( B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT ' `29.:?, (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 A 61K 39/13, C 07K 7/08

Koko: px
Aloita esitys sivulta:

Download "( B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 80601. ' 1 3 17 1 `29.:?, (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 A 61K 39/13, C 07K 7/08"

Transkriptio

1 ( B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT ' `29.:?, (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 A 61K 39/13, C 07K 7/08 (21) Patenttihakemus - Patentansökning SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyrelsen (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag (24) Alkupäivä - Löpdag (41) Tullut julkiseksi - Blivit offentlig (44) Nähtäväksipanon ja kuul.julkaisun pvm. Ansökan utlagd och utl.skriften publicerad (86) Kv. hakemus - Int. ansökan US83/00477 (32) (33) (31) Etuoikeus - Prioritet US US (71) Hakija - Sökande 1. Scripps Clinic and Research Foundation, North Torrey Pines Road, La Jolla, Cal., USA, (US) (72) Keksijä - Uppfinnare 1. Bittle, James L., 5353 Calle Vista, San Diego, Cal., USA, (US) 2. Lerner, Richard A., 7750 East Roseland, La Jolla, Cal., USA, (US) (74) Asiamies - Ombud: Berggren Oy Ab (54) Keksinnön nimitys - Uppfinningens benämning Menetelmä Picornaviruksen synteettisen antigeenin valmistamiseksi Förfarande för framställning av syntetisk Picornavirus antigen (56) Viitejulkaisut - Anförda publikationer FI A (C 07 K 15/00), Proceeding of the National Academy of Science of the USA, vol. 77, 1980, p , Nature, vol. 287, 1980, p , Journal of General Virology, vol. 59, 1982, p , Chemical Abstracts, vol. 97, 1982, t (57) Tiivistelmä - Sammandrag Spesifinen synteettinen antigeeninen peptidi, joka sisältää noin 20 aminohappotäht,,, sekvenssin, joka vastaa Picornaviruksen antigeenisen, kuten suu- ja sorkka- tauti- ja poliomyelitis-virusten VP 1-kuoren tiettyä aluetta. Tämä alue sijaitsee noin %:n etäisyydellä aminohappojen kokonaispituudesta mitattuna aminopäätteestä. Esitetään spesifisiä synteettisiä peptidejä sisältäviä rokotteita, jotka synnyttävät vasta-aineita, jotka suojaavat isäntäeläimiä Picornaviruksilta sekä Picornavirusten antigeenien vastaaineita ja diagnostisia järjestelmiä. Specifik syntetisk peptid, som innehåller en sekvens av ca 20 aminosyrarester motsvarande en viss region av ett Picornavirus antigeniskt skalprotein, såsom mul- och klövsjuka- och poliomyelitis-virus VP 1 -skal. Denna region är belägen på ett avstånd av ca % av aminosyrornas totallängd räknat från aminoändgruppen. Vacciner innehållande specifika syntetiska peptider, vilka producerar antikroppar, vilka skyddar värddjur mot Picornavirus, ävensom antikroppar till och diagnostiska system för Picornavirus antigener beskrives.

2 80601 KAHDEKSAN FMDV VP 1 -KUORIPROTEIININ AMINOHAPPOTÄHDE- SEKVENSSI ASEMISSA Olk TyrAsnGlyGluCysArgTyrAsnArgAsnAlaValProAsnLeu Olc TyrAsnGlyGluCysArgTyrSerArgAsnAlaValPrcAsnVal Alo TyrAspGlyThrAsnLysTyrSerAlaSerAspSer - - Arg Al2 TyrAsnGlyThrAsnLysTyrSerAlaSerGlySerGlY - Val A24 TyrAsnGlyThrSerLysTyrAlaValGlyGlySerGly Arg A27 TyrAsnPheThrAsnLysTyrSerAsnGlyGlyGln - - Arg A79 TyrAsnGlyThrSerLysTyrThrValGlyGlySerGlY - Arg C3 TyrThrGlyThrThrThrTyrThrThrSerAla Arg Olk Olc A10 Al2 A24 A27 A79 C ArgGlyAspLeuGlnValLeuA1aGlnLysValAlaArgThrLeuPro ArgGlyAspLeuGlnValLeuAlaGlnLysValAlaArgThrLeuPro SerGlyAspLeuGlySerIleAlaAlaArgValAlaThrGlnLeuPro ArgGlyAspPheGlySerLeuAlaProArgValAlaArgG1nLeuPro ArgGlyAspMetGlyThrLeuAlaAlaArgValValLysGlnLeuPro AlaGlyAspMetGlySerLeuAlaAlaArgValAlaLYsGlnLeuPro ArgGlyAspMetGlySerLeuAlaAlaArgValAiaLysGlnLeuPro ArgGlyAspLeuValHisLeuAlaAlaAlallisAlaArgHisLeuPro

3 Menetelmä Picornaviruksen synteettisen antigeenin valmistamiseksi Esillä oleva keksintö kohdistuu rokotteisiin ja antigeeneihin infektiotauteja vastaan ja erityisesti antigeeneihin, jotka ovat käyttökelpoisia heimon Picornavirus virueten aiheuttamien tautien, kuten poliomyelitiksen diagnoeoinniesa ja käsittelyssä. Poliomyelitis- (tästedes polio) ja Hepatitis A-virukset kuuluvat Picornavirus-heimoon, ts. ne ovat sukua niille luvulta lähtien on käytetty tehokkaita rokotteita poliovirusten tyyppejä 1, 2 ja 3 vastaan, kun taas ei tunneta mitään tehokasta rokotetta Hepatitis Aita vastaan. Picornavirusten eräs tunnusomainen piirre on, että ne sisältävät neljä kuoriproteiinia. On havaittu, että poliotyyppi 1:n VP 1 :ksi kutsuttu kuoriproteiini sisältää antigeenisen determinanttialueen, joka pystyy saamaan aikaan virusta neutraloivien vasta-aineiden tuottamisen, vaikkakaan VP 1 -kuoren spesifisiä aminohappodeterminanttialueita ei tähän saakka ole löydetty. Ei ole vielä tunnistettu sellaista Hepatitis A- viruksen spesifistä kuorta, joka saisi aikaan neutraloivien vasta-aineiden tuottamisen. Polion vastaisissa rokotteissa käytetään tavallisesti inaktivoituja virustyyppejä 1, 2 ja 3. Joissakin tapauksissa kaikki ne. tapetut virukset eivät ole kuolleet tai virushiukkasia ei ole heikennetty riittävästi, jolloin noin yksi rokotus miljoonasta aiheuttaa kliinisen taudin rokotetussa henkilössä. Näin ollen olisi hyödyllistä jos voitaisiin valmistaa sellainen polion vastainen rokote, joka ei missään tapauksessa sisällä elävää tai edes heikennettyä virusta. Olisi myöskin

4 hyödyllistä jos voitaisiin valmistaa sellainen polion vastainen virus, joka on vapaa solujäännöksistä, bakteeriendotoksiineista ja kasvuväliaineen sivutuotteista, jotka usein esiintyvät jäljempänä kuvatulla yhdistelmä-dna-tekniikalla valmistetuissa rokotevalmisteissa. Olisi edelleen hyödyllistä, jos läydettäisiin sellaisia rokotteita ja diagnostisia tuotteita, jotka ovat turvallisia ja hyvin tehokkaita. Aikaisemmin antigeeneja on saatu useilla tavoin, kuten valmistamalla luonnontuotteista, liittämällä hapteeni kantajaan ja yhdistelmä-dna-tekniikalla. Sela, et al., Proc. Nat. Acad. Sci., U.S.A., 68: (heinäkuu, 1971); Science, 166: (joulukuu 1960); Adv. Immun., 5: (1966) ovat myöskin kuvanneet tiettyjä synteettisiä antigeeneja. Luonnontuotteista johdettuja antigeeneja edustavat lukemattomat tunnetut luonnossa esiintyvät antigeenit, kuten veriryhmäantigeenit, HLA-antigeenit, erilaistuneet antigeenit, virusja bakteeriantigeenit ja sen kaltaiset. Viime vuosisadan aikana on uhrattu huomattavasti työtä näiden antigeenien tunnistamiseksi ja tutkimiseksi. Tiettyjä "synteettisiä" antigeeneja on valmistettu liittämällä pieniä molekyylejä kantajiin, kuten esim. naudan seerumial-.bumiiniin, tuottaen näin antigeeneja, jotka saavat aikaan pienen liitetyn molekyylin vasta-aineen tuottamisen. Kantajamolekyyli on välttämätön, koska eläimen, johon pieni molekyyli injisoidaan, immuunijärjestelmä ei "tunnistaisi" pelkkää pientä molekyyliä. Tätä tekniikkaa on myöskin käytetty yksittäisissä tapauksissa antigeenien valmistamiseksi liittämällä tunnettujen peptidien peptidifragmentteja kantajiin, kuten on kuvattu Sela et al.:in edellä viitatuissa artikkeleissa. Vaikkakin tämä haptiini-kantaja-tekniikka on palvellut hyvin tutkimistyötä tutkittaessa immuunireaktion luonnetta, niin siitä ei ole ollut huomattavaa käyttöä sellaisten antigeenien valmistuksessa, joilla olisi merkitystä diagnostiikassa tai

5 terapiassa. Tämän puutteellisuuden syyt ovat monet. Ensiksi, jotta tällä tekniikalla voitaisiin valita ja rakentaa hyödyllinen antigeeninen determinantti patogeenista, niin on määritettävä patogeenin koko proteiinisekvenssi, jotta onnistumisen mandollisuus olisi kohtuullinen. Tämän tehtävän vaikeuksista johtuen se on harvoin, jos koskaan, toteutettu. Rokotteet valmistetaan klassisesti viemällä tapettuja tai heikennettyjä organismeja isäntään yhdessä sopivien apuaineiden kanssa organismien vastaisen normaalin immuunireaktion alulle panemiseksi, samalla kun toivottavasti vältytään organismin patogeenisilta vaikutuksilta isännässä. Tämä tapa kärsii hyvin tunnetuista rajoituksista, jotka ilmenevät siinä, että on tuskin mandollista välttää patogeenista reagointia rokotteen kompleksisuudesta johtuen, joka rokote ei ainoastaan sisällä kiinnostuksen kohteena olevaa antigeenista determinanttia vaan useita samantapaisia tai erilaisia vahingollisia aineita, jotka voivat, joissakin tai kaikissa yksilöissä, saada aikaan ei-toivotun reaktion isännässä. Klassisella tavalla valmistetut rokotteet voivat esimerkiksi sisältää kilpailevia antigeeneja, jotka ovat haitallisia toivotulle immuunireaktiolle, antigeeneja, jotka johtavat erilaisiin immuunireaktioihin, organismista tai viljelystä peräisin olevia nukleiinihappoja, endotoksiineja ja aineosia, joilla on tuntematon koostumus ja alkuperä. Näiåtä kompleksisista aineista aikaansaaduilla rokotteilla on luonnostaan suhteellisen suuri todennäköisyys synnyttää kilpailevia reaktioita, jopa kiinnostuksen kohteena olevasta antigeenista. Lisäksi tällaiset tunnetut rokotteet FMDV:tä vastaan on pidettävä kylmässä ennen käyttöäja jäähdyttäminen on yleensä vaikea toteuttaa syrjäisillä alueilla, joissa rokotteita käytetään. Yhdistelmä- DNA-teknologia on avannut uusia mandollisuuksia rokotusteknologialle, jonka etuna on, että valmistus lähtee

6 monospesifisestä geenistä, mutta suurin osa tästä edusta menetetään kuitenkin antigeenin varsinaisessa valmistuksessa Escherichia colissa tai muissa mikro-organismeissa. Tämän menetelmän mukaan geenimateriaali viedään plasmidiin, joka sen jälkeen viedään E. coliin, joka tuottaa halutun proteiinin yhdessä muiden aineenvaihduntatuotteiden kanssa, jotka kaikki ovat seoksena ravintoaineen kanssa. Tämä tapa kompiisoituu, koska on epävarmaa jos haluttu proteiini ekspressoituu transformoidussa E. colissa. Lisäksi vaikkakin haluttua proteiinia saattaa muodostua on epävarmaa voidaanko se saada talteen tai ei tuhoutuuko se E. colin kasvuprosessin aikana. On esimerkiksi hyvin tunnettua, että E. coli hajottaa vieraita tai muuttuneita proteiineja. Vaikkakin proteiinia esiintyy riittävä määrä, jotta se olisi mielenkiinnon kohteena, se on kuitenkin vielä erotettava kaikista muista E. colin aineenvaihduntatuotteista, joihin sisältyvät sellaiset vahingolliset aineet kuten ei-toivotut proteiinit, endotoksiinit, nukleiinihapot, geenit ja tuntemattomat tai arvaamattomat aineet. Lopuksi vaikkakin olisi mandollista tai tulisi kehityksen myötä mandolliseksi jollakin tekniikalla, joka pakostakin olisi hyvin kallis, erottaa haluttu proteiini E. colin muista aineenvaihduntatuotteista, niin rokote sisältää yhä kokonaisen.proteiinin, joka saattaa sisältää ei-haluttuja antigeenisia determinantteja, joista, kuten on tunnettua, muutamat - synnyttävät hyvin merkittäviä, haitallisia reaktioita. On todellakin tunnettuai -että tietyt proteiinit, joita muuten voitaisiin pitää rokotteina, sisältävät antigeenisen determinantin, joka synnyttää niin vakavia poikkireaktioita tai sivureaktioita, ettei näitä aineita voida käyttää rokotteena. On myöskin mandollista hybridooma-tekniikkaa käyttäen tuottaa vasta-aineita virusgeenituotteille. Pohjimmiltaan voidaan hybridomitekniikassa lähteä antigeenien kompleksisesta seok- sesta ja valmistaa prosessin myöhemmässä vaiheessa monospesifisiä vasta-aineita. Vastakohtana tälle esillä oleva keksintö

