin tiittereihin kuin immunointi vastaavilla elävillä, agarilla kasvatetuilla bakteereilla. 5. Kokeet, jotka osoittavat, että formaliinilla käsiteltyjen '30 rokoteorganismien pinnalla olevat CFA:t ovat stabiilimpia kuin käsittelemättömien elävien bakteereiden pinnalla olevat CFA:t, kun organismeja inkuboidaaan happamassa puskurissa tai ihmisen ruuansulatuskanavan nesteessä. 6. Tutkimukset, jotka osoittavat, että nesteessä kasvatettuja, formaliinilla inaktivoituja CFA-E. coli-organismeja voidaan antaa vapaaehtoisille ihmisille ilman merkittäviä sivuvaikutuk-

14 sia suun kautta annettavana rokotteena, ja että kanden tai kolmen tällaisen rokoteannoksen antaminen stimuloi IgA-vasta-aineiden tuotantoa suoliston huuhtelunesteessä sekä rokotteen CFA-antigeenejä vastaan vaikuttavaa, spesifistä vasta-ainetta 5 erittävien solujen ilmaantumista kiertoon. Esimerkit Keksinnön puitteissa testattiin suuri lukumäärä ETEC-kantoja, 10 jotka ilmensivät antigeeneja CFA/I, CFA/II (mukaan lukien kannat, joissa ilmentyi pelkkä CS1, CS2 tai CS3 tai CS1+CS3 tai CS2+CS3) tai CFA/IV (kannat, joissa ilmentyi CS4+CS5 tai CS5+CS6). Nämä kannat olivat eri puolilta maailmaa saatuja kliinisiä eristeitä sekä laboratoriossa manipuloituja kantoja, 15 ja niiden joukossa oli kantoja, joissa enterotoksiinin tuotantoprofiilit olivat erilaisia (LT+ST, tai pelkkä LT tai ST, sekä toksiinin suhteen negatiiviset johdannaiset). Koska seuraavissa esimerkeissä 1-5 kuvatut toimenpiteet on todettu testatussa määrin päteviksi erilaisille kannoille, jotka ilmentävät eri- 20 tyyppisiä CFA-antigeeneja tai alatyyppejä ja joiden enterotoksiiniprofiilit ovat erilaisia, niin esimerkeissä kuvatut kokeet ja tulokset on rajoitettu muutamalla valitulla kannalla saatuihin edustaviin tuloksiin. 25 Esimerkki 1 CFA-antigeenien ilmentyminen E. coli-organismien pinnalla fermentorissa, ravisteluviljelmänä nestemäisessä alustassa tapahtuneen kasvatuksen jälkeen 30 Aikaisemmin käytetyt toimenpiteet CFA-antigeenien ilmentämiseksi E. coli:n pinnalla ovat aina perustuneet organismien kasvatukseen kiinteillä pinnoilla, tavallisesti niinkutsutuilla CFAagarmaljoilla [7], koska tiedettiin, että kasvattaminen nestemäisessä alustassa tukandutti tavallisesti CFA-antigeenien mentymistä ja helpotti samalla tyyppiä 1 olevan (tavallisen) karvan ilmentymistä E. coli-bakteereiden pinnalla. ETEC-rokotteen suuressa mitassa tapahtuvan tuotannon helpottamiseksi kek-

15 sinnön puitteissa on kehitetty toimenpiteitä, jotka tekevät mandolliseksi erilaisten CFA-antigeenien voimakkaan ilmentymi- sen E. coli-bakteerin pinnalla myös nestemäisessä alustassa vallitsevissa kasvuolosuhteissa (ravisteluviljelmissä pulloissa 5 tai fermentorissa). Useiden erilaisten tavallisesti käytettyjen bakteriologisten nestemäisten alustojen ja viljelyolosuhteiden epäonnistuneen testaamisen jälkeen saimme kehitetyksi seuraavan toimenpiteen, 10 jolla CFA-antigeenejä voitiin ilmentää ja todeta toivottuina määrinä alunperin jokaisen mallikannan SBL101 (CFA/I), SBL102 ja SBL103 (molemmat CFA/II) pinnalla nestemäisessä alustassa kasvattamisen jälkeen. Sitten CS5:n ilmentämistä varten tarkoitetun alustan koostumusta hieman muuttamalla päästiin myös 15 CFA/IV-antigeenin hyvään ilmentymiseen muiden kantojen pinnalla. Eri kantojen jäädytetyistä siirrosviljelmistä (joita pidettiin glyserolissa -70 C:ssa) otettiin platinasilmukalla pieni määrä, joka siirrostettiin CFA-agarmaljoille, joita inkuboitiin yön yli 37 C:ssa. Maljalla olevista pesäkkeistä selvitettiin 20 asianmukaisen CFA:n ilmentyminen suorilla agglutinaatiokokeilla käyttäen antigeeneja CFA/I, CS1, CS2, CS3, CS4, CS5 ja CS6 vastaan vaikuttavia spesifisiä monoklonaalisia vasta-aineita. Nämä moniklonaaliset vasta-aineet on valmistettu hakijoiden laboratoriossa. Sitten CFA-agarmaljoilla olevat bakteerit otettiin,25 talteen fosfaatilla puskuroidulla suolaliuoksella (PBS) ja tästä suspensiosta otettiin 5-10 x10 9 organismia, jotka lisättiin siirrosteena 400 ml:aan nestemäistä alustaa. Tämän CFA-alustan koostumus oli seuraava: kasaminohappoja 1 % (p/t); hiivauute 0,15 % (p/t); MgSO 4 mm; MnC1 2 0,04 mm; ionittomaksi tehtyä vet- 30 tä H 2O, ph 7,4. Näitä pulloja inkuboitiin ravistellen nopeudella 150 pyöritystä/min., noin 20 tunnin ajan 37 C:ssa, minkä ajanjakson jälkeen suspensiosta tehdyn 1:10-laimennoksen optinen tiheys oli noin 0,25-0,5. Bakteerit otettiin talteen sentrifugoimalla +4 C:n lämpötilassa, bakteerikasauma pestiin ker- 35 taalleen PBS-liuoksella ja bakteerit kasautettiin jälleen sentrifugoimalla ja ne suspendoitiin uudestaan PBS-liuokseen sellaiseksi suspensioksi, josta tehdyn 1:10-laimennoksen optinen

16 tiheys oli 0,285. Tästä suspensiosta ja vertailun vuoksi CFAagarmaljoilla viljeltyjen kantojen rinnakkaisviljelmistä talteenotettujen bakteereiden suspensioista, jotka oli asetettu samaan optiseen tiheyteen, määritettiin laimennossarjana asian- 5 mukaisen CFA:n ilmentyminen. Näissä analyyseissä käytettiin sekä suoraa agglutinointia monoklonaalisella anti-cfa-vastaaineella että kvantitatiiviseen CFA-inhibitioon perustuvaa ELISA-menetelmää, joka oli kehitetty hakijoiden laboratoriossa. 10 Tulokset on koottu taulukkoon 2. Niistä nähdään, että suspensioissa, jotka saatiin sen jälkeen, kun organismeja oli kasvatettu pulloissa nestemäisessä alustassa, CFA-antigeenien ilmentyminen oli verrattavissa CFA-agarmaljoilla kasvatetuilla bakteereilla saavutettuun ilmentymiseen (kun bakteeripitoisuus oli 15 asetettu samansuuruiseksi). Kannoissa SBL102 ja SBL103 läsnäolevat, erilaisia CFA/II CSproteiineja koodaavat plasmidit koodasivat myös bakteerin vastustuskykyä ampisilliinille ja kanamysiinille. Tästä syystä 20 näitä kantoja viljeltiin rinnakkain nestemäisessä alustassa ja agarilla, joita oli täydennetty näillä antibiooteilla. Vaikka taulukossa 2 esitetyt arvot onkin saatu ilman antibiootteja, niin kuitenkin antibioottien läsnäollessa saadut arvot olivat käytännöllisesti katsoen identtisiä (ei esitetty). Samoin nes- 25 temäisessä alustassa, jota käytettiin taulukossa 2 kuvatussa kokeessa, vallinneet kasvuolosuhteet osoittautuivat yhtä tyydyttäviksi kuin kasvatus CFA-agarmaljoilla, jotka oli tarkoitettu useista muista testatuista kannoista peräisin olevien antigeenien CFA/I, CFA/II ja CFA/IV (käsittäen kunkin alaprote- 30 iinin CS4, CS5 ja CS6) ilmentämistä varten; CS5:n optimaalista ilmentämistä varten sekä esiviljelyyn käytettyä CFA-agaria että nestemäistä CFA-alustaa täydennettiin 0,15 % Bacto Bile Saltssuoloilla pitoisuudeksi 1,5 g/1 (Difco).,35 Myöhemmissä kokeissa tätä toimenpidettä, jolla CFA-antigeenit saatiin ilmentymään voimakkaasti ETEC-organismien pinnalla nestemäisissä viljelmissä, sovellettiin fermentorissa, nestemäi-

