Verensiirtoserologian laadunarviointi. Tarja-Terttu Pelliniemi

Transkriptio

1 Verensiirtoserologian laadunarviointi Tarja-Terttu Pelliniemi

2 Laadunarviointi Taustaa Sisäinen laadunvarmistus Ulkoinen laadunarviointi Tulevaisuuden näkymiä

3 EU-Direktiivi

4 6 Artikla

5 10 Artikla

6 11 Artikla

7 Direktiivi ja verikeskukset Laatujärjestelmä Dokumentointi Henkilökunnan koulutus Jäljitettävyys Verivalmisteiden kuljetus Veriturvatoiminta

8 Sisäinen laadunvarmistus Jatkuvaa Kattavaa Hyväksymismenettelyt Korjaavat toimenpiteet

9 Sisäinen laadunvarmistus Reagenssit Tarvikkeet Laitteet Menetelmät

10 Sisäinen laadunvarmistus ABO Rh(D) määritys putkitekniikalla sarjakohtaiset pos. ja neg. kontrollit tulosten loogisuus: soluryhmä ja plasman isoagglutiniinit toistokontrollit ABO Rh(D) määritys pylväsagglutinaatiotekniikalla kasettien tulotarkastus ja määrävälein tapahtuva testaus tunnetuilla näytteillä automaatin toimivuuden testaus päivän alussa tulosten loogisuus: soluryhmä ja plasman isoagglutiniinit toistokontrollit

11 Sisäinen laadunvarmistus Antiglobuliinitekniikkaan perustuvat määritykset putkitekniikalla negatiivisen tuloksen varmistus Coombsin kontrollisoluilla seulonnan, vastaainetunnistuksen ja sopivuuuskokeen loogisuus verensiirtoreaktioiden selvitys LISS/COOMBS- kortit pylväsagglutinaatio tekniikalla kasettien tulotarkastus ja testaus määrävälein reagenssilla, joka antaa heikon positiivisen tuloksen automaatin toimivuuden testaus päivän alussa seulonnan, vastaainetunnistuksen ja sopivuuuskokeen loogisuus verensiirtoreaktioiden selvitys

12 Ulkoinen laadunarviointi Laboratorion suoriutuminen Laboratorion suoriutuminen muihin verrattuna Käytössä olevat menetelmät Poikkeamien aiheuttamat toimenpiteet Kirjallinen palaute selitysosa Suoriutuvuuden kumulatiivinen seuranta

13 Ulkoinen laadunarviointi Historiaa A. Rajamäki & A. Pirkola External quality control in blood transfusion serology: results from the Finnish proficiency testing programme in immunohaematology, Scand J clin Lab Med 40, , 1980

14 Mitä uutta Agglutinaatioreaktioiden voimakkuuden tulostaminen Pisteytys Kumulatiivinen raportti suoriutuvuudesta tulossa

15 Pisteytys Pisteytyksellä ja jatkossa sen kumulatiivisella graafisella seurannalla on tarkoitus helpottaa laboratorioiden omaa suoriutuvuuden seurantaa ja olla apuna sisäisessä ja ulkoisessa auditoinnissa. Kierroksiin voidaan kuitenkin liittää myös sellaisia raja-arvoisia näytteitä, jotka jätetään pisteytyksen ulkopuolelle. Pisteytys perustuu WHO:n suosituksiin kansallisten kierrosten arvioimisesta

16 Pisteytys: ABO-määritys Reaktiovoimakkuudet Oikea agglutinaatioreaktion tulos ja voimakkuus: 1 piste/reaktio, yhteensä 4 pistettä/näyte Oikea, mutta voimakkuudeltaan suuresti poikkeava agglutinaatioreaktion voimakkuus: 0.5 pistettä/reaktio (esim 2+ vaikka odotettu olisi 4+) Väärä reaktiovoimakkuus: 0 pistettä Tulkinta Oikea tulkinta: 4 pistettä/näyte Maksimipisteet / näyte = 8