7 edustaa päinvastaista prosessia, koska siinä lähdetään korkean puhtauden omaavasta antigeenideterminantista ja näin ollen vältytään välttämättömyydestä puhdistaa haluttua antigeenituotetta. On tunnettua, että hybridoomavasta-aineilla on alhainen aktiivisuus ja alhainen sitomisvakio ja tämän vuoksi niillä on vähäistä arvoa. Hybridoomatekniikassa on viime kädessä luotettava pahanlaatuisten solujen tuottamaan vasta-aineeseen kaikkine siihen liittyvine huolineen mitä tulee erottamistekniikkaan, puhtauteen ja varmuuteen. Hybridoomatuotanto perustuu kudosviljelyn tai aineen viemisen hiireen, jonka seurauksena tuotanto on kallista ja esiintyy myöskin luontaisia variaatioita erästä erään. Lisäksi on vaikeata valmistaa hybridi sellaisille molekyyleille, jotka muodostavat vain pienen osuuden siitä kompleksisesta seoksesta, josta on lähdettävä. Aikaisempia tutkimuksia, Arnon et al., Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A. 68:1450 (1971), Atassi, Immunochemistry 12:423 (1975) ja Vyas et al., Science 178:1300 (1972) on tulkittu näiden kirjoittajien toimesta osoittaen, että lyhyet lineaariset aminohapposekvenssit ovat epätodennäköisiä synnyttämään vasta-aineita, jotka ovat reaktiivisia luonnon proteiinirakenteiden kanssa. Ajå'teltiin, että useimpien molekyylien useimpien alueiden kohdalla, aminohappotähteistä saadut antigeenideterminantit erottuvat hyvin lineaarisessa sekvenssissä, mutta vasta-aineiden synnyttämiseen käytettyjen peptidien rakenteen uskottiin olevan kriittinen useimmissa tapauksissa, jopa niille antigeeneille, joissa aminohapot ovat lähellä toisiaan sekvenssissä. Lerner et al., Cell 23; , (1931); Nature 287: (1980), havaitsivat, että lineaaristen peptidien vasta-aineet reagoivat luonnon molekyylien

8 kanssa. Monimutkaiset biosynteesit tulivat näin ollen tarpeettomiksi, epätaloudellisiksi ja vanhanaikaisiksi. Kloonattuun virueproteiinirokotteeseen perustuvalla tavalla on useita luontaisia haittapuolia, rajoituksia ja riskejä. Biosynteesisysteemin vaihtelut voivat sinänsä aiheuttaa vaihteluita proteiinien ekspreeeoitumisessa ja näin vaikuttaa antigeenien puhtauteen, saantoihin, tehoon jne. Lisäksi muiden proteiinien läsnäolo ja vaikeat ja tehottomat erottamiset viittaavat siihen, että kloonatulla virusproteiinimenetelmällä valmistetut rokotteet eivät todennäköisesti ole monospesifisiä. Näin ollen tällä tekniikalla valmistettujen tuotteiden päähuolenaiheena on puhtaus, tehokkuus ja varmuus. Vaikkakin synteettisten antigeenien valmistuksen yleiset periaatteet, lähtien joko tunnetusta peptidisekvenssistä tai genomista, on kuvattu ja vaikkakin sellaisten sopivan pituuden omaavien peptidien valmistus, joita voidaan käyttää antigeenisissä materiaaleisea, on nykyään aika hyvin tunnettu, on olemassa hyvin laaja antigeeni-vasta-aine-teknologian ala, jota edelleen on mandotonta hallita. Vaikkakin tunnetaan joitakin suuntaviivoja ja ehdotuksia koskien mandollisia antigeenisekvenssejä, on tälle alueelle kuitenkin edelleen ominaista spekulaatiot, yritykset ja erehdykset. Vaikkakin tiedetään, että pitkä sekvenssi saattaa sisältää antigeenisesti aktiivisia aineosia, esiintyy suurta epävarmuutta ja arvailua siitä, tarvitaanko koko sekvensei vai vain osa siitä antigeenieyyden saavuttamiseksi ja siitä onko sekvenssin pienemmällä osalla suurempi tai pienempi antigeenisyys. Esillä oleva keksintö kohdistuu menetelmään spesifisen synteettisen, antigeenieen peptidin valmistamiseksi, joka sisältää noin kandenkymmenen aminohappotähteen sekvenesin. Tähän antigeeniseen peptidiin sisältyy aminohappotähteen sekvenesi, joka vastaa antigeenisen Picornaviruksen kuoriproteiinin tiettyä aluetta. Tämä alue sijaitsee etäisyydellä, joka on

9 noin 60 - noin 75 % antigeenisen kuoriproteiinin aminohappojäännössekvensein koko pituudesta laskettuna sen aminopäätteestä. Tämä peptidi kykenee, kun se on sidottu avaimenreikämaljakotilo-hemosyaniinikantajaan konjugaattina ja viety tehokkaana määränä rokotteena isäntåeläimeen, synnyttämään vasta-aineiden tuotannon ieäntäeläimessä, jotka vasta-aineet immuunireagoivat Picornavirukeen kanssa suojaten isäntäeläintä Picornaviruksen aiheuttamalta infektiolta. Peptidillä on edullisesti positivinen nettoionivaraus, lukuunottamatta päätteinä olevien peptidien amino- ja/tai karboksyyliryhmien ionivaraukeet. Erään suoritusmuodon mukaan tällä keksinnöllä aikaansaadaan synteettisiä, antigeenisiä peptidejä, joista kukin sisältää noin kandenkymmenen aminohapon sekvenesin, joka vastaa polioviruksen VP 1 -kuoriproteiinin aminohapposekvenssejä, jotka sijaitsevat asemassa noin 182:sta noin 201:een aminopäätteeetä. Jokainen näistä peptideistä kykenee, kun ne on yksitellen sidottu avaimenreikämaljakotilo-hemosyaniinikantajaan konjugaattina ja viety tehokkaassa määrässä eri isäntäeläimiin, synnyttämään vasta-aineiden tuotannon, jotka vasta-aineet immuunireagoivat polioviruksen kanssa suojaten näitä eläimiä polioinfektioilta. Tämän keksinnön mukaisia synteettisiä antigeenieiä peptidejä voidaan käyttää yhdessä fysiologisesti hyväksyttävien laimetimien, kuten veden ja/tai lieäaineiden kanssa sellaisissa rokotteisea, jotka kykenevät suojaamaan eläimiä Picornaviruksen aiheuttamia tauteja vastaan, tai kasvattamaan vastaaineita, jotka ovat käyttökelpoisia sellaisten antigeenisten proteiinien läsnäolon havaitsemiseksi, jotka liittyvät Picornaviruksen aiheuttamiin tauteihin. Polion VP 1 -kuoreen liittyvien synteettisten peptidien erityisen edullinen noin kandenkymmenen aminohappotähteen eekveneei vastaa VP 1 -kuoren aminohappotähteen alueita, jotka sijaitse-

10 vat asemassa noin 181:stä noin 201:een aminopäätteeetä. Näiden sekvenseien aminohappotähteet, kirjoitettuna vasemmalta oikealle ja suunnassa aminopäätteestä karbokeipäätettä kohti, on esitetty seuraavassa: (181) SerIlePheTyrThrTyrGlyThr(Ala)AlaProAlaArgIle (201) SerValProTyrValGlyIle joissa jokainen suluissa esitetty aminohappotähde sekvenseissä voi itsenäisesti korvata välittömästi sulkujen vasemmalla puolella olevan viereisen aminohappotähteen, ja suluissa olevat numerot määrättyjen aminohappojäännösten yläpuolella yllä olevassa sekvenesissa ilmaisevat poliotyyppi 1-viruksen VP kuoriproteiinin aminohappotähteen asemat aminopäätteen suhteen. Nämä numerot on esitetty vain vertailumieleseä. Esillä olevalla keksinnöllä saavutetaan huomattavaa hyötyä ja etua, erityisesti kun tämän keksinnön mukaisia peptidejä käytetään rokotteissa Picornaviruksen aiheuttamia tauteja vastaan ja diagnostiikaesa, jossa määritetään näiden tautien tai virusten esiintymistä eläimissä, ihminen mukaanluettuna. Näin ollen yksi huomattava etu on se, että synteettiset peptidit voivat muodostaa osan sellaisesta rokotteesta, joka suojaa eläimiä näiltä taudeilta. Kekeinnöllä saavutettava erityinen hyöty on siinä, ettei rokotteita, jotka on valmistettu käyttäen synteettistä peptidiä, tarvitse tehokkaan rokotuksen aikaansaamiseksi säilyttää kylmässä ennen käyttöä. Esillä olevan keksinnön eräs toinen etu saavutetaan diagnostiikan alueella, jossa synteettisen peptidin antiseerumissa tuotetut vasta-aineet immuunireagoivat Picornaviruksiin, ku-

11 ten polioon, liittyvien antigeenisten proteiinien ja vastaaineiden kanssa ja niitä voidaan käyttää näiden läsnäolon havaitsemiseksi. Lisähyödyt ja -edut ovat alan ammattilaiselle ilmeiset seuraavan yksityiskohtaisen selityksen, esimerkkien ja patenttivaatimusten perusteella. Piiruetukeesea, joka muodostaa tämän selityksen osan kuvio esittää polion tyyppi 1 Mahoney- ja Sabin-viruskannat ja tyyppi 3 Leon-polioviruskanta, VP 1 -kuoren aminohappotähdesekvenesejä aminohappotähteen asemassa , käyttäen tavallista kolmekirjainkoodia jokaiselle aminohappotähteelle. Sekvenssit luetaan vasemmalta oikealle ja suunnassa aminopäätteestä karbokeipäätettä kohti. Numerot 182 ja 201 esittävät aminohappotähteen asemat Mahoney tyyppi 1 polioviruksen VP 1 -kuoriproteiinin aminopäätteen suhteen. Esillä olevan keksinnön mukaan on hyvin odottamattomaeti ja hyvin yllätyksellisesti keksitty, että erityinen, suhteellisen lyhyt synteettinen peptidisekvensei on antigeeniseeti erittäin aktiivinen. Synteettinen peptidi sisältää aminohappotähdesekvenssin, jonka pituus on noin 20 happoa. Peptidin aminohappotähdesekvenssi vastaa ainakin antigeenisen Picornaviruksen proteiinin sen alueen aminohappotähdesekvenssiä, joka sijaitsee etäisyydellä joka on noin 60 - noin 75 % antigeenisen kuoriproteiinin aminohappotähdesekvensein kokonaispituudesta, mitattuna sen aminotähteeetä. Synteettisellä peptidillä on nettoionivaraus, joka on nolla tai positiivinen, lukuunottamatta ionivarauksia, jotka aiheutuvat amino- ja/tai karbokeyylipääteryhmien läsnäolosta. Lisäksi ovat synteettieet antigeenit, jotka sisältävät jäljempänä kuvatut peptidisekvenseit, monospeeifisiä Picornavirusten tiettyjen serotyyppien, alatyyppien ja kantojen suhteen ja ne ovat myöskin polyspeeifieiä, vaikkakin pienemmässä määrin useiden näiden virusten serotyyppien, alatyyppien ja kantojen suhteen.

12 Keksinnön mukaiset synteettiset antigeenieet peptidit kykenevät yksinään suoraketjuisessa tai syklisessä muodossa, polymeerinä, jossa viereiset toistuvat peptidiyksiköt on sidottu yhteen hapotetuilla eysteiinitähteillä, tai kantajaan sidottuna kojugaattina, annettuna tehokkaassa määrässä rokotteena, synnyttämään vasta-aineiden tuotannon isäntäeläimessä, jotka vasta-aineet immuunireagoivat sen sukuisen Picornaviruksen kanssa suojaten isäntäeläintä Picornaviruksen aiheuttamalta infektioita. Tämän keksinnön mukaista peptidiä voidaan kuitenkin lisämääritellä sen antigeenisiä ominaisuuksia kuvaavalla yksikkökokeella, joka on riippumaton siitä muodosta, jossa peptidiä lopullisesti käytetään, eli suoraketjuisena, eyklieenä renkaana, polymeerinä tai sidottuna konjugaattina. Tämän yksikkökokeen mukaan keksinnön mukainen peptidi kykenee suoraketjuisessa muodossa, kun se on sidottu avaimenreikämaljakotilo-hemosyaniinikantajaan konjugaattina ja viety tehokkaana määränä rokotteena isäntäeläimeen, synnyttämään vastaaineiden tuotannon, jotka vasta-aineet immuunireagoivat sen sukuisen Picornaviruksen kanssa suojaten tätä isäntäeläintä tältä virukeelta. Peptidin ja kantajan määrät ja konjugointireaktion spesifieet reaktio-olosuhteet ja rokotevalmieteet on esitetty aikakausjulkaisussa Bittle et al., Nature, 298: (heinäkuu, 1982). Rokotteena esillä oleva keksintö käsittää tehokkaan määrän peptidiantigeeniä, joka saattaa yksinään soveltua rokotteeksi, kun läsnä on fysiologisesti hyväksyttävä laimennin, kuten vesi tai suolaliuos. Rokote voi sisältää kantajan, joka voi olla mikä tahansa useista kantajista, kuten avaimenreikämaljakotilo-hemoeyaniini (KLH), jäykkäkouristustoksoidi, poly-l- (Lys:Glu), maapähkinäagglutiniini, ovalbumiini, soijapapuagglutiniini, nautaseerumialbumiini (BSA) ja sentapainen, johon monospesifinen, synteettinen determinanttipeptidi on sidottu. Polymeeri, joka on valmistettu sitomalla useita tämän keksin-