17 sessä alustassa toteutettavaan kasvatukseen. Seuraavan toimenpiteen, joka on esitetty seuraavassa esimerkinomaisesti CFA/Ikannalle, mutta joka todettiin yhtä käyttökelpoiseksi myös muiden, CFA/II:ta tai CFA/IV:ää tuottavien kantojen tapaukses- 5 sa, todettiin johtavan CFA:n samankaltaiseen ilmentymiseen bakteereiden lukumäärää kohden kuin kasvatus CFA-agarilla tai ravisteluviljelmissä. CFA-agarmaljoille siirrostettiin SBL101-kantaa (CFA/I) ja mal- 10 joja kasvatettiin 37 C:ssa yön yli; siirrosteena käytettiin pakastettua siirrosviljelmää. Bakteerit otettiin talteen CFAagarmaljoilta fysiologisen suolaliuoksen avulla ja 5x10 10 bakteeria lisättiin siirrosteena 4 litraan CFA-alustaa; siirrosteena voitaisiin myös käyttää bakteereiden log-vaiheessa ole- 15 vaa, CFa-alustaan tehtyä ravisteluviljelmää. Sitten bakteereita kasvatettiin Bio-flo III-fermentorissa (New Brunswick Scientific Co, Edison, N.J., USA) 37 C:ssa samalla voimakkaasti sekoittaen (800 pyöritystä/minuutti), ph-arvoa säätämättä. Jo 4-5 tunnin kuluttua fermentoriviljelmän aloituksesta viljelmän 20 optinen tiheys oli 4-5, eli suspension 1:10-laimennus oli 0,4-0,5. Optisen tiheyden ei todettu kasvavan jatkettaessa viljelyä fermentorissa 20 tunnin ajan. Näytteistä, jotka oli otettu fermentorista eri ajanhetkillä viljelmän aloittamisen jälkeen - ja vertailun vuoksi saman bakteerisiirrosteen ravisteluviljelmis-..25 tä (pulloissa) valmistetuista bakteerisuspensioista - määritettiin CFA/I:n ilmentyminen sen jälkeen, kun bakteeripitoisuus oli asetettu yhtäsuureksi eli arvoon bakteeria/ml. Kuten taulukosta 3 nähdään, CFA/I:n ilmentyminen (bakteereiden lukumäärää kohden) oli optimaalista jo sen jälkeen, kun viljelyä.30 oli jatkettu 4-5 tuntia fermentorissa, ja se oli verrattavissa siihen CFA/I:n ilmentymiseen, joka todettiin pulloissa, ravisteluviljelmänä 20 tunnin ajan kasvatettujen bakteereiden pinnalla. `. 35

18 Esimerkki 2 Toimenpide E. coli-bakteereiden inaktivoimiseksi formaliinilla siten, että CFA-antigeenien immunoreaktiivisuus ja hemagglutinoiva aktiivisuus säilyy Erilaisia fysikaalisia ja kemiallisia inaktivointimenetelmiä, joista voidaan mainita käsittely formaliinilla erilaisissa olosuhteissa, testattiin epätyydyttävin tuloksin, ennenkuin tässä esimerkissä kuvattu sopiva toimenpide löytyi. Tämä toimenpide, 10 joka käsittää lievän formaliinikäsittelyn eri lämpötiloissa useiden vuorokausien ajan, täytti sen vaatimuksen, että oletetut E. coli-rokoteorganismit saatiin tapetuiksi täydellisesti aiheuttamatta niiden CFA-antigeenisisällössä tai -laadussa merkittävää häviötä. Tämä testattiin määrittämällä erilaisten CFA- 15 antigeenien määrät bakteereiden pinnalla ennen formaliinikäsittelyä ja käsittelyn jälkeen käyttäen kvantitatiiviseen CFA-inhibitioon perustuvaa ELISA-määritystä, jossa käytettiin erilaisia CFA/CS-komponentteja vastaan vaikuttavia monoklonaalisia vasta-aineita, kuten esimerkissä 1 on kuvattu. Tämä menetelmä 20 tekee mandolliseksi bakteeripinnalla olevien CFA-antigeenien täsmällisen määrittämisen. Asetettujen vaatimusten mukaan vähintään yhden kolmasosan CFA-antigeenisisällöstä tulisi olla säilynyt bakteerivalmisteessa tappamisen jälkeen eläviin lähtöorganismeihin verrattuna, ja samoin hemagglutinoivan aktiivi- 25 suuden tulisi olla säilynyt ilmaistavana tapetuissa bakteereissa säilyneen CFA-antigeenisyyden lisäksi. B B Tämä toimenpide ja sen käyttökelpoisuus on kuvattu yksityiskohtaisesti seuraavassa esimerkissä. Joko CFA/I- tai CFA/II-anti- 30 geeneja ilmentäviä bakteereja kasvatettiin nestemäisessä alustassa ja ne suspendoitiin PBS-liuokseen käyttäen esimerkissä 1 kuvattuja samoja toimenpiteitä. Sitten formaliinia (HCHO) lisättiin 0,2 M olevaksi lopulliseksi pitoisuudeksi bakteerisuspensioon, suspensiota varovasti sekoittaen. Sitten suspensiota, 35 inkuboitiin sitä jatkuvasti sekoittaen 37 C:ssa noin 2 tunnin ajan, minkä jälkeen se siirrettiin kylmähuoneeseen ja pidettiin 4 C:ssa vielä tunnin ajan. Kun inkubointi formaliinin

19 kanssa oli saatu päätökseen, suspensiosta otettiin näytteitä ja niistä määritettiin elinkelpoisten organismien puuttuminen viljelemällä sekä elatusalustassa että agarmaljoilla; agarmaljoja ja elatusalustapulloja tarkkailtiin joka päivä 14 vuorokauden 5 ajan. Toimenpide johti aina kaikkien testattujen E. coli-organismien täydelliseen kuolemiseen. Sen jälkeen, kun formaliinikäsittely kylmässä oli suoritettu loppuun, bakteerisuspensioista analysoitiin niiden CFA-sisältö 10 määrittämällä vastaavien näytteiden hemagglutinoiva aktiivisuus [7], sekä kyky estää vastaavien monoklonaalisten vasta-aineiden sitoutuminen CFA ELISA-määrityksessä, joka on kuvattu viitteessä [9]. Vertailun vuoksi kuhunkin kokeeseen sisällytettiin vastaavan kannan käsittelemätön, juuri valmistettu viljelmä, jonka 15 bakteeripitoisuus oli asetettu samaksi kuin formaliinilla käsiteltyjen organismien tapauksessa. Kuten taulukosta 4 todetaan, hemagglutinoiva kyky oli säilynyt näissä formaliinilla käsitellyissä valmisteissa ja CFA-antigeenisyydestä oli säilynyt vähintään 50 % vastaavilla CFA ELISA-inhibitiokokeilla määritet- 20 tynä. Lukuisissa peräkäisissä kokeissa varmistettiin ne tulokset, että formaliinilla käsitellyt bakteerit inhiboivat 50-prosenttisesti vastaavien monoklonaalisten vasta-aineiden sitoutumista kiinteään faasiin sidottuun puhdistettuun CFA:han pitoisuuksina, jotka vastasivat % käsittelemättömien baktee-..25 reiden pitoisuuksista. Esimerkki 3 Formaliinilla käsiteltyjen ja käsittelemättömien (elävien) ETEC-organismien pinnalla olevien CFA-antigeenien varastointi/-,..30 inkubointistabiilisuuden vertaaminen Muissa laboratorioissa tehdyt tutkimukset ovat osoittaneet, että käsittelemättömän CFA-ripsut ovat hyvin herkkiä mahahapol-. le [4,5]. Mahahapon neutraloiminen edeltäkäsin neutraaliin ph- ',35 arvoon ei näyttänyt estävän sen haitallista vaikutusta ripsuproteiinin CFA-antigeenisyyteen [4]. Tätä taustaa vasten me vertasimme käsittelemättömien E. coli-bakteereiden pinnalla ja

20 vastaavien, formaliinilla käsiteltyjen E. coli-bakteereiden pinnalla ilmentyneiden CFA-antigeenien antigeenisyyttä toisiinsa sen jälkeen, kun bakteereita oli inkuboitu happamassa ruuansulatuskanavan nesteessä ja tyhjäsuolinesteessä, vastaavasti. 5 Näytteitä inkuboitiin myös PBS-liuoksessa, jonka ph oli asetettu eri arvoihin. Alustavissa kokeissa erilaisia käsittelemättömiä ja formaliinilla käsiteltyjä bakteerisuspensioita inkuboitiin eri ph-ar- 10 voissa, jotka vaihtelivat alueella ph 3 - ph 11, 30 minuutin ajan 37 C:n lämpötilassa, ennen ph-arvon palauttamista neutraaliksi. Inkubointi näissä ph-arvoissa ei vaikuttanut yhdessäkään tapauksessa käsittelemättömistä bakteereista eikä formaliinilla käsitellyistä ja tapetuista bakteereista saatujen 15 valmisteiden CFA-antigeenisyyteen. Myöhemmissä kokeissa verrattiin toisiinsa elävien bakteereiden ja formaliinilla inaktivoitujen bakteereiden inkubointia puskurissa, jonka ph-arvo oli 2, happamassa ruuansulatuskanavan nesteessä ja tyhjäsuolen nesteessä. Ruuansulatuskanavan nestettä ja tyhjäsuolen nestettä 20 kerättiin aikuisilta ruotsalaisilta Sahlgrenska-sairaalassa, joka sijaitsee Göteborgissa. Kuten taulukosta 5 nähdään, inkubointi puskurissa, jonka ph oli 2, tai inkubointi happamassa ruuansulatuskanavan nesteessä vaikutti vain marginaalisesti tai se ei vaikuttanut lainkaan formaliinilla käsiteltyihin baktee- 25 reihin, eikä CFA-antigeenisyyden todettu pienentyneen lainkaan tyhjäsuolen nesteessä toteutetun inkuboinnin jälkeen. Toisaalta käsittelemättömien elävien bakteereiden CFA-antigeenisyys oli useimmissa tapauksissa selvästi pienempi sekä puskurissa, jonka ph oli 2, inkuboinnin jälkeen että happamassa ruuansulatuskana- 30 van nesteessä inkuboinnin jälkeen. Nämä analyysit osoittavat, että formaliinikäsittely suojaa CFA-ripsuja hajoamiselta mahanesteessä. 35