17 Pisteytys: Rh(D)-määritys Reaktiovoimakkuudet Oikea agglutinaatioreaktion tulos ja voimakkuus: 1 piste/reaktio, yhteensä 2 pistettä/näyte Oikea, mutta voimakkuudeltaan suuresti poikkeava agglutinaatioreaktion voimakkuus: 0.5 pistettä/reaktio (esim 2+ vaikka odotettu olisi 4+) Väärä reaktiovoimakkuus: 0 pistettä Tulkinta Oikea tulkinta: 2 pistettä/näyte Maksimipisteet / näyte = 4

18 Pisteytys: Vasta-aineseulonta ja suora antiglobuliinikoe Reaktiovoimakkuudet Oikea agglutinaatioreaktion tulos ja voimakkuus: 2 pistettä/reaktio Oikea, mutta voimakkuudeltaan suuresti poikkeava agglutinaatioreaktion voimakkuus: 1 piste (esim + vaikka odotettu olisi +++) Väärä reaktio 0 pistettä/reaktio Tulkinta Oikea tulkinta 2 pistettä/näyte Väärä tulkinta 0 pistettä/näyte Maksimipisteet / näyte = 4

19 Pisteytys: Sopivuuskokeet Oikea sopivuus Oikea epäsopivuus Väärä sopivuus Väärä epäsopivuus 10 pistettä / näyte 10 pistettä / näyte 0 pistettä / näyte 5 pistettä / näyte Kierroksella on 8 sopivuuskoetta -> maksimipisteet / kierros = 80

20 Agglutinaatioreaktioiden voimakkuus

21 ABO Rh(D)

22 ABO

23 Rh(D)

24 ABO Rh(D)

25 ABO

26 Palaute: ABO Rh(D) NÄYTTEET Potilas 1 (solut 1E ja seerumi 1S): A2 Rh (D) - positiivisen potilaan näyte. Seerumissa on heikko anti-a 1 -vasta-aine ja anti-b-isoagglutiniini. Potilas 2 (solut 2E ja seerumi 2S): A Rh (D) - negatiivisen potilaan näyte. Seerumissa on anti-bisoagglutiniini. SUORITUKSET Näytteistä tehtiin ABO- ja Rh (D) -määritykset. TULOKSET Vastaukset saatiin 64 suomalaisesta laboratoriosta (tot 148).

27 Palaute: ABO Rh(D) Potilas 1 Odotettu tulos oli, että potilaan veriryhmä on epäselvä (tai A2 mikäli laboratoriolla on käytettävissä menetelmä A:n alaryhmän tunnistamiseen). Viidessätoista laboratoriossa A-testisolujen ja potilaan seeruminäytteen välinen reaktio jäi negatiiviseksi ja tulokseksi saatiin siten A. Yksi laboratorio oli todennut, että seerumipuolen ylimääräinen agglutinaatio johtui anti-a1-vastaaineesta ja potilas kuuluu A2 alaryhmään, mutta oli normaalin vastauskäytäntönsä mukaisesti vastannut tulokseksi A.

28 Palaute: ABO Rh(D) Potilas 2 Odotettu tulos: A Yksi laboratorio oli jättänyt tulkinnan merkitsemättä ja yksi laboratorio ei ollut todennut agglutinaatiota B-testisolujen ja seerumin 2S välillä ja ABO-ryhmä oli siten jäänyt epäselväksi. Muut tulokset olivat oikein ja agglutinaatioreaktioiden voimakkuudet olivat odotusten mukaiset.

29 Palaute Rh(D) Potilas 1 Rh (D)-positiivinen. Kaikki laboratoriot saivat odotetun tuloksen. Potilas 2 Rh (D)-negatiivinen. Kaikki laboratoriot saivat odotetun tuloksen. Agglutinaatioreaktion voimakkuudet olivat odotusten mukaiset

30 Palaute: ABO KOMMENTTEJA Veriryhmämäärityksessä voidaan saada epäselvä tulos, jos potilas kuuluu A:n alaryhmään A2 ja hänellä on seerumissa anti-a1-vasta-aine. Anti-A1-vastaaineella ei ole kliinistä merkitystä, mutta veriryhmämäärityksessä todetun ristiriitaisuuden syy on selvitettävä ennen veriryhmävastauksen antamista. Erot eri menetelmäryhmien välillä johtuvat tekniikoiden ja reagenssien herkkyyseroista anti-a1- vasta-aineen toteamisessa. Näytettä 1 ei pisteytetty.