13 nön mukaisia peptidejä hapetettujen systeiinipääteryhmien päästä-päähän-sidosten välityksellä, saattaa myös käsittää eksogeenisen, kantajaeta vapaan rokotteen yhdessä fysiologisesti hyväksyttävän laimentimen kanssa. Kaikissa tapauksissa tämän keksinnön mukainen peptidi toimii spesifisenä antigeenisenä determinanttina. Antigeenisen peptidin "tehokas määrä" riippuu useista tekijöistä. Näihin tekijöihin sisältyy suojattavan isäntäeläimen ruumiinpaino ja laji, kantaja, kun sitä käytetään, apuaine, kun sitä käytetään, se lukumäärä rokotuksia, jota halutaan käyttää, ja eläimelle halutun suojan kestoaika. Yksittäiset rokotteet sisältävät yleensä noin 20 mikrogramma - noin 2 milligrammaa synteettistä antigeenistä peptidiä, lukuunottamatta kantajaa, johon peptidi voi olla sidottu. Kun tämän keksinnön mukainen antigeeninen rokote viedään haluttuun ieäntåeläimeen, se panee alulle vasta-aineiden tuotannon isäntäeläimeseä edellä mainitulle antigeeniselle peptidille ja sen sukuiselle Picornavirukeelle, kuten poliolle. Rokotteet, jotka sisältävät tehokkaita määriä tämän keksinnön mukaisia peptidejä, eivät ainoastaan pane alulle vastaaineiden tuotantoa isäntäeläimessä, vaan näitä vasta-aineita tuotetaan riittävässä määräesä suojaamaan isäntäeläintä polion tai jonkin toisen Picornaviruksen aiheuttamalta infektiolta. Isäntäeläimen suoja voidaan määrätä kasvatettujen vasta-aineiden neutralointitason avulla ja/tai neutralointiindekein avulla, kuten jäljempänä tarkemmin esitetään. Keksintö käsittää myöskin sellaisia antigeenejä, joissa koko tai osa kokonaisesta kantajaeta on antigeeninen. Näin ollen voidaan käyttää, tai olla käyttämättä, erillistä kantajaosaa. Synteettinen antigeeni, joka on valmistettu sitomalla polion monospesifinen, synteettinen, antigeeninen determinanttipeptidi antigeenikantajaan, sekä myöskin menetelmät tällaisten synteettisten antigeenien valmistamiseksi, ovat esillä olevan keksinnön spesifisiä aspekteja.

14 Yleensä voidaan muodostaa eynteettinen antigeeni seuraavilla vaiheilla: valmistetaan Picornaviruesukuinen peptidi, joka immunologieesti vastaa tai vastaa olennaisesti polion antigeenisiä determinantteja, ja liitetään eynteettinen determinantti farmaeeuttiseeti hyväkeyttävään kantajaan erillisella synteettisellä vaiheelle. Menetelmä rokotteiden valmistamiseksi käsittää polion monospeeifisen, synteettisen antigeenisen determinanttipeptidin syntetisoinnin, joka peptidi antigeenisesti on polion VP 1 - proteiinin tarkoin määrätyn determinanttiosan kaksoiskappale tai olennaisesti sen kaksoiskappale. Synteettinen peptidi voi olla, muttei aina tarvitse olla, sidottu kantajaan, jotta saataisiin antigeeni, jonka antigeenisyys on sama kuin polion monospesifisen antigeenisen determinanttipeptidin, ja joka vietynä isäntäeläimeen yhdessä fysiologisesti siedettävän laimentimen kanssa, panee alulle vasta-aineiden tuotannon popoliovirukselle. Menetelmässä vasta-aineiden valmistamiseksi, edellä kuvattua rokotetta injieoidaan isäntäeläimeen ja proteiiniantigeenia vastaan, isäntäeläimessä kasvatetut vasta-aineet otetaan talteen ieäntäeläimen nesteistä, joita vasta-aineita käytetään tavanomaisissa diagnostisissa menetelmiesä proteiinin vastaaineiden esiintymisen osoittamiseksi tai terapeuttisina aineina passiivista immuuniprofylakeiaa varten. On ymmärrettävä, että vaikkakin keksinnön mukaisten rokotteiden ja vasta-ainevalmieteiden valmistukseen sisältyy useita menetelmävaiheita, kuten jäljempänä esitetään yksityiskohtaisesti, niin keksintö ei ole rajoitettu minkään erityisen vaiheen tai reagenesin tai olosuhteen käyttöön, vaan keksintö on pikemminkin käsitettävä sellaiseksi kuin ee on esitetty edellä ja määritelty yksityiskohtaisesti oheisissa patenttivaatimukeisea.

15 Peptidievnteesi Jäljempänä esitetyt peptidit syntetisoitiin käyttäen tunnettuja menetelmiä [ks. eeim. Marglin, A, ja Merrifield, R.B., Ann. Rev. Biochem., 39: (1970)7. Peptidit liitettiin proteiinikantajan KLH eysteiinitähteen välityksellä, joka systeiinitähde tavallisesti liitettiin peptidin karboksipäätteeseen, ellei toisin mainita. Synteettinen sitomisvaihe, jossa peptidi sidottiin proteiinikantajaan, suoritettiin, ellei toisin esitetä, liittämällä syeteiinin rikkiatomi kantajan ja N-maleimidobentsoyyli-N-hydroksi-sukkiini-imidieeterin <MBS) välisen reaktiotuotteen kaksoissidokeeen, noudattaen yleistä menetelmää, joka on esitetty aikakausjulkaisuesa Liu et al., Biochemietry, 18: <1979). Synteesi tapahtuu siten, että a) aikaansaadaan liukenematon hartsi, jossa on suuri määrä kloorimetyyliryhmiä; b) esteröidään hartsiin Boc-(MeoBz1)-Cys-OH; c) poistetaan Boc-ryhmä vapaan aminoryhmän muodostamiseksi Cys-tähteeseen, d) saatetaan vapaa aminoryhmä reagoimaan toisen aminohapon ylimäärän kanssa, jolla toisella aminohapolla on seuraavat ominaisuudet: <i) siinä on vapaa karboksyyliryhmä, (ii) sen aminoryhmä on sidottu Boc-ryhmään ja <iii) siinä on mandollisesti reaktiivieia sivuryhmiä, jotka on sidottu suojaryhmään ja muodostavat amidiryhmän; e) poistetaan mainitun toisen aminohapon ylimäärä; f) poistetaan viimeksi mainittu Boc-ryhmä vapaan aminoryhmän muodostamiseksi, g) toistetaan vaiheet d), e) ja f) käyttäen aminohappoja sekvenesien <1)-<4) mukaisesti kunnes hartsiin on syntetisoitu vastaava suojattu peptidi; ja h) poistetaan syntetisoitu, suojattu peptidi harteista ja poistetaan peptidistä mandolliset suojaryhmät.

16 Esimerkki 1 Peptidin <1) SerllePheTyrThrTyrGlyThrAlaProAlaArglleSerVal- ProTyrValGlylle synteesi Peptidejä syntetisoitiin Marglinin ja Merrifieldin, jne. (Marglin, A., Merrifield, R.B.A., Rev. Biochem, 39 (1970), ; Houghten, R.A., Chang, W.C., Li, C.H., Int. J. Peptide Protein Ree., 16 (1980) , Sutcliffe, J.G., et al., Nature, 287 (1980) ) kiinteän faasin menetelmän avulla käyttäen peptidisyntetisaattoria mallia Beckmar Model 990B. Alkuperäinen aminohappohartsi valmistettiin esteröimällä Boc-(MeoBzl)-Cye-OH (2 g sen vedetöntä keeiumsuolaa, 4,3 milliekvivalenttia) ja kloorimetyloitua harteia (polystyreeniä- 1 % divinyylibenteeeniä, bio-helmiä, koko meeh, 0,7 mmol g ) 25 ml:sea vedetöntä dimetyyliformamidia (DMF) se- 0 koittamalla 24 h 50 C:eea. Kolminkertaisen ylimäärän kesium- suolaa aktiiviseen kloridipolymeeriin nähden todettiin anta- van melkein täydellisen substituution. Substituution todet- 1 tiin olevan 0,55 milliekvivalenttia x g pikriinihappokokeen ja aminohappoanalyysin - avulla ja sen todettiin olevan 0,53 milliekvivalenttia x g HC1-propionihappohydrolyysin jälkeen. Jokaista synteesiä varten käytettiin 1,0 g (0,53 milliekvivalenttia) Boc-(MeoBz1)-Cye-hartsia. Synteesissä käytettiin seuraavia sivuketjujen suojaryhmiä; tyrosiiniile käytettiin 0-Bri; treoniinille ja seriinille 0-bentsyyli ja arginiinille toeyyli. Suojatut aminohapot (Vega Biochemicaleiita ja Peninsula Laboratoriesilta) kiteytettiin uudelleen sopivasta liuottimeeta kunnes niistä saatiin TLC:lla yksittäiset piikit (kloroformi/etikkahappo = 15:1 tai kloroformi/metanoli = 10:1). Kaikki liittymiset suoritettiin kymmenkertaisella ylimäärällä Boc-AAOH:a. Pikriinihappotestin mukaan kaikki liittymiereaktiot saatettiin 99-prosenttisesti päätökseen. Suojatut peptidipolymeerit <500 mg - 2,5 g, 0,12-0,60 milli-

17 ekvivalenttia) käsiteltiin kaksinkertaisella painomäärällä anisolia ja 40-kertaisella tilavuudella (suhteessa painoon) 0 vedetöntä fluorivetyä 4 C:esa 1 tunnin ajan. Sen jälkeen, kun fluorivety oli haihdutettu pois typpivirran avulla, punainen jäännös sekoitettiin vedettömään eetteriin <50 x, paino/tilavuus) ja sekoitettiin voimakkaasti 15 minuuttia: tämän eetteriuuton kolminkertaisen toiston jälkeen valkoinen jäännös suodatettiin ja kuivattiin vakuumissa. Tämä kuivattu hartsipeptidiseos eketrahoitiin yleensä 5 %:11a etikkahappoa, lyofilisoitiin ja analysoitiin aminohappojen suhteen (tällä tavalla harteista poistettiin suunnilleen 90 % peptidistä). Mikäli aminohappoanalyysi oli tyydyttävä (+ 5 % teoreettitisesta) edellä kuvatulla tavalla valmistetut peptidit käytettiin suoraan; ellei, ne puhdietettiin toivottuun puhtauteen tarvittaessa CMC-kromatografian, partitiokromatografian tai HPLC-kromatografian avulla. Saannot olivat välillä % riippuen peptidistä ja halutusta puhtausasteesta. Peptidit liitettiin tarvittaessa proteiinikantajaan, KLH, peptidin kysteiinin kautta, jolloin käytettiin N-maleimidobentsoyyli-Nhydrokeimeripihkahappoesteriä <MBS) liittämisaineena kuten Liu et al. <Liu, F., Zinnecker, M., Hamaoka, T., Katz. D.H., Biochemietry, 18 (1979) ) ovat kuvanneet. Synteeeistä saatiin peptidi (1), joka mandollisesti oli liitetty proteiinikantajaan. Esimerkki 2 Peptidin (2) SerIlePheTyrThrTyrGlyAlaAlaProAlaArgIleSerVal- ProTyrValGlyIle synteesi Peptidi (2) syntetisoitiin samalla tavalla kuin peptidi (1) esimerkissä 1 paitsi, että aminohappojen lisäysjärjestys vastasi peptidin (2) aminohappotähdeeekvenesiä.

18 Esimerkit 3 ia 4 Peptidien <3) SerllePheTyrThrTyrGlyThrAlaProAlaArglleSerVal- ProTyrValGlyLeu ja <4) SerIlePheTyrThrTyrGlyAlaAlaProAlaArgIleSerValProTyrVal- GlyLeu synteesi suoritettiin samalla tavalla kuin esimerkissä 1 paitsi, että aminohappojen lisäysjärjestys vastasi peptidien (3) ja (4) aminohappotähdeeekveneeiä. Poliovirusta koskevat synteettiset peptidit On valmistettu useita synteettisiä peptidejä, joista jokainen sisältää noin kandenkymmenen aminohappotähteen sekvensein. Neljä näistä sekvensseietä vastaa pääasiassa Mahoney'n ja Sabin'in tyyppiä 1 olevien ja Leon'in tyyppiä 3 olevan polioviruksen VP 1 -kuoriproteeiinien aminohapposekveneeiä aminohappoasemien alueella noin 182:sta noin 201:een. Mahoney'n ja Sabin'in tyyppiä 1 olevien poliovirusten VP 1 -aminohappotähdesekvenseit ovat identtisiä eeitetyillä alueilla. Nämä neljä eekvenssiä on esitetty jäljempänä PP2-merkityn tämän kekeinnön mukaisen synteettisen peptidin sekvenssinä vasemmalta oikealle ja suunnassa aminopäätteestä karbokeipäätettä kohti seuraavasti: PP2: SerIlePheTryThrTyrGlyThr<A1a)AlaProAlaArgIleSer ValProTyrValGlyIle<Leu), jossa suluissa esitetyt aminohappotähteet kummassakin edellä esitetyseä sekvenesiseä voi riippumattomasti korvata välittömästi sulusta vasemmalla olevan viereisen aminohappotähteen, siis lähempänä aminopäätettä olevan aminohappotähteen. Vertailua varten voidaan nähdä, että PP2-aminohappotähdesekveneei vastaa pääasiassa tyyppiä 1 ja 3 olevien poliovirusten VP 1 - kuoren aminohappotähdeeekvenseiä alueella noin 182:sta noin 201:een. Edellä esitetty PP2-aminohappotähdesekvensei edustaa vähintään neljää keksinnön mukaista peptidiä. Alueen neljällä synteettisellä peptidillä on seuraavassa esitetty aminohappoeekvensei, joka on merkitty PP2a, PP2b, PP2c ja PP2d:

19 PP2a: SerIlePheTyrThrTyrGlyThrAlaProAlaArgIleSer ValProTyrValGlyIle PP2b: SerIlePheTyrThrTyrGlyAlaAlaProAlaArgIleSer ValProTyrValGlyIle PP2c: SerIlePheTyrThrTyrGlyThrAlaProAlaArgIleSer ValProTyrValGlyLeu PP2d: SerIlePheTyrThrTyrGlyAlaAlaProAlaArgIleSer ValProTyrValGlyLeu Koemenetelmät ia rokotukset Jokainen kuvassa esitetyistä neljästä synteettiseetä peptidistä syntetisoitiin, samoin kuin useita muita peptidejä, jotka vastasivat tyyppiä 1 olevan polioviruksen VP 1 -kuoren muita asemia, käyttämällä edellä esitettyä menetelmää, jotka on selostettu artikkelissa Bittle et.al., Nature, 298; (heinäkuu 1982). Lisättiin karboksi-pääte-cys-tähteitä kytkentää varten N-maleimidobentsoyyli-N-hydroksieukkiiniimidiesterin (MBS) ja avaimenreikämaljakotilo-hemosyaniinin välityksellä kantajina konjugaattien muodostamiseksi, käyttämällä edellä esitettyä menetelmää. Konjugaateista, joiden sekvenssit vastasivat tyyppi 1:n kuoriproteiineja, tehtiin rokotteita käyttäen niitä peptidimääriä annosta kohti ja niitä kolmea apuainejärjeatelmää, jotka on esitetty mainitun Bittle et al:in taulukon 1 alla. Rokotettuina isäntäeläiminä käytettiin kaneja. Tehokkuusmäärityksiä tehtiin määrittämällä ne vasta-aineseerumin laimennukset, jotka saivat aikaan 50 %:esa kiinteistä viljelyputkista, jotka sisälsivät yksikerrokeisia soluviljelmiä, euojauksen tartunnalta lisättäeseä tyyppi 1 poliovirusta. BSC-1-soluja kasvatettiin L-15-väliaineesea 5 % naudaneikiön seerumissa. Kun viljellyt solukerrokset olivat muodostuneet, istutettiin putkiin ennalta määrätty määrä eläviä Sabin'in tyyppi 1 polioviruspartikkeleita ja rokotettujen kanien seerumia. Istutettuja

20 viljeltyjä soluja tarkastettiin sopivien vertailujen kanssa 2-8 päivää tämän jälkeen. Polioviruspartikkeleita istutettiin kudosviljelmän tartunta-annoksen (TCID) kerrannaisina, jolloin yksinkertainen annosmäärä on riittävä tartuttamaan ja tappamaan 50 % samanlaisista yksikerroksisista viljellyistä soluista (TCID ), kuten määritettiin ennen jokaisen määrityssarjan suorittamista. 50 Näiden määritysten vähimmäis-tcid 50 oli 50, siis istutukseen käytettiin 50 kertaa TCID 50 polioviruspartikkeleita. Käytettiin kerrannaisia 50, 100, 900 ja 1000 TCID 50 seerumlaimennuksen ollessa 1:16, 1:32, 1:64, 1:128 ja 1:256 vastaseerumin tiitteriarvojen saamiseksi tavanomaista tekniikkaa käyttämällä. Kutakin seerumi-virus-laimennusta varten käytettiin ainakin neljää yksikerroksista viljelmää sisältävää astiaa tai putkea. Yksi tai kaksi kania rokotettiin eri kantajaan kytketyillä peptideillä noudattamalla edellä esitettyä rokotusjärjestystä. Näiden määritysten tulokset on esitetty alla olevassa taulukos- sa 10. Tyyppi 1 polion vasta-aine-neutralointitiitterit soluissa eri peptideillä Taulukko 10 viljellyissä KLHL-peptidi Polioviruksen istutus TCID :n kerrannaisina 50 Antigeeni , 14 -,- -,- -, , 32 27, 25 13, 20 11, ,- -,- -,- -, ,- -,- -,- -, ,- -,- -,-, -, , 13 10, 8 -,- -,-

21 Numerot tarkoittavat aminohappotähteiden asemaa aminopäätteestä laskien Mahoney-tyyppiä VP 1 olevassa kuoressa, jota keksinnön mukaisten synteettisten peptidien aminohappotähteiden sekvenssi pääasiassa vastaa. 2 Tiitterit on esitetty seerumin niinä laimennuksina, joita tarvitaan 50 % suojauksen aikaansaamiseksi kullakin TCID 50 - kerrannaisella. Tiitteri 8 tarkoittaa täten, että seerumin 1-8 laimennusta sai aikaan halutun suojauksen jne. Tässä taulukossa tarkoittavat viivat että tiitteri oli alle 1:8. Kaksi tiitteriarvoa osoittaa, että kaksi kania rokotettiin esitettyä peptidiä sisältävänä rokotteella. Edellä esitetyt arvot osoittavat, että poliotyypin 1 VP 1 -kuoressa on kaksi antigeenideterminanttialuetta. Nämä determinanttialueet sijaitsevat aminohappotähdeasemissa noin ja asemissa noin Arvot osoittavat myös, että peptidi, joka vastasi pääasiassa asemia noin , sai aikaan suojauksen suuremmalla viruskonsentraatiolla kuin toinen peptidi. Picornavirusta koskevat synteettiset Peptidit Edellä esitetyt polioviruksen antigeeniaillä kuoriproteiineilla saadut tulokset edustavat laajemman keksinnön kahta spesifistä sovellutuemuotoa, joka keksintö kohdistuu yleisesti Picornavirusten heimoon eikä poliovirukseen. Tämä laajempi keksintö koskee synteettisiä antigeenisiä peptidejä, joista jokainen sisältää noin 20 aminohappotähteen sekvensein, joka ainakin aminohappotähteiden sekvenssin osalta vastaa Picornaviruksen antigeenisen kuoriproteiinin aluetta, joka löytyy noin %:n päässä aminohappotähteiden sekvenssin pituu-

22 desta antigeenisen kuoriproteiinin aminopäätteestä. Nämä synteettiset peptidit ovat neutraaleja ja niissä on neutraali tai mieluummin positiivinen nettoionivaraus fysiologisissa pharvoissa, lukuunottamatta mandollista karboksyyli- tai alfaaminopääteryhmistä johtuvaa varausta. Neutraalin tai positiivisen nettovarauksen olemassaolo voidaan helposti määrittää elektroforeesimääritykeellä fysiologisissa ph-arvoissa tai tutkimalla aminohappotähdesekvenseiä ja tuntien erillisten aminohappotähteiden pk a -arvot. Edellä esitettyjä oynteettieiä peptidejä voidaan käyttää yksin polymeerinä, jossa peptidiyksiköt on kytketty yhteen hapetetuilla systeiinitähteillä, tai kytketty kantajaan konjugaattina yhdessä fysiologisesti siedettävien laimentimien, kuten veden tai apuaineen kanssa rokotteen muodostamiseksi, joka annettuna isäntäeläimeen tehokkaana määränä kykenee synnyttämään vasta-aineiden tuotannon, jotka reagoivat sen Picornaviruksen kanssa, jonka kuoriproteiinin sekvenssiä peptidi vastaa tai pääasiassa vastaa, suojaten täten isäntää tältä Picornavirukselta. Tätä eynteettistä peptidiä, joko yksin polymeerinä tai konjugaattina, voidaan myös käyttää edellä esitetyllä tai jäljempänä esitettävällä tavalla niitä noin 20 aminohappotähdettä sisältäviä peptidejä varten, joiden sekvenesit vastaavat tai pääasiassa vastaavat edellä esitettyä aminohappotähdesekvenssiä. Tutkittaessa edellä esitetyn tyyppiä 1 olevan poliovirukeen arvoja huomataan, että peptidit, joiden eekvenesit vastaavat pääasiassa kuoren aminohappotähdeasemia noin 182:sta noin 201: een aminopäätteestä laskien, ovat huomattavia neutraloivien vasta-aineiden tuottajia tätä virusta vastaan. Synteettinen peptidi määrittelee tällöin tyyppiä 1 olevan poliovirukeen neutraloivia vasta-aineita tuottavan determinanttialueen.

23 Tyyppiä 1 olevan polioviruksen antigeeninen kuori sisältää yhteensä 302 aminohappotähdettä sekvenesissään. Tyyppiä 1 olevan polioviruksen neutraloivia vasta-aineita tuottava determinantti sijaitsee täten alueella noin %:n etäisyydellä tämän antigeenisen kuoren aminohappotähdesekvenssin aminopäätteestä, laskettuna edellä esitetyllä tavalla. Kuvassa esitettyjä aminohappotähdesekvenssejä ja helposti saatavia asiaan kuuluvia pka -arvoja tutkittaessa huomataan, että kunkin sekvensein niiden tähteiden, joilla on positiivinen ionivaraus fysiologisissa ph-arvoissa (Arg, Lys ja His), lukumäärä on suurempi kuin niiden tähteiden, joilla on negatiivinen ionivaraus näissä ph-arvoissa <Asp ja Glu), lukumäärä kaikissa sekvenseeissä paitsi yhdessä. Tämän keksinnön mukaisilla synteettisillä antigeenisillä peptideillä on tyypillisesti neutraali tai positiivinen nettovaraus, lukuunottamatta amino- ja/tai karboksyylipääteryhmien aiheuttamia mandollisia ionivarauksia. Mieluimmin näillä peptideillä on positiivinen nettoionivaraus. Nämä peptidit ovat myös mieluimmin

24 vesiliukoisia. Näyttää kuitenkin siltä, että synteettisen antigeenisen peptidin neutraali tai positiivinen nettoionivaraus ei ole yhtä tärkeä peptidin antigeenisyyteen nähden-kuin se seikka, että peptidin aminohappotähdesekvenssi vastaa ainakin neutraloivia vasta-aineita tuottavan antigeenisen kuoren aminohappotähdesekvenssiä, joka sijaitsee alueella noin % sekvenssin pituudesta aminopäätteestä. Diagnostiikka Keksinnön mukaisia menetelmiä voidaan käyttää diagnoosikokeiden, kuten immuunikokeiden, valmistamiseen, joissa on välttämätöntä, että on käytettävissä löydettävän organismin vasta-aine tai synteettinen antigeeni, joka jäljentää löydettävän organismin determinanttia. Tällainen diagnostiikka käsittää esimerkiksi entsyymi-immuunikokeet, fluoresenssi-immuunikokeet ja muun tekniikan, jossa joko vasta-aine tai antigeeni on merkitty todettavalla merkkiaineella. Käytettäessä esimerkiksi Voller et al:in, "Enzyme Immune Assays in Diagnostic Medicine", Bulletin of the World Health Organization, Vol. 53, s (1976), esittämää kaksoisvasta-ainetekniikkaa voidaan käyttää ELISA-koetta diagnoosikokeen aikaansaamiseksi. Edellä esitetyt vasta-peptidin vasta-ainetiitteriarvot saatiin käyttämällä kaksoisvasta-aine-elisa:a samoin kuin edellä esitetyn Bittle et al:in taulukossa 1 esitetyt arvot. Tiedot tästä ELISA:sta on esitetty Bittle et al:in taulukon 1 alla. Tämän keksinnön mukainen diagnostinen järjestelmä Picornaviruksen antigeenin läsnäolon toteamiseksi sisältää keksinnön mukaisen peptidin avulla muodostettuja vasta-aineita biologisesti aktiivisessa muodossa yhdessä välineen kanssa immuunireaktion toteamiseksi. Sekoitettaessa ruumiinkomponenttiin, kuten seerumiin, virtsaan tai kudosuutteeseen, vasta-aineet immuunireagoivat Picornaviruksen antigeenin kanssa muodostaen immuunireaktantin, ja indikaatioväline ilmaisee tämän immuunireaktion.

25 Ruumiinkomponentti voidaan esimerkiksi päällystää ELISA-koeputkelle ja inkuboida keksinnön mukaisilla vasta-aineilla, kuten kaneissa synnytetyillä, käyttämällä hyvin tunnettua tekniikkaa. Kun kaikki mandollisesti ei-immuunireagoineet vasta-aineet on puhdistamalla poistettu, lisätään toinen entsyymisidottu vasta-aine, joka on muodostettu ensin mainittua tyyppiä olevan vasta-aineen avulla, kuten vuohi-vastakanivasta-aineita, jotka sisältävät sidottua alkaalista fosfataasia, ja inkuboidaan ELISA-putkessa. Toisten vasta-aineiden mandollinen ylimäärä poistetaan puhdistamalla jättäen kaikki ne fosfataasisidotut vuohi-vastakani-vasta-aineet, jotka sitoutuvat keksinnön mukaiseen vasta-aineeseen, ELISA-putkeen. Entsyymisubstraatin, kuten p-nitrofenyylifosfaatin myöhempi sekoittaminen saa aikaan merkin immuunireaktantin muodostumisesta ja täten että ruumiinkomponenttiin sisältyi Picornaviruksen antigeeni. Keksinnön mukaiseen vasta-aineeseen voidaan sitoa radioaktiivinen alkuaine, kuten 125 J, inkubointivälineen muodostamiseksi. Tällöin voidaan esimerkiksi ruumiinkomponentti esipäällystää koeputkelle, minkä jälkeen inkuboidaan radioaktiivisilla vasta-aineilla ja vasta-aineiden ylimäärä poistetaan puhdistamalla putkesta. Putkeen puhdistuksen jälkeen jäävä radioaktiivisuus muodostaa merkin immuunireaktantin syntymisestä. Tämän keksinnön eräs toinen sovellutusmuoto koskee diagnostista järjestelmää Picornaviruksen antigeenin läsnäolon toteamiseksi edellä esitetyn tapaisessa ruumiinkomponentissa. Tämä järjestelmä on erikoisen edullinen kilpailevissa kokeissa ja se käsittää eri säiliöissä olevan ensimmäisen reagenssin ja toisen reagenssin. Ensimmäinen reagenssi sisältää keksinnön mukaisen synteettisen antigeenisen peptidin biologisesti aktiivisessa muodossa. Toinen reagenssi sisältää biologisesti aktiivisessa muodossa olevia vasta-aineita, jotka reagoivat tällaisen peptidin kanssa, kuten peptidin avulla muodostettujen vasta-aineiden kanssa. Järjestelmään sisältyy myös väline peptidin ja vasta-aineiden välisen