21 Esimerkki 4 Formaliinilla käsiteltyjen ETEC-organismien ja käsittelemättömien (elävien) ETEC-organismien pinnalla esiintyvien CFA-antigeenien immunogeenisten ominaisuuksien vertaaminen 5 Formaliinilla käsiteltyjen ja käsittelemättömien (elävien), CFA-positiivisten E. coli-bakteereiden kykyä indusoida anti- CFA-vasta-ainevasteita verrattiin toisiinsa. Täysikasvuisille uusiseelantilaisille valkoisille kaneille, jotka painoivat kg immunoinnin alkaessa, annettiin 3-5 ihonalaisena innjektiona vastaavat annokset (5x10 8-2x109 bakteeria) formaliinilla käsiteltyjä bakteereita tai käsittelemättömiä eläviä bakteereita; ensimmäiset injektiot annettiin Freund:in täydellisessä apuaineessa, toiset injektiot annettiin epätäydellisessä apuaineessa 15 ja myöhemmät injektiot annettiin ilman apuainetta. Formaliinilla käsitellyt bakteerit valmistettiin immunoinnin alkaessa, minkä jälkeen niitä säilytettiin +4 C:ssa käyttöön saakka; elävät bakteerit valmistettiin juuri ennen käyttöä kunakin immunointipäivänä. Formaliinilla käsiteltyjä bakteereita oli vil- 20 jelty CFA-alustassa ja käsittelemättömiä eläviä bakteereita oli viljelty CFA-agarilla; sekä formaliinilla käsitellyt että käsittelemättömät bakteerit pestiin kandesti PBS-liuoksella ennen immunointia. -25 Eläimistä otettiin verinäyte välittömästi ennen immunointia ja sitten 7-10 vuorokauden kuluttua viimeisestä immunoinnista. Seerumit käsiteltiin ja ne pakastettiin annoksina -30 C:n lämpötilaan, jossa niitä pidettiin analyysiin saakka. Spesifiset vasta-ainevasteet immunoivan kannan CFA:ta vastaan määritettiin 30 käyttäen erilaisia ELISA-menetelmiä. ELISA-mikrotiitterilevyt pinnoitettiin puhdistetuilla CFA-antigeeneilla, eli antigeeneilla CFA/I, CFA/II (CS1+CS3), CS2, CS4 tai CS5, liuotettuna PBS-liuokseen 1-5 gg/ml olevaksi lopulliseksi pitoisuudeksi, inkuboimalla CFA-liuosta sisältäviä maljoja 37 C:ssa yön yli. `,35 Sitten seerumin viisinkertainen laimennussarja titrattiin levyillä tavalla, joka on kuvattu aikaisemmin [2,3]. Tiittereinä määritettiin sen intrapoloidun laimennuksen käänteisluku, jonka

22 20 ' laimennuksen absorbanssi oli lukeman 0,3 verran suurempi kuin taustan absorbanssi, kun entsyymin oli annettu reagoida substraattinsa kanssa 20 minuutin ajan. 5 CFA-vasta-ainetaso ei ollut merkittävä yhdessäkään ennen immunointia otetussa verinäytteessä, eli CFA-tiitteri ei ollut yli 50. Toisaalta immunoinnin päättymisen jälkeen kaikissa seerumeissa vasta-ainetiitterit homologista CFA:ta vastaan vaihtelivat alueella (Taulukko 6). Immunointi for- 10 maliinilla käsitellyillä bakteereilla indusoi hyvin samankaltaiset tiitterit homologista CFA:ta vastaan kuin vastaavat käsittelemättömät organismit (Taulukko 6). Esimerkki 5 15 Kokeet, joilla selvitetään formaliinikäsiteltyjen ETEC-bakteereiden turvallisuus ja kyky stimuloida spesifisen IgA-vastaaineen muodostuminen ihmisen suolistossa ETEC-rokotevalmiste, joka koostui formaliinilla tapetuista, 20 antigeeneja CFA/I, CS1, CS2 ja CS3 ilmentävistä bakteereista (eli kannoista SBL 101, SBL 102 ja SBL 103, jotka on mainittu taulukossa 1), valmistettiin Ruotsin kansallisessa bakteriologisessa laboratoriossa (National Bacteriological Laboratory) pienen mitan kliinisiä kokeita varten. Tätä rokotekomponenttia 25 annettiin yhdessä kolera B-alayksikön (CTB [1]) kanssa. Ruotsalaisissa aikuisissa vapaaehtoisissa toteutettiin tutkimus tämän yhdistelmä-cfa-etec-ctb-rokotteen turvallisuuden ja suolistossa paikallisen immunogeenisyyden selvittämiseksi. Myös vasta-ainevasteet seerumissa sekä ääreisveren lymfosyyttien 30 kyky tuottaa spesifisiä vasta-aineita määritettiin. Kullekin vapaaehtoiselle annettiin suun kautta kolmena immunointina tapettua E. coli-organismia ja 1 mg CTB:tä kulloinkin kanden viikon välein. Rokote annettiin 150 ml:ssa pus- 35 kuroitua bikarbonaattiliuosta, käyttäen niitä samoja sitraattibikarbonatti-tabletteja (ACO, Tukholma, Ruotsi), joita käytettiin suun kautta annetussa kolerarokotteessa Bangladesh:in

23 kenttäkokeissa [1]. Suolistonäytteitä ja seerumia kerättiin välittömästi ennen immunointeja ja sitten 9 vuorokauden kuluttua toisesta ja kolmannesta immunoinnista; ääreisveren lymfosyyttejä saatiin sinä päivänä, jolloin ensimmäinen immunointi 5 toteutettiin, ja sitten 7 vuorokautta ensimmäisen, toisen ja kolmannen immunoinnin jälkeen. Suoliston IgA-vasta-ainevasteet useimpia tärkeitä suojaavia antigeeneja vastaan määritettiin suoliston huuhtelunesteestä 10 aikaisemmin kuvatulla tavalla [2]. Suoliston huuhteleminen toteutettiin antamalla vapaaehtoisten juoda isotonista suolaliuosta (tavallisesti 3-5 litraa), kunnes tuloksena oli vesiripuli. Kerätty nestemäinen uloste suodatettiin harsokankaan läpi, sitä käsiteltiin erilaisilla entsyymi-inaktivaattoreilla, 15 se sentrifugoitiin ja väkevöitiin pakastekuivaamalla. Aikaisemmissa tutkimuksissa me olemme jo osoittaneet, että suoliston huuhteluneste on paikallisesti muodostuneiden, erittyneiden, suolistoon annettua antigeenia vastaan vaikuttavien IgA-vastaaineiden rikas lähde; suolistossa paikallisesti syntetisoitu- 20 neet, erittyneet IgA-vasta-aineet ovat todennäköisesti erityisen tärkeitä suojaavassa immuniteetissa ETEC-ripulia vastaan. Paikallisesti suolistossa, esimerkiksi suun kautta annetun rokotteen vaikutuksesta stimuloituneet immunosyytit kulkeutuvat tavallisesti imunesteen kautta vereen ja ja palaavat sitten ta-..25 kaisin suolistoon, jossa ne kypsyvät pääasiassa IgA:ta erittäviksi plasmasoluiksi. Näitä suolistosta peräisin olevia, vastaainetta erittäviä soluja (ASC-soluja) voidaan saada keräämällä ääreisveren lymfosyyttejä tietyllä ajanhetkellä varhain suun kautta tapahtuneen rokotuksen jälkeen - optimaalisesti 7. vuo- 30 rokautena [10] - ja näiden solujen kyky tuottaa stimulointiin käytettyjä antigeeneja vastaan vaikuttavia, spesifisiä vastaaineita voidaan määrittää. Lopuksi erityisen IgA-luokan seerumivasta-aineet voivat myöskin viitata, tosin vähäisemmässä määrin, tällaisiin suolistossa esiintyviin vasteisiin vapaaehtoiselle annettiin kolme annosta rokotetta. Yhdessäkään tapauksessa ei todettu mitään paikallisia eikä systeemisiä

24 haitallisia reaktioita, jotka olisi voitu yhdistää immunointiin. 11 rokotetusta henkilöstä kerätyistä suoliston huuhtelunesteistä tutkittiin antigeeneja CTB/LT, CFA/I, CFA/II ja yhden immunoivan kannan 0-antigeenia vastaan vaikuttavat vasta-aineet 5 [2]. Sitten määritettiin spesifiset ELISA IgA-tiitterit jaettuna kunkin näytteen kokonais-iga-pitoisuudella. Kuten taulukosta 7 nähdään, merkittäviä IgA-vasta-ainevasteita todettiin antigeeneja CFA/I ja CFA/II vastaan sekä CTB:tä vastaan useimmissa rokotetuissa henkilöissä. Vasteiden esiintymistiheys suolistos- 10 sa oli verrattavissa siihen esiintymistiheyteen, joka todettiin jo aikaisemmin CFA-positiivisen E. coli-bakteerin aiheuttamasta infektiosta toipuvien bangladeshiläisten keskuudessa. CFA/I:ta ja CFA/II:ta vastaan vaikuttavat vasta-ainevasteet olivat verrattavissa (kuvio 1) suuruutensa puolesta siihen vasteeseen, 15 joka on nähty jo aikaisemmin ETEC-sairaudesta toipuvissa bangladeshiläisissä. Vapaaehtoisissa todettiin myös selviä suolistossa esiintyviä IgA-vasta-ainevasteita rokotteen CTB-komponentille (kuvio 1) ja nämä vasteet olivat suuremmat kuin kliinisen ETEC-sairauden jälkeen todetut anti-lt-vasteet. 20 Näistä tuloksista nähdään, että ETEC-rokote kykeni indusoimaan paikallisesti suolistossa olennaisia CFA-vasta-ainevasteita; tällaisten vasteiden indusointi ihmisissä suun kautta annettujen eristettyjen ripsujen avulla immunoimalla on ollut ai-.25 kaisemmin vaikeata [4,5]. Immunointi johti myös siihen, että useimpien rokotettujen henkilöiden vereen ilmaantui spesifisiä ASC-soluja, jotka määritettiin ELISPOT-määrityksellä [10] antigeeneja CFA/I, CFA/II ja LT/CTB-vastaan (taulukko 7). Anti-CFA ASC-solujen suurentuneita määriä todettiin jo vain yhden roko-,30 teannoksen jälkeen. CFA-vasta-ainetta tuottavien solujen vasteet olivat vain vähän suuremmat toisen ja kolmannen annoksen jälkeen kuin ensimmäisen immunoinnin jälkeen, kun taas anti- LT:tä tuottavien solujen optimaaliset lukumäärät todettiin toisen immunoinnin jälkeen. Syntyneet anti-cfa-vasta-aineet kuu- 35 luivat pääasiassa IgA-luokkaan, mutta myös eräitä IgM:ää tuottavia ASC-soluja todettiin; anti-ctb ASC-solut olivat pääasiassa IgA-isotyyppiä, mutta myös eräitä IgG:tä tuottavia soluja