31 Vasta-aineseulonta

32 Vasta-aineseulonta Reaktiovoimakkuus

33 Seulonta

34 Sopivuuskoe

35 Sopivuuskoe

36 Sopivuuskoe

37 Palaute: Sopivuuskoe NÄYTTEET Seerumi 3S. A-veriryhmään kuuluvan potilaan seerumia, jossa on anti-cde vasta-aine ja anti-b-isoagglutiniini. Seerumi 4S. A-veriryhmään kuuluvan potilaan seerumia, jossa on anti-b-isoagglutiniini. Solut 5E. A Rh (D) -negatiivisen luovuttajan punasoluja, jotka ovat negatiivisia C ja E antigeenien suhteen. Solut 6E. A Rh (D) -negatiivisen luovuttajan punasoluja, jotka ovat positiivisia C-antigeenin ja negatiivisia E-antigeenin suhteen. Solut 7E. A Rh (D) -negatiivisen luovuttajan punasoluja, jotka ovat negatiivisia C ja E antigeenien suhteen. Solut 8E. A Rh (D) -negatiivisen luovuttajan punasoluja, jotka ovat negatiivisia C ja E antigeenien suhteen.

38 Palaute: Sopivuuskoe SUORITUKSET Seerumeista 3S ja 4S tehtiin vastaaineseulonta. Sopivuuskokeet kuvasivat tilannetta, jossa kahdelle potilaalle (näytteet 3S ja 4S) ristataan kummallekin neljä punasoluyksikköä (näytteet 5E-8E). TULOKSET Vastaukset saatiin 62 suomalaisesta laboratoriosta (tot. 104).

39 Palaute: Vasta-aineseulonta Potilaan 3S kohdalla odotettu tulos oli, että vasta-aineseulonta on positiivinen. Odotettu reaktiovoimakkuus oli pylväsagglutinaatiomenetelmillä ja putkimenetelmällä Kaikki laboratoriot saivat odotetun tuloksen. Potilaan 4S kohdalla odotettu tulos oli, että vasta-aineseulonta on negatiivinen. Kaikki tulokset olivat odotusten mukaiset.

40 Palaute: Sopivuuskoe Potilas 3: odotettu tulos oli, että veriyksiköt 5E, 7E ja 8E ovat sopivia ja yksikkö 6E epäsopiva. Epäsopivuuden syynä oli anti-cde vasta-aine ja solujen 6E C-positiivisuus. Odotettu reaktiovoimakkuus oli Kokeessa 3S/5E yksi laboratorio oli jättänyt tulkinnan kirjaamatta (agglutinaatioreaktion voimakkuus oli oikein). Kokeessa 3S/6E yksi laboratorio oli saanut väärän negatiivisen tuloksen. Potilas 4: odotettu tulos oli, että kaikki sopivuuskokeet ovat negatiiviset. Yksi laboratorio oli saanut väärän positiivisen tuloksen kokeessa 4S/7E.

41 Palaute: Vasta-aineseulonta KOMMENTTEJA Vasta-aineiden seulonnassa tulokset olivat erinomaiset. Kaikki laboratoriot saivat odotetun tuloksen ja agglutinaatioreaktioiden voimakkuudet vaihtelivat vain hyvin vähän. Sopivuuskokeissa todettiin yksi väärä sopivuus (1.6 %), yksi väärä epäsopivuus (0.2 %) ja yksi puuttuva tulkinta (0.2 %).