26 immuunireaktion osoittamiseksi, joko eri säiliössä, kun käytetään fosfataasisidottuja vuohi-vastakani-vasta-aineita ja tämän substraattia, tai yhdessä vasta-aineiden kanssa, kun radioaktiivisia alkuaineita on sidottu vasta-aineisiin. Ennalta määrättyjen ensimmäisen ja toisen reagenssin määrien sekoittaminen koestettavan ruumiinkomponentin ennalta määrätyn määrän läsnäollessa saa aikaan tietyn laajuisen immuunireaktion, jonka ilmaisuväline osoittaa. Immuunireaktion määrä on erilainen kuin tunnetun immuunireaktion määrä, kun ruumiin komponenttiin sisältyy Picornaviruksen antigeeni. Tavanomaisessa käytännön suorituksessa ruumiinkomponentti esiinkuboidaan vasta-aineella ja tämä koostumus inkuboidaan sitten ELISA-putken seinään sidotulla peptidillä. Putken puhdistaminen vasta-aine-picornavirusantigeenikompleksin poistamiseksi jättää peptidin ja vasta-aineen immuunireaktantin, jonka läsnäolo ja määrä voidaan osoittaa ilmaisuvälineen avulla. Kokonaisten, koskemattomien, biologisesti aktiivisten vastaaineiden käyttö ei ole välttämätön monessa diagnostisessa järjestelmässä, kuten edellä esitetyssä kilpailevassa kokeessa. Pikemmin tarvitaan vain vasta-ainemolekyylin biologisesti aktiivista idiotyyppiä sisältävää, antigeeniä sitovaa tunnustusosaa. Idiotyyppiä sisältäviä vasta-aineosia havainnollistavat Fab:na ja F(ab') 2 :na tunnetut vasta-aineosat, joita valmistetaan tyypillisesti kokonaisilla vasta-aineilla suoritetuilla hyvin tunnetuilla entsymaattisilla reaktioilla. Kokonaisia, vahingoittumattomia vasta-aineita, Fab-, F(ab') 2 - osia ja sen tapaisia, jotka sisältävät vasta-aineiden idiotyyppisiä alueita, kutsutaan tässä idiotyyppiä sisältäviksi polyamideiksi. Sanontaa "idiotyyppiä sisältävä polyamidin käytetään oheisissa patenttivaatimuksissa kattamaan tällaisten diagnostisissa tuotteissa tai menetelmissä hyödyllisten molekyylien ryhmän. Vaikkakin Fab- tai F(ab') 2 -vasta-aineosia voidaan käyttää diagnostisen menetelmän tai tuotteen idiotyyppiä sisältä-

27 vässä polyamidissa, käytetään tavallisesti mieluummin kokonaisia, koskemattomia vasta-aineita, senkin takia, että vasta-aineen Fab- tai F(ab') -osan valmistaminen edellyttää lisäreaktioita 2 ja seerumien puhdistusta. Menetelmät ja kirjallisuus Tälle keksinnölle ainutlaatuisia menetelmiä ja aineita selostetaan viittaamalla kulloinkin kyseiseen menettelyyn. Yleensä ovat kuitenkin laboratoriotekniikka, menetelmät ja käytetyt aineet samoja kuin molekyylibiologiassa ja biokemiassa yleisesti käytetyt. Viitataan erityisesti seuraaviin teoksiin METHODS IN ENZYMOLOGY, Colowick, S.P. ja Kaplan, N.O., Editors, Academic Press, New York; METHODS IN IMMUNOLOGY AND WH=OCHEMISTRY, Academic Press, HANDBOOK OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY, Chemical Rubber Publishing Company, ja CELL BIOLOGY: A COMPREHENSIVE TREATISE, Goldstein ja Prescott, Academic Press, N.Y., N.Y. mielenkiintoa olevien yleisten aineiden ja menetelmien selostamiseen nähden. Seuraavat julkaisut esittävät erityisiä tunnettuja vaiheita ja menetelmiä samoin kuin tekniikan nykyistä tasoa:

28 Kirjallisuus Baltimore, D., Cold Spring Harbor Symp., Quant. Biol. 39, (1974). 2. Oskarsson, M.K., Eider, J.H., Gautsch, J.W., Lerner, R.A. and Vande Woude, G.F., Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A. 75, (1978). 3. Gautsch, J.W., Eider, J.H., Schindler, J., Jensen, F.C., ja Lerner, R.A., Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A. 75, (1978). 4. Jamjoon, G.A., Naso, R.B. ja Arlinghaus, R.B., Virol. 78, (1977). 5. Famulari, N.C., Buchhagen, D.L., Klenk, H.D., ja Fleissner, E., J. Virol. 20, (1976). 6. Witte, O.N., Tsukamoto-Adey, A. ja Weissman, L.L., Virol. 76, (1977). 7. Fan, H. and Verma, I.M., J. Virol. 26, (1978). 8. Sutcliffe, J.G., Shinnick, T.M., Lerner, R.A., Johnson, P. ja Verma, I.M., Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 44, in press (1979). 9. Sutcliffe, J.G., Shinnick, T.M., Verma, I.M. ja Lerner, R.A., Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A. in press (1980). 10. Xarglin, A. ja Merrifield, R.B., Ann. Rev. Biochem. 39, (1970). 11. Pederson, F.S. ja Haseltine, W.A., J. Virol. 33, (1980). 12. Atlas of Protein Sequence and Structure, Vol. 5, Sup. 3, M.O. Dayhoff, ed., Natl. Biomed, Res. Found., pub. Washington, D.C. (1978). 13. Dayhoff, M.O., Schwartz, R.M. ja Orcutt, B.C., pp. 352, op. cit. 14. Fisher, R.A., The General Theory of Natural Selection, Clarendon Press, Oxfore (1930). 15. Eider, J.H., Gautsch, J.W., Jensen, F.C., Lerner, R.A., Harley, J.W. ja Rowe, W.P., Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A. 74, (1977).

29 Lerner, R.A., Jensen, F.C., Kennel, S.J., Dixon, F.J., Roches, G.D. ja Francke, U., Proc. Nat. Acad. Sci., U.S.A. 69, (1972). 17. Niman, H.L. ja Elder, J.H., Proc. Nat. Acad. Sci., U.S.A., in press (1980). 18. Edwards, S.A. ja Fan, H., J. Virol. 30, (1979). 19. Kitagawa, T. ja Ailawa, T., J. Biochem. (Tokyo) 79, 233 (1976). 20. Liu, F., Zinnecker, M., Hamaoka, T. ja Katz, D.H. Biochem. 18, 690 (1979). 21. Katz, David H., U.S. Patent No. 4,191,668, March 4, J. Exp. Med., 134: (1971). 23. J. Exp. Med., 136: , (1972). 24. J. Exp. Med., 138: (1973). 25. J. Exp. Med., 139: (1974). 26. Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A., 71: Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A., 73: (1976). 28. J. Immunol. 144: (1975). 29. J. Immunol. 120: (1978). 30. J. Exp. Med., 139: (1974). 31. Humphrey, J.H. ja White, R.G., Immunology for Students of Medicine, Blackwell, Oxford (1970). 32. Katz, David H. and Benacerraf, Baruj, Immunological Tolerance, Mechanisms and Potential Therapeutic Applications, Academic Press (1974). 33. Newsweek, March 17, 1980, pp Chemical & Engineering News, June 23, 1980, p Milstein, C., Differentiation 13: 55 (1979). 36. Howard, J.C., Butcher, G.W., Galfre', G., Milstein, C. ja Miistein, C.P., Immunol. Rev. 47: 139 (1979). 37. Hammerling, G.J., Hammerling, U., ja Lemke, H., Immunogenetics 8: 433 (1978). 38. Shulman, M., Wilde, C.D., ja Kohler, G., Nature 276: 269 (1978).

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. - (51) Kv.lk.4 "-' A 61K 39/12. (24) Alkupäivä Löpdag 01.06.84

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. - (51) Kv.lk.4 -' A 61K 39/12. (24) Alkupäivä Löpdag 01.06.84 (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT C (45) PAÖntti Myörinetty Paten't - beviljats - (51) Kv.lk.4 "-' A 61K 39/12 (21) Patenttihakemus Patentansökning 842215 SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus

Lisätiedot

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNI NGSSKRIFT 83662. (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 C 07K 15/00, G 01N 33/68. (24) Alkupäivä - Löpdag 02.07.

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNI NGSSKRIFT 83662. (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 C 07K 15/00, G 01N 33/68. (24) Alkupäivä - Löpdag 02.07. (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNI NGSSKRIFT 83662 (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 C 07K 15/00, G 01N 33/68 (21) Patenttihakemus - Patentansökning 812092 SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus Patent-

Lisätiedot

SUOMI-FINLAND (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 07.11.85 (FI)

SUOMI-FINLAND (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 07.11.85 (FI) (13) (11) KUULUTUSJULKA I SU UTLAGGN I NGSSKR I FT 84558 C ( 3) T t t y (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 2:1 A 61K 39/12, C 07K 7/08 (21) Patenttihakemus - Patentansökning 854396 SUOMI-FINLAND (22) Hakemispäivä

Lisätiedot

(B) (11) KUSJULKAISU UTLAGG NINGSSKRIFT. C t -1 n. (51) Kv.lk.5 Int.c1.5 A 61K 39/29, C 12N 7/08. (21) Patenttihakemus - Patentansökning 861966

(B) (11) KUSJULKAISU UTLAGG NINGSSKRIFT. C t -1 n. (51) Kv.lk.5 Int.c1.5 A 61K 39/29, C 12N 7/08. (21) Patenttihakemus - Patentansökning 861966 (B) (11) KUSJULKAISU UULUT UTLAGG NINGSSKRIFT 86376 C t -1 n. (51) Kv.lk.5 Int.c1.5 A 61K 39/29, C 12N 7/08 SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyrelsen (21) Patenttihakemus

Lisätiedot

(FI) (41) Tullut julkiseksi - Blivit offentlig 05.12.85

(FI) (41) Tullut julkiseksi - Blivit offentlig 05.12.85 (B) (11)KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 81452 C ( ) (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 _ G O1N 33/571, C 07K 7/04, A 61K 39/00 (21) Patenttihakemus - Patentansökning 854839 (22) Hakemispäivä - Ansökningsdag 05.12.85

Lisätiedot

Arvokkaiden yhdisteiden tuottaminen kasveissa ja kasvisoluviljelmissä

Arvokkaiden yhdisteiden tuottaminen kasveissa ja kasvisoluviljelmissä Arvokkaiden yhdisteiden tuottaminen kasveissa ja kasvisoluviljelmissä Siirtogeenisiä organismeja käytetään jo nyt monien yleisten biologisten lääkeaineiden valmistuksessa. Esimerkiksi sellaisia yksinkertaisia

Lisätiedot

Peptidisynteesi. SPPS:n Periaate

Peptidisynteesi. SPPS:n Periaate Tapio Nevalainen Lääkeainesynteesit II 2011 eptidisynteesi i eptidisynteesi Suoritetaan yleensä kiinteän faasin pinnalla; solid phase peptide synthesis (SS) Suuret peptidiainemäärät valmistetaan liuosfaasissa.

Lisätiedot

Bioteknologian tutkinto-ohjelma Valintakoe Tehtävä 3 Pisteet / 30

Bioteknologian tutkinto-ohjelma Valintakoe Tehtävä 3 Pisteet / 30 Tampereen yliopisto Bioteknologian tutkinto-ohjelma Valintakoe 21.5.2015 Henkilötunnus - Sukunimi Etunimet Tehtävä 3 Pisteet / 30 3. a) Alla on lyhyt jakso dsdna:ta, joka koodaa muutaman aminohappotähteen

Lisätiedot

I1111111 111111111IlIl 11111111111111111111181111111111i

I1111111 111111111IlIl 11111111111111111111181111111111i I1111111 111111111IlIl 11111111111111111111181111111111i F I00008 111111 il I I Ill (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 91688. L.-*, 1.-Lu-..IC " _ b./ n * I. - A I... I. 1. n!. : :,.:. (17) :-

Lisätiedot

Sanna Nikunen ELL 4.10.2012

Sanna Nikunen ELL 4.10.2012 Sanna Nikunen ELL 4.10.2012 Kuuluu heimoon Orthomyxoviridae, joka jaetaan kahteen sukuun; Influenssa A- ja B- virukset sekä influenssa C-virukset A-virukset eläimillä ja ihmisillä, B- virukset harvinaisempia,

Lisätiedot

Synteettinen biologia Suomessa: Virukset synteettisen biologian työkaluina

Synteettinen biologia Suomessa: Virukset synteettisen biologian työkaluina Synteettinen biologia Suomessa: Virukset synteettisen biologian työkaluina Minna Poranen Akatemiatutkija Helsingin yliopisto FinSynBio-ohjelma Suomen Akatemia Virukset synteettisen biologian työkaluina

Lisätiedot

ENTSYYMIKATA- LYYSIN PERUSTEET (dos. Tuomas Haltia)

ENTSYYMIKATA- LYYSIN PERUSTEET (dos. Tuomas Haltia) ENTSYYMIKATA- LYYSIN PERUSTEET (dos. Tuomas Haltia) Elämän edellytykset: Solun täytyy pystyä (a) replikoitumaan (B) katalysoimaan tarvitsemiaan reaktioita tehokkaasti ja selektiivisesti eli sillä on oltava