25 tunnistettiin. Rokote sai myös aikaan merkittäviä seerumin vasta-ainevasteita sekä CFA- että CTB/LT-antigeeneja vastaan useimmissa vapaaehtoisissa (Taulukko 7)

26 Mainitut julkaisut 1. Clemens J, Sack D, Harris JR, Chakraborty J, Noegy PK, Stanton B, Huda N, Khan MU, Kay BA, Khan MR, Ansaruzzaman 5 M, Yunus M, Rao MR, Svennerholm A-M, Holmgren J: Crossprotection by B-subunit-whole cell cholera vaccine against diarrhea associated with heat-labile toxin-producing enterotoxigenic Escherichia coli: results of a large-scale field trial. J. Infect. Dis. 158: , Stoll BJ, Svennerholm A-M, Gothefors L, Barua D, Huda S, Holmgren J: Local and systemic antibody responses to naturally acquired enterotoxigenic Escherichia coli diarrhea in an endemic area. J. Infec. Dis. 153: , kir -8n C, Svennerholm A-M: Synergistic protective effect of antibodies against Escherichia coli enterotoxin and colonization factor antigens. Infect. Immun. 38:74-79, Levine MM, Morris JG, Losonsky G, Boedeker E, Rowe B: Fimbriae (Pili) adhesins as vaccins. In Protein-Carbohydrate Interaction in Biological Systems, pp , Academic Press, London, 1986.,25 5. Evans DG, Graham DY, Evans DJ Jr, Opekun A: Administration of purified colonization factor antigens (CFA/I, CFA/II) of enterotoxigenic Escherichia coli to volunteers. Response to challenge with virulent enterotoxigenic Escherichia coli. Gastroenterology 87: , Levine MM: Vaccines against enterotoxigenic Escherichia coli infection. In Woodrow GC, Levine MM (toimittajat): New generation vaccines. Marcel Dekker, Inc, New York 1990, p

27 Evans DG, Evans DJ Jr: New surface-associated heat-labile colonization factor antigen (CFA/II) produced by enterotoxigenic Escherichia coli or serogroups 06 and 08. Infect. Immun. 21: , Svennerholm A-M, Holmgren J, Sack DA: Development of oral vaccines against enterotoxigenic Eschericia coli diarrhoea. Vaccine 7: , Lopez-Vidal Y, Klemm P, Svennerholm A-M: Monoklonal antibodies against different epitopes on colonization factor antigen I of enterotoxin-producing Escherichia coli. J. Clin. Microbiol. 26: , Czerkinsky C, Svennerholm A-M, Quiding M, Jonsson R, Holmgren J: Antibody-producing cells in peripheral blood and salivary glynds in humans. Infect. Immun. (in press) ,

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. - (51) Kv.lk.4 "-' A 61K 39/12. (24) Alkupäivä Löpdag 01.06.84

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. - (51) Kv.lk.4 -' A 61K 39/12. (24) Alkupäivä Löpdag 01.06.84 (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT C (45) PAÖntti Myörinetty Paten't - beviljats - (51) Kv.lk.4 "-' A 61K 39/12 (21) Patenttihakemus Patentansökning 842215 SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus

Lisätiedot

Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia

Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia Bordetella pertussis Laboratorion näkökulma Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia SIDONNAISUUDET Asiantuntija Labquality Ammatinharjoittaja Mehiläinen Apurahoja:

Lisätiedot

Miten rokottaminen suojaa yksilöä ja rokotuskattavuus väestöä Merit Melin Rokotusohjelmayksikkö

Miten rokottaminen suojaa yksilöä ja rokotuskattavuus väestöä Merit Melin Rokotusohjelmayksikkö Miten rokottaminen suojaa yksilöä ja rokotuskattavuus väestöä Merit Melin Rokotusohjelmayksikkö 1 ESITYKSEN SISÄLTÖ Miten rokottaminen suojaa yksilöä? Immuunijärjestelmä Taudinaiheuttajilta suojaavan immuniteetin

Lisätiedot

1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. SUISENG vet. Injektioneste, suspensio, sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS. Koostumus annosta kohti (2 ml):

1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. SUISENG vet. Injektioneste, suspensio, sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS. Koostumus annosta kohti (2 ml): 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI SUISENG vet. Injektioneste, suspensio, sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Koostumus annosta kohti (2 ml): Vaikuttavat aineet: E. colin F4ab-fimbrian adhesiini 65 % ER

Lisätiedot

Seuraavat E.coli antigeenit. 16 HA yksikköä. 50 HA yksikköä 987P 0,15 µg LTB 0,1 µg (HA = hemagglutiini)

Seuraavat E.coli antigeenit. 16 HA yksikköä. 50 HA yksikköä 987P 0,15 µg LTB 0,1 µg (HA = hemagglutiini) VALMISTEYHTEENVETO 1 ELÄINLÄÄKEVALMISTEEN KAUPPANIMI COLISORB vet. 2 VAIKUTTAVAT AINEET JA APUAINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT Kvantitatiivinen koostumus Vaikuttavat aineet Seuraavat E.coli antigeenit vähintään

Lisätiedot

KandiakatemiA Kandiklinikka

KandiakatemiA Kandiklinikka Kandiklinikka Kandit vastaavat Immunologia Luonnollinen ja hankittu immuniteetti IMMUNOLOGIA Ihmisen immuniteetti pohjautuu luonnolliseen ja hankittuun immuniteettiin. Immunologiasta vastaa lymfaattiset

Lisätiedot

Injektioneste, suspensio. Vaaleanpunertava tai valkoinen neste, joka sisältää valkoista sakkaa. Sakka sekoittuu helposti ravisteltaessa.

Injektioneste, suspensio. Vaaleanpunertava tai valkoinen neste, joka sisältää valkoista sakkaa. Sakka sekoittuu helposti ravisteltaessa. 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Trilyme injektioneste, suspensio koirille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi annos (1 ml) sisältää: Vaikuttavat aineet: Inaktivoitu Borrelia burgdorferi sensu lato: Borrelia

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Nobivac L4 injektioneste, suspensio koirille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 1 ml:n annos sisältää: Vaikuttavat aineet: Inaktivoidut Leptospira

Lisätiedot

NOBIVAC RABIES VET. Adjuvantti: Alumiinifosfaatti (2 %) 0,15 ml (vastaten alumiinifosfaattia 3 mg)

NOBIVAC RABIES VET. Adjuvantti: Alumiinifosfaatti (2 %) 0,15 ml (vastaten alumiinifosfaattia 3 mg) VALMISTEYHTEENVETO 1 ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Nobivac RABIES Vet 2 LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Per annos (1 ml): Vaikuttava aine: BHK-21-soluviljelmässä kasvatettua ja beeta-propionilaktonilla inaktivoitua

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Porcilis ColiClos injektioneste, suspensio sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 2 ml:n annos sisältää: Vaikuttavat aineet: Escherichia

Lisätiedot

11 11111111 111 11111 11 1110111! 11 11191911 1 11111111 111 111111

11 11111111 111 11111 11 1110111! 11 11191911 1 11111111 111 111111 11 11111111 111 11111 11 1110111! 11 11191911 1 11111111 111 111111 (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 107515B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 31.08.2001 SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI-

Lisätiedot

SUOMI-FINLAND 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFt43094

SUOMI-FINLAND 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFt43094 SUOMI-FINLAND 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFt Kv. lk./int. Cl. C 1 2 k 7/00 Lk./KI. 30 h 6 CO Patentti myönnetty 11 11971 Patent meddetat Patenttihakemus Patentansökning 2099/66 Hakemispkiivä Ansökningsdag

Lisätiedot

Kuolioinen suolistotulehdus kalkkunoilla -projektin kuulumisia. Päivikki Perko-Mäkelä Erikoistutkija, ELT Evira, Seinäjoki

Kuolioinen suolistotulehdus kalkkunoilla -projektin kuulumisia. Päivikki Perko-Mäkelä Erikoistutkija, ELT Evira, Seinäjoki Kuolioinen suolistotulehdus kalkkunoilla -projektin kuulumisia Päivikki Perko-Mäkelä Erikoistutkija, ELT Evira, Seinäjoki Tutkimuksen tarkoitus on ymmärtää paremmin kuolioisen suolistotulehduksen syntyä

Lisätiedot

Käänteisestä rokotetutkimuksesta ratkaisu flavobakteeriongelmiin?