42 Suora antiglobuliinikoe

43 Suora antiglobuliinikoe

44 Palaute: Suora antiglobuliinikoe NÄYTTEET Solut 9E: Suora antiglobuliinikoe on negatiivinen. Solut 10E: Suora antiglobuliinikoe on heikosti positiivinen (odotettu reaktiovoimakkuus DiaMedin pylväsagglutinaatiomenetelmällä, BioVuen pylväsagglutinaatiomenetelmällä ja +w 1+ putkitekniikalla). SUORITUS Näytteestä pyydettiin tekemään suora antiglobuliinikoe (polyspesifisellä antiseerumilla). TULOKSET Vastaukset saatiin 52 suomalaisesta laboratoriosta (tot 98).

45 Palaute: Suora antiglobuliinikoe Näytteessä 9E kaikki laboratoriot saivat odotetusti negatiivisen tuloksen. Näytteestä 10E sai kaksi putkitekniikkaa käyttävää laboratoriota väärän negatiivisen tuloksen. Muut laboratoriot saivat odotetun positiivisen tuloksen. KOMMENTTEJA Väärien negatiivisten tulosten osuus oli 3.8 % näytteessä, joka oli heikosti positiivinen. Koska agglutinaatioreaktion voimakkuus näytteessä 10E vaihteli suuresti käytetystä tekniikasta riippuen, näytettä 10E ei pisteytetty.

46 ABO-määritys 1/03 1/03 2/03 2/03 3/03 3/03 Odotettu tulos Epäselvä Epäselvä A A A A Osallistujia Odotetun tuloksen sai 100 % 100 % 100 % 97 % 1/03: Heikko B, jossa seerumissa anti-a ja heikko anti-b 3/03: A 2, jossa seerumissa anti-b ja anti-a 1

47 Rh(D)-määritys 1/03 1/03 2/03 2/03 3/03 3/03 Odotettu tulos pos pos heikko pos neg pos neg Osallistujia Odotetun tuloksen sai 100 % 69 % 100 % 98 %* 100 % 100 % * Väärä Rh(D) positiivinen tulos!

48 Vasta-aineiden seulonta 1/03 1/03 2/03 2/03 3/03 3/03 Odotettu tulos neg neg pos heikko neg pos neg Osallistujia Odotetun tuloksen sai 100% 100 % 93 % 100 % 100 % 100 % 2/03: anti-jka, heikko 3/03: anti-cde

49 Suora antiglobuliinikoe 1/03 1/03 2/03 2/03 3/03 3/03 Odotettu tulos neg pos heikko pos pos heikko neg pos heikko Osallistujia Odotetun tuloksen sai 100% 98 % 100 % 98 % 100 % 96 %

50 Sopivuuskoe Kierros 1/03 Kierros 2/03 Kierros 3/03 Osallistujia Oikea sopivuus 98 % 92 % 98 % Oikea epäsopivuus 100 % 99 % 99 % Väärä sopivuus 2.4 %* 8 %** 1.6 % Väärä epäsopivuus 0 % 0.7 % 0.2 % * solut positiivisia suorassa antiglobliinikokeessa ** seerumissa heikko anti-jka

51 Ulkoisen laadunarvioinnin kansainväliset ohjelmat CAP UKNeqas 10 kierrosta vuodessa 6 vasta-aineiden seulonta ja tunnistus 4 lisäksi veriryhmämääritys ja sopivuuskoe Sakkopisteitä Brittiläiset standardit

52 Tulevaisuus Pisteytyksen vakiinnuttaminen Kumulatiivisen suoriutuvuuden graafinen esittäminen Ongelmien ajantasaistaminen käytännön tarpeita vastaavaksi Yhteis-Eurooppalaisten / kansainvälisten trendien seuraaminen

53 Kiitokset Kuulijoille mielenkiinnosta TYKS:n verikeskuksen henkilökunnalle 25-vuoden antoisasta yhteistyöstä SPRV:lle innostuneesta ja uupumattomasta yhteistyöstä kierrosten suunnittelussa ja toteuttamisessa Labquality Oy:lle ja sen henkilökunnalle innostavasta, kannustavasta ja asiantuntevasta yhteistyöstä Tomi Koskelle lupauksesta toimia asiantuntijana tulevilla kierroksilla