Lisätiedot

GLUTEENIANALYTIIKKA KELIAKIAN KANNALTA. Viljateknologien Helmikollokvio Hartwall, Lahti 8.2.2008 Päivi Kanerva

GLUTEENIANALYTIIKKA KELIAKIAN KANNALTA. Viljateknologien Helmikollokvio Hartwall, Lahti 8.2.2008 Päivi Kanerva GLUTEENIANALYTIIKKA KELIAKIAN KANNALTA Viljateknologien Helmikollokvio Hartwall, Lahti 8.2.2008 Päivi Kanerva Gluteenittomuus Gluteenittomia tuotteita koskevan standardin on asettanut Codex Alimentarius

Lisätiedot

Patentti myönnetty' Patent medelat 10 V 191

Patentti myönnetty' Patent medelat 10 V 191 3 UO M I-FI N LAN D 11 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 3 6 2 5 Kv.11(11M.C1 C 12 k 5/00 UJXL 30 h 6 Patentti myönnetty' Patent medelat 10 V 191 Patenttihakemus Patentansökning 2788/67 Hakemispäivä

Lisätiedot

Nivelreuman serologiset testit: mitä ne kertovat? LT, apulaisylilääkäri Anna-Maija Haapala TAYS Laboratoriokeskus

Nivelreuman serologiset testit: mitä ne kertovat? LT, apulaisylilääkäri Anna-Maija Haapala TAYS Laboratoriokeskus Nivelreuman serologiset testit: mitä ne kertovat? LT, apulaisylilääkäri Anna-Maija Haapala TAYS Laboratoriokeskus Sisältö 1. Nivelreuma: etiologia, esiintyvyys, diagnostiikka 2. Nivelreuman serologiset

Lisätiedot

Miten rokottaminen suojaa yksilöä ja rokotuskattavuus väestöä Merit Melin Rokotusohjelmayksikkö

Miten rokottaminen suojaa yksilöä ja rokotuskattavuus väestöä Merit Melin Rokotusohjelmayksikkö Miten rokottaminen suojaa yksilöä ja rokotuskattavuus väestöä Merit Melin Rokotusohjelmayksikkö 1 ESITYKSEN SISÄLTÖ Miten rokottaminen suojaa yksilöä? Immuunijärjestelmä Taudinaiheuttajilta suojaavan immuniteetin

Lisätiedot

BI4 IHMISEN BIOLOGIA

BI4 IHMISEN BIOLOGIA BI4 IHMISEN BIOLOGIA MITÄ ROKOTUKSIA? Muistatko mitä rokotuksia olet saanut ja minkä viimeiseksi? Miten huolehdit koulun jälkeen rokotuksistasi? Mikrobit uhkaavat elimistöä Mikrobit voivat olla bakteereita,

Lisätiedot

KUULUTUSjULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 409_22 30. 1;), 10 VII 1969 : Pat,3:it IrL3ddelat. Patenffihakemus Patentansökning 2303/63

KUULUTUSjULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 409_22 30. 1;), 10 VII 1969 : Pat,3:it IrL3ddelat. Patenffihakemus Patentansökning 2303/63 SUOMI FINLAND Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyrelsen KUULUTUSjULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 409_22 Kv. IkJlnt. Cl. A 61 k 3/60 Uc/KI. 30. 1;), 10 VII 1969 : Pat,3:it IrL3ddelat Patenffihakemus

Lisätiedot

Alikuoret eli orbitaalit

Alikuoret eli orbitaalit Alkuaineiden jaksollinen järjestelmä Alkuaineen kemialliset ominaisuudet määräytyvät sen ulkokuoren elektronirakenteesta. Seuraus: Samanlaisen ulkokuorirakenteen omaavat alkuaineen ovat kemiallisesti sukulaisia

Lisätiedot

SUOMI-FINLAND 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFt43094

SUOMI-FINLAND 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFt43094 SUOMI-FINLAND 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFt Kv. lk./int. Cl. C 1 2 k 7/00 Lk./KI. 30 h 6 CO Patentti myönnetty 11 11971 Patent meddetat Patenttihakemus Patentansökning 2099/66 Hakemispkiivä Ansökningsdag

Lisätiedot

GEENITEKNIIKALLA MUUNNETTUJEN MIKRO-ORGANISMIEN SUUNNITEL- LUN KÄYTÖN TURVALLISUUDEN ARVIOINNISSA HUOMIOON OTETTAVAT TEKIJÄT

GEENITEKNIIKALLA MUUNNETTUJEN MIKRO-ORGANISMIEN SUUNNITEL- LUN KÄYTÖN TURVALLISUUDEN ARVIOINNISSA HUOMIOON OTETTAVAT TEKIJÄT 48 LIITE IV GEENITEKNIIKALLA MUUNNETTUJEN MIKRO-ORGANISMIEN SUUNNITEL- LUN KÄYTÖN TURVALLISUUDEN ARVIOINNISSA HUOMIOON OTETTAVAT TEKIJÄT Geenitekniikalla muunnettujen mikro-organismien suunnitellun käytön

Lisätiedot

SUO M 1-FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 43624

SUO M 1-FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 43624 SUO M 1-FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 43624 Kv. lk./int. Cl. A 61 k 23/02 C 12 k 5/00 30 h 6 Pat.hak. peruutettu Pat.ans. återtagen 3 V 1971 Patenttihakemus Patentansökning 1977/67 Hakemispäivä

Lisätiedot

Autoimmuunitaudit: osa 1

Autoimmuunitaudit: osa 1 Autoimmuunitaudit: osa 1 Autoimmuunitaute tunnetaan yli 80. Ne ovat kroonisia sairauksia, joiden syntymekanismia eli patogeneesiä ei useimmissa tapauksissa ymmärretä. Tautien esiintyvyys vaihtelee maanosien,

Lisätiedot

S UOM 1 FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 5 7 6 6

S UOM 1 FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 5 7 6 6 S UOM 1 FI N LAN D 0 KUULUTUSJULKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 4 5 7 6 6 Kv. lk./int. Cl. C 12 k 5/00 (5:» Uc./KI. 30 h 6 Patentti myönnetty Patent meddelat 11 IX 1972 Patenttihakemus Patentansökning 547 /6 9

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Nobivac L4 injektioneste, suspensio koirille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 1 ml:n annos sisältää: Vaikuttavat aineet: Inaktivoidut Leptospira

Lisätiedot

RESPIRATORY SYNCYTIAL VIRUS (RSV)

RESPIRATORY SYNCYTIAL VIRUS (RSV) RESPIRATORY SYNCYTIAL VIRUS (RSV) Infektioiden torjuntapäivät 8.11.2018 Espoo, Dipoli 8.11.2018 Respiratory syncytial virus/ Niina Ikonen 1 RS-VIRUS Virus eristettiin 1956 Aiheuttaa vuosittaisia epidemioita

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1/16 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Equilis injektioneste, suspensio, hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Annos (1 ml) sisältää: Vaikuttava(t) aine(et) Hevosen influenssaviruksien

Lisätiedot

SUOMI FINLAND (21) Patenttihakemus - Patentansökning 860015

SUOMI FINLAND (21) Patenttihakemus - Patentansökning 860015 111111111111111111111111111 1 111111111111111111 1 111111111111111111 1 111 F 0000B (B) (U)KUULUTUBJULKAIBU UTLAGGNINGSSKRIFT '''` Pat: - t :::13cl -J.t 27 C3 12:5 (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 A 61K 39/00,

Lisätiedot

vauriotyypit Figure 5-17.mhc.restriktio 9/24/14 Autoimmuniteetti Kudosvaurion mekanismit Petteri Arstila Haartman-instituutti Patogeeniset mekanismit

vauriotyypit Figure 5-17.mhc.restriktio 9/24/14 Autoimmuniteetti Kudosvaurion mekanismit Petteri Arstila Haartman-instituutti Patogeeniset mekanismit vauriotyypit Kudosvaurion mekanismit Autoimmuniteetti Petteri Arstila Haartman-instituutti Antigeenin tunnistus HLA:ssa pitää sisällään autoimmuniteetin riskin: jokaisella on autoreaktiivisia lymfosyyttejä

Lisätiedot

Source: http://industrydocuments.library.ucsf.edu/tobacco/docs/tqbv0109

Source: http://industrydocuments.library.ucsf.edu/tobacco/docs/tqbv0109 PATENTTI - JA REKI STERI HALLI TUS PATENTTIOSASTO Hakemus : _ Luokka : Tutkij a : Hakij a : Asiamies : Asiamiehen 893525 A 24D 001/18 KR Philip Morris Products Inc. Oy Borenius & Co Ab / Pia Hjelt, puh.

Lisätiedot

2 tutkittu alue n. 3 km

2 tutkittu alue n. 3 km Outokumpu Oy Malminetsintä Radiometrinen haravointi Korsnäs Heikki Wennervirta 10.1 e-14e201962 Työn tarkoitus Työstä sovittiin käyntini yhteydessa Korsnäsin kaivoksella 17.10,-19,10.1961 liitteenä olevan

Lisätiedot

Fysiikan, kemian ja matematiikan kilpailu lukiolaisille

Fysiikan, kemian ja matematiikan kilpailu lukiolaisille Fysiikan, kemian ja matematiikan kilpailu lukiolaisille 22.1.2015 Kemian tehtävät Kirjoita nimesi, luokkasi ja lukiosi tähän tehtäväpaperiin. Kirjoita vastauksesi selkeällä käsialalla tehtäväpaperiin vastauksille

Lisätiedot

Teabepäeva korraldamist toetab Euroopa Liit Eesti riikliku mesindusprogrammi 2013 2016 raames

Teabepäeva korraldamist toetab Euroopa Liit Eesti riikliku mesindusprogrammi 2013 2016 raames Teabepäeva korraldamist toetab Euroopa Liit Eesti riikliku mesindusprogrammi 2013 2016 raames Eesti mesinike suvine teabepäev Koht ja aeg: Olustvere Teenindus- ja Maamajanduskooli ruumides, 11.07.2015.a.

Lisätiedot

11. Elimistö puolustautuu

11. Elimistö puolustautuu 11. Elimistö puolustautuu Taudinaiheuttajat Tautimikrobit (= patogeenit): Bakteerit (esim. kolera), virukset (esim. influenssa), alkueliöt (esim. malaria), eräät sienet (esim. silsa) Aiheuttavat infektiotaudin

Lisätiedot

KEMIA. Kemia on tiede joka tutkii aineen koostumuksia, ominaisuuksia ja muuttumista.

KEMIA. Kemia on tiede joka tutkii aineen koostumuksia, ominaisuuksia ja muuttumista. KEMIA Kemia on tiede joka tutkii aineen koostumuksia, ominaisuuksia ja muuttumista. Kemian työturvallisuudesta -Kemian tunneilla tutustutaan aineiden ominaisuuksiin Jotkin aineet syttyvät palamaan reagoidessaan

Lisätiedot

AUTOVASTA-AINEET NIVELREUMASSA. Marja-Kaisa Koivula Sairaalakemisti, FT, dosentti

AUTOVASTA-AINEET NIVELREUMASSA. Marja-Kaisa Koivula Sairaalakemisti, FT, dosentti AUTOVASTA-AINEET NIVELREUMASSA Marja-Kaisa Koivula Sairaalakemisti, FT, dosentti Esityksen sisältö Johdanto Mitä uudelta niveltulehduspotilaalta tutkitaan? Käypähoito-suositus ja ACR/EULAR:n kriteerit

Lisätiedot

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT. (51) Kv.lk.5 - Int.c1.5 (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 85222 SUOMI-FINLAND (Fi) Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyrelsen (71)Hakija - Sökande (32) (33) (31) Etuoikeus - Prioritet 31.01.85 GB 8502399

Lisätiedot

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT. (10) Fl 110234 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 31.12.2002. (51) Kv.lk.7 - Int.kl.

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT. (10) Fl 110234 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 31.12.2002. (51) Kv.lk.7 - Int.kl. 1111111111 1111111111 1111 11111111 11111 1111 11111111 F1000B (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) Fl B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 31.12.2002 SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS

Lisätiedot

Käänteisestä rokotetutkimuksesta ratkaisu flavobakteeriongelmiin?

Käänteisestä rokotetutkimuksesta ratkaisu flavobakteeriongelmiin? Käänteisestä rokotetutkimuksesta ratkaisu flavobakteeriongelmiin? 26.3.2015 Kalaterveyspäivät, Tampere Krister Sundell Akvaattisen patobiologian laboratorio Åbo Akademi Flavobacterium psychrophilum Aiheuttaa

Lisätiedot

Rokottaminen - käytännön ohjeita pulmatilanteisiin

Rokottaminen - käytännön ohjeita pulmatilanteisiin Rokottaminen - käytännön ohjeita pulmatilanteisiin Th Nina Strömberg Rokotusohjelmayksikkö THL 5.4.2016 1 Rokottamisen muistisäännöt Rokottamisessa ja rokotussarjojen aikatauluttamisessa on tietyt lainalaisuudet,

Lisätiedot

3.3 Paraabeli toisen asteen polynomifunktion kuvaajana. Toisen asteen epäyhtälö

3.3 Paraabeli toisen asteen polynomifunktion kuvaajana. Toisen asteen epäyhtälö 3.3 Paraabeli toisen asteen polynomifunktion kuvaajana. Toisen asteen epäyhtälö Yhtälön (tai funktion) y = a + b + c, missä a 0, kuvaaja ei ole suora, mutta ei ole yhtälökään ensimmäistä astetta. Funktioiden

Lisätiedot

Kemialliset reaktiot ja reaktorit Prosessi- ja ympäristötekniikan perusta I

Kemialliset reaktiot ja reaktorit Prosessi- ja ympäristötekniikan perusta I Kemialliset reaktiot ja reaktorit Prosessi- ja ympäristötekniikan perusta I Juha Ahola juha.ahola@oulu.fi Kemiallinen prosessitekniikka Sellaisten kokonaisprosessien suunnittelu, joissa kemiallinen reaktio

Lisätiedot

a b c d + + + + + + + + +

a b c d + + + + + + + + + 28. 10. 2010!"$#&%(')'+*(#-,.*/1032/465$*784 /(9:*;9."$ *;5> *@9 a b c d 1. + + + 2. 3. 4. 5. 6. + + + + + + + + + + P1. Valitaan kannaksi sivu, jonka pituus on 4. Koska toinen jäljelle jäävistä sivuista

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Porcilis ColiClos injektioneste, suspensio sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 2 ml:n annos sisältää: Vaikuttavat aineet: Escherichia

Lisätiedot

KEMIA HYVÄN VASTAUKSEN PIIRTEET

KEMIA HYVÄN VASTAUKSEN PIIRTEET BILÄÄKETIETEEN enkilötunnus: - KULUTUSJELMA Sukunimi: 20.5.2015 Etunimet: Nimikirjoitus: KEMIA Kuulustelu klo 9.00-13.00 YVÄN VASTAUKSEN PIIRTEET Tehtävämonisteen tehtäviin vastataan erilliselle vastausmonisteelle.