Käänteisestä rokotetutkimuksesta ratkaisu flavobakteeriongelmiin? Käänteisestä rokotetutkimuksesta ratkaisu flavobakteeriongelmiin? 26.3.2015 Kalaterveyspäivät, Tampere Krister Sundell Akvaattisen patobiologian laboratorio Åbo Akademi Flavobacterium psychrophilum Aiheuttaa

Lisätiedot

1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. ALPHA JECT 3000 Injektioneste, emulsio merilohelle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS

1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. ALPHA JECT 3000 Injektioneste, emulsio merilohelle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI ALPHA JECT 3000 Injektioneste, emulsio merilohelle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Vaikuttavat aineet: 1 annos (0.1 ml) sisältää: Formaliinilla inaktivoituja bakteerikantoja:

Lisätiedot

Yersinia-serologia. Markus Penttinen 041105 Lääketieteellinen mikrobiologia Turun yliopisto

Yersinia-serologia. Markus Penttinen 041105 Lääketieteellinen mikrobiologia Turun yliopisto Yersinia-serologia Markus Penttinen 041105 Lääketieteellinen mikrobiologia Turun yliopisto Yersiniainfektio Yersiniainfektio aiheuttaa mm. seuraavia tauteja: 1. Akuutteja tauteja - suolistotulehduksia

Lisätiedot

Vaaleankeltainen, opalisoiva piparmintun tuoksuinen ja makuinen suspensio.

Vaaleankeltainen, opalisoiva piparmintun tuoksuinen ja makuinen suspensio. 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI Nystimex, 100 000 IU/ml oraalisuspensio 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT 1 ml sisältää 100 000 IU nystatiinia. Apuaineet: metyyliparahydroksibentsoaatti 1 mg natrium1,2 mg/ml,

Lisätiedot

Autoimmuunitaudit: osa 1

Autoimmuunitaudit: osa 1 Autoimmuunitaudit: osa 1 Autoimmuunitaute tunnetaan yli 80. Ne ovat kroonisia sairauksia, joiden syntymekanismia eli patogeneesiä ei useimmissa tapauksissa ymmärretä. Tautien esiintyvyys vaihtelee maanosien,

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO. Yksi millilitra käyttövalmista oraalisuspensiota sisältää amoksisilliinitrihydraattia vastaten amoksisilliinia 50 mg.

VALMISTEYHTEENVETO. Yksi millilitra käyttövalmista oraalisuspensiota sisältää amoksisilliinitrihydraattia vastaten amoksisilliinia 50 mg. VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Amovet vet 50 mg/ml jauhe oraalisuspensiota varten 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Vaikuttava aine: Yksi millilitra käyttövalmista oraalisuspensiota sisältää

Lisätiedot

Bakteereja tunnistetaan a) muodon perusteella:

Bakteereja tunnistetaan a) muodon perusteella: Bakteereja tunnistetaan a) muodon perusteella: ja b) värjäytyvyyden perusteella: 1) Gram-positiiviset Soluseinän ulkokalvo värjäytyy 2) Gram negatiiviset Soluseinän ulkokalvo jää värjäytymättä Laborointi

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO. Täydellisen parenteraalisen ravitsemuksen täydennyksenä vesiliukoisten vitamiinien päivittäisen tarpeen tyydyttämiseksi.

VALMISTEYHTEENVETO. Täydellisen parenteraalisen ravitsemuksen täydennyksenä vesiliukoisten vitamiinien päivittäisen tarpeen tyydyttämiseksi. VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI Soluvit infuusiokuiva-aine, liuosta varten 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT Yksi Soluvit-injektiopullo sisältää: Yksi pullo sisältää vaikuttavia aineita:

Lisätiedot

Arvokkaiden yhdisteiden tuottaminen kasveissa ja kasvisoluviljelmissä

Arvokkaiden yhdisteiden tuottaminen kasveissa ja kasvisoluviljelmissä Arvokkaiden yhdisteiden tuottaminen kasveissa ja kasvisoluviljelmissä Siirtogeenisiä organismeja käytetään jo nyt monien yleisten biologisten lääkeaineiden valmistuksessa. Esimerkiksi sellaisia yksinkertaisia

Lisätiedot

E RIPULIVASIKAN LÄÄKITSEMINEN / OHJE ELÄINLÄÄKÄRILLE

E RIPULIVASIKAN LÄÄKITSEMINEN / OHJE ELÄINLÄÄKÄRILLE E RIPULIVASIKAN LÄÄKITSEMINEN / OHJE ELÄINLÄÄKÄRILLE NESTEHOITO PÄHKINÄNKUORESSA (RAUTALANKAVERSIO): Anna vasikalle nestettä suonensisäisesti noin 1-2 litraa/50 kg Esim. isotoninen NaCl (13,5 g eli ruiskussa

Lisätiedot

NaturaPura Ibérica Elokuu 10, 2009 Rua das Australias, No. 1 4705-322 Braga Portugali

NaturaPura Ibérica Elokuu 10, 2009 Rua das Australias, No. 1 4705-322 Braga Portugali NaturaPura Ibérica Elokuu 10, 2009 Rua das Australias, No. 1 4705-322 Braga Portugali VIITATEN: IN VITRO IHOÄRSYTTÄVYYSTESTAUSRAPORTTI Oheisena NaturaPuran toimittaman 100% puuvillakangasmateriaalin in

Lisätiedot

S UOM 1 FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 5 7 6 6

S UOM 1 FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 5 7 6 6 S UOM 1 FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 5 7 6 6 Kv. lk./int. Cl. C 12 k 5/00 (5:» Uc./KI. 30 h 6 Patentti myönnetty Patent meddelat 11 IX 1972 Patenttihakemus Patentansökning 547 /6 9

Lisätiedot

SUO M 1-FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 43624

SUO M 1-FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 43624 SUO M 1-FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 43624 Kv. lk./int. Cl. A 61 k 23/02 C 12 k 5/00 30 h 6 Pat.hak. peruutettu Pat.ans. återtagen 3 V 1971 Patenttihakemus Patentansökning 1977/67 Hakemispäivä

Lisätiedot

Menjugate. 22.06.2016, Versio 1 RISKIENHALLINTASUUNNITELMAN JULKINEN YHTEENVETO

Menjugate. 22.06.2016, Versio 1 RISKIENHALLINTASUUNNITELMAN JULKINEN YHTEENVETO Menjugate 22.06.2016, Versio 1 RISKIENHALLINTASUUNNITELMAN JULKINEN YHTEENVETO VI.2 VI.2.1 Julkisen yhteenvedon osiot Tietoa sairauden esiintyvyydestä N. meningitidis -bakteeri voi aiheuttaa infektion

Lisätiedot

Sanna Nikunen ELL 4.10.2012

Sanna Nikunen ELL 4.10.2012 Sanna Nikunen ELL 4.10.2012 Kuuluu heimoon Orthomyxoviridae, joka jaetaan kahteen sukuun; Influenssa A- ja B- virukset sekä influenssa C-virukset A-virukset eläimillä ja ihmisillä, B- virukset harvinaisempia,

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1/16 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Equilis injektioneste, suspensio, hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Annos (1 ml) sisältää: Vaikuttava(t) aine(et) Hevosen influenssaviruksien

Lisätiedot

Laila Rossow Erikoistutkija/Siipikarjan taudit TUVI/TUJA Ajankohtaista eläinten terveydestä ja lääkityksestä

Laila Rossow Erikoistutkija/Siipikarjan taudit TUVI/TUJA Ajankohtaista eläinten terveydestä ja lääkityksestä Broilereiden kohonnut kuolleisuus Laila Rossow Erikoistutkija/Siipikarjan taudit TUVI/TUJA Ajankohtaista eläinten terveydestä ja lääkityksestä 7.5.2015 Kolibasilloosiepidemia broilereilla Vuoden 2013 loppupuolelta

Lisätiedot

Hevosten rokottaminen. Eläinlääkäri Martti Nevalainen Intervet Oy, osa Schering-Plough konsernia

Hevosten rokottaminen. Eläinlääkäri Martti Nevalainen Intervet Oy, osa Schering-Plough konsernia Hevosten rokottaminen Eläinlääkäri Martti Nevalainen Intervet Oy, osa Schering-Plough konsernia Miksi rokotuttaa hevosia? Pyritään ennaltaehkäisemään tai lieventämään tartuntatauteja, jotka saattavat aiheuttaa

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO. Duramune DAPPi injektiokuiva-aine, kylmäkuivattu ja liuotin suspensiota varten

VALMISTEYHTEENVETO. Duramune DAPPi injektiokuiva-aine, kylmäkuivattu ja liuotin suspensiota varten VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Duramune DAPPi injektiokuiva-aine, kylmäkuivattu ja liuotin suspensiota varten 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS 1 annos (1 ml) sisältää: Vaikuttavat aineet:

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI. MUTAFLOR oraalisuspensio 10 8 CFU/ml 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT

VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI. MUTAFLOR oraalisuspensio 10 8 CFU/ml 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI MUTAFLOR oraalisuspensio 10 8 CFU/ml 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT 1 ml sisältää vaikuttavana aineena: Escherichia coli kanta Nissle 1917 vastaten 10

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Purevax Rabies injektioneste, suspensio 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 1 ml:n annos sisältää: Vaikuttava aine: Rabies rekombinantti canarypox-virus

Lisätiedot

Pienen vatsan ystävä. Sanotaan, että hyvä olo tuntuu ihan vatsanpohjas sa asti. Hyvinvointi lähtee vatsasta myös perheen pienimmillä.