Lisätiedot

LIITE EMEAN TIETEELLISET JOHTOPÄÄTÖKSET JA HYLKÄYSPERUSTEET

LIITE EMEAN TIETEELLISET JOHTOPÄÄTÖKSET JA HYLKÄYSPERUSTEET LIITE EMEAN TIETEELLISET JOHTOPÄÄTÖKSET JA HYLKÄYSPERUSTEET LÄÄKEVALMISTEKOMITEAN () 19. HEINÄKUUTA 2007 ANTAMAN VALMISTETTA NIMELTÄ NATALIZUMAB ELAN PHARMA KOSKEVAN LAUSUNNON UUDELLEENARVIOINTI Heinäkuussa

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Duvaxyn WNV injektioneste, emulsio, hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS 1 ml annos sisältää: Vaikuttava aine: Inaktivoitu Länsi-Niilin virus,

Lisätiedot

Ympäristöntutkimus 67301

Ympäristöntutkimus 67301 Ympäristöntutkimus 67301 Ympäristöntutkimussalkku 67301 Erinomainen uusi opetusmateriaali ympäristön tutkimiseen! Pohjautuu tutkivaan ja ongelmakeskeiseen lähestymistapaan, jossa lähtökohtana ovat lähiympäristöön

Lisätiedot

Tehtävä 1 2 3 4 5 6 7 Vastaus

Tehtävä 1 2 3 4 5 6 7 Vastaus Kenguru Benjamin, vastauslomake Nimi Luokka/Ryhmä Pisteet Kenguruloikka Irrota tämä vastauslomake tehtävämonisteesta. Merkitse tehtävän numeron alle valitsemasi vastausvaihtoehto. Jätä ruutu tyhjäksi,

Lisätiedot

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 83667. (51) Kv.lk.5 - Int.cl.5 C 12N 5/18, A 61K 39/012. (21) Patenttihakemus - Patentansökning 843142

(B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 83667. (51) Kv.lk.5 - Int.cl.5 C 12N 5/18, A 61K 39/012. (21) Patenttihakemus - Patentansökning 843142 (B) (11) KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT 83667 _. (51) Kv.lk.5 - Int.cl.5 C 12N 5/18, A 61K 39/012 SUOMI-FINLAND (FI) Patentti- ja rekisterihallitus Patent- och registerstyrelsen (21) Patenttihakemus

Lisätiedot

Hevosten rokottaminen. Eläinlääkäri Martti Nevalainen Intervet Oy, osa Schering-Plough konsernia

Hevosten rokottaminen. Eläinlääkäri Martti Nevalainen Intervet Oy, osa Schering-Plough konsernia Hevosten rokottaminen Eläinlääkäri Martti Nevalainen Intervet Oy, osa Schering-Plough konsernia Miksi rokotuttaa hevosia? Pyritään ennaltaehkäisemään tai lieventämään tartuntatauteja, jotka saattavat aiheuttaa

Lisätiedot

(12) PATENTMULKAISU 111111111111111!!!!!!!linillie PATENTSKRIFT (10) FI 107620 B. (51) Kv.lk.7 - Intk1.7 C12Q 1168. (24) Alkupäivä - Löpdag 18.11.

(12) PATENTMULKAISU 111111111111111!!!!!!!linillie PATENTSKRIFT (10) FI 107620 B. (51) Kv.lk.7 - Intk1.7 C12Q 1168. (24) Alkupäivä - Löpdag 18.11. (12) PATENTMULKAISU 111111111111111!!!!!!!linillie PATENTSKRIFT (10) FI 107620 B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 14.09.2001 SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS PATENT- OCH REGISTERSTYRELSEN

Lisätiedot

Luettelo tunnusnumeroista 1801 (1) Huom. (2)

Luettelo tunnusnumeroista 1801 (1) Huom. (2) 3300 N:o 899 OSA III Lisäykset Lisäys VIII MÄÄRÄYKSET TUNNUSMERKINNÖISTÄ SEKÄ VAARALLISTEN AINEIDEN LUETTELO Säiliövaunujen, monisäiliövaunujen, irrotettavilla säiliöillä varustettujen vaunujen ja säiliökonttien,

Lisätiedot

PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (12) FI 106564 B (10) (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 28.02.2001. (51) Kv.11c7 - Int. k1.

PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (12) FI 106564 B (10) (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 28.02.2001. (51) Kv.11c7 - Int. k1. (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 106564 B SUOMI - FINLAND (FI) (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 28.02.2001 (51) Kv.11c7 - Int. k1.7 C12N 15151, 7/00, A61K 39/29, GO1N 33/576 C120 1/70,

Lisätiedot

1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. SUISENG vet. Injektioneste, suspensio, sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS. Koostumus annosta kohti (2 ml):

1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI. SUISENG vet. Injektioneste, suspensio, sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS. Koostumus annosta kohti (2 ml): 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI SUISENG vet. Injektioneste, suspensio, sioille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Koostumus annosta kohti (2 ml): Vaikuttavat aineet: E. colin F4ab-fimbrian adhesiini 65 % ER

Lisätiedot

SUOIVII FINLAND (21) Patenttihakemus Patentansökning 883876

SUOIVII FINLAND (21) Patenttihakemus Patentansökning 883876 1111111 11111 1111 111111111111111111111111111111111111 F 10000B (B) (11)KUULUTUSJULKAISU UTLAGGNINGSSKRIFT C (45) Patentti myönnetty Patznt me1de1at 27 01 1997 (51) Kv.lk.6 - Int.c1.6 A 61K 39/09, C 12N

Lisätiedot

1 Tehtävät. 2 Teoria. rauta(ii)ioneiksi ja rauta(ii)ionien hapettaminen kaliumpermanganaattiliuoksella.

1 Tehtävät. 2 Teoria. rauta(ii)ioneiksi ja rauta(ii)ionien hapettaminen kaliumpermanganaattiliuoksella. 1 Tehtävät Edellisellä työkerralla oli valmistettu rauta(ii)oksalaattia epäorgaanisen synteesin avulla. Tätä sakkaa tarkasteltiin seuraavalla kerralla. Tällä työ kerralla ensin valmistettiin kaliumpermanganaatti-

Lisätiedot

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 106844 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.04.2001. (51) Kv.Ik.7 - Intk1.7

(12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 106844 B. (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.04.2001. (51) Kv.Ik.7 - Intk1.7 11111111111111i111111 100 11(311111111,111i1111111111i 1111111 (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI 106844 B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.04.2001 SUOMI - FINLAND (FI) (51) Kv.Ik.7

Lisätiedot

11111111111111 11 [II 1111

11111111111111 11 [II 1111 11111111111111 11 [II 1111 F (000101453B (12) PATENTTIJULKAISU PATENTS1CRIFT (10) FI 101453 B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.06.98 (51) Kv.lk.6 - Int.k1.6 SUOMI-FINLAND (FI) A 61K 39/012,

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Purevax Rabies injektioneste, suspensio 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 1 ml:n annos sisältää: Vaikuttava aine: Rabies rekombinantti canarypox-virus

Lisätiedot

Keskeiset käsitteet ja asiakirjaaineiston valmisteleminen, osa I

Keskeiset käsitteet ja asiakirjaaineiston valmisteleminen, osa I Keskeiset käsitteet ja asiakirjaaineiston valmisteleminen, osa I Yhdestä aineosasta koostuvat aineet Suvi Takala http://echa.europa.eu 1 Keskeiset käsitteet ja asiakirja-aineiston valmisteleminen, osa

Lisätiedot

NOBIVAC RABIES VET. Adjuvantti: Alumiinifosfaatti (2 %) 0,15 ml (vastaten alumiinifosfaattia 3 mg)

NOBIVAC RABIES VET. Adjuvantti: Alumiinifosfaatti (2 %) 0,15 ml (vastaten alumiinifosfaattia 3 mg) VALMISTEYHTEENVETO 1 ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Nobivac RABIES Vet 2 LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Per annos (1 ml): Vaikuttava aine: BHK-21-soluviljelmässä kasvatettua ja beeta-propionilaktonilla inaktivoitua

Lisätiedot

Virukset Materiaalitieteiden Rakennusaineina Suomalainen Tiedeakatemia

Virukset Materiaalitieteiden Rakennusaineina Suomalainen Tiedeakatemia Virukset Materiaalitieteiden Rakennusaineina Suomalainen Tiedeakatemia Mauri Kostiainen Molekyylimateriaalit-ryhmä Teknillisen fysiikan osasto Aalto-yliopisto Virukset materiaaleina Virus on isäntäsolussa

Lisätiedot

25.4.78 EUROOPAN YHTEISÖJEN VIRALLINEN LEHTI N:o L 113/13

25.4.78 EUROOPAN YHTEISÖJEN VIRALLINEN LEHTI N:o L 113/13 03/Nide 09 Euroopan yhteisöjen virallinen lehti 209 378L0387 \ 25.4.78 EUROOPAN YHTEISÖJEN VIRALLINEN LEHTI N:o L 113/13 ENSIMMÄINEN KOMISSION DIREKTIIVI annettu 18 päivänä huhtikuuta 1978 viljakasvien

Lisätiedot

VERIRYHMÄT JA VERIRYHMÄVASTA-AINEET

VERIRYHMÄT JA VERIRYHMÄVASTA-AINEET VERIRYHMÄT JA VERIRYHMÄVASTA-AINEET Raskaudenaikaiset veriryhmäimmunisaatiot 2018 Kati Sulin Biokemisti 12.4.2018 Sisältö Veriryhmät ABO Rh-veriryhmäjärjestelmä Sikiön veriryhmämääritykset äidin verinäytteestä

Lisätiedot

Asetus hyödyllisyysmallioikeudesta annetun asetuksen muuttamisesta

Asetus hyödyllisyysmallioikeudesta annetun asetuksen muuttamisesta Annettu Helsingissä 22 päivänä joulukuuta 1995 Asetus hyödyllisyysmallioikeudesta annetun asetuksen muuttamisesta Kauppa- ja teollisuusministerin esittelystä muutetaan hyödyllisyysmallioikeudesta 5 päivänä

Lisätiedot

b) Laske prosentteina, paljonko sydämen keskimääräinen teho muuttuu suhteessa tilanteeseen ennen saunomista. Käytä laskussa SI-yksiköitä.

b) Laske prosentteina, paljonko sydämen keskimääräinen teho muuttuu suhteessa tilanteeseen ennen saunomista. Käytä laskussa SI-yksiköitä. Lääketieteellisten alojen valintakokeen 009 esimerkkitehtäviä Tehtävä 4 8 pistettä Aineistossa mainitussa tutkimuksessa mukana olleilla suomalaisilla aikuisilla sydämen keskimääräinen minuuttitilavuus

Lisätiedot

Isomerian lajit. Rakenne- eli konstituutioisomeria. Avaruus- eli stereoisomeria. Ketjuisomeria Funktioisomeria Paikkaisomeria

Isomerian lajit. Rakenne- eli konstituutioisomeria. Avaruus- eli stereoisomeria. Ketjuisomeria Funktioisomeria Paikkaisomeria Isomeria Isomeria Yhdisteellä on sama molekyylikaava, mutta eri rakenne: siksi eri isomeereillä voi olla erilaiset fysikaaliset ja kemialliset ominaisuudet!!!! Esim. yhdisteellä C2H6O on kaksi isomeeriä.

Lisätiedot

TÄS ON PROTSKUU! Missä yhteyksissä olet törmännyt sanaan proteiini tai valkuaisaine?