Pienen vatsan ystävä. Sanotaan, että hyvä olo tuntuu ihan vatsanpohjas sa asti. Hyvinvointi lähtee vatsasta myös perheen pienimmillä. Vatsan ystävä Pienen vatsan ystävä Sanotaan, että hyvä olo tuntuu ihan vatsanpohjas sa asti. Hyvinvointi lähtee vatsasta myös perheen pienimmillä. Reladrops on vauvan oma maito happobakteerivalmiste. Sen

Lisätiedot

Koagulaasipositiivisten stafylokokkien määrittäminen. Pesäkelaskentatekniikka.

Koagulaasipositiivisten stafylokokkien määrittäminen. Pesäkelaskentatekniikka. Vastuuhenkilöt Hakola Satu, Sivu/sivut 1 / 5 Koagulaasipositiivisten stafylokokkien määrittäminen. Pesäkelaskentatekniikka. 1 Menetelmäviitteet ja poikkeamat ISO 6888-1:1999,/ Amd 1:2003, muunnos. (Baird-Parker

Lisätiedot

(FI) (41) Tullut julkiseksi - Blivit offentlig 05.12.85

(FI) (41) Tullut julkiseksi - Blivit offentlig 05.12.85 (B) (11)KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 81452 C ( ) (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 _ G O1N 33/571, C 07K 7/04, A 61K 39/00 (21) Patenttihakemus - Patentansökning 854839 (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 05.12.85

Lisätiedot

I1111111 111111111IlIl 11111111111111111111181111111111i

I1111111 111111111IlIl 11111111111111111111181111111111i I1111111 111111111IlIl 11111111111111111111181111111111i F I00008 111111 il I I Ill (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 91688. L.-*, 1.-Lu-..IC " _ b./ n * I. - A I... I. 1. n!. : :,.:. (17) :-

Lisätiedot

TOOTHGUIDE suun luonnollinen maitohappobakteerisuoja ientulehduksia, hiivoja ja plakin muodostusta vastaan

TOOTHGUIDE suun luonnollinen maitohappobakteerisuoja ientulehduksia, hiivoja ja plakin muodostusta vastaan TOOTHGUIDE suun luonnollinen maitohappobakteerisuoja ientulehduksia, hiivoja ja plakin muodostusta vastaan Kehitys ja markkinointi GutGuide Oy www.toothguide.fi I www.gutguide.fi Veli-Matti Mäkinen I veli-matti.makinen@gutguide.fi

Lisätiedot

* Valmistajan tekemän in vitro määrityksen mukaan erän valmistus- ja vapauttamishetkellä.

* Valmistajan tekemän in vitro määrityksen mukaan erän valmistus- ja vapauttamishetkellä. 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Paracox-5 vet. konsentraatti oraalisuspensiota varten 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Vaikuttavat aineet: Yksi rokoteannos (0,004 ml) sisältää seuraavat määrät sporuloituneita

Lisätiedot

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 85222 SUOMI-FINLAND (Fi) Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyrelsen (71)Hakija - Sökande (32) (33) (31) Etuoikeus - Prioritet 31.01.85 GB 8502399

Lisätiedot

Erityiset varotoimenpiteet, joita eläinlääkevalmistetta antavan henkilön on noudatettava

Erityiset varotoimenpiteet, joita eläinlääkevalmistetta antavan henkilön on noudatettava VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Nobilis RT inac 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Per 0,5 ml annos: Vaikuttava aine: Inaktivoituja avian rhinotracheitis -viruksia, kanta But 1 #8544: Adjuvantti:

Lisätiedot

Rokottaminen - käytännön ohjeita pulmatilanteisiin

Rokottaminen - käytännön ohjeita pulmatilanteisiin Rokottaminen - käytännön ohjeita pulmatilanteisiin Th Nina Strömberg Rokotusohjelmayksikkö THL 5.4.2016 1 Rokottamisen muistisäännöt Rokottamisessa ja rokotussarjojen aikatauluttamisessa on tietyt lainalaisuudet,

Lisätiedot

Pikkulasten rokotuskattavuus esimerkkinä rotavirusrokotukset. Tuija Leino, Rokotusohjelmayksikkö, THL

Pikkulasten rokotuskattavuus esimerkkinä rotavirusrokotukset. Tuija Leino, Rokotusohjelmayksikkö, THL Pikkulasten rokotuskattavuus esimerkkinä rotavirusrokotukset Tuija Leino, Rokotusohjelmayksikkö, THL Rokotuskattavuus tarkoittaa: ROKOTUSTIEDOT! ROKOTETUT KOKO VÄESTÖ VÄESTÖN TIEDOT! Rokotuskattavuutta

Lisätiedot

PAKKAUSSELOSTE. VPRIV 200 yksikköä infuusiokuiva-aine, liuosta varten VPRIV 400 yksikköä infuusiokuiva-aine, liuosta varten velagluseraasi alfa

PAKKAUSSELOSTE. VPRIV 200 yksikköä infuusiokuiva-aine, liuosta varten VPRIV 400 yksikköä infuusiokuiva-aine, liuosta varten velagluseraasi alfa PAKKAUSSELOSTE VPRIV 200 yksikköä infuusiokuiva-aine, liuosta varten VPRIV 400 yksikköä infuusiokuiva-aine, liuosta varten velagluseraasi alfa Lue tämä pakkausseloste huolellisesti, ennen kuin aloitat

Lisätiedot

(B) (11) KUSJULKAISU UTLAGG NINGSSKRIFT. C t -1 n. (51) Kv.lk.5 Int.c1.5 A 61K 39/29, C 12N 7/08. (21) Patenttihakemus - Patentansökning 861966

(B) (11) KUSJULKAISU UTLAGG NINGSSKRIFT. C t -1 n. (51) Kv.lk.5 Int.c1.5 A 61K 39/29, C 12N 7/08. (21) Patenttihakemus - Patentansökning 861966 (B) (11) KUSJULKAISU UULUT UTLAGG NINGSSKRIFT 86376 C t -1 n. (51) Kv.lk.5 Int.c1.5 A 61K 39/29, C 12N 7/08 SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyrelsen (21) Patenttihakemus

Lisätiedot

Myymälässä pakattujen juustojen mikrobiologinen laatu ja käsittelyhygienia

Myymälässä pakattujen juustojen mikrobiologinen laatu ja käsittelyhygienia Myymälässä pakattujen juustojen mikrobiologinen laatu ja käsittelyhygienia Projektiyhteenveto 2014 Pääkaupunkiseudun kunnissa toteutettiin touko-lokakuussa 2014 yhteinen projekti, jonka tarkoituksena oli

Lisätiedot

Labqualitypäivät 04.02.10 Riitta Karttunen. HUSLAB, kl. Mikrobiologia Virologian ja immunologian osasto

Labqualitypäivät 04.02.10 Riitta Karttunen. HUSLAB, kl. Mikrobiologia Virologian ja immunologian osasto Syfiliksen laboratoriodiagnostiikka ato od ag ost a Labqualitypäivät 04.02.10 Riitta Karttunen HUSLAB, kl. Mikrobiologia Virologian ja immunologian osasto Aiheet suora bakteerin osoitus tai nukleiinihappotestiosoitus

Lisätiedot

KUULUTUSJULKAISU r 7. Patentti MY'jnr1.2'_ ty 10 Cl 193 (45) 1i. (go) KvA?mit.a3. (21) Patenttlhakemus Patemensökning (n) HaltemispIllvi AmoöknIquelag

KUULUTUSJULKAISU r 7. Patentti MY'jnr1.2'_ ty 10 Cl 193 (45) 1i. (go) KvA?mit.a3. (21) Patenttlhakemus Patemensökning (n) HaltemispIllvi AmoöknIquelag SUOMI FINLAND (F I) Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyreisen (B]. KUULUTUSJULKAISU r 7 C UTLAGGNINGSSKRIFT 0 Patentti MY'jnr1.2'_ ty 10 Cl 193 (45) 1i (go) KvA?mit.a3 (21) Patenttlhakemus

Lisätiedot

Otanta ja idätysnäytteiden valmistus

Otanta ja idätysnäytteiden valmistus Otanta ja idätysnäytteiden valmistus Metsäpuiden siementen idätystestit ISTA:n säännöt ja nykykäytännöt Pekka Helenius Metla / Suonenjoki / Metsäntutkimuslaitos Skogsforskningsinstitutet Finnish Forest

Lisätiedot

niin monta nisäkäs-siirtoktilkua, ettei niiden hengitystien epiteelissä

niin monta nisäkäs-siirtoktilkua, ettei niiden hengitystien epiteelissä SUOMI-FINLAND (I» KUULUTUSJOLKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 41428 Kv. lk./int. Cl. A 61 k 23/00 30 h 6 ;inn3tt:r 10 ZI 1?(.) Patenttihakemus Patentansökning 983/65 Qit Hakemispäivä Ansökningsdag 22 IV 1965 Alkupäivä

Lisätiedot

KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE asetuksen (EY) 1907/2006 - ISO 11014-1 mukaan

KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE asetuksen (EY) 1907/2006 - ISO 11014-1 mukaan KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE asetuksen (EY) 1907/2006 - ISO 11014-1 mukaan SDS numero: 1250 V001.0 Tarkistuspäivämäärä: 1. AINEEN TAI VALMISTEEN JA YHTIÖN TAI YRITYKSEN TUNNISTETIEDOT Aineen tai valmisteen

Lisätiedot

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT. (10) Fl 110234 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 31.12.2002. (51) Kv.lk.7 - Int.kl.

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT. (10) Fl 110234 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 31.12.2002. (51) Kv.lk.7 - Int.kl. 1111111111 1111111111 1111 11111111 11111 1111 11111111 F1000B (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) Fl B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 31.12.2002 SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS

Lisätiedot

SUOMI-FINLAND (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 07.11.85 (FI)

SUOMI-FINLAND (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 07.11.85 (FI) (13) (11) KUULUTUSJULKA I SU UTLAGGN I NGSSKR I FT 84558 C ( 3) T t t y (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 2:1 A 61K 39/12, C 07K 7/08 (21) Patenttihakemus - Patentansökning 854396 SUOMI-FINLAND (22) Hakemispäivä

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI. Rehydron Optim jauhe oraaliliuosta varten 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT

VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI. Rehydron Optim jauhe oraaliliuosta varten 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI Rehydron Optim jauhe oraaliliuosta varten 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT Yksi annospussi sisältää: Glukoosi, vedetön 6,75 g Natriumkloridi 1,30 g Natriumsitraatti

Lisätiedot

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT A 61K 37/02, 39/145, C 12N 15/44. (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 29.08.85

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT A 61K 37/02, 39/145, C 12N 15/44. (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 29.08.85 (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 85811 C (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 ' 10 C,1; A 61K 37/02, 39/145, C 12N 15/44 (21) Patenttihakemus - Patentansökning 853320 SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus

Lisätiedot

KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE Asetuksen (EY) N:o 1907/2006 mukaisesti

KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE Asetuksen (EY) N:o 1907/2006 mukaisesti Created on: 11.08.2010 1. Aineen tai seoksen ja yhtiön tai yrityksen tunnistustiedot Tuotetiedot Aineen ja/tai seoksen käyttötapa Biokemiallinen tutkimus ja analyysit Valmistaja: Merck KGaA * 64271 Darmstadt

Lisätiedot

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 106844 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.04.2001. (51) Kv.Ik.7 - Intk1.7

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 106844 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.04.2001. (51) Kv.Ik.7 - Intk1.7 11111111111111i111111 100 11(311111111,111i1111111111i 1111111 (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 106844 B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.04.2001 SUOMI - FINLAND (FI) (51) Kv.Ik.7

Lisätiedot

Teabepäeva korraldamist toetab Euroopa Liit Eesti riikliku mesindusprogrammi 2013 2016 raames

Teabepäeva korraldamist toetab Euroopa Liit Eesti riikliku mesindusprogrammi 2013 2016 raames Teabepäeva korraldamist toetab Euroopa Liit Eesti riikliku mesindusprogrammi 2013 2016 raames Eesti mesinike suvine teabepäev Koht ja aeg: Olustvere Teenindus- ja Maamajanduskooli ruumides, 11.07.2015.a.

Lisätiedot

Jardiance-valmisteen (empagliflotsiini) riskienhallintasuunnitelman (RMP) yhteenveto

Jardiance-valmisteen (empagliflotsiini) riskienhallintasuunnitelman (RMP) yhteenveto EMA/188850/2014 Jardiance-valmisteen (empagliflotsiini) riskienhallintasuunnitelman (RMP) yhteenveto Tämä on Jardiance-valmisteen riskienhallintasuunnitelman yhteenveto, jossa esitetään toimenpiteet, joilla

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO. Nobivac KC kuiva-aine, kylmäkuivattu ja liuotin, suspensiota varten sieraimeen annettavaksi

VALMISTEYHTEENVETO. Nobivac KC kuiva-aine, kylmäkuivattu ja liuotin, suspensiota varten sieraimeen annettavaksi VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Nobivac KC kuiva-aine, kylmäkuivattu ja liuotin, suspensiota varten sieraimeen annettavaksi 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi annos (0,4 ml) käyttökuntoon

Lisätiedot

Nivelreuman serologiset testit: mitä ne kertovat? LT, apulaisylilääkäri Anna-Maija Haapala TAYS Laboratoriokeskus

Nivelreuman serologiset testit: mitä ne kertovat? LT, apulaisylilääkäri Anna-Maija Haapala TAYS Laboratoriokeskus Nivelreuman serologiset testit: mitä ne kertovat? LT, apulaisylilääkäri Anna-Maija Haapala TAYS Laboratoriokeskus Sisältö 1. Nivelreuma: etiologia, esiintyvyys, diagnostiikka 2. Nivelreuman serologiset

Lisätiedot

NÄYTTEET: Ilmanäytteet on ottanut Miia Pitkäranta, Indoor Quality Service Oy, ja ne on vastaanotettu laboratorioon

NÄYTTEET: Ilmanäytteet on ottanut Miia Pitkäranta, Indoor Quality Service Oy, ja ne on vastaanotettu laboratorioon RAPORTTI ILA 2012-52 Miia Pitkäranta Indoor Quality Service Oy Tiilenpolttajankuja 5 01720 Vantaa TULOSRAPORTTI KOHDE: Päiväkoti Ukko-Pekka, Asematie 3, 01300 Vantaa NÄYTTEET: Ilmanäytteet on ottanut Miia

Lisätiedot

Source: http://industrydocuments.library.ucsf.edu/tobacco/docs/kmpc0106

Source: http://industrydocuments.library.ucsf.edu/tobacco/docs/kmpc0106 t PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS PATENTTI OSAS'I'0 Hakemus : 921078 Luokka : A 24B 015/26 Tutkij a : Hakija : Asiamies : KR Philip Morris Products Inc. Oy Borenius & Co Ab / Pia Hjelt, puh. 492593 Asiamiehen

Lisätiedot

KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE asetuksen (EY) 1907/2006 - ISO 11014-1 mukaan

KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE asetuksen (EY) 1907/2006 - ISO 11014-1 mukaan KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE asetuksen (EY) 1907/2006 - ISO 11014-1 mukaan SDS numero: 79881 V001.3 Tarkistuspäivämäärä: 1. AINEEN TAI VALMISTEEN JA YHTIÖN TAI YRITYKSEN TUNNISTETIEDOT Aineen tai valmisteen

Lisätiedot

Hoito: Yksilöllinen annos, joka säädetään seerumin kaliumarvojen mukaan.

Hoito: Yksilöllinen annos, joka säädetään seerumin kaliumarvojen mukaan. 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI Kaliumklorid Orifarm 750 mg depottabletti 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT Yksi depottabletti sisältää 750 mg kaliumkloridia. Täydellinen apuaineluettelo, ks. kohta 6.1. 3.

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI Dukoral suspensio ja porerakeet oraalisuspensiota varten Kolerarokote (inaktivoitu, suun kautta otettava) 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT Yksi

Lisätiedot

GEENITEKNIIKAN PERUSASIOITA

GEENITEKNIIKAN PERUSASIOITA GEENITEKNIIKAN PERUSASIOITA GEENITEKNIIKKKA ON BIOTEKNIIKAN OSA-ALUE! Biotekniikka tutkii ja kehittää elävien solujen, solun osien, biokemiallisten menetelmien sekä molekyylibiologian uusimpien menetelmien

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO. Ei saa käyttää tapauksissa, joissa esiintyy yliherkkyyttä penisilliineille, kefalosporiineille tai apuaineille.

VALMISTEYHTEENVETO. Ei saa käyttää tapauksissa, joissa esiintyy yliherkkyyttä penisilliineille, kefalosporiineille tai apuaineille. VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI KEFAVET VET 50 mg/ml rakeet oraalisuspensiota varten 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS 1 ml sisältää: Vaikuttava aine: Kefaleksiinimonohydraatti vastaten

Lisätiedot

Entyvio 300 mg kuiva aine välikonsentraatiksi infuusionestettä varten, liuos (vedolitsumabi)

Entyvio 300 mg kuiva aine välikonsentraatiksi infuusionestettä varten, liuos (vedolitsumabi) Entyvio 300 mg kuiva aine välikonsentraatiksi infuusionestettä varten, liuos (vedolitsumabi) RISKIENHALLINTASUUNNITELMAN JULKINEN YHTEENVETO 27.6.2014, versio 1.0 VI.2 Julkisen yhteenvedon osiot VI.2.1

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI Dukoral, suspensio ja porerakeet oraalisuspensiota varten. Suun kautta otettava kolerarokote. 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT Yksi annos rokotesuspensiota

Lisätiedot

JÄTEHUOLLON ERIKOISTYÖ

JÄTEHUOLLON ERIKOISTYÖ Jari-Jussi Syrjä 1200715 JÄTEHUOLLON ERIKOISTYÖ Typpioksiduulin mittaus GASMET-monikaasuanalysaattorilla Tekniikka ja Liikenne 2013 1. Johdanto Erikoistyön tavoitteena selvittää Vaasan ammattikorkeakoulun

Lisätiedot

Yhteenveto seleenitutkimuksen tuloksista

Yhteenveto seleenitutkimuksen tuloksista Yhteenveto seleenitutkimuksen tuloksista Heidi Härtel Rotukarjan hyvinvoinnin ja taloudellisten toimintaedellytysten kehittäminen -hanke Manner-Suomen maaseudun kehittämisohjelma Seleenitutkimuksen tulokset

Lisätiedot

Materiaalinäytteiden qpcr-tulosten tulkinnasta

Materiaalinäytteiden qpcr-tulosten tulkinnasta Materiaalinäytteiden qpcr-tulosten tulkinnasta Helena Rintala ja Teija Meklin Sisäilmastoseminaari 13.3.2014 Taustaa qpcr (kvantitatiivinen PCR) on nopea menetelmä mikrobien toteamiseen Käytetty paljon

Lisätiedot

[8] (11) KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 0 51 0. C (45) ::;t:r I 10 04 1934 Patent meddelat (51) Kviidfirt.a. 3 A 61 K 39/02 C 12 N 1/20

[8] (11) KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 0 51 0. C (45) ::;t:r I 10 04 1934 Patent meddelat (51) Kviidfirt.a. 3 A 61 K 39/02 C 12 N 1/20 [8] (11) KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 0 51 0 C (45) ::;t:r I 10 04 1934 Patent meddelat (51) Kviidfirt.a. 3 A 61 K 39/02 C 12 N 1/20 SUOMI FINLAND (FI). Patentti- ja rekisterlhallitus Patent- och

Lisätiedot

OLLI RUOHO TERVEYDENHUOLTOELÄINLÄÄKÄRI. www.ett.fi. ETT ry

OLLI RUOHO TERVEYDENHUOLTOELÄINLÄÄKÄRI. www.ett.fi. ETT ry OLLI RUOHO TERVEYDENHUOLTOELÄINLÄÄKÄRI www.ett.fi ETT ry VIRUSRIPULIT, HENGITYSTIETULEHDUKSET Ajoittain esiintyviä, erittäin helposti leviäviä V. 2012 tarttuvaa, voimakasoireista koronavirusripulia (?)