TÄS ON PROTSKUU! Missä yhteyksissä olet törmännyt sanaan proteiini tai valkuaisaine? TÄS ON PROTSKUU! KOHDERYHMÄ: Työ soveltuu parhaiten yläkouluun kurssille elollinen luonto ja yhteiskunta, sekä lukioon kurssille KE1. KESTO: Työ koostuu kahdesta osasta: n. 30 min/osa. MOTIVAATIO: Mitä

Lisätiedot

RYHMÄKERROIN ÄÄNILÄHDERYHMÄN SUUNTAAVUUDEN

RYHMÄKERROIN ÄÄNILÄHDERYHMÄN SUUNTAAVUUDEN ÄÄNILÄHDERYHMÄN SUUNTAAVUUDEN ARVIOINNISSA Seppo Uosukainen, Jukka Tanttari, Heikki Isomoisio, Esa Nousiainen, Ville Veijanen, Virpi Hankaniemi VTT PL, 44 VTT etunimi.sukunimi@vtt.fi Wärtsilä Finland Oy

Lisätiedot

111 11111111 III IIII 1111111111111 11 11111 II III III

111 11111111 III IIII 1111111111111 11 11111 II III III 111 11111111 III IIII 1111111111111 11 11111 II III III F I 000B (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (10) FI B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 30.06.2000 SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS

Lisätiedot

TÄS ON PROTSKUU! PROTEIINIEN KEMIAA

TÄS ON PROTSKUU! PROTEIINIEN KEMIAA sivu 1/8 TÄS ON PROTSKUU! PROTEIINIEN KEMIAA LUOKKA-ASTE/KURSSI TAUSTA Työ soveltuu peruskoulun yläasteelle ja lukioon. Työn tavoite on tutustua proteiinien kokeellisiin tunnistusmenetelmiin. POHDITTAVAKSI

Lisätiedot

niin järjestys on tämä: ensin kerto- ja jakolaskut vasemmalta oikealle, sen jälkeen plus- ja miinuslaskut vasemmalta oikealle.

niin järjestys on tämä: ensin kerto- ja jakolaskut vasemmalta oikealle, sen jälkeen plus- ja miinuslaskut vasemmalta oikealle. Alkeistason matikkaa Plus-, miinus-, kerto- ja jakolaskujen laskujärjestys Esim. jos pitää laskea tällainen lasku:? niin järjestys on tämä: ensin kerto- ja jakolaskut vasemmalta oikealle, sen jälkeen plus-

Lisätiedot

II 1 1111111 II 111 11111 11 11111 111 11111 111

II 1 1111111 II 111 11111 11 11111 111 11111 111 II 1 1111111 II 111 11111 11 11111 111 11111 111 FI000104374B (12) (10) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT FI 104374B (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 14.01.2000 SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA

Lisätiedot

Mikäli huomaat virheen tai on kysyttävää liittyen malleihin, lähetä viesti osoitteeseen

Mikäli huomaat virheen tai on kysyttävää liittyen malleihin, lähetä viesti osoitteeseen Mikäli huomaat virheen tai on kysyttävää liittyen malleihin, lähetä viesti osoitteeseen anton.mallasto@aalto.fi. 1. 2. Muista. Ryhmän G aliryhmä H on normaali aliryhmä, jos ah = Ha kaikilla a G. Toisin

Lisätiedot

Evoluutiopuu. Aluksi. Avainsanat: biomatematiikka, päättely, kombinatoriikka, verkot. Luokkataso: 6.-9. luokka, lukio

Evoluutiopuu. Aluksi. Avainsanat: biomatematiikka, päättely, kombinatoriikka, verkot. Luokkataso: 6.-9. luokka, lukio Evoluutiopuu Avainsanat: biomatematiikka, päättely, kombinatoriikka, verkot Luokkataso: 6.-9. luokka, lukio Välineet: loogiset palat, paperia, kyniä Kuvaus: Tehtävässä tutkitaan bakteerien evoluutiota.

Lisätiedot

1 Aritmeettiset ja geometriset jonot

1 Aritmeettiset ja geometriset jonot 1 Aritmeettiset ja geometriset jonot Johdatus Johdatteleva esimerkki 1 Kasvutulille talletetaan vuoden jokaisen kuukauden alussa tammikuusta alkaen 100 euroa. Tilin nettokorkokanta on 6%. Korko lisätään

Lisätiedot

Vinkkejä opettajille ja odotetut tulokset SIVU 1

Vinkkejä opettajille ja odotetut tulokset SIVU 1 Vinkkejä opettajille ja odotetut tulokset SIVU 1 Konteksti palautetaan oppilaiden mieliin käymällä Osan 1 johdanto uudelleen läpi. Kysymysten 1 ja 2 tarkoituksena on arvioida ovatko oppilaat ymmärtäneet

Lisätiedot

TARTUNTATAUDIT Ellen, Olli, Maria & Elina

TARTUNTATAUDIT Ellen, Olli, Maria & Elina TARTUNTATAUDIT Ellen, Olli, Maria & Elina ELIMISTÖN PUOLUSTUSKYKY Immuniteetti eli vastutuskyky on elimistön kyky suojautua tarttuvilta taudeilta Jos tauteja aiheuttavat mikrobit uhkaavat elimistöä, käynnistyy

Lisätiedot

Source: http://industrydocuments.library.ucsf.edu/tobacco/docs/kmpc0106

Source: http://industrydocuments.library.ucsf.edu/tobacco/docs/kmpc0106 t PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS PATENTTI OSAS'I'0 Hakemus : 921078 Luokka : A 24B 015/26 Tutkij a : Hakija : Asiamies : KR Philip Morris Products Inc. Oy Borenius & Co Ab / Pia Hjelt, puh. 492593 Asiamiehen

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Proteq West Nile injektioneste, suspensio, hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi 1 ml:n annos sisältää: Vaikuttava aine: West Nile rekombinantti

Lisätiedot

Helsingin yliopisto/tampereen yliopisto Henkilötunnus - Molekyylibiotieteet/Bioteknologia Etunimet valintakoe Tehtävä 3 Pisteet / 30

Helsingin yliopisto/tampereen yliopisto Henkilötunnus - Molekyylibiotieteet/Bioteknologia Etunimet valintakoe Tehtävä 3 Pisteet / 30 Helsingin yliopisto/tampereen yliopisto Henkilötunnus - hakukohde Sukunimi Molekyylibiotieteet/Bioteknologia Etunimet valintakoe 20.5.2013 Tehtävä 3 Pisteet / 30 3. Osa I: Stereokemia a) Piirrä kaikki

Lisätiedot

niin monta nisäkäs-siirtoktilkua, ettei niiden hengitystien epiteelissä

niin monta nisäkäs-siirtoktilkua, ettei niiden hengitystien epiteelissä SUOMI-FINLAND (I» KUULUTUSJOLKAISU UTLÄGGNINGSSKRIFT 41428 Kv. lk./int. Cl. A 61 k 23/00 30 h 6 ;inn3tt:r 10 ZI 1?(.) Patenttihakemus Patentansökning 983/65 Qit Hakemispäivä Ansökningsdag 22 IV 1965 Alkupäivä

Lisätiedot

Inieilii!lim 111 1!!!mill

Inieilii!lim 111 1!!!mill Inieilii!lim 111 1!!!mill (12) PATENTTIJULKAISU PATENTSKRIFT (1 0) FI B SUOMI - FINLAND (FI) PATENTTI- JA REKISTERIHALLITUS PATENT- OCH REGISTERSTYRELSEN (45) Patentti myönnetty - Patent beviljats 15.11.2002

Lisätiedot

Kahden laboratorion mittaustulosten vertailu

Kahden laboratorion mittaustulosten vertailu TUTKIMUSSELOSTUS NRO RTE9 (8) LIITE Kahden laboratorion mittaustulosten vertailu Sisältö Sisältö... Johdanto... Tulokset.... Lämpökynttilät..... Tuote A..... Tuote B..... Päätelmiä.... Ulkotulet.... Hautalyhdyt,

Lisätiedot

Luomuruokinnan erot tavanomaiseen ruokintaan

Luomuruokinnan erot tavanomaiseen ruokintaan ruokinnan erot tavanomaiseen ruokintaan Kehityspäällikkö Eija Valkonen Hankkija Oy Rehuliiketoiminta rehujen valmistuksen yleiset tuotantosäännöt 1. Luonnonmukaisten rehujen valmistus on pidettävä ajallisesti

Lisätiedot

782630S Pintakemia I, 3 op

782630S Pintakemia I, 3 op 782630S Pintakemia I, 3 op Ulla Lassi Puh. 0400-294090 Sposti: ulla.lassi@oulu.fi Tavattavissa: KE335 (ma ja ke ennen luentoja; Kokkolassa huone 444 ti, to ja pe) Prof. Ulla Lassi Opintojakson toteutus

Lisätiedot

Bioteknologian perustyökaluja

Bioteknologian perustyökaluja Bioteknologian perustyökaluja DNAn ja RNAn eristäminen helppoa. Puhdistaminen työlästä (DNA pestään lukuisilla liuottimilla). Myös lähetti-rnat voidaan eristää ja muuntaa virusten käänteiskopioijaentsyymin

Lisätiedot

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO

LIITE I VALMISTEYHTEENVETO LIITE I VALMISTEYHTEENVETO 1 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Equilis West Nile injektioneste, suspensio hevoselle 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi annos (1 ml) sisältää: Vaikuttava aine: Inaktivoitu

Lisätiedot

T Luonnollisten kielten tilastollinen käsittely

T Luonnollisten kielten tilastollinen käsittely T-61.281 Luonnollisten kielten tilastollinen käsittely Vastaukset 3, ti 11.2.2003, 16:15-18:00 Kollokaatiot, Versio 1.1 1. Lasketaan ensin tulokset sanaparille valkoinen, talo käsin: Frekvenssimenetelmä:

Lisätiedot

Elimistö puolustautuu

Elimistö puolustautuu Elimistö puolustautuu Tautimikrobit (= patogeenit): Bakteerit (esim. kolera), virukset (esim. influenssa), alkueliöt (esim. malaria), eräät sienet (esim. silsa) Aiheuttavat infektiotaudin Miten elimistö

Lisätiedot

LAITE SUUNTAUKSEN HAVAINNOLLISTAMISEKSI KEKSINNÖN ALA. Esillä oleva keksintö liittyy laitteen 5suuntauksen havainnollistamiseen.

LAITE SUUNTAUKSEN HAVAINNOLLISTAMISEKSI KEKSINNÖN ALA. Esillä oleva keksintö liittyy laitteen 5suuntauksen havainnollistamiseen. 1 LAITE SUUNTAUKSEN HAVAINNOLLISTAMISEKSI KEKSINNÖN ALA Esillä oleva keksintö liittyy laitteen 5suuntauksen havainnollistamiseen. TUNNETUN TEKNIIKAN KUVAUS Tunnettua ovat erilaiset tasosensorit. Eräs 10yleisimmistä

Lisätiedot

Elimistö puolustautuu

Elimistö puolustautuu Elimistö puolustautuu Tautimikrobit (= patogeenit): Bakteerit (esim. kolera), virukset (esim. influenssa), alkueliöt (esim. malaria), eräät sienet (esim. silsa) Aiheuttavat infektiotaudin Mistä taudinaiheuttajat

Lisätiedot

Kansallinen rokotusohjelma tutuksi

Kansallinen rokotusohjelma tutuksi Kansallinen rokotusohjelma tutuksi Tämä selkokielinen esite on tehty osana opinnäytetyötä Kansallinen rokotusohjelma tutuksi selkokielinen esite maahanmuuttajille. Opinnäytetyön toimeksiantaja on MARJAT-hanke.

Lisätiedot

KOMISSION ASETUS (EU) /, annettu , asetuksen (EY) N:o 847/2000 muuttamisesta vastaavanlaisen lääkkeen käsitteen määritelmän osalta

KOMISSION ASETUS (EU) /, annettu , asetuksen (EY) N:o 847/2000 muuttamisesta vastaavanlaisen lääkkeen käsitteen määritelmän osalta EUROOPAN KOMISSIO Bryssel 29.5.2018 C(2018) 3193 final KOMISSION ASETUS (EU) /, annettu 29.5.2018, asetuksen (EY) N:o 847/2000 muuttamisesta vastaavanlaisen lääkkeen käsitteen määritelmän osalta (ETA:n

Lisätiedot

TEKIJÄNOIKEUSNEUVOSTO LAUSUNTO 2011:7

TEKIJÄNOIKEUSNEUVOSTO LAUSUNTO 2011:7 TEKIJÄNOIKEUSNEUVOSTO LAUSUNTO 2011:7 Asia Hakija Tekijänoikeus liiketunnukseen X Annettu 9.3.2011 Tiivistelmä Yrityksen liiketunnus ei ollut riittävän itsenäinen ja omaperäinen ollakseen tekijänoikeuslain

Lisätiedot

Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia

Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia Bordetella pertussis Laboratorion näkökulma Jukka Hytönen Kliinisen mikrobiologian erikoislääkäri UTULab Bakteeriserologia SIDONNAISUUDET Asiantuntija Labquality Ammatinharjoittaja Mehiläinen Apurahoja:

Lisätiedot

Injektioneste, suspensio. Vaaleanpunertava tai valkoinen neste, joka sisältää valkoista sakkaa. Sakka sekoittuu helposti ravisteltaessa.

Injektioneste, suspensio. Vaaleanpunertava tai valkoinen neste, joka sisältää valkoista sakkaa. Sakka sekoittuu helposti ravisteltaessa. 1. ELÄINLÄÄKKEEN NIMI Trilyme injektioneste, suspensio koirille 2. LAADULLINEN JA MÄÄRÄLLINEN KOOSTUMUS Yksi annos (1 ml) sisältää: Vaikuttavat aineet: Inaktivoitu Borrelia burgdorferi sensu lato: Borrelia

Lisätiedot

9. JAKSOLLINEN JÄRJESTELMÄ

9. JAKSOLLINEN JÄRJESTELMÄ 9. JAKSOLLINEN JÄRJESTELMÄ Jo vuonna 1869 venäläinen kemisti Dmitri Mendeleev muotoili ajatuksen alkuaineiden jaksollisesta laista: Jos alkuaineet laitetaan järjestykseen atomiluvun mukaan, alkuaineet,

Lisätiedot

Uusi ejektoripohjainen hiilidioksidin talteenotto-menetelmä. BioCO 2 -projektin loppuseminaari elokuuta 2018, Jyväskylä.

Uusi ejektoripohjainen hiilidioksidin talteenotto-menetelmä. BioCO 2 -projektin loppuseminaari elokuuta 2018, Jyväskylä. Uusi ejektoripohjainen hiilidioksidin talteenotto-menetelmä BioCO 2 -projektin loppuseminaari - 30. elokuuta 2018, Jyväskylä Kristian Melin Esityksen sisältö Haasteet CO 2 erotuksessa Mitä uutta ejektorimenetelmässä

Lisätiedot