Lisätiedot

Miksi meidän kannattaa ottaa kausi-influenssarokotus?

Miksi meidän kannattaa ottaa kausi-influenssarokotus? Miksi meidän kannattaa ottaa kausi-influenssarokotus? Kausi-influenssarokotus on tehokas keino ehkäistä influenssan leviämistä Henkilökunnan influenssarokotuksille on vahvat perusteet Henkilökunta on merkittävä

Lisätiedot

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) F11177898. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats. (51) Kv.lk. - Int.kl.

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) F11177898. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats. (51) Kv.lk. - Int.kl. (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT 1 1 10 111 (10) F18 (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 28.02.2007 SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS PATENT- OCH REGISTERSTYRELSEN (51) Kv.lk.

Lisätiedot

Lepakkorabiestutkimus

Lepakkorabiestutkimus Lepakkorabiestutkimus Lepakkoseminaari 19.3.2011 Esitelmän rakenne Tietoa rabieksesta ja lepakkorabieksesta Tutkimushanke Miten voit osallistua hankkeeseen Mitä lepakkoharrastajan ja -tutkijan on hyvä

Lisätiedot

1 Tehtävät. 2 Teoria. rauta(ii)ioneiksi ja rauta(ii)ionien hapettaminen kaliumpermanganaattiliuoksella.

1 Tehtävät. 2 Teoria. rauta(ii)ioneiksi ja rauta(ii)ionien hapettaminen kaliumpermanganaattiliuoksella. 1 Tehtävät Edellisellä työkerralla oli valmistettu rauta(ii)oksalaattia epäorgaanisen synteesin avulla. Tätä sakkaa tarkasteltiin seuraavalla kerralla. Tällä työ kerralla ensin valmistettiin kaliumpermanganaatti-

Lisätiedot

Patentti myönnetty' Patent medelat 10 V 191

Patentti myönnetty' Patent medelat 10 V 191 3 UO M I-FI N LAN D 11 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 3 6 2 5 Kv.11(11M.C1 C 12 k 5/00 UJXL 30 h 6 Patentti myönnetty' Patent medelat 10 V 191 Patenttihakemus Patentansökning 2788/67 Hakemispäivä

Lisätiedot

Viekirax-valmisteen (ombitasviiri/paritapreviiri/ritonaviiri) riskienhallintasuunnitelman yhteenveto

Viekirax-valmisteen (ombitasviiri/paritapreviiri/ritonaviiri) riskienhallintasuunnitelman yhteenveto EMA/775985/2014 Viekirax-valmisteen (ombitasviiri/paritapreviiri/ritonaviiri) enhallintasuunnitelman yhteenveto Tämä on Viekirax-valmisteen enhallintasuunnitelman yhteenveto, jossa esitetään toimenpiteet,

Lisätiedot

Accu-Chek Compact- ja Accu-Chek Compact Plus -järjestelmien luotettavuus ja tarkkuus. Johdanto. Menetelmä

Accu-Chek Compact- ja Accu-Chek Compact Plus -järjestelmien luotettavuus ja tarkkuus. Johdanto. Menetelmä Accu-Chek Compact- ja Accu-Chek Compact Plus -järjestelmien luotettavuus ja tarkkuus I. TARKKUUS Järjestelmän tarkkuus on vahvistettu ISO 15197 -standardin mukaiseksi. Johdanto Tämän kokeen tarkoituksena

Lisätiedot

Raakamaidosta tehtävät STEC tutkimukset. Saija Hallanvuo Elintarvike- ja rehumikrobiologian tutkimusyksikkö Tutkimus- ja laboratorio-osasto

Raakamaidosta tehtävät STEC tutkimukset. Saija Hallanvuo Elintarvike- ja rehumikrobiologian tutkimusyksikkö Tutkimus- ja laboratorio-osasto Raakamaidosta tehtävät STEC tutkimukset Saija Hallanvuo Elintarvike- ja rehumikrobiologian tutkimusyksikkö Tutkimus- ja laboratorio-osasto Raakamaidon tuotanto ja myynti koulutuspäivä viranomais- ja alan

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. GastroGard 370 mg/g oraalipasta hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS. 1 gramma sisältää:

VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. GastroGard 370 mg/g oraalipasta hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS. 1 gramma sisältää: VALMISTEYHTEENVETO 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI GastroGard 370 mg/g oraalipasta hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS 1 gramma sisältää: Vaikuttava aine Omepratsoli 370 mg Apuaineet Keltainen rautaoksidi

Lisätiedot

Tuhkarokko Euroopassa ja Yhdysvalloissa

Tuhkarokko Euroopassa ja Yhdysvalloissa Tuhkarokko Euroopassa ja Yhdysvalloissa - mikä suoja suomalaisilla? Tartuntatautikurssi 15.4.2015 15.4.2015 Virusinfektiot-yksikkö/ Mia Kontio 1 Tuhkarokko: epäíly ja varmistus Oireet 7-21 vrk tartunnasta:

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Proteq West Nile injektioneste, suspensio, hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 1 ml:n annos sisältää: Vaikuttava aine: West Nile rekombinantti

Lisätiedot

Päiväys:2009-11-21 Edellinen päiväys: 1997-11-20

Päiväys:2009-11-21 Edellinen päiväys: 1997-11-20 KÄYTTÖTURVALLISUUSTIEDOTE KEMIKAALIILMOITUS Päiväys:20091121 Edellinen päiväys: 19971120 1. AINEEN TAI VALMISTEEN JA YHTIÖN TAI YRITYKSEN TUNNISTETIEDOT 1.1 Kemikaalin tunnistustiedot Kauppanimi PSosienpesujauhe

Lisätiedot

Siipikarjan terveys- ja hyvinvointipäivä Ikaalinen 22.3.2012. Terveydenhuoltoeläinlääkäri Hannele Nauholz

Siipikarjan terveys- ja hyvinvointipäivä Ikaalinen 22.3.2012. Terveydenhuoltoeläinlääkäri Hannele Nauholz Siipikarjan terveys- ja hyvinvointipäivä Ikaalinen 22.3.2012 Terveydenhuoltoeläinlääkäri Hannele Nauholz Saksa, Nordrhein-Westfalen 11/2011 962 tuotantopolven broilerikasvatuserää 182 eri tilalta Helmi-kesäkuu

Lisätiedot

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT 11111111 1 1111111 111,11111!1,11,1 1,11111!111!11111111111 1 11111111 F (10) FI 116838 B

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT 11111111 1 1111111 111,11111!1,11,1 1,11111!111!11111111111 1 11111111 F (10) FI 116838 B (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT 11111111 1 1111111 111,11111!1,11,1 1,11111!111!11111111111 1 11111111 F (10) FI 116838 B SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERINALLITUS PATENT- OCH REGISTERSTYRELSEN

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1/19 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Eurican Herpes 205 injektiokuiva-aine ja liuotin, emulsiota varten 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Vaikuttava aine: 1 ml annos: koirien herpesvirus

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Equilis West Nile injektioneste, suspensio hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi annos (1 ml) sisältää: Vaikuttava aine: Inaktivoitu

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Nobivac L4, injektioneste, suspensio koirille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 1 ml:n annos sisältää: Vaikuttavat aineet: Inaktivoidut Leptospira

Lisätiedot

VALMISTEYHTEENVETO. Suun kautta annettavaan aktiiviseen immunisaatioon Salmonella typhi -infektiota (lavantauti) vastaan.

VALMISTEYHTEENVETO. Suun kautta annettavaan aktiiviseen immunisaatioon Salmonella typhi -infektiota (lavantauti) vastaan. VALMISTEYHTEENVETO 1. LÄÄKEVALMISTEEN NIMI Vivotif enterokapseli 2. VAIKUTTAVAT AINEET JA NIIDEN MÄÄRÄT Yksi Vivotif -kerta-annos sisältää vähintään 2 x 10 9 elävää, heikennettyä ja kylmäkuivattua Salmonella

Lisätiedot

Sisäilman mikrobitutkimus 27.8.2013

Sisäilman mikrobitutkimus 27.8.2013 Sisäilman mikrobitutkimus 27.8.2013 2 1 Tutkimuksen tarkoitus 2 Tutkimuskohde Tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää Genano 310 ilmanpuhdistuslaitteiden vaikutus pahasti mikrobivaurioituneen omakotitalon

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1/ 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Porcilis Porcoli Diluvac Forte. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Vaikuttavat aineet: ml:n annosta kohti: - F4ab (K88ab) fimbriallinen adhesiini 9.0

Lisätiedot